检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学报 2019年第6期50卷 735-740页

作者：孙莹孙攀文郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室

目的探讨兔心包液内的细胞成分及其分化潜能,为心包液细胞基础研究和临床应用提供形态学依据。方法成年新西兰大白兔30只,无菌开胸,用输液针软管抽取心包液,离心培养。取不同培养代次细胞,倒置显微镜下行细胞形态观察。利用免疫荧光... 详细信息

目的探讨兔心包液内的细胞成分及其分化潜能,为心包液细胞基础研究和临床应用提供形态学依据。方法成年新西兰大白兔30只,无菌开胸,用输液针软管抽取心包液,离心培养。取不同培养代次细胞,倒置显微镜下行细胞形态观察。利用免疫荧光技术对心包液细胞进行免疫显色,观察CD44、CD45、波形蛋白(vimentin)的表面标记。取第3代细胞进行成骨、成脂诱导。利用PCR技术检测CD44、CD45、vimentin相关分子表达情况及分析表达量的差异。结果成年兔心包液中含有形态较为均匀、生长状态良好、增殖能力强的细胞群。免疫荧光结果显示,CD44、vimentin阳性表达,不表达CD45。成脂和成骨诱导后,可向成骨和成脂细胞分化。结论兔心包液中含有多项分化潜能的细胞,它们可能对心肌修复具有积极意义。

关键词： CD44 CD45 波形蛋白心包液免疫荧光新西兰白兔

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新生大鼠心脏成纤维细胞体外分裂方式

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解剖学报 2016年第1期47卷 55-61页

作者：李辞霞常玉巧郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的观察体外培养状态下心脏成纤维细胞（CFs）的形态特征和分裂增殖方式。方法原代培养新生大鼠CFs，免疫荧光双标法分别检测波形蛋白和磷酸化组蛋白H3（H3P）共表达，波形蛋白和微管蛋白共表达。利用活细胞工作站和荧光显微镜观目的... 详细信息

目的观察体外培养状态下心脏成纤维细胞（CFs）的形态特征和分裂增殖方式。方法原代培养新生大鼠CFs，免疫荧光双标法分别检测波形蛋白和磷酸化组蛋白H3（H3P）共表达，波形蛋白和微管蛋白共表达。利用活细胞工作站和荧光显微镜观目的观察处于不同分裂期的细胞时相。结果CFs 0．5～1h贴壁，培养2～3d细胞增殖旺盛，大量细胞进入有丝分裂期，其中多数CFs先隆起变圆，而少数则仍维持扁平状进行分裂。偶见无丝分裂现象。圆隆型有丝分裂时长为20～30min，扁平型分裂时长为40～50min。分裂前期胞核形状规则，H3P开始表达；前中期核膜破裂，纺锤体形成；中期染色体排列在赤道面，H3P高表达，纺锤体呈典型纺锤样；后期染色单体分开并移向两极，H3P在染色单体上持续表达；末期两个子核形成，微管聚集在两子核之间；胞质分裂期，两个子细胞形成，H3P不表达。结论体外培养的CFs存在圆隆型和扁平型两种有丝分裂形态，在分裂方式上存在有丝分裂和无丝分裂两种形式。

关键词：有丝分裂无丝分裂活细胞工作站心脏成纤维细胞免疫荧光新生大鼠

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体外培养状态下心肌细胞有丝分裂的证据

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解剖学报 2015年第1期46卷 63-68页

作者：李辞霞卢杏郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨体外培养状态下心肌细胞有丝分裂、增殖的证据。方法分离新生大鼠心肌细胞,分别原代培养0h至12d;免疫荧光分别双标心肌肌钙蛋白-T（c Tn T）、磷酸化组蛋白H3（H3P）和微管蛋白（tubulin）,利用活细胞工作站和荧光显微镜观察处... 详细信息

