检索结果-内蒙古大学图书馆

不同表达系统来源的SARS-CoV-2 N蛋白以及联合S1蛋白的免疫效果评价

国际病毒学杂志 2024年第5期31卷 359-363页

作者：杨燕王慧娟单徐畅郭晓炎梁殷洁祁振勇邓瑶谭文杰温州医科大学检验医学院(生命科学学院)浙江省医学遗传学重点实验室 325035 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会生物安全重点实验室北京102206 新乡医学院公共卫生学院 453003 内蒙古医科大学基础医学院呼和浩特010110 广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心南宁530021

目的对哺乳动物细胞真核系统来源以及大肠杆菌原核系统来源的SARS-CoV-2全长N蛋白以及联合S1蛋白在小鼠体内的免疫原性进行评价.方法将蛋白与氢氧化铝以及CpG佐剂混合后通过肌肉注射免疫小鼠,初次免疫后4 w进行加强免疫,通过ELISA和SARS... 详细信息

目的对哺乳动物细胞真核系统来源以及大肠杆菌原核系统来源的SARS-CoV-2全长N蛋白以及联合S1蛋白在小鼠体内的免疫原性进行评价.方法将蛋白与氢氧化铝以及CpG佐剂混合后通过肌肉注射免疫小鼠,初次免疫后4 w进行加强免疫,通过ELISA和SARS-CoV-2假病毒检测结合以及中和抗体水平,通过IFN-γELISpot检测细胞免疫应答水平.结果免疫S1蛋白以及N蛋白加强免疫后均能诱导产生高滴度的IgG抗体,并且均高于初次免疫(P<0.05),且真核系统与原核系统来源的N蛋白诱导的IgG抗体滴度没有差异(P>0.05).N蛋白与S1蛋白分别联合氢氧化铝和CpG佐剂均诱导了较为平衡的Th免疫应答.假病毒中和试验结果显示S1蛋白能诱导产生中和抗体,但N蛋白无法诱导产生.从细胞免疫应答水平来看,S1蛋白以及N蛋白均能诱导IFN-γ分泌细胞的产生,真核系统来源的N蛋白相较于原核系统诱导作用更强,差异有统计学意义(P<0.05).N蛋白与S1蛋白联合免疫小鼠与仅免疫一种蛋白相比,无论是体液免疫还是细胞免疫均没有得到增强.结论本研究比较了不同表达系统来源的N蛋白以及联合N蛋白与S1蛋白的免疫原性,为进一步揭示SARS-CoV-2结构蛋白诱导的免疫应答特点以及疫苗的研发提供了参考.

关键词：新型冠状病毒核衣壳蛋白 S1蛋白免疫原性

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超声联合微泡介导肿瘤药物治疗的研究进展

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中华生物医学工程杂志 2021年第3期27卷 343-348页

作者：董磊王永玲李娜娜常连生魏茜茜王峰新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院生理学与病理生理学系河南新乡453003 新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系河南新乡453003

目前肿瘤的治疗方式包括手术治疗、放疗、化疗、基因治疗、免疫治疗和中医中药治疗等,化疗是其中一种极其重要的治疗方式。然而,无论口服还是静脉等给药方式,化疗药物进入血液循环后导致药物利用率低、不良反应明显。超声联合微泡介导... 详细信息

目前肿瘤的治疗方式包括手术治疗、放疗、化疗、基因治疗、免疫治疗和中医中药治疗等,化疗是其中一种极其重要的治疗方式。然而,无论口服还是静脉等给药方式,化疗药物进入血液循环后导致药物利用率低、不良反应明显。超声联合微泡介导药物释放是一种有效的非侵入性、靶向给药传递技术,在超声波脉冲驱动下,微泡以每秒几十到几百米的速度振荡,可以偏转到血管壁或破碎成纳米量级的颗粒。同时,在聚焦的超声束作用下数百万的微泡发生爆破,可以增加细胞膜的通透性,靶向、无创、可逆地开放血脑屏障或血肿瘤屏障,从而有利于提高化疗药物的利用率、降低化疗药物的不良反应。本文主要对超声联合微泡介导药物靶向治疗肿瘤的研究进展进行综述。

关键词：超声微泡肿瘤药物治疗造影剂

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刺梨黄酮对阿霉素所致心肌细胞毒性的保护作用

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解剖学报 2019年第1期50卷 49-55页

作者：院慧芳张永春蔡新华徐萍陈辉新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第一附属医院心内科新乡医学院药学院河南新乡453003

