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中华精神科杂志 2015年第4期48卷 239-245页

作者：刘聪王长虹闫福林韩金红谷景阳翟飞单筱雯新乡医学院第二附属医院临床精神医学教研室 453002 新乡医学院药学院药物化学与药剂学教研室新乡医学院基础医学院组织与胚胎学教研室

目的探讨慢性不可预见性刺激（chronic unpredictable stress,CUS）大鼠海马微管相关蛋白-2（microtubule associated protein-2,MAP-2）表达水平的变化,氟西汀联合丰富环境对CUS大鼠的作用.方法将30只成年雄性Sprague-Dawle（SD）大鼠采用随机数字表法分为CUS组、正常组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组,每组6只.CUS组均孤养并接受6周CUS,正常组标准环境每笼3只群养6周,剩余3组接受6周CUS并于第3周末至第6周末分别氟西汀、丰富环境、氟西汀＋丰富环境干预,CUS前后及干预后以糖水消耗实验、体重测量、旷场实验对大鼠行为进行评估,以免疫组织化学法测定各组大鼠海马MAP-2表达水平.结果（1）CUS前各组大鼠行为评估组间两两比较,糖水消耗、体重、水平运动距离、直立次数、粪便粒数差异均无统计学意义.（2）CUS后CUS组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组较正常组糖水消耗少、体重增加少、水平运动距离小（均P＜0.05）.（3）干预后正常组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组较CUS组糖水消耗多、体重增加多、水平运动距离大（均P＜0.05）;正常组[（84±3）g,（6 687±664） cm]较CUS＋氟西汀组[（75±4）g,（5 859±624） cm]、CUS＋丰富环境组[（77±8）g,（5 876±784） cm]体重增加多（P=0.005、0.029）、水平运动距离大（P=0.028、0.031）;CUS＋氟西汀＋丰富环境组[（6 657±430） cm]较CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组水平运动距离大（P=0.033、0.037）.（4）免疫组织化学显示,正常组（0.408±0.014、0.405±0.011、0.406±0.012）、CUS＋氟西汀组（0.403±0.011、0.403±0.011、0.403±0.012）、CUS＋丰富环境组（0.406±0.015、0.399±0.013、0.406±0.017）、CUS＋氟西汀＋丰富环境组（0.407±0.015、0.401±0.010、0.407±0.013）MAP-2在海马CA1、CA3和齿状回区表达水平较CUS组（0.379±0.020、0.390±0.014、0.394±0.013）增加（均P＜0.05）.结论氟西汀、丰富环境、氟西汀联合丰富环境均可能逆转CUS大鼠抑郁样行为,氟西汀联合丰富环境效果可能优于单独使用氟西汀或丰富环境;CUS大鼠海马CA1、CA3、齿状回区MAP-2表达水平可能降低,且可能被上述3种方法逆转.

关键词：抑郁症大鼠海马氟西汀慢性不可预见性刺激丰富环境

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毛蕊异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞作用的体外研究

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肿瘤 2011年第9期31卷 789-793页

作者：匡文娟刘立涛谭显曙段迎周黎明四川大学华西基础医学与法医学院药理学教研室成都610041

目的:观察毛蕊异黄酮在体外对雌激素受体阳性细胞人乳腺癌MCF-7细胞的作用及其机制。方法:用不同浓度毛蕊异黄酮作用MCF-7细胞,并设未处理阴性对照组及17-雌二醇(17-estradiol,E2)阳性对照组。MTT法测定细胞增殖抑制的情况,FCM检测细胞... 详细信息

目的:观察毛蕊异黄酮在体外对雌激素受体阳性细胞人乳腺癌MCF-7细胞的作用及其机制。方法:用不同浓度毛蕊异黄酮作用MCF-7细胞,并设未处理阴性对照组及17-雌二醇(17-estradiol,E2)阳性对照组。MTT法测定细胞增殖抑制的情况,FCM检测细胞凋亡率影响,并通过RT-PCR和免疫细胞化学法分别测定细胞中Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白水平变化。结果:低浓度的毛蕊异黄酮(2、4和8μmol/L)促进MCF-7细胞增殖,而高浓度毛蕊异黄酮(16和32μmol/L)抑制MCF-7细胞增殖,并且呈剂量依赖性。同时,低浓度的毛蕊异黄酮能减少MCF-7细胞凋亡率(P<0.05),并且显著降低Bax表达水平,增加Bcl-2表达水平(P<0.05)。结论:毛蕊异黄酮在低浓度时能促进MCF-7细胞增殖,减少细胞凋亡,其机制可能与毛蕊异黄酮的雌激素作用有关。

