检索结果-内蒙古大学图书馆

QS系统中LasR和RhlR蛋白对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响以及免疫原性研究(英文)

生物化学与生物物理进展 2006年第1期33卷 31-38页

作者：谢轶曾蔚贾文祥杨发龙杨维青程曦康梅王兰兰张再容四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 四川大学华西医学中心临床医学院实验医学部成都610041

为探讨铜绿假单胞菌 PAO1 中 lasR 和 rhlR 基因表达产物的分子生物学特性,研究它们对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响以及对小鼠的免疫保护效果,采用聚合酶链式反应 (PCR) 方法扩增铜绿假单胞菌标准株 PAO1 中的 lasR 和 rhlR 基因,全... 详细信息

为探讨铜绿假单胞菌 PAO1 中 lasR 和 rhlR 基因表达产物的分子生物学特性,研究它们对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响以及对小鼠的免疫保护效果,采用聚合酶链式反应 (PCR) 方法扩增铜绿假单胞菌标准株 PAO1 中的 lasR 和 rhlR 基因,全自动荧光测序仪测序,并用 Blast 方法检测克隆片段. 利用 pGEX4T-1 载体分别构建 lasR/rhlR-pGEX4T-1 重组质粒,在大肠杆菌 BL21(DE3)中诱导表达,并经过免疫印迹实验验证其生物学活性. 用硅胶膜培养法建立生物被膜模型,诱导转入了pGFPuv 质粒的铜绿假单胞菌 PAG0305 形成生物被膜,并测定 LasR 蛋白和 RhlR 蛋白对生物被膜形成的影响. 同时用纯化的重组蛋白免疫小鼠,菌落计数法检测免疫组和对照组鼠肺对铜绿假单胞菌的清除率. 以 PAO1 染色体 DNA 为模板的 PCR 结果显示,lasR 的全基因序列为 720 bp,rhlR 基因序列为 726 bp,经序列分析和同源性比较分别与 GenBank 中 lasR/rhlR 基因(登录号:M59425; AE004768) 的同源性为 100%. 大肠杆菌 BL21 (DE3) 分别转化重组质粒 lasR/rhlR-pGEX4T-1 后,经 IPTG诱导和 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表达的融合蛋白分子质量均为 54 ku 左右,与预期蛋白质分子质量相同. 荧光显微镜观察和测定结果表明,在硅胶膜上 PAG0305 能够形成典型的发荧光的生物被膜,LasR 或 RhlR 蛋白 (10 mg/L) 存在的情况下,PAG0305 生物被膜的形成速度在前三天比对照组平均提高 40.77%,而且两蛋白单独存在与同时存在时的作用相同. 体内实验中,免疫小鼠肺部对铜绿假单胞菌的清除率显著高于未经免疫的正常组 (P < 0.05). 上述结果表明:构建的lasR/rhlR-pGEX4T-1 重组质粒能够在大肠杆菌 BL21(DE3)中成功地表达并具有生物学活性. LasR/RhlR 蛋白在体外模型中能够加快铜绿假单胞菌生物被膜的形成速度,是调节铜绿假单胞菌生物被膜形成的重要因素之一. 免疫结果表明,重组蛋白对小鼠表现出一定的保护作用,这为进一步开展疫苗研究奠定了基础.

关键词：铜绿假单胞菌数量感知系统生物被膜免疫原性

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乙酰二脱水卫矛醇对L1210细胞Caspase-3活性的影响

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四川生理科学杂志 2005年第4期27卷 159-161页

作者：邓晓慧范文燕郑风劲杨锦南刘小康四川大学基础医学与法医学院药理教研室成都610041 新乡医学院形态学教研室新乡453003

目的:探讨半胱氨酶-3(Caspase-3)在二乙酰二脱水卫矛醇(d iacetyld ianhydrogalactitol,DADAG)诱导小鼠白血病L1210凋亡过程中的作用。方法:MTT法观察DADAG对L1210细胞的生长抑制作用;透射电镜检测细胞凋亡;Caspase-3试剂盒测定细胞内Ca... 详细信息

