检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学报 2014年第5期45卷 663-669页

作者：朱蓓蓓蔡新华孙银平新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院病理生理学教研室河南新乡453003

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光... 详细信息

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光探针示踪培养检测细胞增殖特征。实验分为单纯心肌干细胞组和与心肌共培养组,分别用HGF和IGF1干预,倒置显微镜观察细胞不同时期数量与形态的变化,活细胞工作站观察CFDA SE示踪剂荧光强弱,采集图像,进行统计学分析。免疫荧光技术检测Nkx2.5、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达。结果单纯心肌干细胞组,生长因子刺激后心肌干细胞数量与形态均无明显变化。与心肌共培养组,细胞均发生增殖与形态变化,Nkx2.5、cTnT阳性表达,有个别心肌干细胞分化为自发搏动的心肌细胞。结论心肌干细胞与心肌细胞共培养条件下,HGF和IGF1能够促进心肌干细胞增殖,联合作用能够诱导心肌干细胞向心肌细胞分化。

关键词：心肌干细胞增殖心肌分化肝细胞生长因子类胰岛素样生长因子免疫荧光大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

高龄大鼠心室肌间质弹性纤维和胶原纤维的结构分布特征及其机制

引用

解剖学报 2023年第6期54卷 716-721页

作者：许亚平余悦欣陈金福王柯柯郭志坤郑州市第七人民医院河南省心脏重构与移植重点实验室郑州450000 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨高龄大鼠心室肌间质弹性纤维和胶原纤维的结构分布特征及其机制。方法青年SD大鼠(24周)和高龄SD大鼠(104周)各5只,小动物超声检测心功能,采用改良Weigert弹力纤维染色、免疫组织化学、免疫荧光和Western blotting,分别检测心室... 详细信息

目的探讨高龄大鼠心室肌间质弹性纤维和胶原纤维的结构分布特征及其机制。方法青年SD大鼠(24周)和高龄SD大鼠(104周)各5只,小动物超声检测心功能,采用改良Weigert弹力纤维染色、免疫组织化学、免疫荧光和Western blotting,分别检测心室肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维及蛋白、弹性纤维及蛋白、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达变化。结果高龄大鼠心室肌间质Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白丰富,包绕心肌细胞周围,与青年大鼠相比,高龄大鼠心室肌间质胶原蛋白含量明显增多(P<0.05)。高龄大鼠心室肌间质弹性纤维分布广泛,与青年大鼠比较,高龄大鼠心室肌间质弹性纤维数量和弹性蛋白水平均明显减少(P<0.05)。高龄大鼠心室肌MMP-2和MMP-9水平增高,且与弹性蛋白水平呈相互消长关系。高龄大鼠心室肌TIMP-2水平随年龄增加而降低。结论高龄大鼠心室肌间质胶原纤维数量和弹性纤维数量存在相互消长的关系。随年龄的增长大鼠心室肌间质TIMP-2和弹性纤维含量减少,同时胶原纤维与弹性纤维比例失调。

关键词：基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶抑制剂2 胶原纤维弹性纤维心室肌免疫荧光免疫印迹法大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡胚培养及活体电转基因方法的建立

引用

解剖学报 2012年第4期43卷 564-568页

作者：杨慈清毛会丽林俊堂新乡医学院生命科学技术系河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的建立和优化鸡胚胎带壳培养(in ovo culture)、去壳培养(ex ovo culture)和活体原位电转基因(in vivo electroporation)等技术。方法鸡胚孵化第2～3天,带壳培养至2～3 d和去壳培养至5～6d,分别在脊髓和大脑视顶部位,在电压18V、电流6... 详细信息

目的建立和优化鸡胚胎带壳培养(in ovo culture)、去壳培养(ex ovo culture)和活体原位电转基因(in vivo electroporation)等技术。方法鸡胚孵化第2～3天,带壳培养至2～3 d和去壳培养至5～6d,分别在脊髓和大脑视顶部位,在电压18V、电流60mA、间隔90ms和电脉冲6次(60ms/次)的条件下进行定时定位活体电转基因。结果带壳和去壳培养样本数分别为20个和10个,成活率分别是85%和80%,胚胎发育至2～3 d和5～6 d在脊髓和视顶部位转染样本数分别为11个和10个,阳性表达率为54.5%和60%。结论成功建立和优化了鸡胚培养和活体定时定位电转基因的方法。