关键词：乳腺肿瘤植物雌激素类细胞增殖细胞凋亡毛蕊异黄酮

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重组人L型丙酮酸激酶N末端单克隆抗体的制备与鉴定

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四川大学学报（医学版） 2010年第4期41卷 571-574页

作者：廖婷婷张晨阳蒋小梅魏大鹏章崇杰四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室成都610041

目的制备抗人L型丙酮酸激酶N末端(PK-N)的单克隆抗体并对其特异性进行鉴定。方法以PK-N-GST-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用EL... 详细信息

目的制备抗人L型丙酮酸激酶N末端(PK-N)的单克隆抗体并对其特异性进行鉴定。方法以PK-N-GST-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western blot、免疫组化对此单克隆抗体特性进行鉴定。结果筛选到两株能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的细胞株,亚类鉴定重链为IgG2b,轻链为kappa链。ELISA法测定腹水效价分别为1∶409600和1∶102400,抗体相对亲和力分别为3.54×108L/mol和2.72×108L/mol。Western blot显示抗体能特异识别免疫原和人肝细胞株HL-7702中的天然丙酮酸激酶蛋白。免疫组化进一步显示了其在细胞及组织中的定位,均匀的分布于细胞的胞浆中。结论成功制备了抗PK-N单克隆抗体。

关键词：单克隆抗体重组人L型丙酮酸激酶糖代谢

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解剖学杂志 2013年第6期36卷 1049-1052页

作者：曹兴玥靳艳路军秀王国栋高福莲新乡医学院组织学与胚胎学教研室新乡453003 新乡医学院三全学院新乡453003 新乡医学院基础医学院新乡453003

目的：探讨多药耐药相关蛋白1（MRPl）在常见人肿瘤细胞的表达。方法：培养K562、A549、SCK；7901和SGC7901／VCR细胞，RT-PCR检测ABCClmRNA的表达；SABC法检测MRPl蛋白的表达。结果：4种细胞均有ABCClmRNA的表达，SCK27901／VCR细胞的A... 详细信息

目的：探讨多药耐药相关蛋白1（MRPl）在常见人肿瘤细胞的表达。方法：培养K562、A549、SCK；7901和SGC7901／VCR细胞，RT-PCR检测ABCClmRNA的表达；SABC法检测MRPl蛋白的表达。结果：4种细胞均有ABCClmRNA的表达，SCK27901／VCR细胞的ABCClmRNA水平显著高于SCX27901细胞；SGC7901／VCR细胞MRPl表达显著高于SGC7901。结论：ABCC1／MRP1可能参与SGC7901细胞获得性多药耐药。

关键词：多药耐药相关蛋白1 人肿瘤细胞系

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小鼠体内抗牛血清白蛋白B细胞克隆对McAb筛选的影响

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四川大学学报（医学版） 2003年第4期34卷 691-693页

作者：王霞魏大鹏蔡美英四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室成都610041

目的　探讨小鼠体内存在的抗牛血清白蛋白 B细胞克隆对抗原特异性 Mc Ab筛选的影响。方法　在Mc Ab筛选过程中 ,采用间接 EL ISA法 ,分别以人重组高效复合干扰素 (r SIFN- co)和 BSA为抗原包被酶标板 ,对杂交瘤细胞培养上清进行“双筛”... 详细信息

目的　探讨小鼠体内存在的抗牛血清白蛋白 B细胞克隆对抗原特异性 Mc Ab筛选的影响。方法　在Mc Ab筛选过程中 ,采用间接 EL ISA法 ,分别以人重组高效复合干扰素 (r SIFN- co)和 BSA为抗原包被酶标板 ,对杂交瘤细胞培养上清进行“双筛”,建立 r SIFN- co/ BSA双阳性杂交瘤细胞克隆和 r SIFN- co单阳性杂交瘤细胞克隆 ,并且对所建立的各株杂交瘤细胞培养上清和正常小鼠血清 ,用 BSA进行吸附抑制实验。结果　建立了 1株r SIFN- co/ BSA双阳性杂交瘤细胞株 ,3株 r SIFN- co单阳性杂交瘤细胞株 ,双阳性杂交瘤细胞株培养上清经 BSA预先吸附后 ,与 r SIFN- co的反应性被显著抑制 (P<0 .0 5 )。而且正常小鼠血清与 r SIFN- co呈阳性反应 ,经 BSA吸附后 ,与 r SIFN- co的反应也被显著抑制。结论　在杂交瘤细胞筛选中 ,存在对特异性抗原和用于封闭酶标板的BSA显示双阳性的杂交瘤细胞克隆 ,提示小鼠体内可能天然存在抗 BSA的 B细胞克隆 ,它们在 Mc Ab筛选过程中会引起假阳性反应 ,因而在杂交瘤细胞筛选过程中应该用特异性抗原和 BSA进行“双筛”。

