检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2012年第5期28卷 412-414页

作者：蔡报伟栗华韩伟王世媛张亭刘升发周克夫厦门大学生命科学学院环境与生态学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 厦门市第一医院厦门361005 厦门伯赛基因转录技术有限公司厦门361000

根据Parkin等报道,2000年全球新发癌症病例为1 010万例,死亡620万。在Ferlay等报道中最常见的癌症中致死率排列第三是肝癌。在我国肝癌的死亡率占全部恶性肿瘤死亡的18.8%,仅次于胃癌。因此，寻找和筛选有效的抗肝癌药物是目前医学界研... 详细信息

根据Parkin等报道,2000年全球新发癌症病例为1 010万例,死亡620万。在Ferlay等报道中最常见的癌症中致死率排列第三是肝癌。在我国肝癌的死亡率占全部恶性肿瘤死亡的18.8%,仅次于胃癌。因此，寻找和筛选有效的抗肝癌药物是目前医学界研究的热点。

关键词：小鼠肝癌细胞H22 体内抑制胸腺素 Parkin 恶性肿瘤死亡率致死率医学界

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福建绞股蓝皂苷的微生物转化研究

福建绞股蓝皂苷的微生物转化研究

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2012年学术交流会

作者：陈良华明艳林陈清西童庆宣厦门华侨亚热带植物引种园厦门市引种检疫和植物源产物重点实验室厦门361002 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 厦门华侨亚热带植物引种园厦门市引种检疫和植物源产物重点实验室厦门361002 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

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鸡Rad51蛋白的体外表达与纯化及其抗血清的制备

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中国免疫学杂志 2011年第3期27卷 243-245,250页

作者：刘宽灿王恒孟艳敏叶军袁立厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室厦门361005

目的:Rad51蛋白在双链断裂的DNA修复的同源重组中发挥重要作用。因而其过量表达在细胞内的基因操作中被用于在提高基因同源重组的效率。当前在鸡中还未有针对该蛋白的特异性抗体。为此我们对鸡的Rad51进行了体外表达与纯化,并制备了cRa... 详细信息

目的:Rad51蛋白在双链断裂的DNA修复的同源重组中发挥重要作用。因而其过量表达在细胞内的基因操作中被用于在提高基因同源重组的效率。当前在鸡中还未有针对该蛋白的特异性抗体。为此我们对鸡的Rad51进行了体外表达与纯化,并制备了cRad51抗体,为该蛋白质在鸡细胞中的功能研究及探讨其用于鸡细胞中提高同源重组的研究提供有效工具。方法:对鸡Rad51基因进行全长克隆并构建原核表达载体pET-28a(+),用IPTG诱导该蛋白在Rosseta菌株中表达,纯化后注射BALB/c小鼠获得抗体。结果:成功制备鸡Rad51特异多克隆抗体,ELISA显示该抗体血清效价达51 200,该抗体血清可以用于Western等的蛋白检测技术。结论:针对鸡基因产物制备抗体的技术方法有效可行;首次成功获得鸡Rad51蛋白及多克隆抗体,为与该蛋白相关的研究提供了有效工具。

关键词：鸡的Rad51 蛋白表达抗体制备

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E-cadherin前体蛋白抗体的制备与鉴定

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厦门大学学报（自然科学版） 2011年第1期50卷 97-100页

作者：王继峰叶志云林舒勇厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

E-cadherin是一种重要的肿瘤转移抑制因子,它的功能异常能够导致肿瘤细胞的转移.细胞内成熟的E-cadherin由其前体蛋白剪切而成,目前还没有针对该前体蛋白的特异性抗体.为了得到能用于检测内源性E-cadherin前体蛋白(E-cadherin pre)的抗... 详细信息

E-cadherin是一种重要的肿瘤转移抑制因子,它的功能异常能够导致肿瘤细胞的转移.细胞内成熟的E-cadherin由其前体蛋白剪切而成,目前还没有针对该前体蛋白的特异性抗体.为了得到能用于检测内源性E-cadherin前体蛋白(E-cadherin pre)的抗体,对E-cadherin基因用限制性内切酶PstⅠ和PvuⅡ进行双酶切,获取E-cadherin基因的N-端片段,将其重组入原核表达载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达重组蛋白,经谷胱甘肽-琼脂糖珠子纯化后,得到较高纯度的E-cadherin前体抗原.用该抗原免疫新西兰兔,获得抗血清,进一步纯化血清得到抗E-cadherinpre的多克隆抗体.用Western blot检测了外源性和内源性E-cadherin pre,发现该抗体效价高且特异性强;免疫荧光实验表明该抗体可以用于细胞染色,为深入研究E-cadherin pre在细胞内的功能奠定了基础.