关键词：发育培养活体电转鸡胚

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡胚活体原位电转基因技术报告基因绿色荧光蛋白质量评估

引用

解剖学报 2012年第4期43卷 468-472页

作者：杨慈清毛会丽郭志坤林俊堂新乡医学院生命科学技术系河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的在成功建立鸡胚活体原位电转基因技术的基础上,探讨报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达及其在鸡胚发育过程对胚胎形态结构影响,分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和神经丝蛋白(NF)的表达情况。方法活体原位电转基因技术将pCAGGS-GFP质粒... 详细信息

目的在成功建立鸡胚活体原位电转基因技术的基础上,探讨报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达及其在鸡胚发育过程对胚胎形态结构影响,分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和神经丝蛋白(NF)的表达情况。方法活体原位电转基因技术将pCAGGS-GFP质粒转入带壳培养第3天和第3天去壳培养至第5天的鸡胚,在电转基因24h后荧光体视显微镜观察,选择对照组和阳性表达胚胎,每组各5个胚胎,冷冻切片后进行荧光免疫组织化学检测α-SMA和NF分别在脊髓和视顶部位的表达状况。结果在脊髓和视顶不同发育阶段和转染的不同时间,实验组、对照组及GFP阳性表达区域和正常区域内α-SMA、NF两种蛋白表达不存在差异,胚胎形态结构也不存在差异。结论原位电转GFP在鸡胚发育早期过程中不影响正常基因的表达及鸡胚胎发育形态结构的变化,可以作为报告基因。

关键词：胚胎绿色荧光蛋白 α-平滑肌肌动蛋白神经丝蛋白活体电转鸡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

引用

新乡医学院学报 2021年第6期38卷 505-510,515页

作者：刘刚崔朝初卢娜冯超丽刘博万光瑞王现伟新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院药学院河南新乡453003

目的探讨复方心脉佳对巨噬细胞炎症相关因子caspase-1和白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响及其机制。方法将对数生长期RAW264.7细胞随机分为对照组和体积分数0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%复方心脉佳组,应用细胞计数试剂盒检测... 详细信息

目的探讨复方心脉佳对巨噬细胞炎症相关因子caspase-1和白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响及其机制。方法将对数生长期RAW264.7细胞随机分为对照组和体积分数0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%复方心脉佳组,应用细胞计数试剂盒检测复方心脉佳孵育24 h时各组细胞存活率。将对数生长期的RAW264.7细胞随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和低、中、高剂量复方心脉佳组,对照组细胞正常培养不加任何刺激剂和药物,LPS组加入1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h,低、中、高剂量复方心脉佳组分别加入体积分数1.0%、2.5%和5.0%的复方心脉佳预孵育12 h,随后加入1 mg·L^(-1) LPS处理4 h;应用Western blot检测5组细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量,实时荧光定量聚合酶链反应法检测对照组、LPS组、高剂量复方心脉佳组细胞中caspase-1前体、IL-1β前体及核转录因子κB(NF-κB)mRNA相对表达量。将对数生长期THP-1细胞随机分为对照组、联合刺激组和低、中、高剂量复方心脉佳组,对照组细胞正常培养不加任何刺激剂和药物,联合刺激组细胞给予1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h后再加入10μmol·L^(-1)尼日利亚菌素孵育1 h,低、中、高剂量复方心脉佳组分别加入体积分数1.0%、2.5%和5.0%的复方心脉佳预孵育12 h,然后加入1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h后再加入10μmol·L^(-1)尼日利亚菌素孵育1 h;应用Western blot检测各组细胞培养液上清液中caspase-1和IL-1β相对表达量。结果对照组与0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%复方心脉佳组RAW264.7细胞存活率分别为(100.00±2.43)%、(102.25±2.76)%、(102.05±2.76)%、(100.63±3.32)%、(94.17±2.05)%、(83.62±3.46)%、(79.44±9.60)%。低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体蛋白相对表达量显著低于对照组和LPS组(P<0.05),对照组与LPS组RAW264.7细胞中caspase-1前体蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);LPS组和低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中IL-1β前体蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05),低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于LPS组(P<0.05);高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于低、中剂量复方心脉佳组(P<0.05),中剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于低剂量复方心脉佳组(P<0.05)。LPS组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体和NF-κB mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05),高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体和NF-κB mRNA相对表达量显著低于LPS组和对照组(P<0.05)。联合刺激组和低、中、高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05);低、中、高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著低于联合刺激组(P<0.05);高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著低于低、中剂量复方心脉佳组(P<0.05);低剂量复方心脉佳组与中剂量复方心脉佳组THP-1细胞培养上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方心脉佳可能通过调控NF-κB信号通路而降低巨噬细胞中炎症相关因子caspase-1和IL-1β的表达和释放,其抗动脉粥样硬化功效可能与抗炎作用有关。