关键词： McAb 制备牛血清白蛋白酶联免疫吸附试验小鼠

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抑制Jak3激酶活性诱导NALM-6白血病细胞凋亡

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华西医科大学学报 2002年第1期33卷 25-27页

作者：胡为民章崇杰张平魏大鹏赵宗蓉蔡美英四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室成都610041

目的　研究 Jak3的活化与急性淋巴细胞白血病 (AL L)之间的关系。方法　在不同浓度的 Jak3抑制剂 AG490处理 Jak3活化的 AL L 前 B细胞株 NAL M- 6细胞后 ,用流式细胞术及噻唑蓝法分析细胞的凋亡、增殖情况。结果　除 5 μm ol/ L 组外 ... 详细信息

目的　研究 Jak3的活化与急性淋巴细胞白血病 (AL L)之间的关系。方法　在不同浓度的 Jak3抑制剂 AG490处理 Jak3活化的 AL L 前 B细胞株 NAL M- 6细胞后 ,用流式细胞术及噻唑蓝法分析细胞的凋亡、增殖情况。结果　除 5 μm ol/ L 组外 ,经 10、15、2 0 μm ol/ L AG490处理后 NAL M- 6细胞均有明显的亚 G1 峰 ,与 DMSO对照相比 ,凋亡率均有显著增加 (P<0 .0 5 ) ;噻唑蓝法示除 5 μmol/ L 组外 ,与 DMSO对照相比 ,10、15、2 0 μm ol/ LAG490均能显著抑制 NAL M- 6细胞的增殖 (P<0 .0 5 )。以上作用呈剂量依赖性关系。结论　 Jak3抑制剂 AG490能抑制 NAL M- 6细胞的增殖并诱导凋亡 ,提示 Jak3的活化与前 B型 AL L

关键词： Jak3激酶 AG490 急性淋巴细胞白血病 NALM-6细胞系细胞凋亡

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大鼠骨髓间充质干细胞最适培养基的筛选

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四川大学学报（医学版） 2019年第6期50卷 891-895页

作者：王景阁俞小琴文继锐朱光光包明月何学令李良四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程教研室

目的探讨不同培养基对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)生长的影响,筛选对大鼠BMSCs生长较适宜的培养基。方法采用全骨髓差速贴壁分离法从SD大鼠股骨和胫骨分离BMSCs,分别选用DMEM-LG、α-MEM、DMEM/F1... 详细信息

目的探讨不同培养基对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)生长的影响,筛选对大鼠BMSCs生长较适宜的培养基。方法采用全骨髓差速贴壁分离法从SD大鼠股骨和胫骨分离BMSCs,分别选用DMEM-LG、α-MEM、DMEM/F12三种培养基分离培养大鼠BMSCs。倒置相差显微镜下观察不同培养基对大鼠BMSCs形态均一化程度、克隆形成时间与第14天克隆形成数量、第1次传代时间、细胞增殖率以及细胞贴壁率等的影响;流式细胞术鉴定并观察不同培养基对大鼠BMSCs表面抗原表达的影响。结果与其他两组相比,体外DMEM-LG培养基培养的大鼠BMSCs形态均一、克隆形成时间和第1次传代时间短、克隆形成数量多达(14±2)个、细胞贴壁率高达(47.0±2.8)%;同时,BMSCs进入对数生长期仅需4 d,且平均增殖率最高,单位时间内平均扩增数量最多,3 d总扩增数量达(2.2~2.7)×105 mL-1;采用DMEM-LG、α-MEM、DMEM/F12三种培养基分离培养的细胞均为大鼠BMSCs,且不同培养基对大鼠BMSCs表面抗原表达无明显影响。结论 DMEM-LG培养基较适合大鼠BMSCs的生长。

关键词：大鼠骨髓间充质干细胞原代培养培养基筛选

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雷公藤多甙对实验性重症肌无力动物骨骼肌复合动作电位的影响

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四川大学学报（医学版） 2004年第3期35卷 379-381页

作者：王涛张云吕广能李克勇徐建国四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

目的　观察雷公藤多甙 (TWP)对实验性自身免疫性重症肌无力 (EAMG)动物肌肉活动的直接效应。方法　将筛选出的 EAMG小鼠腓肠肌和旋前圆肌标本置于 TWP恒温浴液中 ,观察给药前后骨骼肌复合动作电位衰减百分率变化。结果　 14 0 mg/ L TWP... 详细信息

