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作者

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5 篇 wang hui
5 篇 liu yue
5 篇 王辉
5 篇 王洁
5 篇 wang jie
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5 篇 任方龙
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5 篇 刘月
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4 篇 cui yuhan
4 篇 徐祉轩
4 篇 guan yuhe
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4 篇 朱琳琳
4 篇 song di

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排序：

IFI16在HTLV-1阳性T细胞中对病毒蛋白和促炎因子表达的影响

中华微生物学和免疫学杂志 2019年第9期39卷 668-673页

作者：崔钰晗关宇鹤刘月张葛陈凡陈蒙蒙孙静靓任晓文杨波王洁新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003

目的探讨DNA识别受体干扰素诱导蛋白16(IFI16)在成人T淋巴细胞白血病1型病毒(HTLV-1)阳性T细胞中对HTLV-1病毒蛋白和促炎因子表达的影响。方法在不同的HTLV-1阳性T细胞系中,采用免疫印迹试验检测IFI16在HTLV-1阳性T细胞中的表达变化;构... 详细信息

目的探讨DNA识别受体干扰素诱导蛋白16(IFI16)在成人T淋巴细胞白血病1型病毒(HTLV-1)阳性T细胞中对HTLV-1病毒蛋白和促炎因子表达的影响。方法在不同的HTLV-1阳性T细胞系中,采用免疫印迹试验检测IFI16在HTLV-1阳性T细胞中的表达变化;构建IFI16基因沉默siRNA并用免疫印迹检测其IFI16敲低表达的效率;用siRNA在HTLV-1阳性T细胞系中敲低IFI16表达后,通过real-time PCR和采用免疫印迹分别检测HTLV-1病毒蛋白Tax在mRNA和蛋白质水平上的表达量;并通过real-time PCR检测干扰素(IFN)-α、IFN-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α和HTLV-1病毒基因Tax以及Env的表达量。结果与HTLV-1病毒阴性T细胞Jurkat相比,IFI16在HTLV-1阳性T细胞MT2、MT4以及C8166中表达均增高;在MT2和MT4细胞中用siRNA敲低IFI16表达后,HTLV-1病毒蛋白Tax表达量上升,IFN-α、IFN-γ以及TNF-α的表达量下降。结论在HTLV-1病毒稳定感染的MT2和MT4细胞中,IFI16表达量上升,从而促进干扰素和促炎因子的产生,进而抑制HTLV-1病毒蛋白的表达。

关键词： IFI16 成人T淋巴细胞白血病病毒1型干扰素 T淋巴细胞肿瘤坏死因子-α

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cGAS识别HTLV-1反转中间体并诱导STING依赖性的固有免疫应答

中华微生物学和免疫学杂志 2019年第3期39卷 168-173页

作者：刘月崔钰晗宋迪关宇鹤陈凡陈蒙蒙杨波王洁新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)在成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染过程中对病毒反转中间体的识别以及诱导的下游信号通路。方法将生物素标记的HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞,采用免疫共沉淀试验检... 详细信息

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)在成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染过程中对病毒反转中间体的识别以及诱导的下游信号通路。方法将生物素标记的HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞,采用免疫共沉淀试验检测cGAS与ssDNA90的相互作用;将HeLa细胞与HTLV-1阳性细胞系MT2共培养,采用免疫共沉淀的方法检测cGAS与干扰素基因刺激蛋白(STING)的相互作用;采用siRNA的方法在HeLa细胞中敲减STING,24 h后再转染入cGAS表达质粒,24 h后与MT2细胞共培养24 h,real-time PCR实验检测HeLa细胞中干扰素(IFN)-β、调节活化正常T细胞表达和趋化因子(RANTES)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、HTLV-1病毒蛋白Tax、p19以及HBZ的表达,免疫印迹检测HeLa细胞中干扰素调节因子3(IRF3)和p65的磷酸化水平。结果cGAS与ssDNA90存在相互作用;cGAS与STING存在相互作用,且作用部位在胞质中;在敲减STING的HeLa细胞中,cGAS过表达对IFN-β、RANTES和TNF-α的表达量无明显影响,对HTLV-1病毒蛋白Tax、p19和HBZ的表达量无明显影响,对IRF3和p65的磷酸化水平无明显影响。结论cGAS可结合HTLV-1的反转中间体ssDNA90并通过STING激活固有免疫应答。

