检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学报 2016年第5期47卷 714-720页

作者：刘彦礼牛荣成杨芬闫岩林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

外周神经损伤带给患者长期病痛的同时严重影响了患者的生活质量,目前临床上除显微外科手术外,移植施万细胞(SC)也成为有效的治疗方法。然而SC移植的先天不足限制了其在临床上的大规模使用,因此,干细胞治疗神经损伤逐渐成为近年来的研究... 详细信息

外周神经损伤带给患者长期病痛的同时严重影响了患者的生活质量,目前临床上除显微外科手术外,移植施万细胞(SC)也成为有效的治疗方法。然而SC移植的先天不足限制了其在临床上的大规模使用,因此,干细胞治疗神经损伤逐渐成为近年来的研究热点。而近来发现的经血源性子宫内膜干细胞(Men ESCs)凭借其丰富的来源,无创伤的分离方式以及较高的增殖活性和分化潜能等方面的优势获得广泛关注,并在成骨、心肌、肝脏、子宫内膜及中风等疾病的治疗过程中显示了良好的效果。因此,我们在明确外周神经损伤发生机制的基础上,着重阐明Men ESCs的生物学特性及其在治疗外周神经损伤的机制,以期为Men ESCs在外周神经损伤的治疗提供借鉴。

关键词：干细胞经血源性子宫内膜干细胞外周神经损伤神经再生

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正常大鼠心室肌弹性纤维和弹性蛋白的增龄变化

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解剖学报 2013年第1期44卷 106-110页

作者：翟新博武俊芳郭志坤汪艳丽新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院三全学院河南新乡453003

目的探讨大鼠心脏发育过程中弹性蛋白的形态分布特点和增龄变化规律。方法取孕18d、生后10d、生后1个月和生后3个月大鼠各10只,采用地衣红染色、免疫组织化学和Western blotting技术,观测心室弹性纤维的分布和弹性蛋白表达的变化;利用... 详细信息

目的探讨大鼠心脏发育过程中弹性蛋白的形态分布特点和增龄变化规律。方法取孕18d、生后10d、生后1个月和生后3个月大鼠各10只,采用地衣红染色、免疫组织化学和Western blotting技术,观测心室弹性纤维的分布和弹性蛋白表达的变化;利用图像分析系统对弹性蛋白进行定量分析,并对不同月龄心室弹性蛋白含量进行对比分析。结果弹性纤维广泛分布于心外膜、心肌细胞周围、小动脉壁。弹性纤维形似发丝,无粗大纤维束;胎鼠至初生期增长迅速,幼年到成年期增速减慢。心内膜的弹性纤维在幼年期达到高峰,成年略有降低。结论从胚胎至成年大鼠心室弹性纤维逐渐增加,这种变化是心肌生理性重构的重要组成部分。

关键词：心脏弹性纤维地衣红染色免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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C1型尼曼-匹克氏症小鼠嗅球胶质细胞的活性变化

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生理学报 2016年第2期68卷 141-147页

作者：闫欣乔梁杨恩慧林俊堂新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

本文观察Npc1基因突变对于小鼠嗅球神经胶质细胞活性的影响,探讨C1型尼曼-匹克氏症的病理机制。提取鼠尾基因组DNA,采用PCR检测基因型;采用免疫荧光组织化学染色观察出生后30 d的小鼠嗅球中小胶质细胞和星形胶质细胞的活性反应;采用免... 详细信息

本文观察Npc1基因突变对于小鼠嗅球神经胶质细胞活性的影响,探讨C1型尼曼-匹克氏症的病理机制。提取鼠尾基因组DNA,采用PCR检测基因型;采用免疫荧光组织化学染色观察出生后30 d的小鼠嗅球中小胶质细胞和星形胶质细胞的活性反应;采用免疫印迹方法检测嗅球中Neu N、神经丝蛋白(neurofilament,NF)、双皮质素(Doublecortin,DCX)、CD68和GFAP的蛋白表达情况。结果显示,Npc1基因突变导致小鼠嗅球中CD68和GFAP蛋白表达显著上调,小胶质细胞和星形胶质细胞的活性明显增强;磷酸化NF的表达也明显增加,而DCX的表达量显著下调。以上结果提示,Npc1基因突变在早期能够引起小鼠嗅球发生一些变化。

关键词： C1型尼曼-匹克氏症嗅觉障碍小胶质细胞星形胶质细胞神经胶质细胞

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大鼠成纤维细胞生长因子对心肌成纤维细胞增殖和转分化的作用机制