目的探讨体外培养状态下心肌细胞有丝分裂、增殖的证据。方法分离新生大鼠心肌细胞,分别原代培养0h至12d;免疫荧光分别双标心肌肌钙蛋白-T（c Tn T）、磷酸化组蛋白H3（H3P）和微管蛋白（tubulin）,利用活细胞工作站和荧光显微镜观察处于分裂期的心肌细胞。结果原代培养的心肌细胞生长状态好、纯度高,可观察到分裂各期的心肌细胞及其微管蛋白的变化。处于分裂各期的心肌细胞不隆起变圆仍维持扁平状。分裂前期细胞核形状规则,染色质凝集,H3P开始表达;前中期核膜破裂,纺锤体形成;中期染色体排列在赤道面,纺锤体呈典型纺锤样;后期染色单体分开并移向两极;末期子核形成,平行微管聚结在两子核之间;胞质分裂期形成两个子细胞,两个细胞分开后,可见有少量微管呈丝状连接。原代培养1～12d的心肌细胞在整个细胞分裂图像中很少见到双核心肌细胞。培养第3天开始发现分裂象的心肌细胞,占总心肌细胞数的2/127（1.57%）和1/92（1.09%）,培养第7天,分裂细胞比率达3/69（4.35%）和5/163（3.07%）,培养第12天有2/100（2%）和0/60（0）的心肌细胞处于分裂期。结论体外培养的心肌细胞存在一定数量的完全有丝分裂,是心肌增殖和心肌再生的细胞学证据。

关键词：有丝分裂心肌细胞免疫荧光技术体外培养大鼠

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5-氮杂胞苷诱导大鼠心脏成纤维细胞向心肌样细胞分化进程相关基因的表达差异

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解剖学报 2020年第6期51卷 861-867页

作者：常玉巧贾阳阳韩贝郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨5-氮杂胞苷(5-aza)诱导心脏成纤维细胞(CFs)向心肌样细胞分化5 d、7 d、14 d、21 d和28 d相关基因的表达差异。方法新生1~3 d SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新生大鼠CFs,采用CFs分子标记盘状结构域受体2(DDR2)... 详细信息

目的探讨5-氮杂胞苷(5-aza)诱导心脏成纤维细胞(CFs)向心肌样细胞分化5 d、7 d、14 d、21 d和28 d相关基因的表达差异。方法新生1~3 d SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新生大鼠CFs,采用CFs分子标记盘状结构域受体2(DDR2)并行细胞免疫荧光染色。含15μmol/L 5-aza心肌细胞诱导液培养第3代CFs,Real-time PCR检测心肌化诱导不同时间点相关基因vimentin、DDR2、Nanog、sox2、c-kit、sca-1、Tbx5、CD73、CD34、c Myc、klf4、Gata4、Oct4、Mef2c和心肌肌钙蛋白T(c Tn T)的表达差异,细胞免疫荧光检测心肌化诱导后5 d、7 d、14 d、21 d和28 d肌钙蛋白T(c Tn T)的表达。透射电子显微镜观察心肌化诱导28 d CFs的超微结构变化。结果 5-aza诱导CFs后3 d细胞生长速率减慢,部分细胞由三角形、梭形向圆形和杆状转变。诱导后7 d、14 d、21 d和28 d,与诱导前相比,DDR2表达稳定,vimentin在14 d表达下降,Nanog、c-kit、sox2和Tbx5伴随着心肌化进程呈现表达下降趋势,而CD73、Mef2c、CD34、Gata4、Oct4和c Tn T表达逐步增加,sca-1在7 d表达上升又下降,c Myc和klf4在14 d表达上升又下降。诱导后5 d少量细胞表达c Tn T,14~21 d c Tn T阳性细胞数明显增高,28 d表达c Tn T较多且趋于稳定。透射电子显微镜显示,CFs心肌化诱导28 d,细胞与细胞间出现端-端连接,细胞质内出现大量的肌原纤维,排列较为规律,但肌节不明显,H带、Z线和M线显示不清。结论 CFs经5-aza诱导,可向心肌样细胞分化,但不能形成成熟的心肌细胞。

关键词： 5-氮杂胞苷心脏成纤维细胞心肌样细胞基因表达实时定量聚合酶链反应大鼠

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Nanog蛋白在CD73^+小鼠脂肪源间充质干细胞中的表达

