检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2007年第3期23卷 231-235页

作者：罗庆礼王志成李敏郑美娟余轶婧罗飞沈继龙教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室(省部共建)

目的探讨重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)间接ELISA用于血吸虫病免疫诊断的价值。方法表达并利用纯化的rSj14-3-3与成虫抗原(SjAWA)间接ELISA法分别检测51份急性和49份慢性日本血吸虫病患者和50份正常人血清,以上血清标本同时... 详细信息

目的探讨重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)间接ELISA用于血吸虫病免疫诊断的价值。方法表达并利用纯化的rSj14-3-3与成虫抗原(SjAWA)间接ELISA法分别检测51份急性和49份慢性日本血吸虫病患者和50份正常人血清,以上血清标本同时用SEA致敏的间接血凝试验(SEA-IHA)检测。再以3种方法检测30份华支睾吸虫感染者、24份卫氏并殖吸虫感染者和31份钩虫感染者血清,分析其交叉反应性。结果51份急性和49份慢性血吸虫病患者血清的rSj14-3-3抗体阳性率分别为98.0%和91.8%;SjAWA的检出率分别为96.1%和90.0%;IHA的阳性率分别为98.0%和93.9%。经统计学分析,以上结果无显著性差异(P>0.05)。Sj14-3-3间接ELISA、SjAWA间接ELISA和SEA-IHA对于30份华支睾吸虫感染者的交叉反应性分别为13.3%、20.0%和16.7%,24份卫氏并殖吸虫感染者分别为8.3%、12.5%和12.5%,31份钩虫感染者分别为12.9%、16.1%和12.9%。经统计学分析结果也无显著性差异(P>0.05)。结论rSj14-3-3抗原间接ELISA法诊断日本血吸虫病,具有高度的敏感性和特异性,可用于血吸虫病的免疫诊断。

关键词：日本血吸虫病 14-3-3蛋白免疫诊断 ELISA间接血凝试验

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sag5b:一种用于鉴别弓形虫虫株毒力的新基因(英文)

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中国人兽共患病学报 2008年第3期24卷 189-192页

作者：乔增培沈继龙余轶婧李霞余莉重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室

目的本文作者比较了强毒株(RH)弓形虫与弱毒株(Prugniaud)基因组中一种可能成为基因标志物的基因片断——sag5b的差异。PCR扩增出的sag5b片断依次亚克隆进入T-easy载体以及pET28a表达载体。融合基因经过IPTG诱导表达出目的蛋白,并通过SD... 详细信息

目的本文作者比较了强毒株(RH)弓形虫与弱毒株(Prugniaud)基因组中一种可能成为基因标志物的基因片断——sag5b的差异。PCR扩增出的sag5b片断依次亚克隆进入T-easy载体以及pET28a表达载体。融合基因经过IPTG诱导表达出目的蛋白,并通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定正确。证明表达出来的重组蛋白与强毒株弓形虫细胞膜上的天然蛋白有相同的免疫反应性。将感染了Prugniaud的小鼠脑组织取出并匀浆,以该脑组织为模板,分别用sag1和sag5b的引物来引发,结果发现sag1可以扩增出来而sag5b的扩增结果是阴性的。该结果提示sag5b可以作为鉴别弓形虫虫株毒力的基因标志。将该毒力相关基因的表达产物免疫小鼠并没有使小鼠获得明显的可以抵抗强毒株攻击的免疫保护性。

关键词：弓形虫重组蛋白毒力基因标志

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男性不育与基因缺陷

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遗传 2010年第5期32卷 411-422页

作者：阮健杜卫东安徽医科大学省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽省基因研究重点实验室合肥230032

目前全世界约有15%的育龄夫妇不育,其中男性因素占50%。男性不育(Male infertility)病因复杂,许多内外因素可导致男性不育,其中生育相关基因缺陷是重要原因之一,患者临床多表现为无精子症及少弱畸精子症。文章主要论述了已知基因缺陷与... 详细信息