目的:探讨半胱氨酶-3(Caspase-3)在二乙酰二脱水卫矛醇(d iacetyld ianhydrogalactitol,DADAG)诱导小鼠白血病L1210凋亡过程中的作用。方法:MTT法观察DADAG对L1210细胞的生长抑制作用;透射电镜检测细胞凋亡;Caspase-3试剂盒测定细胞内Caspase-3的酶活性。结果:DADAG对L1210细胞有较强的体外增殖抑制作用,其IC50值为24.6 mg/L;DADAG可诱导L1210细胞发生凋亡及时间依赖性地升高Caspase-3酶活性。结论:Caspase-3在DADAG诱导的细胞凋亡中可能起重要作用。

关键词：二乙酰二脱水卫矛醇 L1210细胞凋亡半胱氨酶-3 Caspase-3活性 Caspase-3酶活性白血病L1210 细胞凋亡生长抑制作用增殖抑制作用

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FADD在大鼠脑出血周围组织的表达及其与细胞凋亡的关系

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四川解剖学杂志 2005年第4期13卷 22-23页

作者：郑风劲侯软玲邓晓慧季米娜刘小康四川大学华西基础与法医学院药理教研室成都610041 新乡医学院基础医学院河南新乡453003

目的研究大鼠脑出血时血肿周围组织FADD的表达与细胞凋亡之间的关系。方法大鼠70只,随机分为出血前1组及出血后6组,采用胶原酶与肝素联合注射建立大鼠脑出血模型,分析出血前、后不同时相血肿周围组织中FADD的表达与细胞凋亡。结果出血... 详细信息

目的研究大鼠脑出血时血肿周围组织FADD的表达与细胞凋亡之间的关系。方法大鼠70只,随机分为出血前1组及出血后6组,采用胶原酶与肝素联合注射建立大鼠脑出血模型,分析出血前、后不同时相血肿周围组织中FADD的表达与细胞凋亡。结果出血灶血肿周围组织细胞凋亡、FADD的表达上调,分别与对照组比较,组间差异有显著性(P<0.01)。结论大鼠脑出血后引起了FADD的表达及细胞凋亡,FADD的表达强度与细胞凋亡密切关联。

关键词：脑出血细胞凋亡 FADD 大鼠

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项韧带的解剖学观测及临床意义

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四川解剖学杂志 2005年第4期13卷 18-19页

作者：邓晓慧张小路付升旗郭进学刘小康四川大学基础医学与法医学院药理教研室成都610041 新乡医学院人体解剖学教研室河南新乡453003

目的为颈椎病的临床诊断提供解剖学资料。方法采用31例头颈标本,观测项韧带的位置、形态及其与周围结构的关系,应用游标卡尺测量其长、宽、厚度。结果横断层标本上,颈椎棘突至皮肤间自上而下可见项韧带由窄到宽,再由宽到窄的形态学改变... 详细信息

目的为颈椎病的临床诊断提供解剖学资料。方法采用31例头颈标本,观测项韧带的位置、形态及其与周围结构的关系,应用游标卡尺测量其长、宽、厚度。结果横断层标本上,颈椎棘突至皮肤间自上而下可见项韧带由窄到宽,再由宽到窄的形态学改变;正中矢状切标本上,项韧带长13.24±0.13cm,最宽处5.62±0.11cm,厚1.60±0.16cm,形如尖向下的三角形。结论项韧带形态结构的观测对颈椎病的病因诊断及开展微创手术等具有重要的临床意义。

关键词：项韧带断层解剖颈椎病颈椎棘突

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制作实验教学多媒体课件浅议——制作组织病理学多媒体实验课件的理念

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中原医刊 2005年第19期32卷 42-42页

作者：范文艳河南省新乡医学院基础医学部形态学教研室 453003

利用多媒体辅助实验教学,这是各高校教学发展的新趋势,尤其是在医学类院校,多媒体的应用能使学生对人体解剖层次和细胞形态方面有更深刻的了解.我院自2002年在组织病理学首次实行多媒体实验教学以来,深受广大教师和学生的喜爱,收到了良... 详细信息

利用多媒体辅助实验教学,这是各高校教学发展的新趋势,尤其是在医学类院校,多媒体的应用能使学生对人体解剖层次和细胞形态方面有更深刻的了解.我院自2002年在组织病理学首次实行多媒体实验教学以来,深受广大教师和学生的喜爱,收到了良好的教学效果.因此设计制作多媒体组织病理学实验课题成为各教师所关注和实验的焦点,那么设计多媒体的制作应在什么样的理念下来实施操作才能达到预期目的呢?