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解剖学报 2012年第5期43卷 619-623页

作者：齐立杰郭志坤李琼罗欢欢新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨Nanog蛋白在小鼠脂肪源间充质干细胞(ADMSCs)中的表达规律。方法体外分离培养ADMSCs,利用流式细胞仪从ADMSCs中分选出CD73+和CD73-两个细胞亚群。体外分别培养两组细胞,用免疫细胞化学和免疫荧光测定两组细胞Nanog蛋白的表达,... 详细信息

目的探讨Nanog蛋白在小鼠脂肪源间充质干细胞(ADMSCs)中的表达规律。方法体外分离培养ADMSCs,利用流式细胞仪从ADMSCs中分选出CD73+和CD73-两个细胞亚群。体外分别培养两组细胞,用免疫细胞化学和免疫荧光测定两组细胞Nanog蛋白的表达,并比较其差异。结果 CD73+ADMSCs细胞约占总细胞的5%,形态上分为大细胞和小细胞。Nanog蛋白在CD73+ADMSCs细胞中强阳性表达率(16.85±6.83)%,弱阳性表达率(81.78±7.19)%,阴性表达率(1.63±3.59)%;nanog蛋白在CD73-ADMSCs细胞中强阳性表达率(5.74±2.79)%,弱阳性表达率(85.84±37.31)%,阴性表达率(8.42±4.12)%。在Nanog阳性表达的细胞中可见不同分裂时相的有丝分裂细胞,CD73+细胞的分裂象明显多于CD73-细胞。结论 CD73和Nanog可能均是ADMSCs特异性表达的标志,Nanog蛋白强阳性的细胞可能更具幼稚性。通常采用分离培养方法获得的ADMSCs是多种细胞的复合物。

关键词： Nanog蛋白脂肪源间充质干细胞 CD73 免疫组织化学免疫荧光小鼠

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胞葬作用影响动脉粥样硬化的分子机制研究进展

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新乡医学院学报 2021年第3期38卷 207-212页

作者：卢娜崔朝初张淑红刘刚王现伟新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡 453003

动脉粥样硬化(AS)斑块增大、坏死核心形成及斑块破裂是心脑血管疾病的主要病理基础.胞葬即吞噬细胞将凋亡、死亡、受损或衰老的细胞吞噬、降解的过程,对维持组织平衡、消除炎症、免疫防御具有重要的作用.胞葬功能缺陷导致的斑块内细胞... 详细信息

动脉粥样硬化(AS)斑块增大、坏死核心形成及斑块破裂是心脑血管疾病的主要病理基础.胞葬即吞噬细胞将凋亡、死亡、受损或衰老的细胞吞噬、降解的过程,对维持组织平衡、消除炎症、免疫防御具有重要的作用.胞葬功能缺陷导致的斑块内细胞凋亡及坏死细胞清除障碍是推动AS进展的关键因素.本文就巨噬细胞介导的胞葬在AS发生过程中的分子机制研究进展进行阐述,以期为该疾病的防治提供新的思路.

关键词：动脉粥样硬化胞葬巨噬细胞

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线粒体DNA氧化损伤在动脉粥样硬化发生、发展中的作用研究进展

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新乡医学院学报 2021年第3期38卷 201-206页

作者：卢娜李晓刘冬玲王现伟新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡 453003

细胞受损可使线粒体(MT)产生过量活性氧(ROS),引起氧化应激水平升高,而ROS又可反作用于MT,造成线粒体DNA(mtDNA)损伤.动脉粥样硬化(AS)是一种以脂质累积、血管平滑肌细胞增生、细胞凋亡和局部炎症反应为特征的慢性炎症性疾病,氧化损伤... 详细信息

细胞受损可使线粒体(MT)产生过量活性氧(ROS),引起氧化应激水平升高,而ROS又可反作用于MT,造成线粒体DNA(mtDNA)损伤.动脉粥样硬化(AS)是一种以脂质累积、血管平滑肌细胞增生、细胞凋亡和局部炎症反应为特征的慢性炎症性疾病,氧化损伤是其发病机制之一.mtDNA氧化损伤可通过炎症反应、细胞凋亡和改变脂质代谢等途径促进AS的发生和发展.本文就mtDNA氧化损伤与AS的关系进行阐述,以期为AS的防治提供新的策略和靶点.

