检索结果-内蒙古大学图书馆

现代肿瘤医学 2023年第5期31卷 789-794页

作者：董磊魏茜茜李孟壕何美李城李昭一尹朝华张素婷李娜娜王永玲常连生王峰新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的:研究藤黄酸对人神经胶质瘤细胞U87的有效作用浓度,以及载藤黄酸(gambogic acid,GA)的多孔脂质/PLGA杂化微泡(GA/PLGA)在超声作用下对U87的杀伤效果。方法:马尔文粒度仪检测GA/PLGA粒径电位分布情况;CCK-8法检测细胞活力;Annexin V... 详细信息

目的:研究藤黄酸对人神经胶质瘤细胞U87的有效作用浓度,以及载藤黄酸(gambogic acid,GA)的多孔脂质/PLGA杂化微泡(GA/PLGA)在超声作用下对U87的杀伤效果。方法:马尔文粒度仪检测GA/PLGA粒径电位分布情况;CCK-8法检测细胞活力;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。结果:每50 mg PLGA中添加4 mg GA制备出的GA/PLGA具有最高的包封率和载药量,分别为(95.57±1.89)%和(7.65±0.15)%;GA对U87细胞的半数抑制浓度(IC50)为1.5μmol/L;US+GA/PLGA处理组对应U87细胞活力最低为(3.85±0.67)%;US+GA/PLGA处理组U87细胞凋亡率最高,为(75.97±0.49)%。结论:GA/PLGA微泡在超声作用下可以增强GA对U87的杀伤效果。

关键词：人神经胶质瘤超声微泡藤黄酸声孔效应

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心脏成纤维细胞生物表型多样性

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解剖学报 2018年第3期49卷 317-323页

作者：常玉巧李辞霞贾阳阳郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨心脏成纤维细胞(CFs)生物表型多样性。方法新生1~3天SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新60只生大鼠CFs,比较原代和传代培养细胞形态学变化,免疫组织化学学检测鉴定常见成纤维细胞标记波形蛋白(vimentin)、成纤维... 详细信息

目的探讨心脏成纤维细胞(CFs)生物表型多样性。方法新生1~3天SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新60只生大鼠CFs,比较原代和传代培养细胞形态学变化,免疫组织化学学检测鉴定常见成纤维细胞标记波形蛋白(vimentin)、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP1)和盘状结构域受体(DDR2)的表达,细胞免疫荧光检测CFs干细胞标记nanog、c-kit、sca-1、CD73和CD90的表达,细胞免疫荧光三标技术检测CFs干细胞标记间的共表达情况。结果酶联合消化法分离培养的CFs收获细胞量大,第3代细胞活力好、纯度高。Vimentin、FSP1和DDR2在CFs中均表达,但DDR2在CFs中呈强表达。部分CFs分别表达nanog、c-kit、sca-1、CD73和CD90,部分nanog阳性的CFs分别和CD73、CD90和sca-1,及其CD90和sca-1存在共表达,nanog^+/CD73^+共表达阳性率最高(59.02%±8.39%),与其他3组相比差异均有极显著性(P<0.01);而nanog^+/CD90^+共表达阳性率与nanog^+/sca-1^+之间差异无显著性(P>0.05),但这两组与CD90^+/sca-1^+相比差异均有极显著性(P<0.01);CD90^+/sca-1^+共表达阳性率均低于其他3组,差异具有极显著意义(P<0.01)。结论 CFs是具有干细胞特征混合细胞群,在表型上具有多样性。

关键词：心脏成纤维细胞干细胞标记细胞培养免疫组织化学新生大鼠

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小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞表面标记表达的比较

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解剖学报 2016年第2期47卷 203-208页

作者：余霞李琼任明芬牛艳菲甘黎郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第二附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨小鼠脂肪源间充质干细胞（ADMSCs）和骨髓源间充质干细胞（BMSCs）表面标记表达的差异。方法分别对小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞进行成骨、成脂、成心肌分化诱导、鉴定;流式细胞术与细胞免疫荧光法检测CD29、CD44、CD45和CD7... 详细信息