关键词：环鸟苷酸-腺苷酸合成酶成人T淋巴细胞白血病病毒1型干扰素基因刺激蛋白 DNA识别受体反转中间体

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cGAS促进HTLV-1反转中间体ssDNA90诱导的固有免疫应答

中华微生物学和免疫学杂志 2018年第6期38卷 434-439页

作者：郭志祥宋迪刘月崔钰晗马玲玲关宇鹤杨波王洁新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室 453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003 新乡医学院河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心 453003

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）在成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）的反转中间体诱导的固有免疫信号通路中的调控功能。方法将HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞，采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞... 详细信息

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）在成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）的反转中间体诱导的固有免疫信号通路中的调控功能。方法将HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞，采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞中的表达变化；将cGAS表达质粒，转染入HeLa细胞，24 h后再转染入ssDNA90，real-time PCR试验检测HeLa细胞中干扰素（IFN）-β、干扰素诱导蛋白10（IP-10）、调节活化正常T细胞表达和趋化因子（RANTES）和肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达，免疫印迹试验检测HeLa细胞中干扰素调节因子3（IRF3）和p65的磷酸化水平；采用siRNA的方法在HeLa和佛波酯（phorbol-12-myristate-13-acetate，PMA）诱导分化的THP1（PMA-THP1）细胞中沉默cGAS的表达，24 h后再转染入ssDNA90，real-time PCR试验检测HeLa和PMA-THP1细胞中IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达，免疫印迹试验检测HeLa和PMA-THP1细胞中IRF3和p65的磷酸化水平。结果ssDNA90转染后，HeLa细胞中cGAS的表达升高；转染有cGAS表达质粒的HeLa细胞与对照组细胞相比，在ssDNA90刺激后，IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量增加，IRF3和p65的磷酸化水平升高；沉默cGAS表达的HeLa和PMA-THP1细胞与对照组细胞相比，在ssDNA90刺激后，IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量降低，IRF3和p65的磷酸化水平下降。结论cGAS在HTLV-1的反转中间体ssDNA90诱导的固有免疫应答中可能具有促进功能。

关键词：环鸟苷酸-腺苷酸合成酶成人T淋巴细胞白血病病毒1型 DNA识别受体反转中间体固有免疫应答

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蓝萼甲素通过IL-6调节HCCLM3细胞STAT3信号通路的表达

中华微生物学和免疫学杂志 2019年第8期39卷 608-612页

作者：朱琳琳徐祉轩张明明新乡医学院医学检验学院、河南省免疫与靶向药物重点实验室、河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心 453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003

目的研究蓝萼甲素(glaucocalyxin A,GLA)调节HCCLM3细胞信号转导转录激活因子(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信号通路表达的作用,探讨GLA影响HCCLM3细胞转移的作用机制。方法不同浓度(0.1 ng/ml、1 ng/m... 详细信息

目的研究蓝萼甲素(glaucocalyxin A,GLA)调节HCCLM3细胞信号转导转录激活因子(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信号通路表达的作用,探讨GLA影响HCCLM3细胞转移的作用机制。方法不同浓度(0.1 ng/ml、1 ng/ml、10 ng/ml、100 ng/ml、1 000 ng/ml)GLA分组刺激培养HCCLM3细胞48 h,qRT-PCR与Western blot分别检测IL-6、STAT3/pSTAT3^Tyr705、MMP9 mRNA与蛋白质的表达;Transwell检测细胞迁移与侵袭;ELISA检测细胞培养液中IL-6的浓度。结果0.1 ng/ml GLA刺激培养HCCLM3细胞48 h,IL-6 mRNA与蛋白质的表达升高,STAT3^Tyr705磷酸化增强,侵袭迁移的细胞增多,分泌至胞外的IL-6浓度也有所升高;随浓度增加,1 000 ng/ml GLA对IL-6的表达、STAT3磷酸化及细胞侵袭迁移表现出明显的抑制作用。结论GLA能够调节HCCLM3细胞IL-6的表达,并通过IL-6影响STAT3信号通路的活化,作用效果与剂量密切相关。