目的探讨刺梨黄酮(FRRT)对阿霉素(DOX)所致心肌细胞凋亡的影响及机制。方法利用1~3 d新生大鼠(每次26只)原代分离培养心肌细胞和H9C2心肌细胞系,5μmol/L DOX孵育心肌细胞,建立心肌细胞毒性模型,并用FRRT干预,透射电子显微镜观察各组H9C... 详细信息

目的探讨刺梨黄酮(FRRT)对阿霉素(DOX)所致心肌细胞凋亡的影响及机制。方法利用1~3 d新生大鼠(每次26只)原代分离培养心肌细胞和H9C2心肌细胞系,5μmol/L DOX孵育心肌细胞,建立心肌细胞毒性模型,并用FRRT干预,透射电子显微镜观察各组H9C2心肌细胞株超微结构。利用免疫荧光技术和Western blotting检测Bax、P53和Bcl-2蛋白的表达,并对Western blotting检测结果进行半定量分析。结果透射电子显微镜观察显示,DOX组细胞内呈现大量的自噬泡和脂褐素,细胞状态差; FRRT干预后,心肌细胞未见脂褐素的结构,有少量自噬泡。免疫荧光检测显示,DOX组Bax和P53呈阳性表达,Bcl-2呈弱阳性表达; FRRT+DOX组Bax和P53表达不明显,Bcl-2呈强阳性表达。Western blotting检测结果显示,5μmol/L DOX孵育心肌细胞18 h时,Bax蛋白表达水平达到最高,组间比较,差异有统计学意义(*P<0.01)。Bax蛋白在DOX组表达增加,FRRT+DOX组表达减少,组间比较,差异具有统计学意义(*P<0.05); P53蛋白在DOX组表达增加,FRRT+DOX组表达减少,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05); Bcl-2蛋白在DOX组表达减少,FRRT+DOX组表达增加,组间比较,差异具有统计学意义(*P<0.05,**P<0.01)。结论 FRRT通过下调DOX引起的心肌细胞凋亡作用,进而发挥对心肌细胞的保护作用。

关键词：心肌细胞刺梨黄酮阿霉素免疫荧光免疫印迹法大鼠

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超声联合载BDNF逆转录病毒微泡开放血脑屏障治疗阿尔茨海默病

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中华生物医学工程杂志 2021年第6期27卷 591-596页

作者：李冉王皓张凯李素敏范会军郭丽娟王永玲李娜娜吴宏伟魏茜茜董磊王峰新乡医学院第一附属医院超声科河南新乡453100 河南省荣军医院超声科河南新乡453003 新乡医学院生理学与病理生理学系河南新乡453003 新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院化学教研室河南新乡453003

目的制备载脑源性神经营养因子(BDNF)逆转录病毒超声微泡(MpLXSN-BDNF),探讨其联合超声开放血脑屏障对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的治疗作用。方法成年雄性SD大鼠32只,随机分为4组:超声+载pLXSN-EGFP微泡组(U+MpLXSN-EGFP组)、超声+载pLX... 详细信息

目的制备载脑源性神经营养因子(BDNF)逆转录病毒超声微泡(MpLXSN-BDNF),探讨其联合超声开放血脑屏障对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的治疗作用。方法成年雄性SD大鼠32只,随机分为4组:超声+载pLXSN-EGFP微泡组(U+MpLXSN-EGFP组)、超声+载pLXSN-BDNF微泡组(U+MpLXSN-BDNF组)、超声+微泡+pLXSN-BDNF病毒组(U+M+pLXSN-BDNF组)和对照组(Normal组),每组8只。脑内注射β-淀粉样蛋白1-40建立AD大鼠模型,U+MpLXSN-EGFP组、U+MpLXSN-BDNF组、U+M+pLXSN-BDNF组大鼠分别经尾静脉注射载pLXSN-EGFP的微泡、载pLXSN-BDNF的微泡、pLXSN-BDNF病毒和微泡;上述3组注射完成后采用磁共振引导的低频聚焦超声辐照大鼠左侧海马区开放血脑屏障,Normal组不进行处理。处理前、处理1个月后,各组大鼠采用Morris水迷宫实验评价大鼠行为学改变。采用免疫组化法和高效液相色谱法检测大鼠海马组织乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性细胞数目及乙酰胆碱(ACh)含量。结果Morris水迷宫实验显示,与处理前比较,处理1个月后U+MpLXSN-BDNF组大鼠穿越平台次数明显增多(P<0.05);其余3组处理前后穿越平台次数比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。免疫组化和高效液相色谱法检测显示,与U+MpLXSN-BDNF组比较,U+MpLXSN-EGFP组和U+M+pLXSN-BDNF组大鼠海马组织ChAT阳性神经元数目和Ach含量均明显减少(均P<0.05)。结论超声联合载BDNF病毒微泡可增加脑内神经细胞的转染效率,促进外源基因BDNF高表达,对AD模型大鼠起到治疗作用。

