检索结果-内蒙古大学图书馆

中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第4期22卷 448-453页

作者：王雷王煜霞姬明丽薛会朝新乡医学院第一附属医院普外科河南新乡453100 新乡医学院基础医学院病理生理学教研室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院生理学教研室河南新乡453003

目的:研究Bestrophin 3高表达对人肝癌细胞株HepG2凋亡能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将Bestrophin 3腺病毒以感染复数(multiplicity of infection,MOI)10、20、40、80转染HepG2细胞株,Western blotting检测转染细胞内Bestrophin 3的表达,确定最佳MOI值。设对照组(未转染病毒)、LacZ组(转染携带LacZ的对照腺病毒载体)、Ad-Best3组(以最佳MOI值转染Bestrophin 3腺病毒),CCK-8法和流式细胞术分别检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞增殖、凋亡的影响,Western blotting检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞内Bcl-2、Bax以及细胞色素C表达的影响,JC-1染色观察Bestrophin 3过表达对HepG2细胞线粒体膜电位的影响。结果:Bestrophin 3腺病毒转染HepG2细胞的最佳MOI为40,转染后细胞过表达Bestrophin 3。Ad-Best3组的细胞存活率显著低于对照组和Lac Z组[(79.37±1.76)%vs(98.67±3.02)%、(99.67±3.25)%,均P<0.05],而其细胞凋亡率显著升高[(29.47±2.37)%vs(5.47±0.37)%,(4.95±0.44)%,均P<0.05]。AdBest3组HepG2细胞内Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bax的蛋白表达显著增加,导致Bcl-2/Bax比值显著降低(0.32±0.047 vs1.00±0.00,P<0.05);Ad-Best3组HepG2细胞的线粒体膜电位显著降低[(0.64±0.09)%vs(1.00±0.00)%,P<0.05],同时线粒体中细胞色素C明显减少(P<0.05),而细胞质中细胞色素C水平显著升高(P<0.05)。结论:过表达Bestrophin 3可能通过促使线粒体释放细胞色素C从而促进肝癌细胞株HepG2的凋亡。

关键词： Bestrophin 3 肝癌 HepG2细胞凋亡细胞色素c

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大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化后自噬水平的变化

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中国应用生理学杂志 2015年第1期31卷 31-34页

作者：李博黄春田李彩芳段萍韩雪飞鄢文海邢莹郑州大学生理学教研室河南郑州450001 郑州大学干细胞研究中心河南郑州450001 郑州大学病理生理学教研室河南郑州450001 新乡医学院生理学教研室河南新乡453003

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化前后自噬水平的变化,进一步研究BMSCs神经分化机制。方法:原代培养大鼠BMSCs,三代后用L-DMEM(2%DMSO+200μmol/L BHA)诱导其向神经细胞分化,采用免疫细胞化学方法检测神经元特异标记物NS... 详细信息

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化前后自噬水平的变化,进一步研究BMSCs神经分化机制。方法:原代培养大鼠BMSCs,三代后用L-DMEM(2%DMSO+200μmol/L BHA)诱导其向神经细胞分化,采用免疫细胞化学方法检测神经元特异标记物NSE表达,采用RT-PCR方法检测自噬相关基因LC3B、Beclin1、Atg5、Atg7、Atg10的表达,用Western blot及流式细胞术检测了自噬标志蛋白LC3B的表达。结果:大鼠BMSCs传3代后,贴壁的BMSCs可达90%以上,类成纤维细胞样梭形生长,经诱导剂作用5 h后,细胞呈现神经细胞样改变,NSE阳性率为(83±5)%。RT-PCR结果表明BMSCs向神经细胞分化后LC3B,Beclin1,Atg5,Atg7,Atg10的表达升高,流式细胞术检测LC3B的平均荧光强度升高,Western blot结果表明神经分化后LC3B-Ⅱ表达增加。结论:大鼠BMSCs向神经细胞分化后自噬水平增加。

关键词：骨髓间充质干细胞自噬分化神经细胞大鼠

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蟾蜍灵诱导肝癌Huh7细胞的凋亡及其机制研究

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中药药理与临床 2015年第6期31卷 58-61页

作者：王雷王煜霞薛会朝原志庆新乡医学院第一附属医院普外科卫辉453100 新乡医学院基础医学院病理生理学教研室新乡453003

目的:研究蟾蜍灵(bufalin)诱导肝癌Huh7细胞的凋亡及其凋亡的初步机制。方法:CCK-8法检测不同浓度蟾蜍灵作用细胞不同时间后的细胞活性;Annexin V-FITC/PI双染试剂盒检测蟾蜍灵诱导的细胞死亡方式并分析细胞凋亡率;细胞活性氧ROS特异性... 详细信息