关键词：复方心脉佳动脉粥样硬化巨噬细胞白细胞介素-1β caspase-1

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠急性心肌梗死后干细胞抗原-1和Nanog阳性细胞的动态变化

引用

解剖学报 2017年第4期48卷 457-462页

作者：杨黎晓任明芬郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院第二附属医院心内科河南新乡453003

目的观察大鼠急性心肌梗死后心肌干细胞在梗死病程中的动态变化。方法成年SD大鼠50只,结扎冠状动脉前降支制备急性心肌梗死模型,在术前及术后1周、2周、3周和4周分别检测心功能指标:左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒... 详细信息

目的观察大鼠急性心肌梗死后心肌干细胞在梗死病程中的动态变化。方法成年SD大鼠50只,结扎冠状动脉前降支制备急性心肌梗死模型,在术前及术后1周、2周、3周和4周分别检测心功能指标:左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室舒张末期容积(LVEDV)和左室后壁舒张末期厚度(LVPWT)。取各组大鼠新鲜心脏,石蜡切片、Masson染色,确定心肌梗死的病理变化。利用免疫组织化学技术对各组心脏切片进行免疫染色,观察干细胞抗原-1(Sca-1)、Nanog阳性心肌干细胞的动态变化。对每组切片阳性表达的细胞数进行定量分析。利用Western blotting技术观察Sca-1、Nanog的蛋白含量。结果大鼠心功能于术后1周开始降低,自第3周稳定于较低水平;Masson染色显示心肌梗死区域瘢痕组织明显,证实模型制备成功;免疫组织化学结果显示,Sca-1、Nanog阳性心肌干细胞数量在2周时上升至高峰,随后下降。结论 Sca-1、Nanog阳性心肌干细胞在心肌梗死病理演变过程中呈先上升后下降的趋势,提示心肌干细胞在心肌损伤和修复过程中发挥了重要作用。

关键词：心脏干细胞抗原-1 Nanog 心肌梗死免疫组织化学大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新生大鼠心肌成纤维细胞的内皮细胞分化潜能

引用

解剖学报 2018年第4期49卷 443-449页

作者：张俊悦殷国田郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院第三附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨心肌成纤维细胞(CFs)向内皮细胞分化以及成血管潜能。方法新鲜左心室组织,体外分离、培养、纯化CFs,利用内皮细胞诱导液对第3代CFs诱导培养,连续诱导培养28 d后,换用内皮细胞培养基(ECM),并消化传代扩增至第3代。观察诱导细胞... 详细信息

目的探讨心肌成纤维细胞(CFs)向内皮细胞分化以及成血管潜能。方法新鲜左心室组织,体外分离、培养、纯化CFs,利用内皮细胞诱导液对第3代CFs诱导培养,连续诱导培养28 d后,换用内皮细胞培养基(ECM),并消化传代扩增至第3代。观察诱导细胞生长情况和形态变化,利用免疫细胞化学法、流式细胞术和血管形成分析实验对诱导后细胞的内皮细胞标志物的表达和功能特性进行评价。结果新生大鼠第3代CFs,呈三角形、梭形和多边形,增殖速度迅速;波形蛋白(vimentin)、盘状结构受体2(DDR2)均呈阳性表达。诱导第3天细胞开始汇合,21 d部分细胞形成串珠样连接,28 d出现细胞汇集成环状样形状;免疫组织化学标记vWF和CD31呈阳性表达;细胞免疫荧光标记vWF、CD34、CD105均呈阳性表达;流式细胞术检测诱导后细胞表面标志物CD31表达率为50.5%,对照组CD31表达率为5.82%。结论血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)体外定向诱导CFs可使其向血管内皮细胞分化,并表现其功能特征。

关键词：血管内皮生长因子碱性成纤维生长因子心肌成纤维细胞内皮细胞分化细胞培养大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