目的探讨小鼠脂肪源间充质干细胞（ADMSCs）和骨髓源间充质干细胞（BMSCs）表面标记表达的差异。方法分别对小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞进行成骨、成脂、成心肌分化诱导、鉴定;流式细胞术与细胞免疫荧光法检测CD29、CD44、CD45和CD73的表达并进行比较。结果 BMSCs形态均一,呈长梭形;ADMSCs形态多样,呈梭形、星形、多角形等,胞体较大,表面分泌物较多;两者均可诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞和心肌样细胞。流式细胞术检测显示,BMSCs表面分子CD29、CD44和CD73表达率分别为（83.43±1.97）%、（90.33±0.81）%、（2.63±0.42）%;ADMSCs表面分子CD29和CD44的表达率分别为（53.1±1.05）%、（34.8±2.1）%,CD73表达不稳定,在1.8%~19.7%之间波动。两种细胞均不表达造血干细胞标记物CD45。免疫荧光显示,CD73分子与部分CD29、CD44阳性细胞共表达。结论小鼠BMSCs和ADMSCs均具有成脂、成骨、成心肌分化能力,但是在形态上和分子表达上均存在差异。BMSCs的CD44和CD29表达高于ADMSCs;而CD73的表达则相反,CD73在两种细胞的表达均较低,在ADMSCs的表达不稳定。

关键词： CD73 CD29 CD44 间充质干细胞免疫荧光法流式细胞术小鼠

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大鼠白色和棕色脂肪来源的间充质干细胞成脂分化特性的比较

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解剖学报 2016年第5期47卷 607-613页

作者：牛艳菲赵国安常玉巧甘黎殷国田郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第三附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨白色脂肪组织(WAT)和棕色脂肪组织(BAT)来源的间充质干细胞成脂分化特性的差异。方法雄性SD大鼠15只,3只用于细胞分离培养,12只用于细胞移植。体外分离培养WAT和BAT两种来源的脂肪干细胞,用油红O染色检测两种干细胞的成脂分化率... 详细信息

目的探讨白色脂肪组织(WAT)和棕色脂肪组织(BAT)来源的间充质干细胞成脂分化特性的差异。方法雄性SD大鼠15只,3只用于细胞分离培养,12只用于细胞移植。体外分离培养WAT和BAT两种来源的脂肪干细胞,用油红O染色检测两种干细胞的成脂分化率,用免疫荧光技术检测成脂诱导、分化后的细胞是棕色脂肪细胞还是白色脂肪细胞。4’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记两种来源的干细胞后移植至腹股沟区,分别在第1、2、3周取材,免疫荧光技术检测植入细胞的分化趋向。结果 WAT来源的干细胞增殖速度明显快于BAT来源的干细胞,前者成脂分化率为0.205±0.069,后者为0.165±0.053,两种干细胞的成脂诱导率差异无统计学意义(P>0.05)。两种干细胞分别植入体内后,在第1、2、3周发现,两种干细胞均表达棕色脂肪特异性蛋白解耦联蛋白1(UCP1)。结论 WAT和BAT来源的干细胞在体外及体内诱导成脂后均分化为棕色脂肪细胞。

关键词：解耦联蛋白1 棕色脂肪组织白色脂肪组织脂肪间充质干细胞成脂诱导免疫荧光大鼠

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鸡胚发育过程中音猬因子超表达对Pax家族基因表达的影响

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解剖学报 2015年第5期46卷 667-672页

作者：李晗杨慈清乔梁张必超林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南新乡453003 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨鸡胚发育过程中,音猬因子（Shh）基因在脊髓中超表达后对配对框（Pax）基因家族Pax3、Pax6以及Pax7蛋白表达的影响。方法在鸡胚龄2.5-3.0d（E2.5-E3）时,实验组利用鸡胚脊髓活体电转基因技术将携带Shh基因的质粒和携带有绿色... 详细信息