目的:研究蟾蜍灵(bufalin)诱导肝癌Huh7细胞的凋亡及其凋亡的初步机制。方法:CCK-8法检测不同浓度蟾蜍灵作用细胞不同时间后的细胞活性;Annexin V-FITC/PI双染试剂盒检测蟾蜍灵诱导的细胞死亡方式并分析细胞凋亡率;细胞活性氧ROS特异性抑制剂NAC预处理细胞1小时后,检测蟾蜍灵对细胞活性的影响,并采用Hoechst 33342染色技术染细胞核,在共聚焦显微镜下观察NAC对细胞凋亡的影响;采用流式细胞仪检测NAC对蟾蜍灵引起的细胞线粒体膜电位下降的影响。结果:10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)mol/L蟾蜍灵分别作用细胞12、24、48小时后,细胞的活性呈浓度和时间依赖性降低;用10^(-7)mol/L这一浓度为接下来的实验浓度,流式双染结果表明10^(-7)mol/L蟾蜍灵诱导的细胞死亡为凋亡,凋亡率为42.9%,与星形孢菌素组引起的细胞凋亡分布类似;NAC预处理细胞1小时,再用蟾蜍灵作用细胞24小时后细胞活性为60.9±2.5%,明显比没有NAC预处理的细胞活性高,而且共聚焦显微镜和流式细胞核染色结果分别显示NAC预处理细胞可以减少蟾蜍灵引起的细胞凋亡和升高蟾蜍灵引起的线粒体膜电位的下降,升高的百分率为9.5%。结论:蟾蜍灵可以诱导肝癌细胞Huh7凋亡,ROS参与了蟾蜍灵诱导的细胞凋亡和线粒体膜电位的下降,本实验结果将为蟾蜍灵的临床使用和研究提供实验依据。

关键词：蟾蜍灵肝癌细胞Huh7 凋亡活性氧ROS 线粒体膜电位

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一种挽救轻度污染的肿瘤贴壁细胞的方法

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新乡医学院学报 2015年第9期32卷 814-816页

作者：姬明丽王煜霞新乡医学院生理学教研室河南新乡453003 新乡医学院病理生理学教研室河南新乡453003

目的探讨一种挽救轻度污染的贴壁肿瘤细胞的方法。方法经多次双抗培养液吹打离心、双抗磷酸盐缓冲液冲洗处理的轻度污染的鼻咽癌细胞株XB-5-8F、鼻咽癌细胞株C666-1和食管鳞状细胞癌细胞系TE8等贴壁细胞(实验组)进行传代培养48 h,复苏... 详细信息

目的探讨一种挽救轻度污染的贴壁肿瘤细胞的方法。方法经多次双抗培养液吹打离心、双抗磷酸盐缓冲液冲洗处理的轻度污染的鼻咽癌细胞株XB-5-8F、鼻咽癌细胞株C666-1和食管鳞状细胞癌细胞系TE8等贴壁细胞(实验组)进行传代培养48 h,复苏的相应冻存细胞(对照组)传代培养48 h,对2组细胞计数、细胞活力及细胞形态等进行比较。结果实验组细胞处理后总细胞计数、活细胞计数及细胞活力均大于处理前,死亡细胞计数低于处理前,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组和对照组总细胞计数、活细胞计数、细胞活力及细胞形态等比较差异均无统计学意义(P>0.05)。实验组和对照组3种细胞的吸光度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论此种对轻度污染细胞的处理方法可以恢复细胞活性,完成细胞传代。

关键词：肿瘤贴壁细胞轻度污染传代

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肝癌患者肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-8水平变化及其与临床病理特征的关系

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新乡医学院学报 2015年第8期32卷 735-737页

作者：王雷王煜霞薛会朝新乡医学院第一附属医院普外科河南卫辉453100 新乡医学院基础医学院病理生理学教研室河南新乡453003

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)在肝癌中联合检测的临床意义,揭示二者变化与肝癌临床病理特征的关系。方法采集诊断明确的肝癌患者(肝癌组)术前、术后血清与健康人群(对照组)血清,并采集肝癌患者肝组织石蜡标本,... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)在肝癌中联合检测的临床意义,揭示二者变化与肝癌临床病理特征的关系。方法采集诊断明确的肝癌患者(肝癌组)术前、术后血清与健康人群(对照组)血清,并采集肝癌患者肝组织石蜡标本,采用酶联免疫吸附法检测血清TNF-α和IL-8水平,免疫组织化学法检测肝癌患者肝组织中TNF-α和IL-8的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果肝癌患者术后血清TNF-α和IL-8水平较术前显著降低(P<0.01),但仍显著高于对照组人群(P<0.01)。肝癌患者血清TNF-α和IL-8水平与性别、年龄、组织类型、临床分期及肿瘤大小无明显相关性(P>0.05),与有无淋巴结转移有关(P<0.05)。肝癌组织中TNF-α和IL-8的表达呈正相关(P<0.01)。结论 TNF-α和IL-8可作为肝癌转移的重要标志物及预后评估的指标。