关键词：蓝萼甲素白细胞介素-6 信号转导与转录激活因子3 肝癌

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蓝萼甲素通过Bcl-2/Beclin1靶点调节人肝癌HCCLM3细胞自噬与凋亡的机制研究

中国药房 2022年第9期33卷 1082-1087页

作者：朱琳琳张明明郭格格徐祉轩新乡医学院医学检验学院/河南省分子检验与医学检验技术协同创新中心/河南省免疫与靶向药物重点实验室河南新乡453003

目的研究蓝萼甲素(GLA)对人肝癌HCCLM3细胞自噬与凋亡的调节作用机制。方法HCCLM3细胞按不同实验目的主要设对照组、GLA 2.5μg/mL组、GLA 5μg/mL组、GLA 10μg/mL组。对照组仅加入完全培养基,各给药组分别加入含GLA相应终质量浓度的... 详细信息

目的研究蓝萼甲素(GLA)对人肝癌HCCLM3细胞自噬与凋亡的调节作用机制。方法HCCLM3细胞按不同实验目的主要设对照组、GLA 2.5μg/mL组、GLA 5μg/mL组、GLA 10μg/mL组。对照组仅加入完全培养基,各给药组分别加入含GLA相应终质量浓度的完全培养基。采用流式细胞术检测细胞周期分布与凋亡情况;采用透射电镜观察细胞线粒体形态和自噬情况(仅设对照组、GLA 5μg/mL组);采用JC-1染色和荧光倒置显微镜观察并检测细胞线粒体膜电位;采用Western blot法检测细胞中Bcl-2、Bax、Beclin1、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)蛋白的表达;采用免疫共沉淀法检测细胞中Bcl-2与Beclin1的结合与解离(仅设GLA 5μg/mL组、GLA 10μg/mL组)。结果与对照组相比,GLA 5、10μg/mL能够诱发细胞周期显著阻滞于G2~M期、诱导线粒体膜电位显著下降、增加促凋亡作用,还能显著促进Bax、cleaved caspase-3、Beclin1蛋白表达,显著抑制Bcl-2蛋白表达(P<0.01);GLA 5μg/mL还可引发线粒体形态显著改变,自噬小体增多。免疫共沉淀法结果显示,与GLA 5μg/mL比较,GLA 10μg/mL能够增强Bcl-2与Beclin1的结合。结论GLA可能通过Bcl-2/Beclin1靶点调节HCCLM3细胞自噬与凋亡,且作用效果与剂量密切相关。

关键词：蓝萼甲素靶点机制自噬凋亡 Bcl-2 Beclin1

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cGAS通过调控固有免疫应答抑制HTLV-1在HeLa细胞中复制

中华微生物学和免疫学杂志 2017年第11期37卷 822-826页

作者：马玲玲郭志祥宋迪刘月崔钰晗关宇鹤杨波王洁新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室 453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）在成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）感染HeLa细胞过程中的功能及其作用机制.方法将HeLa细胞与MT2细胞（HTLV-1阳性T细胞）共培养,采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞中的表达... 详细信息

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）在成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）感染HeLa细胞过程中的功能及其作用机制.方法将HeLa细胞与MT2细胞（HTLV-1阳性T细胞）共培养,采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞中的表达变化;构建带有血凝素（HA）标签的cGAS表达质粒,转染入HeLa细胞24 h后与MT2细胞共培养24 h,免疫印迹试验检测HeLa细胞中HTLV-1病毒蛋白Tax和p19的表达量,real-time PCR检测HeLa细胞中HTLV-1病毒基因Tax、p19、Env、HBZ以及px转录本的量,同时免疫印迹试验检测干扰素调节因子3（IRF3）和p65的磷酸化水平,real-time PCR检测干扰素（IFN）-β、干扰素诱导蛋白10（IP-10）、调节活化正常T细胞表达和趋化因子（RANTES）和肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达量.结果与MT2细胞共培养后,HeLa细胞中cGAS的表达升高;转染有cGAS表达质粒的HeLa细胞与对照组细胞相比,在与MT2细胞共培养后,Tax和p19在蛋白水平上的表达量减少,Tax、p19、EnV、HBZ以及px转录本的量减少,IRF3和p65的磷酸化水平升高,IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量增加.结论 cGAS在HTLV-1感染的HeLa细胞中可能具有促进固有免疫应答并抑制HTLV-1病毒复制的功能.