目的　观察雷公藤多甙 (TWP)对实验性自身免疫性重症肌无力 (EAMG)动物肌肉活动的直接效应。方法　将筛选出的 EAMG小鼠腓肠肌和旋前圆肌标本置于 TWP恒温浴液中 ,观察给药前后骨骼肌复合动作电位衰减百分率变化。结果　 14 0 mg/ L TWP对 EAMG小鼠腓肠肌复合动作电位衰减百分率有明显影响 (P<0 .0 5 ) ,用药 1.5 h后衰减百分率明显降低〔用药前 (14± 36 ) % ,用药后 (- 4 0± 2 4 ) %〕;2 4 0 m g/ L TWP对 EAMG小鼠旋前圆肌复合动作电位衰减百分率有明显影响 (P<0 .0 5 ) ,用药 1.5 h后衰减百分率明显降低〔用药前 (17±2 5 ) % ,用药后 (- 17± 10 ) %〕;340 mg/ L TWP对 EAMG小鼠腓肠肌和旋前圆肌复合动作电位衰减百分率的影响无明显差异。结论　 TWP具有直接增强 EAMG动物骨骼肌兴奋收缩的效应。

关键词：雷公藤多甙重症肌无力复合动作电位

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EAE小鼠模型的构建及其免疫学机制的探讨

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免疫学杂志 2008年第1期24卷 34-37页

作者：泰淑红李虹贾静吕梅励张林四川大学华西基础医学与法医学院免疫教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院微生物教研室成都610041 四川大学基础医学与法医学院物证教研室成都610041

目的用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)多肽免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型并初步探讨EAE发病的免疫学机制。方法用MOG35-55抗原免疫C57BL/6小鼠,观察实验动物的症状及中枢神经系统的病理改变;应用MTT法... 详细信息

目的用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)多肽免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型并初步探讨EAE发病的免疫学机制。方法用MOG35-55抗原免疫C57BL/6小鼠,观察实验动物的症状及中枢神经系统的病理改变;应用MTT法测定EAE小鼠脾脏T淋巴细胞活化增殖程度;应用ELISA技术测定EAE小鼠血清IFN-γ浓度和抗MOG35-55抗体水平。结果EAE组发病率为100%,HE染色观察到脑脊髓炎性细胞浸润,白质脱髓鞘等病理改变;EAE小鼠脾脏MOG35-55反应性T淋巴细胞增殖活化,血清IFN-γ浓度和抗MOG35-55抗体随病情的加重而升高。结论用MOG35-55多肽成功诱导了C57BL/6小鼠EAE模型;并推断EAE的发生可能与MOG35-55反应性T淋巴细胞的活化、抗MOG35-55抗体和IFN-γ升高有关。

关键词：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白实验性自身免疫性脑脊髓炎干扰素-γ

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黄连素对L-甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚的保护作用

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四川大学学报（医学版） 2004年第2期35卷 223-225页

作者：杨静周祖玉徐建国四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

目的　研究黄连素对 L-甲状腺素 (L- Thy)诱发大鼠发生心肌肥厚的保护作用。方法　 SD大鼠腹腔注射 (ip) L-甲状腺素 0 .5 mg/(kg· d)× 10 d,造成心肌肥厚模型 ,同时用黄连素 30 mg/(kg· d)× 10 d灌胃 ,观察大鼠的... 详细信息

目的　研究黄连素对 L-甲状腺素 (L- Thy)诱发大鼠发生心肌肥厚的保护作用。方法　 SD大鼠腹腔注射 (ip) L-甲状腺素 0 .5 mg/(kg· d)× 10 d,造成心肌肥厚模型 ,同时用黄连素 30 mg/(kg· d)× 10 d灌胃 ,观察大鼠的心肌肥厚指数 ,心肌细胞膜 Na+ - K+ - ATP酶和肌浆网 Ca2 + - ATP酶活力 ,心肌 NO含量 ,心肌钙调神经磷酸酶 (Ca N)活力的变化。结果　与正常对照组相比 ,心肌肥厚组心肌肥厚指数、Ca N活力明显升高 (P<0 .0 1) ,而心肌NO含量、Na+ - K+ - ATP酶活力和 Ca2 + - ATP酶活力均显著降低 (P<0 .0 1)。黄连素治疗组心肌肥厚指数 ,Ca N活力显著低于肥厚组 (P<0 .0 1) ,心肌 NO含量、Na+ - K+ - ATP酶活力和 Ca2 + - ATP酶活力则显著高于肥厚组 (P<0 .0 1)。结论　黄连素对 L-甲状腺素诱导的大鼠心肌肥厚具有保护作用。

关键词： L-甲状腺素心肌肥厚黄连素保护作用

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