关键词：肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-8 肝癌临床病理特征

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原发性肝癌中多药耐药蛋白谷胱甘肽转移酶及拓扑异构酶Ⅱ的表达与临床病理指标的相关性

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新乡医学院学报 2015年第7期32卷 626-628页

作者：王雷王煜霞陈丽平薛会朝新乡医学院第一附属医院普外科河南卫辉453100 新乡医学院基础医学院病理生理学教研室河南新乡453003

目的探讨原发性肝癌中谷胱甘肽转移酶(GST-π)及拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)的表达与临床病理指标的相关性及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测GST-π及Topo-Ⅱ在原发性肝癌患者病理组织中的表达情况,分析GST-π及Topo-Ⅱ阳性表达与临... 详细信息

目的探讨原发性肝癌中谷胱甘肽转移酶(GST-π)及拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)的表达与临床病理指标的相关性及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测GST-π及Topo-Ⅱ在原发性肝癌患者病理组织中的表达情况,分析GST-π及Topo-Ⅱ阳性表达与临床病理指标之间的关系,评价其临床意义。结果原发性肝癌患者肝癌组织中GST-π的阳性表达与术前甲胎蛋白水平、肿瘤直径、有无癌栓及肿瘤包膜是否完整相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤淋巴结转移(TNM)分期及病灶个数无关(P>0.05);Topo-Ⅱ的阳性表达与患者术前甲胎蛋白水平、肿瘤直径、TNM分期、有无癌栓及肿瘤包膜是否完整相关(P<0.05),与患者年龄及病灶个数无关(P>0.05)。结论 GST-π及Topo-Ⅱ阳性表达与肝癌患者临床病理指标密切相关,可作为判断肝癌患者预后的客观评价指标。

关键词：原发性肝癌多药耐药蛋白谷胱甘肽转移酶拓扑异构酶Ⅱ

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长寿家系的白细胞端粒长度

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中国老年学杂志 2015年第9期35卷 2325-2327页

作者：吴华裕罗晓秋韩焕钦吕泽平胡才友刘承武彭均华孙鹏葛琳潘尚领广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室广西南宁530021 新乡医学院生理学教研室广东医学院第一附属医院传染科国家康复辅具研究中心附属康复医院神经内科广西壮族自治区江滨医院神经内科广西医科大学病理生理学教研室

目的探讨长寿家系血液白细胞的端粒长度与人类衰老/长寿的关系。方法采用real-time PCR方法对广西巴马地区长寿家系(BLF,n=1 301)群体外周血白细胞进行相对端粒长度(LTL)的测定,并与同地区非长寿家系(BNLF,n=283)及外地区(广西平果地区... 详细信息

目的探讨长寿家系血液白细胞的端粒长度与人类衰老/长寿的关系。方法采用real-time PCR方法对广西巴马地区长寿家系(BLF,n=1 301)群体外周血白细胞进行相对端粒长度(LTL)的测定,并与同地区非长寿家系(BNLF,n=283)及外地区(广西平果地区)长寿家系(PLF,n=308)、非长寿家系(PNLF,n=482)进行比较。结果 (1)在整体人群及各家系人群中,LTL均与年龄呈负相关;(2)在BLF中,LTL在各年龄段均无性别差异(P>0.05),其他对照家系除个别年龄段外,也呈现类似的趋势;(3)BLF 90~年龄段的LTL长于PLF(P=0.000);(4)BLF 65~年龄段(近似于长寿老人的第一胎子女)的LTL长于BNLF(P=0.000)、PLF(P=0.011)及PNLF(P=0.021)三个对照家系,BLF 90~高龄段的LTL与三个对照家系65~年龄段的水平相当。结论长寿家系LTL明显长于普通家系,存在一定的遗传倾向。

关键词：端粒长度长寿衰老

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结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌患者中的突变热点研究

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新乡医学院学报 2015年第9期32卷 826-828,832页