目的探讨鸡胚发育过程中,音猬因子（Shh）基因在脊髓中超表达后对配对框（Pax）基因家族Pax3、Pax6以及Pax7蛋白表达的影响。方法在鸡胚龄2.5-3.0d（E2.5-E3）时,实验组利用鸡胚脊髓活体电转基因技术将携带Shh基因的质粒和携带有绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的质粒共转入鸡胚脊髓,对照组则只转入报告基因质粒。E4时取材,每组至少取3例,冷冻切片后采用原位杂交技术检测Shh基因的mRNA表达水平,利用荧光免疫技术检测Shh在鸡胚脊髓中超表达后对Pax3,Pax6以及Pax7蛋白表达水平的影响,并将对照组及实验组中3种基因在脊髓两侧的表达量进行统计学分析。结果原位杂交结果表明,E4时Shh的mRNA主要表达在脊髓底板和脊索,实验组结果显示,利用鸡胚脊髓活体电转技术成功建立了Shh超表达模型。对照组中荧光免疫结果表明,Pax3主要表达于脊髓翼板、生肌节、背根以及背根神经节;Pax6主要表达于跨越翼板和基板的脊髓中间部位;Pax7则主要均匀表达于翼板、顶板和生肌节。Shh超表达后,脊髓转染侧与未转染侧相比Pax3、Pax6以及Pax7的表达量差异极显著（P〈0.01）,这3种基因在脊髓中的表达均被抑制。结论在鸡胚发育过程中,Pax家族Pax3、Pax6以及Pax7 3种基因在鸡胚脊髓中具有不同的表达模式,Shh超表达后对其均具有明显的抑制作用,显示这3种Pax基因受Shh信号通路调控。

关键词：音猬因子配对框鸡胚脊髓活体电转原位杂交鸡

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刺梨黄酮对阿霉素所致心肌细胞毒性的保护作用

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解剖学报 2019年第1期50卷 49-55页

作者：院慧芳张永春蔡新华徐萍陈辉新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第一附属医院心内科新乡医学院药学院河南新乡453003

目的探讨刺梨黄酮(FRRT)对阿霉素(DOX)所致心肌细胞凋亡的影响及机制。方法利用1~3 d新生大鼠(每次26只)原代分离培养心肌细胞和H9C2心肌细胞系,5μmol/L DOX孵育心肌细胞,建立心肌细胞毒性模型,并用FRRT干预,透射电子显微镜观察各组H9C... 详细信息

目的探讨刺梨黄酮(FRRT)对阿霉素(DOX)所致心肌细胞凋亡的影响及机制。方法利用1~3 d新生大鼠(每次26只)原代分离培养心肌细胞和H9C2心肌细胞系,5μmol/L DOX孵育心肌细胞,建立心肌细胞毒性模型,并用FRRT干预,透射电子显微镜观察各组H9C2心肌细胞株超微结构。利用免疫荧光技术和Western blotting检测Bax、P53和Bcl-2蛋白的表达,并对Western blotting检测结果进行半定量分析。结果透射电子显微镜观察显示,DOX组细胞内呈现大量的自噬泡和脂褐素,细胞状态差; FRRT干预后,心肌细胞未见脂褐素的结构,有少量自噬泡。免疫荧光检测显示,DOX组Bax和P53呈阳性表达,Bcl-2呈弱阳性表达; FRRT+DOX组Bax和P53表达不明显,Bcl-2呈强阳性表达。Western blotting检测结果显示,5μmol/L DOX孵育心肌细胞18 h时,Bax蛋白表达水平达到最高,组间比较,差异有统计学意义(*P<0.01)。Bax蛋白在DOX组表达增加,FRRT+DOX组表达减少,组间比较,差异具有统计学意义(*P<0.05); P53蛋白在DOX组表达增加,FRRT+DOX组表达减少,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05); Bcl-2蛋白在DOX组表达减少,FRRT+DOX组表达增加,组间比较,差异具有统计学意义(*P<0.05,**P<0.01)。结论 FRRT通过下调DOX引起的心肌细胞凋亡作用,进而发挥对心肌细胞的保护作用。

关键词：心肌细胞刺梨黄酮阿霉素免疫荧光免疫印迹法大鼠

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Bax、Bcl-2在培养新生鼠皮层神经元中的表达及L-NAME的干预作用