关键词：阳离子微泡阿尔茨海默病逆转录病毒脑源性神经营养因子

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超声荧光微泡在脑血管成像中的应用研究

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中华生物医学工程杂志 2022年第3期28卷 241-246页

作者：梁思敏圣泽源路浩刘晓胡珊珊刘梓豪王峰潘敏广州中医药大学第六临床医学院广州中医药大学深圳医院(福田)超声科深圳518034 中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所深圳518055 新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的采用染料掺杂工程化技术制备超声荧光微泡, 探讨其在脑血管近红外二区荧光成像中的应用效果。方法采用薄膜水化法制备负载吲哚菁绿(ICG)染料的超声荧光微泡ICG-MBs, 比较ICG-MBs和商用SonoVue超声微泡的超声造影性能。采用近红外二... 详细信息

目的采用染料掺杂工程化技术制备超声荧光微泡, 探讨其在脑血管近红外二区荧光成像中的应用效果。方法采用薄膜水化法制备负载吲哚菁绿(ICG)染料的超声荧光微泡ICG-MBs, 比较ICG-MBs和商用SonoVue超声微泡的超声造影性能。采用近红外二区荧光成像技术, 评估小鼠尾静脉注射ICG-MBs后脑血管成像性能, 并对其生物安全性进行评价。结果成功制备了分散均匀、粒径约为1 μm的超声荧光微泡ICG-MBs, 证实该微泡具有普通超声微泡和荧光成像的双重性能。超声造影结果显示, 与同等浓度SonoVue微泡比较, ICG-MBs依然保留微泡的超声造影功能, 且二者超声信号强度相近。在小鼠头皮和颅骨保持完整的情况下, ICG-MBs实现了快速(200 ms)、高空间分辨率(165.1 μm)的脑血管近红外二区荧光成像, 且小鼠各主要器官组织均无明显炎症或损伤。结论超声荧光微泡ICG-MBs具有荧光和超声显影的双重功能, 可实现高灵敏度、高分辨率的小鼠脑血管成像, 为脑血管病的诊断和疗效评价提供了一种新的成像方法。

关键词：超声检查谱学近红外线荧光微泡脑血管成像

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不同来源间充质干细胞表面标记的比较

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解剖学报 2019年第5期50卷 589-594页

作者：杜志朋殷国田李苗苗郭志坤李琼新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第三附属医院心血管内科新乡医学院护理学院河南新乡453003

目的探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)、人脂肪间充质干细胞(ADSCs)和人经血源子宫内膜间充质干细胞(MenSCs)之间表面标记的差异及随培养代次增加表面标记的变化。方法分别将HUCMSCs、 ADSCs和MenSCs培养至第3、6、9、12代,用流式细胞... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)、人脂肪间充质干细胞(ADSCs)和人经血源子宫内膜间充质干细胞(MenSCs)之间表面标记的差异及随培养代次增加表面标记的变化。方法分别将HUCMSCs、 ADSCs和MenSCs培养至第3、6、9、12代,用流式细胞术、免疫荧光法检测CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD45的表达并进行比较。结果培养MenSCs和HUCMSCs呈纺锤状,ADSCs形态多样以梭型、多角形为主。流式细胞术检测显示,人HUCMSCs、ADSCs和MenSCs的第3代CD29、CD44、CD73和CD105阳性表达率均在95%以上,CD45阴性表达;第3代MenSCs CD90的表达率为(72.43±0.76)%,均低于其在HUCMSCs(99.67±0.12)%和ADSCs(99.70±0.15)%表达(P<0.001)。HUCMSCs、ADSCs和MenSCs随培养代次的增加表面标记CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD45表达率差异无显著性(P>0.05)。免疫荧光结果与流式细胞术结果一致。结论 HUCMSCs、ADSCs和MenSCs随培养时间的增加稳定高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105,不表达CD45,MenSCs的CD90表达率低于其在HUCMSCs和ADSCs的表达。

关键词：人脐带间充质干细胞人脂肪间充质干细胞人经血源子宫内膜间充质干细胞免疫荧光法流式细胞术人

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大鼠心肌细胞和心肌细胞系H9C2表达弹性蛋白

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解剖学报 2019年第3期50卷 292-296页

作者：韩贝任明芬常玉巧郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院第二附属医院心血管内科河南新乡453000