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解剖学报 2021年第5期52卷 712-719页

作者：刘梦昕孙昌业李铎任明芬郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第二附属医院心血管内科河南新乡453003

目的探讨成纤维细胞生长因子(FGF)对心肌成纤维细胞(CFs)在增殖和转分化为肌成纤维细胞(MFs)中的作用。方法分离、培养大鼠CFs,利用FGF对其进行诱导培养,CCK-8技术检测细胞活性和增殖状况,免疫荧光和Western blotting技术测定α平滑肌... 详细信息

目的探讨成纤维细胞生长因子(FGF)对心肌成纤维细胞(CFs)在增殖和转分化为肌成纤维细胞(MFs)中的作用。方法分离、培养大鼠CFs,利用FGF对其进行诱导培养,CCK-8技术检测细胞活性和增殖状况,免疫荧光和Western blotting技术测定α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达量。结果随大鼠CFs培养代数的增加,其α-SMA、ColⅠ的表达和活化为MFs的数量增加。加入FGF诱导培养的大鼠CFs数量没有明显增加;加入FGF1、FGF2诱导的CFs表达α-SMA减少,活化为MFs数量减少。结论FGF家族对大鼠CFs没有促增殖作用,但FGF1和FGF2可以抑制CFs活化,减少其向MFs的分化。

关键词：成纤维细胞生长因子 α平滑肌肌动蛋白肌成纤维细胞心肌成纤维细胞免疫印迹法大鼠

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鸡源Wnt3a融合蛋白表达载体的构建及其对鸡胚脊髓神经前体细胞增殖和轴突形成的影响

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解剖学报 2017年第1期48卷 7-13页

作者：李秋玲杨慈清张必超朱少义林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的构建鸡源Wnt3a融合蛋白真核表达载体(pCAG-MCs-Wnt3a-EGFP),并探讨其在鸡胚脊髓发育过程中超表达后对神经前体细胞增殖及轴突形成的影响。方法利用分子生物学手段,提取鸡胚脊髓总RNA并获得Wnt3a片段,将其克隆到pCAG-MCs-EGFP载体中... 详细信息

目的构建鸡源Wnt3a融合蛋白真核表达载体(pCAG-MCs-Wnt3a-EGFP),并探讨其在鸡胚脊髓发育过程中超表达后对神经前体细胞增殖及轴突形成的影响。方法利用分子生物学手段,提取鸡胚脊髓总RNA并获得Wnt3a片段,将其克隆到pCAG-MCs-EGFP载体中构建pCAG-MCs-Wnt3a-EGFP表达载体。在鸡胚发育至2.5~3d(E2.5~E3)时,利用鸡胚活体电转技术将pCAG-MCs-Wnt3a-EGFP(实验组)和pCAG-MCs-EGFP(对照组)质粒分别转入鸡胚脊髓,E4时取材切片,每组5个胚胎组织,采用免疫荧光染色技术检测Wnt3a和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达变化分析Wnt3a与细胞增殖间的关系,根据载体自发绿色荧光蛋白(GFP)观察脊髓神经前体细胞轴突生成情况。结果 pCAG-MCs-Wnt3a-EGFP表达载体基因测序结果与Gene bank中基因序列一致,将pCAGMCs-Wnt3a-EGFP导入鸡胚脊髓中发现绿色荧光。在脊髓组织切片水平上,免疫荧光染色结果表明,Wnt3a在鸡胚脊髓中能够超表达。Wnt3a超表达后,与对照组比较,含有轴突的神经元数量明显减少(n=3,P<0.01),而PCNA的表达量显著增加(n=3,P<0.01)。结论成功构建了鸡源性Wnt3a融合蛋白真核表达载体,并证实Wnt3a在鸡胚发育过程中促进神经前体细胞的增殖并抑制轴突的形成。

关键词： Wnt3a 增殖轴突形成活体原位电转免疫荧光鸡胚

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脂肪间充质干细胞CD73亚群心肌分化能力评价

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解剖学报 2016年第1期47卷 49-54页

作者：张珉高建辉李琼余霞王晶晶郭志坤河南省肿瘤医院肝胆胰外科郑州450008 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨CD73+和CD73-脂肪间充质干细胞(ADMSCs)两个亚群向心肌分化能力的差异,筛选出心肌分化优势亚群,为进一步开展细胞治疗心肌疾患提供实验参考。方法流式细胞仪分选CD73+/CD73-ADMSCs亚群,HE染色观测其形态。体外5-氮杂胞甙(5-aza... 详细信息