关键词：多媒体课件设计制作组织病理学实验教学实验课件病理学实验细胞形态解剖层次教学效果

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人肝癌细胞差异表达基因纤维蛋白原γ-多肽的克隆与鉴定

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癌症 2004年第3期23卷 249-253页

作者：范秉琳朱武凌邹国林雒国胜许春雷赵卫星新乡医学院基础医学部河南新乡453003 武汉大学生命科学学院生物化学教研室湖北武汉430072

背景与目的:肝细胞癌(肝癌)的发生、发展与基因的异常表达有关,但详细机制还不清楚,原因在于目前所知的遗传学信息尚欠充分;本研究旨在探索新的人肝癌细胞差异表达基因。方法:应用抑制性消减杂交技术获得肝癌细胞消减cDNA,以T/A方法进... 详细信息

背景与目的:肝细胞癌(肝癌)的发生、发展与基因的异常表达有关,但详细机制还不清楚,原因在于目前所知的遗传学信息尚欠充分;本研究旨在探索新的人肝癌细胞差异表达基因。方法:应用抑制性消减杂交技术获得肝癌细胞消减cDNA,以T/A方法进行克隆,通过DNA测序分析、Northern印迹杂交、cDNA末端快速扩增(rapidamplificationofcDNAend,RACE)和RT-PCR等方法加以鉴定。结果:在被克隆的消减cDNA之中,一个长度为787个核苷酸的差异表达cDNA片段经Northern印迹分析,发现其在两种人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2中的表达均明显高于正常肝细胞;经过RACE后获得一个长度为1597bp、具有3'端polyA结构的基因序列,它含有完整的开放阅读框,编码437个氨基酸,经同源性分析证实该基因为编码人纤维蛋白原γ-多肽(fibrinogengammapolypeptide,FGG)的基因;RT-PCR分析证明癌组织中FGGmRNA表达水平较癌旁非癌组织明显增加,尤其是在肝癌转移灶中。结论:SMMC-7721和HepG2细胞中发现FGG高表达,FGG基因的上调表达是肝癌病理过程中一个重要分子事件。

关键词：肝癌细胞基因纤维蛋白原 γ-多肽克隆基因表达肿瘤

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心脏和肾脏短暂缺血对心肌保护作用的比较研究

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中华心血管病杂志 2002年第7期30卷 424-427页

作者：赵国安丁延峰牛新清李东亮何瑞荣新乡医学院第一附属医院心内科卫辉453100 新乡医学院第一附属医院基础医学部生理教研室卫辉453100 新乡医学院第二附属医院内科河北医科大学基础所生理室

目的　明确心脏和肾脏短暂缺血预处理对心肌缺血再灌注 (MIR)所致心肌坏死和细胞凋亡的影响。方法　在家兔MIR模型上 ,36只动物随机分为单纯MIR组、心肌短暂缺血预处理 (MIP)组和肾脏短暂缺血预处理 (RIP)组。实验过程中 ,记录血流动... 详细信息

目的　明确心脏和肾脏短暂缺血预处理对心肌缺血再灌注 (MIR)所致心肌坏死和细胞凋亡的影响。方法　在家兔MIR模型上 ,36只动物随机分为单纯MIR组、心肌短暂缺血预处理 (MIP)组和肾脏短暂缺血预处理 (RIP)组。实验过程中 ,记录血流动力学、心外膜电图 ;应用三苯硝基四氮唑红测定心肌梗死范围 ;采用末端标记和流式细胞方法检测心肌细胞凋亡等。结果　 (1)血流动力学和心外膜电图 :三组动物的血流动力学指标在MIR过程中逐渐下降 ;心外膜电图ST段在缺血期明显抬高 ,再灌注过程中恢复正常。 (2 )心肌梗死范围 :MIR组的心肌梗死范围 (坏死区占缺血区的重量百分比 )为 (5 3 83± 2 0 4 ) % ,MIP组和RIP组的心肌梗死范围分别为 (2 9 6 7± 2 16 ) %和 (33 0 0±3 4 6 ) %。与MIR组相比 ,MIP组和RIP组的心肌梗死范围明显减小 (P <0 0 1)。 (3)心肌细胞凋亡 :末端标记显示 ,MIR组、MIP组和RIP组中缺血区的心肌细胞凋亡率分别为 (10 98± 0 92 ) %、(5 93±0 81%和 (5 5 8± 0 5 0 ) % ,MIP组和RIP组缺血区中的细胞凋亡率较MIR组明显降低 (P <0 0 1)。结论　MIP和RIP均能减少MIR所致的心肌梗死范围和细胞凋亡 ,MIP和RIP对心脏的保护效应无明显差别。