关键词：环鸟苷酸-腺苷酸合成酶成人T淋巴细胞白血病病毒1型 DNA识别受体逆转录病毒

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Ku70对HTLV-1阳性T细胞中HTLV-1病毒蛋白表达的影响

中国病理生理杂志 2018年第12期34卷 2261-2266页

作者：宋迪马玲玲郭志祥刘月崔钰晗关宇鹤杨波王洁新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室医学检验学院科研创新班河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心河南新乡453003

目的:探讨Ku70对人嗜T淋巴细胞病毒1(HTLV-1)阳性T细胞中HTLV-1病毒蛋白表达的影响。方法:Western blot实验检测不同的HTLV-1阳性T细胞系中Ku70的表达水平;构建Ku70基因沉默siRNA并通过Western blot实验检测其敲减Ku70表达的效率;采用si... 详细信息

目的:探讨Ku70对人嗜T淋巴细胞病毒1(HTLV-1)阳性T细胞中HTLV-1病毒蛋白表达的影响。方法:Western blot实验检测不同的HTLV-1阳性T细胞系中Ku70的表达水平;构建Ku70基因沉默siRNA并通过Western blot实验检测其敲减Ku70表达的效率;采用siRNA在HTLV-1阳性的T细胞中敲减Ku70表达后,通过real-time PCR和Western blot实验分别检测HTLV-1病毒蛋白在mRNA和蛋白水平上的表达量,并通过real-time PCR实验检测干扰素和促炎因子的表达量。结果:HTLV-1阳性T细胞系MT2、MT4及C8166中的Ku70均呈高表达;采用siRNA敲减Ku70的表达后,MT2细胞及MT4细胞中的HTLV-1病毒蛋白表达量上升;采用siRNA敲减Ku70的表达后,MT2细胞及MT4细胞中干扰素α、干扰素γ及肿瘤坏死因子α的表达下降。结论:Ku70在HTLV-1阳性T细胞中高表达;在HTLV-1阳性T细胞中,Ku70促进干扰素和促炎因子的表达,抑制HTLV-1病毒蛋白的表达。

关键词： Ku70蛋白人嗜T淋巴细胞病毒1 干扰素肿瘤坏死因子α

来源：评论

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TNFAIP8在小鼠肠道组织及肠道炎症中的表达及意义

中国免疫学杂志 2020年第4期36卷 385-389页

作者：韩美娟牛凯娄运伟王辉(指导) 河南省免疫与靶向药物重点实验室新乡医学院医学检验学院新乡453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003 河南省免疫与靶向药物重点实验室新乡453003

目的:探讨TNFAIP8(TIPE)在小鼠正常肠道组织和结肠炎症组织中的表达及意义。方法:选择8~10周龄的C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠3只并取其结肠组织,进行研磨破碎后用TRIzol试剂提取结肠总RNA,聚合酶链反应(PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(q... 详细信息

目的:探讨TNFAIP8(TIPE)在小鼠正常肠道组织和结肠炎症组织中的表达及意义。方法:选择8~10周龄的C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠3只并取其结肠组织,进行研磨破碎后用TRIzol试剂提取结肠总RNA,聚合酶链反应(PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测结肠中TIPE家族成员mRNA表达情况。选择8~10周龄的WT雄性小鼠5只,分离其十二指肠、空肠、回肠和结肠的上皮细胞后,提取细胞总蛋白和总RNA,Western blot和qPCR检测十二指肠、空肠、回肠和结肠上皮细胞中TIPE蛋白及mRNA的表达。选择8~10周龄的WT雄性小鼠18只,分成6组,每组3只,用含3.0%DSS的饮用水饲养小鼠,在不同的时间点处理小鼠并提取其结肠上皮细胞,qPCR检测DSS诱导肠炎后结肠上皮细胞中TIPE的表达变化。选择8~10周龄的WT雄性小鼠9只,分成3组,每组3只,为了检测感染效率,将小鼠进食8 h后,然后用2×109 CFU的Citrobacter rodentium给小鼠灌胃,在不同的时间点处理小鼠并提取其结肠上皮细胞,qPCR检测Citrobacter rodentium诱导肠炎后结肠上皮细胞中TIPE的表达变化。结果:在WT小鼠结肠组织中,TIPE家族成员都有相应的表达,但TIPE在结肠组织中的表达最高。和十二指肠、空肠和回肠相比,TIPE在结肠上皮细胞中的表达最高。DSS诱导肠炎后,TIPE在结肠上皮细胞中的表达上调(P<0.05)。Citrobacter rodentium诱导肠炎后,TIPE在结肠上皮细胞中的表达上调(P<0.05)。结论:与其他TIPE家族成员相比,TIPE在小鼠结肠组织中和结肠上皮细胞中高表达。DSS及Citrobacter rodentium诱导肠炎后,TIPE在结肠上皮细胞中表达上调。TIPE在肠道组织中特殊的表达方式提示TIPE可能在肠道免疫稳态和肠道炎症过程中发挥一定的作用。