关键词：氧化损伤线粒体DNA 动脉粥样硬化

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前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9及其抑制剂在动脉粥样硬化中的作用研究进展

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新乡医学院学报 2021年第3期38卷 213-219页

作者：崔朝初卢娜冯超丽杨建波郭志坤王现伟新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡 453003

动脉粥样硬化(AS)严重威胁着人类的生命健康.低密度脂蛋白胆固醇通过促进泡沫细胞的形成及炎症反应在AS的发生、发展中发挥重要作用.低密度脂蛋白受体(LDLR)是负责清除血液中低密度脂蛋白(LDL)的主要分子之一.前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白... 详细信息

动脉粥样硬化(AS)严重威胁着人类的生命健康.低密度脂蛋白胆固醇通过促进泡沫细胞的形成及炎症反应在AS的发生、发展中发挥重要作用.低密度脂蛋白受体(LDLR)是负责清除血液中低密度脂蛋白(LDL)的主要分子之一.前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(PCSK9)能够通过多种途径促进LDL介导的AS的发生和发展,其已被证实是治疗AS的重要靶点,目前已有多种类型的PCSK9抑制剂应用于AS的临床治疗或临床试验研究.本文综述了PCSK9的分子调节机制及其在AS中的作用,以及靶向PCSK9抑制剂的研究进展.

关键词：前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9 低密度脂蛋白受体胆固醇动脉粥样硬化心血管疾病

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着丝粒蛋白A在大鼠心脏的表达及增龄变化

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解剖学报 2018年第4期49卷 512-517页

作者：冯颖殷国田李爱荣郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨着丝粒蛋白A(CENP-A)在大鼠心脏中的表达部位及增龄变化。方法取新生1 d、1周龄、2周龄、3周龄、4周龄、3月龄、6月龄大鼠各10只,采用免疫组织化学、免疫荧光、Western blotting、Real-time PCR技术,观察心脏不同部位CENP-A的... 详细信息

目的探讨着丝粒蛋白A(CENP-A)在大鼠心脏中的表达部位及增龄变化。方法取新生1 d、1周龄、2周龄、3周龄、4周龄、3月龄、6月龄大鼠各10只,采用免疫组织化学、免疫荧光、Western blotting、Real-time PCR技术,观察心脏不同部位CENP-A的分布和增龄变化;利用图像分析系统对CENP-A进行定量分析,并对不同年龄组心脏CENP-A含量进行对比。结果大鼠心脏中CENP-A的表达主要分布在血管壁、心外膜及外膜下组织。随着年龄增长血管壁中CENP-A表达基本稳定,心外膜及外膜下组织中CENP-A表达逐渐减少,新生1 d表达最多,3月龄、6月龄明显减少。血管壁中CENP-A主要是在平滑肌细胞表达,且各年龄段表达基本不变。在靠近心外膜的组织中也有少量心肌细胞表达,且随增龄变化而减少。结论大鼠心脏CENP-A的表达随增龄变化逐渐减少,血管壁CENP-A的表达稳定不变。

关键词：着丝粒蛋白心肌组织心外膜心脏免疫组织化学免疫荧光大鼠

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大鼠心肌梗死后心功能变化与新生血管的关系

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解剖学报 2014年第6期45卷 835-840页

作者：左红波李辞霞郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨大鼠心肌梗死后心功能变化及其与血管新生之间的关系。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支,制备心肌梗死模型,术后利用心脏彩超分别评价梗死后1周、2周、3周和4周的心功能,采用免疫组织化学和Western blotting方法,检测各周大鼠梗死... 详细信息

目的探讨大鼠心肌梗死后心功能变化及其与血管新生之间的关系。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支,制备心肌梗死模型,术后利用心脏彩超分别评价梗死后1周、2周、3周和4周的心功能,采用免疫组织化学和Western blotting方法,检测各周大鼠梗死边缘Ⅷ因子和血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化。结果大鼠心肌梗死1周时心功能最差,2周和3周心功能有所改善,4周时心功能降低;Ⅷ因子与VEGF于术后1周、2周呈高表达,3周表达开始降低,4周时已接近正常水平。结论梗死后心功能的变化与血管新生不一致,心肌梗死早期血管密度的增加不能明显改善心功能。

关键词： Ⅷ因子血管内皮生长因子心肌梗死新生血管心脏彩超免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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