目前全世界约有15%的育龄夫妇不育,其中男性因素占50%。男性不育(Male infertility)病因复杂,许多内外因素可导致男性不育,其中生育相关基因缺陷是重要原因之一,患者临床多表现为无精子症及少弱畸精子症。文章主要论述了已知基因缺陷与男性不育的关系。

关键词：男性不育基因缺陷突变

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结膜吸吮线虫实验室感染大绕眼果蝇

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2009年第4期27卷 375-376页

作者：沈继龙王增贤罗庆礼李静闻慧琴周银娣安徽省人畜共患病重点实验室教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽省病原生物学实验室合肥230032

在安徽黄山地区捕捉有绕眼习性的果蝇,将结膜吸吮线虫初产蚴混于果汁中,实验室喂饲感染果蝇,常温饲养20d后,检查果蝇的感染情况。结果显示,大绕眼果蝇(Amiota magna)和冈田绕眼果蝇(***)的阳性率分别为30%(30/100)和21.6%(55/255),两者... 详细信息

在安徽黄山地区捕捉有绕眼习性的果蝇,将结膜吸吮线虫初产蚴混于果汁中,实验室喂饲感染果蝇,常温饲养20d后,检查果蝇的感染情况。结果显示,大绕眼果蝇(Amiota magna)和冈田绕眼果蝇(***)的阳性率分别为30%(30/100)和21.6%(55/255),两者间的差异无统计学意义(χ2=0.0584,P>0.05)。将采自大绕眼果蝇的结膜吸吮线虫感染期幼虫接种家兔,35d后在兔结膜囊内检获结膜吸吮线虫成虫及其初产蚴,表明在实验室条件下,结膜吸吮线虫可感染大绕眼果蝇。

关键词：大绕眼果蝇结膜吸吮线虫易感性中间宿主

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轮状病毒SA11衣壳蛋白VP7的毕赤酵母重组表达及IgY的制备

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中华预防医学杂志 2009年第6期43卷 526-530页

作者：张诗海罗庆礼周银娣李静徐元宏沈继龙安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022 安徽省人兽共患病重点实验室教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室

目的真核重组表达轮状病毒（rotavirus，RV）SA11株VP7衣壳蛋白并制备、纯化其卵黄抗体（IgY）。方法将SA11标准株在MA104细胞中增殖，收集病毒液。从病毒液中提取RNA，通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增获得SA11株衣壳蛋白VP7的长... 详细信息

目的真核重组表达轮状病毒（rotavirus，RV）SA11株VP7衣壳蛋白并制备、纯化其卵黄抗体（IgY）。方法将SA11标准株在MA104细胞中增殖，收集病毒液。从病毒液中提取RNA，通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增获得SA11株衣壳蛋白VP7的长度为978bp的编码基因，将PCR产物连接到pMD18-T载体上，进行测序。将重组体亚克隆到分泌表达载体pPICZαB中，再将重组体转化人大肠杆菌rop10中，用BstXI线性化酶切重组质粒后电转入毕赤酵母X-33中，进行测序。转染成功的菌落再用甲醇诱导表达，亲和层析法纯化重组蛋白抗原，十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和蛋白免疫印迹（Western blotting）鉴定，用重组蛋白免疫罗曼母鸡，收集鸡蛋，Western blotting鉴定、纯化IgY。结果细胞增殖液中提取的RNA银染可见11个条带，成功构建了含pPICZαB—SAllVP7的毕赤酵母X-35，毕赤酵母X-33分泌的融合蛋白被收集、纯化。毕赤酵母X-33表达的SA11VP7的衣壳蛋白经Western blotting验证与预测蛋白相对分子质量40200相符。从鸡蛋中提取的鸡的IgV验证为抗Vfy7的抗体。纯度可达到95％，1个鸡蛋能产10．2mg的IgY。结论抗重组RVSA11衣壳蛋白VP7和IgY的成功制备为疫苗和诊断试剂的开发奠定了基础。