关键词：肾脏心脏缺血-再灌注损伤缺血预处理心肌坏死细胞凋亡对比分析心肌保护

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普萘洛尔对兔门静脉平滑肌细胞电压依赖性钙通道的抑制作用

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新乡医学院学报 2002年第1期19卷 22-24页

作者：刘巨源崔泰震新乡医学院基础医学部药理学教研室河南新乡453003

目的　探讨普萘洛尔 (propranolol,Pro)降低门脉压和对门静脉血管平滑肌的作用机制。方法　采用离体兔门静脉平滑肌实验方法 ,观察Pro对门静脉平滑肌张力、自发性节律性收缩及CaCl2 、KCl、高K+ 去极化收缩的影响。结果　Pro对兔门静脉... 详细信息

目的　探讨普萘洛尔 (propranolol,Pro)降低门脉压和对门静脉血管平滑肌的作用机制。方法　采用离体兔门静脉平滑肌实验方法 ,观察Pro对门静脉平滑肌张力、自发性节律性收缩及CaCl2 、KCl、高K+ 去极化收缩的影响。结果　Pro对兔门静脉环正常张力无影响 ;Pro 10 0 μmol·L-1和维拉帕米 (verapamil,Ver) 10 μmol·L-1显著抑制兔门静脉的自律性收缩 ;Pro和Ver使兔门静脉环KCl和CaCl2 量效曲线非平行右移 ,最大反应压低 ,显示非竞争性拮抗的两种曲线 ;Pro显著抑制高K+ 去极化所致门静脉环的收缩作用。结论　较大剂量的Pro可能通过阻断血管平滑肌细胞膜上电压依赖性钙通道 (VDC)

关键词：普萘洛尔门静脉钙拮抗剂兔

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复方氢溴酸樟柳碱对眼压已控制青光眼的视功能恢复疗效观察

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临床眼科杂志 2002年第3期10卷 246-247页

作者：李超卢娜新乡医学院第三附属医院眼科 453000 新乡医学院基础医学部解剖教研室

目的　了解复方氢溴酸樟柳碱注射液对青光眼术后病人视功能恢复的疗效。方法　通过应用复方氢溴酸樟柳碱注射液对 2 0例青光眼术后眼压已控制的患者进行治疗 ,随访疗效 6个月。结果　所有病人均取得不同程度的疗效。

关键词：复方樟柳碱青光眼眼压控制药物治疗视功能恢复疗效观察

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改良额肌瓣转移术治疗上睑下垂疗效观察

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中国眼耳鼻喉科杂志 2002年第1期2卷 41-41,47页

作者：卢娜李超河南省新乡医学院基础医学部解剖教研室 453003 新乡医学院三附院眼科453003

额肌瓣转移术治疗上睑下垂早有人报道,但是术后患者抬睑多不自然,且容易形成过矫。而对于重、中度上睑下垂患者施行提上睑肌缩短术,又因此类患者的提上睑肌十分薄弱,缩短术行之难度大、效果不佳。于此我们结合提上睑肌缩短术和额肌瓣转... 详细信息

额肌瓣转移术治疗上睑下垂早有人报道,但是术后患者抬睑多不自然,且容易形成过矫。而对于重、中度上睑下垂患者施行提上睑肌缩短术,又因此类患者的提上睑肌十分薄弱,缩短术行之难度大、效果不佳。于此我们结合提上睑肌缩短术和额肌瓣转移术的优点对重、中度上睑下垂患者施行改良额肌瓣转移术,观察疗效,远期效果良好,现报告如下:

关键词：改良额肌瓣转移术上睑下垂疗效手术方法

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