检索结果-内蒙古大学图书馆

第二十六届长城国际心脏病学会议、亚太心脏大会2015、国际心血管病预防与康复会议2015

作者：赵书才赵国安河南新乡医学院第三附属医院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡医学院第三附属医院

目的:探讨TNF-α预处理骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对猪急性心肌梗死后心功能的影响,为心肌梗死的干细胞治疗提供理论依据.方法:体外分离培养并鉴定BMSCs,利用心导管介入球囊封堵左冠状动脉前降支法,制备猪急性心肌梗死模型.12头巴马香...

目的:探讨TNF-α预处理骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对猪急性心肌梗死后心功能的影响,为心肌梗死的干细胞治疗提供理论依据.方法:体外分离培养并鉴定BMSCs,利用心导管介入球囊封堵左冠状动脉前降支法,制备猪急性心肌梗死模型.12头巴马香猪,随机分为TNF-α预处理组、TNF-α未处理组和对照组,TNF-α预处理组:经导管注入等量DAPI标记过的TNF-α预处理后BMSC;TNF-α未处理组:注入等量DAPI标记过的BMSC;对照组:注入等量无菌培养基.造模前及造模后1、2、3、4周采血,提取血清,酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子、肿瘤坏死因子α的浓度变化,术前、术后4周行超声心动图检测心功能变化,HE、Masson染色观察梗死区形态改变,Ⅷ因子免疫组化染色比较新生血管生成.

关键词：

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大鼠心肌梗死后心功能变化与新生血管的关系

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解剖学报 2014年第6期45卷 835-840页

作者：左红波李辞霞郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨大鼠心肌梗死后心功能变化及其与血管新生之间的关系。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支,制备心肌梗死模型,术后利用心脏彩超分别评价梗死后1周、2周、3周和4周的心功能,采用免疫组织化学和Western blotting方法,检测各周大鼠梗死... 详细信息

目的探讨大鼠心肌梗死后心功能变化及其与血管新生之间的关系。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支,制备心肌梗死模型,术后利用心脏彩超分别评价梗死后1周、2周、3周和4周的心功能,采用免疫组织化学和Western blotting方法,检测各周大鼠梗死边缘Ⅷ因子和血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化。结果大鼠心肌梗死1周时心功能最差,2周和3周心功能有所改善,4周时心功能降低;Ⅷ因子与VEGF于术后1周、2周呈高表达,3周表达开始降低,4周时已接近正常水平。结论梗死后心功能的变化与血管新生不一致,心肌梗死早期血管密度的增加不能明显改善心功能。

关键词： Ⅷ因子血管内皮生长因子心肌梗死新生血管心脏彩超免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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Bax、Bcl-2在培养新生鼠皮层神经元中的表达及L-NAME的干预作用

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中国临床解剖学杂志 2014年第5期32卷 595-598页

作者：宋海岩高志涛邓晓慧连辉任铭新付升旗新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨Bax与Bcl-2在体外培养的皮层神经元的表达及非选择性一氧化氮合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)的干预作用。方法原代培养SD新生大鼠皮层神经元,并采用neuron specific enolase(NSE)免疫荧光方法进行细胞纯度鉴定。神经... 详细信息

目的探讨Bax与Bcl-2在体外培养的皮层神经元的表达及非选择性一氧化氮合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)的干预作用。方法原代培养SD新生大鼠皮层神经元,并采用neuron specific enolase(NSE)免疫荧光方法进行细胞纯度鉴定。神经元随机分为正常组、N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)组、NG-Nitro-L-arginine Methyl Ester(L-NAME)组,分别采用ELISA检测各组细胞中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的表达,采用RT-PCR、Western blot分别检测各组细胞中Bax、Bcl-2mRNA及蛋白的表达。结果 NSE免疫荧光大多数细胞为NSE阳性细胞,神经元纯度高达90%;LNAME组中NOS及Bax的表达均高于正常组而低于NMDA组,Bcl-2的表达低于正常组而高于NMDA组。结论 L-NAME对NMDA诱导的神经细胞凋亡起明显的保护作用,其可能是通过上调Bcl-2的表达、下调Bax的表达发挥作用。