目的探讨CD73+和CD73-脂肪间充质干细胞(ADMSCs)两个亚群向心肌分化能力的差异,筛选出心肌分化优势亚群,为进一步开展细胞治疗心肌疾患提供实验参考。方法流式细胞仪分选CD73+/CD73-ADMSCs亚群,HE染色观测其形态。体外5-氮杂胞甙(5-aza)诱导CD73+/CD73-亚群,免疫荧光法检测心肌特异性肌钙蛋白T(c Tn T),Real-time PCR检测c Tn T、Gata-4变化;4’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记两个亚群后,移植到大鼠心肌内,免疫荧光法检测移植细胞c Tn T表达。结果 CD73+ADMSCs形态以小细胞为主呈细长形或纺锤状,CD73-细胞以宽大扁平或方形等为主。体外成心肌诱导后,CD73+ADMSCs心肌特异性c Tn T表达率为45.5%、CD73-亚群为5.75%,基因水平上CD73+亚群表达c Tn T、Gata-4明显高于阴性亚群(P<0.01)。体内CD73+亚群较阴性亚群高表达c Tn T。结论 CD73+ADMSCs较CD73-ADMSCs具有更高向心肌分化的潜能,CD73+ADMSCs可能更具有心肌治疗的前景。

关键词： CD73 心肌特异性肌钙蛋白T 心肌分化脂肪间充质干细胞流式细胞术小鼠

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一种自制电极鸡胚视顶盖转基因技术

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解剖学报 2015年第1期46卷 133-137页

作者：杨慈清李小英王聪睿李晗张必超林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的建立一种高效鸡胚视顶盖电转基因技术,对自制电极进行评估。方法在鸡胚发育的第5天（E5）,将0.5 g/L的p CAGGS-绿色荧光蛋白（GFP）质粒0.25～0.5μl准确地注射到视顶盖内,每组60个鸡胚,在电压18V、每次脉冲60ms、间隔100ms、电脉冲... 详细信息

目的建立一种高效鸡胚视顶盖电转基因技术,对自制电极进行评估。方法在鸡胚发育的第5天（E5）,将0.5 g/L的p CAGGS-绿色荧光蛋白（GFP）质粒0.25～0.5μl准确地注射到视顶盖内,每组60个鸡胚,在电压18V、每次脉冲60ms、间隔100ms、电脉冲6次的条件下,以原装电极为对照,自制电极为实验组进行定时定位活体电转基因,电转后在E6~E12时观察胚胎成活率,取材后在体视荧光显微镜下观察报告基因GFP表达结果以此判断转染的效率。结果在鸡胚模型中,通过自制电极转染鸡胚视顶盖,24h后鸡胚成活率达到89%,在鸡胚发育到E12时存活率达到35%,与原装电极相比分别提高48.3%和600%个百分点。结论自制电极在鸡胚视顶盖电转过程对胚胎的损伤小,转染后胚胎成活率高,为鸡胚视顶盖电转基因提供一种高效的转染技术。

关键词：视顶盖自制电极活体电转鸡胚

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N-乙酰半胱氨酸通过海马区Notch1/hes1通路改善丙戊酸孤独症模型鼠的学习和记忆能力

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中国临床解剖学杂志 2019年第4期37卷 390-396页

作者：项哲张应花何雪玲王丽君崔卫刚新乡医学院基础医学院新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡市分子神经病学重点实验室

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)能否改善孤独症模型鼠的学习和记忆能力及其作用机制。方法利用丙戊酸(valproic acid,VPA)建立孤独症模型,通过三箱实验鉴定造模成功,Western blotting技术检测模型鼠海马区Notch1/hes1通... 详细信息