关键词： E-cadherin pre 抗体 pGST E-cadherin pre

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内生放线菌A00122中germicidin生物合成基因的克隆

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厦门大学学报（自然科学版） 2011年第3期50卷 598-602页

作者：吴莹莹李瑶瑶郑忠辉白林泉黄耀坚厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 上海交通大学生命科学与技术学院上海200240

在植物和细菌中,Ⅲ型聚酮合酶能够产生种类多样的次生代谢产物.在药用植物内生放线菌A00122的发酵产物中,分离到了一个已知的Ⅲ型聚酮类化合物germicidin.对A00122菌株建立了基因组文库,根据已知的同源基因Sco7221设计引物作为探针对文... 详细信息

在植物和细菌中,Ⅲ型聚酮合酶能够产生种类多样的次生代谢产物.在药用植物内生放线菌A00122的发酵产物中,分离到了一个已知的Ⅲ型聚酮类化合物germicidin.对A00122菌株建立了基因组文库,根据已知的同源基因Sco7221设计引物作为探针对文库进行PCR筛选,并通过Southern杂交的方法从阳性克隆5-3-10中定位了包含germi-cidin基因的片段,经测序得到长度为1 185 bp的完整合成基因.该基因的获得为深入研究Ⅲ型聚酮合酶的底物选择性,通过定向改造的方法获得非天然Ⅲ型聚酮类化合物提供了重要基础.

关键词： Ⅲ型聚酮合酶 germicidin 基因克隆

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胸腺素α原作为约氏疟原虫疫苗免疫佐剂的初步研究

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中国免疫学杂志 2011年第6期27卷 552-555页

作者：高吉青刘升发韩伟张亭吴汉洲王世媛杨彩霞洪凌仙章军周克夫厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 厦门伯赛基因转录技术有限公司厦门361005

目的:研究胸腺素α原(Prothymosinα,ProTα)作为约氏疟原虫疫苗免疫佐剂的作用。方法:提取***-17XNL全蛋白作为抗原,用胸腺素α原作为免疫佐剂,免疫小鼠。具体方案为:昆明小鼠分为4组,每组6只,A组免疫***-17XNL全蛋白+ProTα;B组免疫**... 详细信息

目的:研究胸腺素α原(Prothymosinα,ProTα)作为约氏疟原虫疫苗免疫佐剂的作用。方法:提取***-17XNL全蛋白作为抗原,用胸腺素α原作为免疫佐剂,免疫小鼠。具体方案为:昆明小鼠分为4组,每组6只,A组免疫***-17XNL全蛋白+ProTα;B组免疫***-17XNL全蛋白;C组只注射ProTα;D组为空白对照,以相同体积的生理盐水代替。免疫结束后感染致死的***-17XL,1×107个虫/只小鼠。结果:感染后的前10天A组小鼠疟原虫血症平均值要低于其他三组,且最终有3只小鼠存活下来,存活率50%,C组有一只小鼠存活,B、D组小鼠全部死亡。结论:用***-17XNL全蛋白做抗原,用ProTα作为佐剂,比单独用***-17XNL全蛋白对小鼠有更好的免疫保护作用,提示了ProTα可以成为一种有潜力的蛋白疫苗。

关键词：约氏疟原虫疫苗胸腺素α原免疫佐剂

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抗H5亚型禽流感病毒单链抗体在毕赤酵母中的分泌型表达和生物活性分析

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病毒学报 2011年第3期27卷 202-206页

作者：何芳萍林庆山李少伟魏旻希陈振钦罗文新陈毅歆张军夏宁邵厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

在本实验室研制出的多株针对H5N1亚型禽流感血凝素单抗中,13D4单抗对所有H5亚型病毒均有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强和识别广的特点,且在小鼠实验中显示了对各种代表株禽流感的感染和发病均具有良好的治疗效果。在此研... 详细信息