关键词：一氧化氮合酶 Bax Bcl-2

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肝细胞生长因子和类胰岛素样生长因子对心肌干细胞的诱导作用

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解剖学报 2014年第5期45卷 663-669页

作者：朱蓓蓓蔡新华孙银平新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院病理生理学教研室河南新乡453003

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光... 详细信息

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光探针示踪培养检测细胞增殖特征。实验分为单纯心肌干细胞组和与心肌共培养组,分别用HGF和IGF1干预,倒置显微镜观察细胞不同时期数量与形态的变化,活细胞工作站观察CFDA SE示踪剂荧光强弱,采集图像,进行统计学分析。免疫荧光技术检测Nkx2.5、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达。结果单纯心肌干细胞组,生长因子刺激后心肌干细胞数量与形态均无明显变化。与心肌共培养组,细胞均发生增殖与形态变化,Nkx2.5、cTnT阳性表达,有个别心肌干细胞分化为自发搏动的心肌细胞。结论心肌干细胞与心肌细胞共培养条件下,HGF和IGF1能够促进心肌干细胞增殖,联合作用能够诱导心肌干细胞向心肌细胞分化。

关键词：心肌干细胞增殖心肌分化肝细胞生长因子类胰岛素样生长因子免疫荧光大鼠

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鸡胚发育过程中金属硫蛋白水解酶17在视顶盖中的过表达与血管生成的关系

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解剖学杂志 2014年第4期37卷 437-439,476,F0002页

作者：李小英范文艳林俊堂李晗崔莉马义杰杨慈清新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的：探索金属硫蛋白水解酶17（ADAM17）在胚胎发育过程中过表达与血管形成的关系.方法：鸡胚正常培养到第3天（E3 d）,采用鸡胚带壳开窗培养方法,取出3～4 ml蛋清,密封开口继续培养至E5d,将pCAGGS-ADAM17和pCAGGS-GFP质粒通过活体电... 详细信息

目的：探索金属硫蛋白水解酶17（ADAM17）在胚胎发育过程中过表达与血管形成的关系.方法：鸡胚正常培养到第3天（E3 d）,采用鸡胚带壳开窗培养方法,取出3～4 ml蛋清,密封开口继续培养至E5d,将pCAGGS-ADAM17和pCAGGS-GFP质粒通过活体电转基因导入视顶盖,电转后继续培养到胚胎发育的E12 d,取材、4％多聚甲醛固定、OCT包埋、切片后采用原位杂交检测ADAM17表达水平,免疫荧光组织化学分析ADAM17过表达对微血管形成的影响.结果：鸡胚发育过程,采用活体电转基因实现了ADAM17在视顶盖中的过表达,ADAM17过表达对微血管的形成具有一定的影响.结论：ADAM17过表达促进微血管数量的增加.

关键词：金属硫蛋白水解酶17 视顶盖微血管过表达

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鸡胚发育早期Sonic Hedgehog在脊髓中的异位表达对形态结构及相关蛋白表达的影响

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中国细胞生物学学报 2014年第8期36卷 1123-1127页

作者：李小英杨慈清王聪睿付苏雷李晗林俊堂新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

该文主要分析音猬因子（Sonic Hedgehog,Shh）在鸡胚发育过程中对脊髓形态结构的形成和相关蛋白表达的影响。实验过程采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3 d,将2μg/μL pCAGGS-Shh和0.25μg/μL pCAGGS-GFP质粒以1：8浓度混合,将... 详细信息