关键词：轮状病毒属衣壳蛋白质类卵黄免疫球蛋白

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线粒体DNA突变与相关人类疾病

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遗传 2007年第11期29卷 1299-1308页

作者：陈刚杜卫东曹慧敏安徽医科大学省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽省基因研究重点实验室中国科学院上海微系统与信息技术研究所上海200050

在过去的20年里,人们发现线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变与多种人类疾病相关,其致病范围从单器官组织损害到多系统受累。文章目的在于探讨mtDNA突变与人类疾病的关系。文章重点论述:(1)线粒体遗传学特征;(2)mtDNA突变与人类遗... 详细信息

在过去的20年里,人们发现线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变与多种人类疾病相关,其致病范围从单器官组织损害到多系统受累。文章目的在于探讨mtDNA突变与人类疾病的关系。文章重点论述:(1)线粒体遗传学特征;(2)mtDNA突变与人类遗传性疾病;(3)体细胞mtDNA突变在衰老和肿瘤中的作用;(4)mtDNA疾病的诊断和治疗。

关键词：线粒体疾病线粒体DNA 突变诊断

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高脂组和正常组兔肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量测定和对比分析

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光谱学与光谱分析 2012年第11期32卷 3142-3145页

作者：吴允凯曹洪毛昌杰顾志红汪渊安徽医科大学基础医学院化学教研室安徽合肥230032 安徽大学化学系安徽合肥230039 安徽省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽合肥230032

讨论实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量的变化。采用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,获取肝脏,用HNO3-H2O2混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd的含量。正常组肝脏组织Z... 详细信息

讨论实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量的变化。采用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,获取肝脏,用HNO3-H2O2混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd的含量。正常组肝脏组织Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量分别为137.6,362.3 14.39,***-1和159.3,355.0,290.0μ***-1,高脂组肝脏组织Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量分别为86.09,277.1,11.07,***-1和115.2,286.0,210.5μ***-1。高脂兔肝脏Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量降低,可能与食物摄取和脂蛋白代谢异常有关。

关键词：高脂组正常组肝脏微量元素

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小鼠结肠癌中巨噬细胞金属弹力蛋白酶对血管抑素生成和肿瘤血管生长的影响

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中华消化杂志 2011年第4期31卷 258-263页

作者：徐张巍许建明石海梅俏鲍峻峻沈玉先安徽医科大学第一附属医院消化科安徽省高校消化疾病重点实验室合肥230032 省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室

目的在小鼠模型体内探讨巨噬细胞金属弹力蛋白酶（macrophage metalloelastase,MME）分解纤溶酶原生成有生物学功能的血管抑素的途径,及其对肿瘤生长和微血管密度（MVD）的抑制作用.方法构建重组质粒pEGFP-C1-MME.给90只小鼠分别皮下... 详细信息

目的在小鼠模型体内探讨巨噬细胞金属弹力蛋白酶（macrophage metalloelastase,MME）分解纤溶酶原生成有生物学功能的血管抑素的途径,及其对肿瘤生长和微血管密度（MVD）的抑制作用.方法构建重组质粒pEGFP-C1-MME.给90只小鼠分别皮下接种稳定转染pEGFP-C1-MME（MME转染组）、空质粒pEGFP-C1（空质粒转染组）和未转染（未转染组）的CT-26细胞,每组30只.应用放射性碘标纤溶酶原及其示踪技术分析体内血管抑素的生成情况.结果各组肿瘤标本进行SDS-PAGE电泳,在MME转染组电泳胶中,蛋白相对分子质量为35×103和38×103的区域放射性明显高于空质粒转染组和未转染组（P值均为0.00）.Western印迹检测发现三组均检测出35×103和38×103片段表达,通过灰度扫描分析发现上述2个片断在MME转染组表达强度为9.32±1.52和5.61±2.24,明显高于空质粒组（2.47±0.23和0.67±0.12,P值均为0.00）和未转染组（1.21±0.69和0.86±0.44,P值均为0.00）.MME转染组MVD平均值和血管内皮生长因子（VEGF）荧光表达强度均明显低于空质粒转染组和未转染组（P值均为0.00）.MME转染组小鼠皮下种植瘤平均体积小于空质粒组和未转染组（P值均为0.00）.结论 MME是与血管抑素生成密切相关的间质金属蛋白酶,同时具有抑制结肠肿瘤血管形成的作用.