关键词：肠道组织 TIPE 肠炎肠道上皮细胞

来源：评论

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蓝萼甲素通过cyclinB1/CDK1途径诱导DU145细胞G2/M期阻滞

中国免疫学杂志 2021年第18期37卷 2235-2239页

作者：朱琳琳徐祉轩张明明新乡医学院医学检验学院河南省分子检验与医学检验技术协同创新中心河南省免疫与靶向药物重点实验室新乡453003

目的:研究蓝萼甲素(GLA)调节DU145细胞周期信号通路的表达,探讨GLA阻滞DU145细胞周期的作用机制。方法:不同浓度(1、2.5、5μg/ml)GLA分别刺激培养DU145细胞24 h,CCK8检测细胞增殖;流式检测细胞周期与凋亡;qRT-PCR与Western blot分别检... 详细信息

目的:研究蓝萼甲素(GLA)调节DU145细胞周期信号通路的表达,探讨GLA阻滞DU145细胞周期的作用机制。方法:不同浓度(1、2.5、5μg/ml)GLA分别刺激培养DU145细胞24 h,CCK8检测细胞增殖;流式检测细胞周期与凋亡;qRT-PCR与Western blot分别检测细胞周期蛋白p21、cyclinB1、CDK1 mRNA与蛋白水平的表达;免疫荧光检测cyclinB1、CDK1在细胞中的定位表达。结果:5μg/ml GLA刺激培养DU145细胞24 h,细胞中p21表达升高,cyclinB1、CDK1表达降低,细胞周期显著阻滞于G2/M期,且细胞凋亡增加。结论:GLA能够通过cyclinB1/CDK1途径诱导DU145细胞周期阻滞于G2/M期,且作用效果与剂量密切相关。

关键词：蓝萼甲素细胞周期蛋白B1 细胞周期蛋白依赖性激酶1

来源：评论

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二甲双胍与三氧化二砷对KG1a细胞增殖的抑制作用

中国实验血液学杂志 2024年第1期32卷 66-70页

作者：黄李文惠刘萌桂淑敏冯明明刘慧司晓慧牛新清新乡医学院医学技术学院河南省免疫与靶向药物重点实验室河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心河南新乡453003

目的:探讨二甲双胍协同三氧化二砷对急性髓系白血病KG1a细胞增殖的影响及其可能的机制。方法:采用CCK-8法检测二甲双胍、三氧化二砷以及联合应用对KG1a细胞的杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测应用二甲双胍协同三氧化二砷... 详细信息

目的:探讨二甲双胍协同三氧化二砷对急性髓系白血病KG1a细胞增殖的影响及其可能的机制。方法:采用CCK-8法检测二甲双胍、三氧化二砷以及联合应用对KG1a细胞的杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测应用二甲双胍协同三氧化二砷对KG1a细胞凋亡的影响;Western blot检测胞内凋亡、自噬相关蛋白的表达。结果:二甲双胍与三氧化二砷联合及单独应用均可抑制KG1a细胞增殖,诱导KG1a细胞凋亡,联合用药组增殖抑制率及凋亡率高于单独用药组(P<0.05)。联合用药诱导KG1a细胞中Caspase 8和P62蛋白表达上调且高于单药组(P<0.05)。结论:二甲双胍能协同三氧化二砷杀伤KG1a细胞,其作用机制可能与诱导凋亡和增强自噬有关。

关键词：三氧化二砷二甲双胍急性髓系白血病 Caspase 8 P62

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