该文主要分析音猬因子（Sonic Hedgehog,Shh）在鸡胚发育过程中对脊髓形态结构的形成和相关蛋白表达的影响。实验过程采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3 d,将2μg/μL pCAGGS-Shh和0.25μg/μL pCAGGS-GFP质粒以1：8浓度混合,将0.1~0.5μL混合液准确地注射到神经管,在电压18 V、每次脉冲60 ms、间隔100 ms、电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后6 h开始到5 d分别收集胚胎,冰冻切片,采用荧光免疫组化和DAPI染色观察组织形态结构及相关蛋白的变化。结果表明,电转后6 h便可以观察到GFP的表达,24 h时Shh在脊髓中的异位表达能够诱导转录因子Nkx2.2（NK2 homeobox 2）的表达,并且能够抑制Pax7（paired-type homeobox 7）的表达,而Shh异位表达时脊髓的结构发生了明显的改变;说明Shh作为脊髓发育过程重要的信号分子,其异位表达能够诱导和抑制相关蛋白的表达,影响脊髓正常发育。

关键词：鸡胚脊髓

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一种鸡胚发育过程脊髓神经纤维投射研究方法的建立

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解剖学报 2014年第5期45卷 724-728页

作者：胡阿珍杨慈清付苏雷贾阳阳李晗郭志坤林俊堂河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院生命科学技术学院河南新乡453003

目的建立一种鸡胚发育过程脊髓神经纤维投射的研究方法。方法采用鸡胚带壳开窗培养技术,在鸡胚胚龄3d(E3),通过活体电转基因技术将携带有报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的质粒(pCAGGS-GFP)准确注射到脊髓腔进行定时定位活体电转,转染后3d在... 详细信息

目的建立一种鸡胚发育过程脊髓神经纤维投射的研究方法。方法采用鸡胚带壳开窗培养技术,在鸡胚胚龄3d(E3),通过活体电转基因技术将携带有报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的质粒(pCAGGS-GFP)准确注射到脊髓腔进行定时定位活体电转,转染后3d在体视荧光显微镜下进行观察;取出GFP阳性表达的胚胎,剥离出脊髓,从顶板处破开之后将脊髓展开,用4%多聚甲醛固定1h后,对神经钙黏蛋白(N-cadherin)进行免疫荧光染色,用4’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染细胞核;封片后在荧光显微镜下观察神经纤维投射情况。结果对比横向切片和脊髓展开标本,两者均观察到GFP阳性转染侧的神经元纤维穿过底板沿对侧脊髓白质区边缘投射到神经结节,在脊髓展开标本中还可观察到神经纤维穿过底板再纵向向脑部投射;而N-cadherin免疫荧光染色结果表明,GFP基因的转染对机体正常的发育无明显影响。结论本实验建立了一种鸡胚发育过程脊髓神经纤维投射的研究方法。

关键词：脊髓神经纤维投射活体电转鸡胚

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ADAM17异常表达对神经前体细胞迁移的影响

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神经解剖学杂志 2014年第6期30卷 683-687页

作者：杨慈清李小英王聪睿付苏雷李晗林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的：分析在胚胎发育过程ADAM17异常表达对神经前体细胞迁移的影响。方法：采用鸡胚活体电转和小鼠子宫内电转基因技术,在鸡胚发育的第5 d（E5）,将2μg/μl的p CAGGS-ADAM17和0.25μg/μl的p CAGGS-GFP质粒以1∶8混合液0.25-0.5μl准... 详细信息