关键词：结肠肿瘤基质金属蛋白酶类巨噬细胞血管抑制素类新生血管化,病理性疾病模型,动物

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循环抗原及血清抗体的联合检测诊断日本血吸虫病

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安徽医科大学学报 2007年第4期42卷 351-354页

作者：余轶婧沈继龙罗庆礼乔增培安徽医科大学病原生物学教研室教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室(省部共建)省重要遗传病基因资源利用重点实验室安徽医科大学人兽共患病研究所合肥230032

目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在血吸虫病免疫诊断中的价值。方法制备并纯化抗重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)的单抗和多抗,并建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA);以纯化的rSj14-3-3建立间接ELISA,分别比... 详细信息

目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在血吸虫病免疫诊断中的价值。方法制备并纯化抗重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)的单抗和多抗,并建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA);以纯化的rSj14-3-3建立间接ELISA,分别比较该两种方法以及两种方法联合检测对于急、慢性血吸虫病患者免疫诊断的特异性和敏感性。结果利用双抗体夹心ELISA、间接ELISA和联合检测3种方法检测急性患者血清70例,敏感性分别为72.9%、75.7%和91.4%;检测慢性患者血清110例,敏感性分别为46.4%、61.8%和82.7%;检测正常人血清100例,特异性分别为96%、92%和92%;吡喹酮治疗后患者血清161份,其中急性治疗后1年以内转阴率分别为50%、38.9%和33.3%;慢性治疗后1年内分别是76.4%、55.6%和43.1%;慢性治疗后2年以上分别为93.0%、83.0%和78.9%。3种方法检测华支睾吸虫病、钩虫病的交叉反应性分别为0%、15.6%和15.6%,8.7%、19.6%和21.7%。3种方法的敏感性、与华支睾吸虫感染者血清交叉反应、慢性治疗1年内及慢性治疗2年以上患者血清的转阴率差异具有显著性(P<0.05),而特异性、与钩虫感染者血清交叉反应及其他化疗后患者血清的转阴率差异无显著性(P>0.05)。结论循环抗原Sj14-3-3和抗体联合检测在日本血吸虫病免疫诊断中具有潜在的临床应用价值。

关键词：血吸虫病,日本/诊断 14-3-3蛋白质类抗原,蠕虫/分析抗体,蠕虫/分析

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一视紫红质基因突变常染色体显性遗传视网膜色素变性家系的临床特征及其与基因型的关系

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中华眼底病杂志 2010年第6期26卷 567-569页

作者：孙安李寿玲王渊高敏龚健杨周青杜文辉安徽医科大学第一附属医院眼科合肥230022 教育部“重要遗传病基因资源利用”重点实验室[(省部共建)

视网膜色素变性（RP）是以夜盲、进行性视野损害、视网膜色素沉着、视盘呈蜡黄色萎缩和视网膜电图（ERG）呈熄灭型为主要临床特征的遗传性致盲眼病.RP遗传方式复杂,以常染色体显性遗传RP（ADRP）为多见.在已成功克隆出15个ADRP致病基因... 详细信息

视网膜色素变性（RP）是以夜盲、进行性视野损害、视网膜色素沉着、视盘呈蜡黄色萎缩和视网膜电图（ERG）呈熄灭型为主要临床特征的遗传性致盲眼病.RP遗传方式复杂,以常染色体显性遗传RP（ADRP）为多见.在已成功克隆出15个ADRP致病基因中,视紫红质（RHO）基因是引起ADRP的主要致病基因,大约20%的ADRP患者存在RHO基因突变.RHO突变位点很多,表型各异.为探讨RHO基因型与RP的关系,我们观察了1个RHO基因突变的ADRP家系中RP患者的临床特征.现将结果报道如下.

关键词：视网膜炎色素性视紫质系谱

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