作者：崔凯王焕宰守峰冯衍生新乡市中心医院普瘤外科河南新乡453000 新乡市中心医院肾内科河南新乡453000 新乡医学院基础医学院病理生理学教研室河南新乡453003

目的探讨结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变热点及对肿瘤的影响。方法通过公共数据库c Bioportal调取结肠癌突变位点结果,根据其中的一段突变热点区域,构建对应结肠腺瘤样息肉病基因过表达载体及RNAi,采用Western blot检测并证实此... 详细信息

目的探讨结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变热点及对肿瘤的影响。方法通过公共数据库c Bioportal调取结肠癌突变位点结果,根据其中的一段突变热点区域,构建对应结肠腺瘤样息肉病基因过表达载体及RNAi,采用Western blot检测并证实此区域的功能。结果结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变率高达73.9%,显著高于其他肿瘤（P〈0.05）;其中3 454~4 662 bp区域突变发生率占总突变次数的56.1%;构建RNAi后在正常肠上皮细胞中发现β-catenin、CD44、Ki67出现显著上调;在结肠癌细胞中过表达野生型APC（wt-APC）,缺失APC（hotdelAPC）的情况下发现,wt-APC可以有效抑制c-myc、β-catenin、CD44、Ki67等致癌基因的表达,但hotdel-APC不能。结论APC基因中3 454~4 662 bp这段区域编码的蛋白可能在结肠癌发生过程中发挥重要作用。

关键词：结肠腺瘤样息肉病基因结肠癌突变热点

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骨髓间充质干细胞对胶原诱导的关节炎大鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

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中华实验外科杂志 2014年第5期31卷 1091-1093页

作者：张明生穆永慧陈清汉朱宇郑州大学第二附属医院骨科 450014 新乡医学院病理生理学教研室

目的观察间充质干细胞（MSCs）对Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠Treg细胞数量和功能的影响。方法以Ⅱ型胶原蛋白免疫SD大鼠建立CIA动物模型；分离培养正常SD大鼠骨髓MSCs，尾静脉移注CIA大鼠；流式细胞仪检测大鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T... 详细信息

目的观察间充质干细胞（MSCs）对Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠Treg细胞数量和功能的影响。方法以Ⅱ型胶原蛋白免疫SD大鼠建立CIA动物模型；分离培养正常SD大鼠骨髓MSCs，尾静脉移注CIA大鼠；流式细胞仪检测大鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞比例变化；实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）检测脾脏叉状头／翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）mRNA水平及白细胞介素（IL）-10、转化生长因子-β1（TGF—β1）的表达；免疫磁珠法分选各组大鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞，体外检测CD4^＋CD25^＋T细胞对CD4^＋CD25^-T细胞（Teff）增殖的抑制作用。结果MSCs移植改善了CIA大鼠的关节炎症状；与对照组比较，MSCs治疗组大鼠的脾脏内Treg细胞比例逐渐增加，到30d时，和正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Foxp3mRNA水平逐渐升高，同时IL-10、TGF-β 1mRNA水平亦逐渐增加；MSCs治疗组Treg细胞对Teff细胞增殖作用与CIA组比较显著增强（P〈0．05）。结论通过移植MSCs可提高CIA大鼠体内Treg细胞的数量和功能，通过免疫调节改善了CIA大鼠关节炎症的进程。

关键词：骨髓间充质干细胞类风湿关节炎调节性T细胞

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肝细胞生长因子和类胰岛素样生长因子对心肌干细胞的诱导作用

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解剖学报 2014年第5期45卷 663-669页

作者：朱蓓蓓蔡新华孙银平新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院病理生理学教研室河南新乡453003

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光... 详细信息

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光探针示踪培养检测细胞增殖特征。实验分为单纯心肌干细胞组和与心肌共培养组,分别用HGF和IGF1干预,倒置显微镜观察细胞不同时期数量与形态的变化,活细胞工作站观察CFDA SE示踪剂荧光强弱,采集图像,进行统计学分析。免疫荧光技术检测Nkx2.5、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达。结果单纯心肌干细胞组,生长因子刺激后心肌干细胞数量与形态均无明显变化。与心肌共培养组,细胞均发生增殖与形态变化,Nkx2.5、cTnT阳性表达,有个别心肌干细胞分化为自发搏动的心肌细胞。结论心肌干细胞与心肌细胞共培养条件下,HGF和IGF1能够促进心肌干细胞增殖,联合作用能够诱导心肌干细胞向心肌细胞分化。

关键词：心肌干细胞增殖心肌分化肝细胞生长因子类胰岛素样生长因子免疫荧光大鼠

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