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中国临床解剖学杂志 2014年第5期32卷 595-598页

作者：宋海岩高志涛邓晓慧连辉任铭新付升旗新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨Bax与Bcl-2在体外培养的皮层神经元的表达及非选择性一氧化氮合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)的干预作用。方法原代培养SD新生大鼠皮层神经元,并采用neuron specific enolase(NSE)免疫荧光方法进行细胞纯度鉴定。神经... 详细信息

目的探讨Bax与Bcl-2在体外培养的皮层神经元的表达及非选择性一氧化氮合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)的干预作用。方法原代培养SD新生大鼠皮层神经元,并采用neuron specific enolase(NSE)免疫荧光方法进行细胞纯度鉴定。神经元随机分为正常组、N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)组、NG-Nitro-L-arginine Methyl Ester(L-NAME)组,分别采用ELISA检测各组细胞中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的表达,采用RT-PCR、Western blot分别检测各组细胞中Bax、Bcl-2mRNA及蛋白的表达。结果 NSE免疫荧光大多数细胞为NSE阳性细胞,神经元纯度高达90%;LNAME组中NOS及Bax的表达均高于正常组而低于NMDA组,Bcl-2的表达低于正常组而高于NMDA组。结论 L-NAME对NMDA诱导的神经细胞凋亡起明显的保护作用,其可能是通过上调Bcl-2的表达、下调Bax的表达发挥作用。

关键词：一氧化氮合酶 Bax Bcl-2

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新乡医学院学报 2021年第6期38卷 505-510,515页

作者：刘刚崔朝初卢娜冯超丽刘博万光瑞王现伟新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院药学院河南新乡453003

目的探讨复方心脉佳对巨噬细胞炎症相关因子caspase-1和白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响及其机制。方法将对数生长期RAW264.7细胞随机分为对照组和体积分数0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%复方心脉佳组,应用细胞计数试剂盒检测... 详细信息

目的探讨复方心脉佳对巨噬细胞炎症相关因子caspase-1和白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响及其机制。方法将对数生长期RAW264.7细胞随机分为对照组和体积分数0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%复方心脉佳组,应用细胞计数试剂盒检测复方心脉佳孵育24 h时各组细胞存活率。将对数生长期的RAW264.7细胞随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和低、中、高剂量复方心脉佳组,对照组细胞正常培养不加任何刺激剂和药物,LPS组加入1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h,低、中、高剂量复方心脉佳组分别加入体积分数1.0%、2.5%和5.0%的复方心脉佳预孵育12 h,随后加入1 mg·L^(-1) LPS处理4 h;应用Western blot检测5组细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量,实时荧光定量聚合酶链反应法检测对照组、LPS组、高剂量复方心脉佳组细胞中caspase-1前体、IL-1β前体及核转录因子κB(NF-κB)mRNA相对表达量。将对数生长期THP-1细胞随机分为对照组、联合刺激组和低、中、高剂量复方心脉佳组,对照组细胞正常培养不加任何刺激剂和药物,联合刺激组细胞给予1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h后再加入10μmol·L^(-1)尼日利亚菌素孵育1 h,低、中、高剂量复方心脉佳组分别加入体积分数1.0%、2.5%和5.0%的复方心脉佳预孵育12 h,然后加入1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h后再加入10μmol·L^(-1)尼日利亚菌素孵育1 h;应用Western blot检测各组细胞培养液上清液中caspase-1和IL-1β相对表达量。结果对照组与0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%复方心脉佳组RAW264.7细胞存活率分别为(100.00±2.43)%、(102.25±2.76)%、(102.05±2.76)%、(100.63±3.32)%、(94.17±2.05)%、(83.62±3.46)%、(79.44±9.60)%。低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体蛋白相对表达量显著低于对照组和LPS组(P<0.05),对照组与LPS组RAW264.7细胞中caspase-1前体蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);LPS组和低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中IL-1β前体蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05),低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于LPS组(P<0.05);高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于低、中剂量复方心脉佳组(P<0.05),中剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于低剂量复方心脉佳组(P<0.05)。LPS组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体和NF-κB mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05),高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体和NF-κB mRNA相对表达量显著低于LPS组和对照组(P<0.05)。联合刺激组和低、中、高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05);低、中、高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著低于联合刺激组(P<0.05);高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著低于低、中剂量复方心脉佳组(P<0.05);低剂量复方心脉佳组与中剂量复方心脉佳组THP-1细胞培养上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方心脉佳可能通过调控NF-κB信号通路而降低巨噬细胞中炎症相关因子caspase-1和IL-1β的表达和释放,其抗动脉粥样硬化功效可能与抗炎作用有关。