目的：分析在胚胎发育过程ADAM17异常表达对神经前体细胞迁移的影响。方法：采用鸡胚活体电转和小鼠子宫内电转基因技术,在鸡胚发育的第5 d（E5）,将2μg/μl的p CAGGS-ADAM17和0.25μg/μl的p CAGGS-GFP质粒以1∶8混合液0.25-0.5μl准确地注射到视顶盖内,然后电转基因,E12时收集胚胎;小鼠胚胎发育的15 d（E15）进行子宫内电转,将2μg/μl的shRNA-ADAM17和0.25μg/μl的p CAGGS-GFP质粒以1∶8混合液0.25-0.5μl准确地注射到一侧脑室,电转基因后E20时收集胚胎。冰冻切片,采用免疫荧光组织化学和DAPI染色观察组织形态结构及相关蛋白的变化。结果：在鸡胚模型中,ADAM17的超表达并不会明显的引起神经前体细胞迁移的改变,对细胞核转录因子Pax7的表达也没有影响;在鼠胚模型中,ADAM17的抑制表达能够引起神经前体细胞迁移受阻,但并没有引起大脑皮层各层的结构的变化。结论：ADAM17的抑制表达对神经前体细胞的迁移具有抑制作用,但并不会引起大脑皮层结构的改变。

关键词： ADAM17 神经前体细胞鸡胚小鼠胚胎

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正常大鼠心室肌弹性纤维和弹性蛋白的增龄变化

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解剖学报 2013年第1期44卷 106-110页

作者：翟新博武俊芳郭志坤汪艳丽新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院三全学院河南新乡453003

目的探讨大鼠心脏发育过程中弹性蛋白的形态分布特点和增龄变化规律。方法取孕18d、生后10d、生后1个月和生后3个月大鼠各10只,采用地衣红染色、免疫组织化学和Western blotting技术,观测心室弹性纤维的分布和弹性蛋白表达的变化;利用... 详细信息

目的探讨大鼠心脏发育过程中弹性蛋白的形态分布特点和增龄变化规律。方法取孕18d、生后10d、生后1个月和生后3个月大鼠各10只,采用地衣红染色、免疫组织化学和Western blotting技术,观测心室弹性纤维的分布和弹性蛋白表达的变化;利用图像分析系统对弹性蛋白进行定量分析,并对不同月龄心室弹性蛋白含量进行对比分析。结果弹性纤维广泛分布于心外膜、心肌细胞周围、小动脉壁。弹性纤维形似发丝,无粗大纤维束;胎鼠至初生期增长迅速,幼年到成年期增速减慢。心内膜的弹性纤维在幼年期达到高峰,成年略有降低。结论从胚胎至成年大鼠心室弹性纤维逐渐增加,这种变化是心肌生理性重构的重要组成部分。

关键词：心脏弹性纤维地衣红染色免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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心肌细胞的三维培养

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中国组织工程研究 2013年第7期17卷 1313-1318页

作者：王慧玲郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南省新乡市453003

背景:由于三维培养可以再现组织细胞的体内生长情况,它已经成为研究肿瘤的耐药性、侵袭性和肿瘤微环境的重要平台。目的:总结归纳了心肌细胞三维培养的研究进展及存在的问题。方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中1994年1月至2012年... 详细信息

背景:由于三维培养可以再现组织细胞的体内生长情况,它已经成为研究肿瘤的耐药性、侵袭性和肿瘤微环境的重要平台。目的:总结归纳了心肌细胞三维培养的研究进展及存在的问题。方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中1994年1月至2012年1月关于心肌细胞三维培养的文章,在标题和摘要中以"三维培养,心肌细胞"或"Three-dimensional culture,Cardiaccell"为检索词进行检索。选择文章内容与心肌细胞三维培养有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到828篇文献,根据纳入标准选择关于心肌细胞三维培养的36篇文献进行综述。结果与结论:寻找满足要求和易于操作的种子细胞是心肌细胞三维培养的关键环节,而种子细胞的空间立体生长要求有支架的依附,支架使种子细胞间形成适宜的空间分布和细胞联系,并可以提供信号诱导细胞的生长和分化。心肌细胞三维培养为心肌修复提供了一个新的思路,虽然此方面研究已取得了很大进展,但仍有很多问题亟待解决,使三维培养的心肌组织血管化是今后研究的主要方向。

关键词：组织构建组织构建学术探讨心肌细胞三维培养心肌血管化心肌修复支架材料种子细胞组织工程

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