CRISPR-Cas9系统在疾病模型中的应用

引用

中国生物工程杂志 2016年第10期36卷 79-85页

作者：朱少义管丽红林俊堂新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

规律成簇间隔短回文重复(CRISPR)及相关核酸内切酶(Cas)系统是最近发现的一种关于RNA指导核酸内切酶的基因编辑技术,这一技术的发现促进了生物学和医学研究的发展。CRISPR-Cas9系统的简便性使其广泛应用于细胞基因组编辑、动物模型的构... 详细信息

规律成簇间隔短回文重复(CRISPR)及相关核酸内切酶(Cas)系统是最近发现的一种关于RNA指导核酸内切酶的基因编辑技术,这一技术的发现促进了生物学和医学研究的发展。CRISPR-Cas9系统的简便性使其广泛应用于细胞基因组编辑、动物模型的构建及疾病模型的基因治疗。现就CRISPR-Cas9系统的结构特点、作用机制及应用进行了综述。

关键词： CRISPR-Cas9 基因编辑动物模型基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用鸡胚活体电转GFP示踪技术观察脊髓左右两侧神经元纤维投射

引用

中国免疫学杂志 2012年第8期28卷 718-721页

作者：杨慈清石晓卫胡阿珍贾阳阳郭志坤林俊堂新乡医学院生命科学技术系新乡453003 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的:探索鸡胚发育过程中,脊髓左右侧神经元经纤维之间的联系,为脊髓两侧神经纤维投射提供形态学基础;方法:采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3天,通过活体电转基因,将pCAGGS-GFP质粒0.1～0.5μl准确注射到脊柱,在电压18 V、每... 详细信息

目的:探索鸡胚发育过程中,脊髓左右侧神经元经纤维之间的联系,为脊髓两侧神经纤维投射提供形态学基础;方法:采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3天,通过活体电转基因,将pCAGGS-GFP质粒0.1～0.5μl准确注射到脊柱,在电压18 V、每次脉冲60 ms,间隔100 ms,电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后6小时开始到10天,分别收集胚胎,甲醛固定冰冻切片,DAPI染细胞核观察组织形态结构变化。结果:电转后6小时便可以观察到GFP的表达,24小时后可以看到GFP标记细胞纤维的投射,3天可以清晰的观察到转入GFP一侧脊髓的运动神经元纤维束投射到另外一侧脊髓。结论:电转GFP成功标记运动神经元纤维在脊髓左右两侧的投射。

关键词：鸡胚胚胎发育活体电转纤维投射

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

金葡菌类肠毒素K原核表达载体构建及其生物学活性分析

引用

中国生物工程杂志 2015年第12期35卷 45-50页

作者：刘彦礼牛荣成杨芬朱文慧林俊堂新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的:金葡菌类肠毒素K(SElK)原核表达载体构建及其生物学活性初步分析。方法:通过常规分子生物学技术将SElK基因片段插入载体p ET-28a中,阳性单菌落扩大培养,诱导目的基因表达后通过Ni+亲和层析纯化SElK重组蛋白;小鼠脾淋巴细胞增殖实... 详细信息

目的:金葡菌类肠毒素K(SElK)原核表达载体构建及其生物学活性初步分析。方法:通过常规分子生物学技术将SElK基因片段插入载体p ET-28a中,阳性单菌落扩大培养,诱导目的基因表达后通过Ni+亲和层析纯化SElK重组蛋白;小鼠脾淋巴细胞增殖实验及尾静脉注射后血常规检测SElK超抗原活性;进一步通过检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性及尿素(Urea)和肌酐(CR)含量来评价SElK潜在肠毒性。结果:成功构建SElK原核表达载体,并通过Ni^+亲和层析获得高纯度SElK重组蛋白(>95%);随后的超抗原活性检测发现SElK能够在体外刺激小鼠脾淋巴细胞显著增殖,尾静脉注射后能够有效地刺激血液中淋巴细胞增殖;最终的肠毒性检测结果发现SElK能够显著增加血清中AST活性及Urea含量。结论:成功构建并纯化获得高纯度SElK重组蛋白,并对其超抗原活性及潜在肠毒性进行初步分析,为开发更优的抗肿瘤制剂提供备选药物。

关键词：超抗原金葡菌类肠毒素 T淋巴细胞血常规肠毒性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：