关键词：复方心脉佳动脉粥样硬化巨噬细胞白细胞介素-1β caspase-1

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神经型钙黏蛋白对小鼠脂肪间充质干细胞的成神经作用

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解剖学杂志 2015年第6期38卷 659-659,671,封4页

作者：贾阳阳杨慈清付苏雷李晗郭志坤骆建凯新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室

目的:探讨神经型钙黏蛋白(N-cadherin)在小鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)成神经分化中的作用.方法;用差速培养法获取小鼠ADMSCs,传至第5代,经成神经诱导液诱导ADMSCs 7 d后,免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE... 详细信息

目的:探讨神经型钙黏蛋白(N-cadherin)在小鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)成神经分化中的作用.方法;用差速培养法获取小鼠ADMSCs,传至第5代,经成神经诱导液诱导ADMSCs 7 d后,免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管相关蛋白2(MAP2)的表达,半定量PCR检测细胞中N-cadherinmRNA的表达;采用N-cadherin对细胞进行基因修饰,免疫荧光检测神经丝蛋白(NF)和GFAP的表达.结果:ADMSCs经成神经诱导7d后表达GFAP、NSE和MAP2,半定量PCR结果显示,与对照组相比成神经诱导后的细胞表达N-cadherin显著增高.转染N-cadherin的N-cadherin细胞培养24h后发出细长的突起,与相邻细胞之间形成网状连接.免疫荧光结果显示,转染后的细胞NF和GFAP表达阳性.结论:ADMSCs在体外多种作用下,具有向神经细胞分化的潜能.N-cadherin转染后能改变ADMSCs的形态,并且在ADMSCs向神经分化中发挥一定的作用.

关键词：神经型钙黏蛋白脂肪间充质干细胞成神经诱导半定量PCR 转染

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新生大鼠多器官成纤维细胞nanog蛋白的表达差异

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解剖学报 2015年第4期46卷 488-494页

作者：鲁召辉常玉巧郭志坤赵国安李琼李辞霞新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室第三附属医院心脏内科河南新乡453003

目的探讨新生大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤中成纤维细胞nanog蛋白表达差异及其意义。方法用免疫组织化学、免疫荧光和体外细胞培养技术,对成纤维细胞进行nanog蛋白和波形蛋白(vimentin)标记,检测并比较新生大鼠不同器官中成纤维细胞na... 详细信息

目的探讨新生大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤中成纤维细胞nanog蛋白表达差异及其意义。方法用免疫组织化学、免疫荧光和体外细胞培养技术,对成纤维细胞进行nanog蛋白和波形蛋白(vimentin)标记,检测并比较新生大鼠不同器官中成纤维细胞nanog蛋白和vimentin表达及共表达特征。结果新生大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤6种器官中均有nanog蛋白和vimentin表达,在每个器官中均有少数成纤维细胞共表达这两种蛋白,共表达率分别为心(10.07±0.77)%、肝(9.97±3.70)%、脾(11.23±2.98)%、肺(15.07±2.87)%、肾(11.75±2.76)%、皮肤(16.14±1.28)%,其中皮肤和肺的共表达率高于心、肝、脾、肾(P<0.05)。结论共表达nanog蛋白和vimentin的成纤维细胞可能更具有干细胞样特性;新生大鼠皮肤和肺的成纤维细胞可能更具有组织损伤修复潜能。

关键词： nanog蛋白波形蛋白成纤维细胞免疫组织化学免疫荧光新生大鼠

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