目的检测弹性蛋白在大鼠心肌细胞和H9C2心肌细胞系内的表达。方法取新生和成年SD大鼠各5例的新鲜心脏,冷冻切片;取20只新生3 d SD大鼠心脏,通过0.05%胰蛋白酶和0.075%Ⅱ型胶原酶消化法,获取原代心肌细胞;免疫组织化学和免疫荧光技术检... 详细信息

目的检测弹性蛋白在大鼠心肌细胞和H9C2心肌细胞系内的表达。方法取新生和成年SD大鼠各5例的新鲜心脏,冷冻切片;取20只新生3 d SD大鼠心脏,通过0.05%胰蛋白酶和0.075%Ⅱ型胶原酶消化法,获取原代心肌细胞;免疫组织化学和免疫荧光技术检测大鼠心肌组织、原代心肌细胞和H9C2心肌细胞系的弹性蛋白表达;ELISA法检测培养的H9C2心肌细胞系上清中的弹性蛋白。结果在大鼠心肌细胞、H9C2心肌细胞系和新生、成年大鼠心肌组织上均发现心肌肌钙蛋白T和弹性蛋白的共表达。免疫组织化学结果发现,弹性蛋白在成纤维细胞、平滑肌细胞和细胞间质内均有表达。H9C2心肌细胞培养液的上清中检测到少量的弹性蛋白。结论大鼠心肌细胞表达弹性蛋白,可能参与心肌细胞的势能和细胞间质弹性纤维的构建。

关键词：弹性蛋白心肌细胞心肌细胞系H9C2 免疫组织化学免疫荧光酶联免疫吸附测定大鼠

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N-乙酰半胱氨酸通过海马区Notch1/hes1通路改善丙戊酸孤独症模型鼠的学习和记忆能力

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中国临床解剖学杂志 2019年第4期37卷 390-396页

作者：项哲张应花何雪玲王丽君崔卫刚新乡医学院基础医学院新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡市分子神经病学重点实验室

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)能否改善孤独症模型鼠的学习和记忆能力及其作用机制。方法利用丙戊酸(valproic acid,VPA)建立孤独症模型,通过三箱实验鉴定造模成功,Western blotting技术检测模型鼠海马区Notch1/hes1通... 详细信息

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)能否改善孤独症模型鼠的学习和记忆能力及其作用机制。方法利用丙戊酸(valproic acid,VPA)建立孤独症模型,通过三箱实验鉴定造模成功,Western blotting技术检测模型鼠海马区Notch1/hes1通路信号分子Notch1、Notch1胞内活性结构域(Notch intracellular domain,NICD)、Hes1、Jagged1变化,免疫荧光技术检测该通路信号下游靶基因Hes1的表达;然后用NAC干预,检测模型鼠学习和记忆能力的变化及Notch1/hes1信号通路关键信号分子的改变。结果与对照组相比,VPA组大鼠找到平台的时间增加,跨越平台的次数及在靶象限的时间均减少,同时Notch1、NICD、Hes1、Jagged1的蛋白表达水平增加;而NAC干预以后,与VPA组相比,VPA+NAC组大鼠找到平台的时间减少,跨越平台的次数及在靶象限的时间均增加,同时海马脑区NICD、Hes1的蛋白表达均下降。结论 NAC可以改善VPA孤独症模型鼠学习和记忆能力,其作用机制可能与降低Notch1/hes1信号通路的过度活化有关。

关键词：孤独症 N-乙酰半胱氨酸 Notch1 丙戊酸学习记忆能力

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不同培养代次对经血源子宫内膜干细胞生物学活性的影响

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中国细胞生物学学报 2020年第2期42卷 204-212页

作者：任雅坤孙钰椋何亚南张胜辉朱鑫星刘彦礼程洪斌丰慧根林俊堂河南省医用组织再生重点实验室新乡453003 新乡医学院生命学技术学院干细胞与生物治疗技术研究中心新乡453003 新乡医学院第三附属医院新乡453003 新乡医学院生物医学工程学院新乡453003 解放军总医院第三医学中心北京100039

该研究明确了不同培养代次经血源子宫内膜干细胞(menstrual blood derived endometrial stem cells,MenSCs)的生物学活性差异,为深入研究MenSCs生物学特性及其潜在临床应用提供理论支持。该研究使用钙黄绿素AM(Calcein-AM)染色检测体外... 详细信息