在本实验室研制出的多株针对H5N1亚型禽流感血凝素单抗中,13D4单抗对所有H5亚型病毒均有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强和识别广的特点,且在小鼠实验中显示了对各种代表株禽流感的感染和发病均具有良好的治疗效果。在此研究基础上,本实验通过基因工程构建含有13D4单链抗体(scFv)基因的毕赤酵母表达载体,实现目的蛋白的分泌性表达和纯化。经过竞争法和血凝抑制检测其活性,表明获得的单链抗体具有与原始鼠源抗体相近的反应活性和相同的识别表位。H5N1广谱中和单抗13D4的单链抗体的成功构建,为进一步研制针对H5N1禽流感病毒的治疗性抗体奠定了基础。

关键词：高致病性禽流感病毒单链抗体血凝抑制毕赤酵母

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变性剂对重组牛肠激酶活性的影响

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厦门大学学报（自然科学版） 2011年第3期50卷 603-606页

作者：陈小兰杨美花李智聪郑丽钦孙黎陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 厦门特宝生物工程股份有限公司福建厦门361022

肠激酶(EK,EC 3.4.21.9)是一种在基因工程产品中广泛应用的工具酶.以小分子荧光物质Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-β-萘胺为底物,采用荧光跟踪法研究了变性剂盐酸胍、硫脲、尿素对重组牛肠激酶(rEK)活力的影响及抑制动力学.结果表明:盐酸胍... 详细信息

肠激酶(EK,EC 3.4.21.9)是一种在基因工程产品中广泛应用的工具酶.以小分子荧光物质Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-β-萘胺为底物,采用荧光跟踪法研究了变性剂盐酸胍、硫脲、尿素对重组牛肠激酶(rEK)活力的影响及抑制动力学.结果表明:盐酸胍、硫脲、尿素均对该酶的活性有较强的抑制作用,它们对该酶的半抑制浓度(IC50)分别为0.025,0.080和0.750 mol/L.研究的3种变性剂对该酶的抑制均显示可逆抑制机理;抑制类型也均为竞争性类型,测定它们对酶的抑制常数KI分别为0.015,0.060和0.553 mol/L.

关键词：变性剂重组牛肠激酶动力学抑制作用

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患红体病凡纳滨对虾肝胰腺NAGase基本性质的改变研究

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安徽农业科学 2011年第21期39卷 12906-12908页

作者：谢晓兰龚丽芬魏晓倩黄乾生陈清西泉州师范学院化学与生命科学学院福建泉州362000 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

[目的]为虾养殖过程中红体病的诊断和控制提供重要的理论依据。[方法]分别测定健康和患红体病的凡纳滨对虾(Litopenaeus vanname)的肝胰腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)的比活力及其性质差异。[结果]2种来源NAGase的... 详细信息

[目的]为虾养殖过程中红体病的诊断和控制提供重要的理论依据。[方法]分别测定健康和患红体病的凡纳滨对虾(Litopenaeus vanname)的肝胰腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)的比活力及其性质差异。[结果]2种来源NAGase的比活力、基本酶学性质等均存在差异。对虾患红体病后,肝胰腺NAGase的比活力和最适温度下降,但催化反应动力学常数Km、Vm值和活化能上升。[结论]该研究表明NAGase与对虾患病可能存在着密切关系。

关键词：凡纳滨对虾 NAGase 红体病性质比较

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丝组二肽--现代蛋白酶分子进化过程中的原始雏形

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中国科学：化学 2011年第4期41卷 579-586页

作者：刘艳林铭堃陈培燕留筱厦杜海莲麻远赵玉芬化学生物学福建省重点实验室厦门大学化学化工学院化学生物学系化学系厦门361005 细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院生物医学系厦门361005 生物有机磷及化学生物学教育部重点实验室清华大学化学系北京100084

系统阐述了我们实验室近十五年来对丝组二肽的生物活性的研究.丝组二肽是目前报道的具有多种切割活性的最小活性肽,它不仅能够切割DNA,而且可以切割蛋白质及羧酸酯.丝组二肽是迷你的磷酸酯酶和蛋白水解酶,是现代蛋白酶分子进化过程中的... 详细信息

系统阐述了我们实验室近十五年来对丝组二肽的生物活性的研究.丝组二肽是目前报道的具有多种切割活性的最小活性肽,它不仅能够切割DNA,而且可以切割蛋白质及羧酸酯.丝组二肽是迷你的磷酸酯酶和蛋白水解酶,是现代蛋白酶分子进化过程中的原始雏形.

关键词：丝组二肽核酸切割蛋白切割蛋白酶的分子进化

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