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)能否改善孤独症模型鼠的学习和记忆能力及其作用机制。方法利用丙戊酸(valproic acid,VPA)建立孤独症模型,通过三箱实验鉴定造模成功,Western blotting技术检测模型鼠海马区Notch1/hes1通路信号分子Notch1、Notch1胞内活性结构域(Notch intracellular domain,NICD)、Hes1、Jagged1变化,免疫荧光技术检测该通路信号下游靶基因Hes1的表达;然后用NAC干预,检测模型鼠学习和记忆能力的变化及Notch1/hes1信号通路关键信号分子的改变。结果与对照组相比,VPA组大鼠找到平台的时间增加,跨越平台的次数及在靶象限的时间均减少,同时Notch1、NICD、Hes1、Jagged1的蛋白表达水平增加;而NAC干预以后,与VPA组相比,VPA+NAC组大鼠找到平台的时间减少,跨越平台的次数及在靶象限的时间均增加,同时海马脑区NICD、Hes1的蛋白表达均下降。结论 NAC可以改善VPA孤独症模型鼠学习和记忆能力,其作用机制可能与降低Notch1/hes1信号通路的过度活化有关。

关键词：孤独症 N-乙酰半胱氨酸 Notch1 丙戊酸学习记忆能力

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不同来源间充质干细胞表面标记的比较

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解剖学报 2019年第5期50卷 589-594页

作者：杜志朋殷国田李苗苗郭志坤李琼新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第三附属医院心血管内科新乡医学院护理学院河南新乡453003

目的探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)、人脂肪间充质干细胞(ADSCs)和人经血源子宫内膜间充质干细胞(MenSCs)之间表面标记的差异及随培养代次增加表面标记的变化。方法分别将HUCMSCs、 ADSCs和MenSCs培养至第3、6、9、12代,用流式细胞... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)、人脂肪间充质干细胞(ADSCs)和人经血源子宫内膜间充质干细胞(MenSCs)之间表面标记的差异及随培养代次增加表面标记的变化。方法分别将HUCMSCs、 ADSCs和MenSCs培养至第3、6、9、12代,用流式细胞术、免疫荧光法检测CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD45的表达并进行比较。结果培养MenSCs和HUCMSCs呈纺锤状,ADSCs形态多样以梭型、多角形为主。流式细胞术检测显示,人HUCMSCs、ADSCs和MenSCs的第3代CD29、CD44、CD73和CD105阳性表达率均在95%以上,CD45阴性表达;第3代MenSCs CD90的表达率为(72.43±0.76)%,均低于其在HUCMSCs(99.67±0.12)%和ADSCs(99.70±0.15)%表达(P<0.001)。HUCMSCs、ADSCs和MenSCs随培养代次的增加表面标记CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD45表达率差异无显著性(P>0.05)。免疫荧光结果与流式细胞术结果一致。结论 HUCMSCs、ADSCs和MenSCs随培养时间的增加稳定高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105,不表达CD45,MenSCs的CD90表达率低于其在HUCMSCs和ADSCs的表达。

关键词：人脐带间充质干细胞人脂肪间充质干细胞人经血源子宫内膜间充质干细胞免疫荧光法流式细胞术人

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肌腱再生工程中肌腱细胞增殖分化研究进展

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新乡医学院学报 2021年第2期38卷 197-200页

作者：王淑贤宋振峰武林威任天宁孙永琨新乡医学院基础医学院河南新乡453003 新乡医学院三全学院河南新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

肌腱病变通常伴随着肌腱细胞的随意增生及变性,并出现胶原纤维断裂和非胶原基质产生过多的现象,其本质是一种不正常的愈合反应,但肌腱组织生长发育和损伤修复涉及的机制尚不清楚。随着我国民众运动意识的提高和老龄化进程的加剧,损伤性... 详细信息

肌腱病变通常伴随着肌腱细胞的随意增生及变性,并出现胶原纤维断裂和非胶原基质产生过多的现象,其本质是一种不正常的愈合反应,但肌腱组织生长发育和损伤修复涉及的机制尚不清楚。随着我国民众运动意识的提高和老龄化进程的加剧,损伤性和退行性肌腱病的发病率也随之升高,临床常用的治疗方案如手术缝合、肌腱移植、保守治疗等无法保证肌腱功能完全恢复,亦有发生肌腱二次损伤的风险。近年来,用组织工程方法构建再生肌腱来修复损伤肌腱的研究日渐受到关注,而肌腱再生的关键是探明肌腱细胞生长相关的生物力学因素及分子机制,肌腱再生工程中如何选取理想的种子细胞、怎样进行有效的细胞培养尚存在争议。为了使损伤性肌腱的结构和功能得到最大化恢复,本文就肌腱再生中种子细胞的选取及肌腱细胞增殖所需要的最适微环境进行综述,以期为肌腱修复治疗提供新的研究思路。

关键词：肌腱再生组织工程增殖分化

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