该研究明确了不同培养代次经血源子宫内膜干细胞(menstrual blood derived endometrial stem cells,MenSCs)的生物学活性差异,为深入研究MenSCs生物学特性及其潜在临床应用提供理论支持。该研究使用钙黄绿素AM(Calcein-AM)染色检测体外培养至第三代(passage 3,P3)、P9和P15代MenSCs的形态;β-半乳糖苷酶染色检测不同培养代次MenSCs的衰老程度;活性氧试剂盒检测不同培养代次MenSCs中活性氧的变化;随后利用MTT、流式细胞术及细胞活死染色在接触式共培养条件下检测P3、P9和P15代MenSCs对小鼠脾淋巴细胞活性、细胞周期、死亡情况以及脾脏淋巴细胞中CD3^+和CD19^+淋巴细胞比例的影响。结果表明,随着培养代次的增加MenSCs细胞面积显著增大,在培养至P15代时MenSCs开始出现大量丝状伪足。衰老程度及活性氧的含量也随培养代次的增加而显著升高;随后与MenSCs接触式共培养体显著增加了小鼠脾淋巴细胞的活性,降低淋巴细胞死亡率,且随培养代次的增加,MenSCs对促进淋巴细胞存活、降低死亡的能力显著降低;进一步细胞周期检测发现,MenSCs无刺激淋巴细胞增殖分裂活性,但可显著降低淋巴细胞死亡及碎片化,且培养代次的增加可显著降低MenSCs维持淋巴细胞存活的能力;此外,不同培养代次MenSCs在体外均对小鼠脾淋巴细胞中CD3^+和CD19^+细胞亚群百分比无显著性影响。综上,MenSCs随着体外培养时间和代次的增加,出现明显的生物学活性降低等特征,且对淋巴细胞活性的调节能力显著降低,上述结果为临床应用中保障MenSCs质量、平衡细胞培养代次和细胞数量及保证稳定的MenSCs临床治疗效果提供理论支持。

关键词：经血源子宫内膜干细胞培养代次细胞衰老氧化损伤

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调节性T细胞对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第10期39卷 752-757页

作者：高海瑶李萌丰慧根林俊堂李永海新乡医学院生命科学技术学院河南省干细胞与生物治疗工程技术研究中心453003 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室453003

目的通过剔除和移植调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)正反两个方面来研究Treg细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)疾病发展中的作用,探讨Treg细胞在EAE病程发展中扮演的角色.方法首先... 详细信息

目的通过剔除和移植调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)正反两个方面来研究Treg细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)疾病发展中的作用,探讨Treg细胞在EAE病程发展中扮演的角色.方法首先通过注射抗小鼠CD25的单克隆抗体来剔除小鼠体内天然产生的Treg细胞,再利用人工合成的MOG35-55短肽对小鼠进行EAE诱导,观察和比较Treg细胞剔除和未剔除的小鼠在EAE病程中EAE评分上的差异.利用流式细胞术分析小鼠体内CD4^+Foxp3^+的Treg细胞数量和比例在EAE病程中的动态变化.用磁性激活细胞分选术(MACS)和荧光激活细胞分选术(FACS)相结合的方法,从Foxp3GFP+转基因小鼠中分离出GFP标记的Treg细胞,然后将分离出的GFP标记Treg细胞通过尾静脉注射到免疫后6 d的EAE小鼠体内,观察Treg细胞移植对EAE小鼠的治疗效果.结果在给小鼠注射抗CD25的单克隆抗体后,流式细胞术检测表明小鼠血液中天然产生的Treg细胞剔除率大于95%.经EAE诱导后,与对照组(注射PBS)小鼠相比,Treg细胞剔除小鼠的疾病程度更为严重,差异显著.通过流式细胞术分析Treg细胞在整个EAE病程中的动态变化,发现在EAE诱导后的第6天,小鼠血液中CD4^+Foxp3^+的Treg细胞比例最低(约11%),因而我们把EAE诱导后6 d作为Treg细胞移植的时间点.从经EAE诱导后6 d的Foxp3GFP+转基因小鼠的脾脏和淋巴结中分离出CD4^+GFP+的Treg细胞,将之通过尾静脉注射给同样经EAE诱导后6 d的野生型小鼠.与对照组相比,接受了Treg细胞移植的小鼠EAE评分明显降低,且差异具有统计学意义.结论Treg细胞剔除小鼠的EAE评分明显比未剔除的对照组小鼠高;而Treg细胞移植可使小鼠的EAE评分明显降低,说明移植的Treg细胞在EAE病程中对小鼠起到一定的保护作用,Treg细胞移植可能作为一种有效的治疗多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)的细胞疗法.

关键词：多发性硬化症实验性自身免疫性脑脊髓炎调节性T细胞

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