检索结果-内蒙古大学图书馆

四川大学学报（医学版） 2003年第1期34卷 1-4页

作者：戴保民游自立何泼王敏王雅静四川大学华西基础医学与法医学院钩端螺旋体病研究室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室

目的　对问号赖型钩端螺旋体 (赖型钩体 ) DNA疫苗〔包括内鞭毛蛋白基因 (fla B2 )和质粒 DNA表达载体 (VR10 12 )〕的 Cp G基序 (Cp G motifs)进行分析 ,为 DNA疫苗免疫机制的阐明和提高 DNA疫苗的效能奠定基础。方法　以 fla B2与 VR1... 详细信息

目的　对问号赖型钩端螺旋体 (赖型钩体 ) DNA疫苗〔包括内鞭毛蛋白基因 (fla B2 )和质粒 DNA表达载体 (VR10 12 )〕的 Cp G基序 (Cp G motifs)进行分析 ,为 DNA疫苗免疫机制的阐明和提高 DNA疫苗的效能奠定基础。方法　以 fla B2与 VR10 12构建重组 DNA的免疫原 ,对 fla B2及 VR10 12全核苷酸序列进行计算机分析 (分类、计数和定位 )。结果　 Cp G的“C”的侧翼为两个嘌呤 ,“G”的侧翼为两个嘧啶 ,在 fla B2中共 3个 ,分别为GACGCT,GACGTC和 GACGCC;在 VR10 12中共 11个 ,分别为 GACGTC1个 ,GACGCT2个 ,GACGCC1个 ,GACGTT1个 ,GGCGTT2个 ,GGCGCT2个 ,GGCGCC1个 ,AACGCT1个 ,其中特别重要的 TGACGTCA4个和 TAACGCCA有 1个 ,位于 5′端 4 5 6～ 4 6 3;5 0 9～ 5 16 ;5 92～ 5 99;778～ 785和 4 86～ 4 93;4个 TGACGTCA和 1个TAACGCCA均位于 5′端且相对集中。结论　赖型钩体 fla B2与 VR10 12构成的 DNA疫苗含有 TGACGTCA等Cp G,这些基序又称免疫刺激序列 ,构成了

关键词：钩端螺旋体 DNA疫苗核苷酸序列分析 CpG基序内鞭毛蛋白基因质粒表达载体

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GABA_B受体信号对皮质酮所致神经元凋亡的影响

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四川大学学报（医学版） 2015年第4期46卷 519-523页

作者：魏慧平郑翔潘倩李鑫夏卫维吴炳火周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室成都610041

目的研究皮质酮是否可通过调节γ-氨基丁酸（GABA）受体影响神经细胞凋亡。方法体内实验：将健康雄性SD大鼠（8-9周龄,20只）制备慢性束缚应激高血糖模型,测定血清皮质酮水平。取脑干进行HE染色观察显微结构,利用活化型Caspase-3免疫组... 详细信息

目的研究皮质酮是否可通过调节γ-氨基丁酸（GABA）受体影响神经细胞凋亡。方法体内实验：将健康雄性SD大鼠（8-9周龄,20只）制备慢性束缚应激高血糖模型,测定血清皮质酮水平。取脑干进行HE染色观察显微结构,利用活化型Caspase-3免疫组化、TUNEL染色检测细胞凋亡。体外实验：NG108-15细胞（神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞系）经皮质酮（10-7 mol/L）作用后用免疫印迹法检测活化型Caspase-3含量。NG108-15细胞重组GABAB2受体后,用100μmol/L巴氯酚和100μmol/L CGP35348分别激动和拮抗GABAB受体,检测皮质酮（10-7 mol/L）作用下重组NG108-15细胞内活化型Caspase-3的表达量。结果慢性束缚应激高血糖大鼠脑干孤束核HE染色见异常细胞,免疫组化染色可见活化型Caspase-3阳性凋亡细胞、TUNEL染色也可见阳性细胞核,血清皮质酮呈现先升高后回落的趋势。体外培养NG108-15细胞表达GABAB1受体,其在皮质酮的作用下活化型Caspase-3表达量增高（P〈0.05）。在皮质酮和巴氯芬作用下,重组NG108-15细胞活化型Caspase-3的表达量低于皮质酮和CGP35348作用下的活化型Caspase-3的表达量（P〈0.05）。结论皮质酮对GABAB受体的抑制是导致神经细胞兴奋性水平的异常,从而引发凋亡的机制之一。

关键词：皮质酮 GABA受体B亚型神经元凋亡慢性束缚应激大鼠

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QS系统中LasR和RhlR蛋白对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响以及免疫原性研究(英文)

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生物化学与生物物理进展 2006年第1期33卷 31-38页

作者：谢轶曾蔚贾文祥杨发龙杨维青程曦康梅王兰兰张再容四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 四川大学华西医学中心临床医学院实验医学部成都610041

为探讨铜绿假单胞菌 PAO1 中 lasR 和 rhlR 基因表达产物的分子生物学特性,研究它们对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响以及对小鼠的免疫保护效果,采用聚合酶链式反应 (PCR) 方法扩增铜绿假单胞菌标准株 PAO1 中的 lasR 和 rhlR 基因,全... 详细信息

为探讨铜绿假单胞菌 PAO1 中 lasR 和 rhlR 基因表达产物的分子生物学特性,研究它们对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响以及对小鼠的免疫保护效果,采用聚合酶链式反应 (PCR) 方法扩增铜绿假单胞菌标准株 PAO1 中的 lasR 和 rhlR 基因,全自动荧光测序仪测序,并用 Blast 方法检测克隆片段. 利用 pGEX4T-1 载体分别构建 lasR/rhlR-pGEX4T-1 重组质粒,在大肠杆菌 BL21(DE3)中诱导表达,并经过免疫印迹实验验证其生物学活性. 用硅胶膜培养法建立生物被膜模型,诱导转入了pGFPuv 质粒的铜绿假单胞菌 PAG0305 形成生物被膜,并测定 LasR 蛋白和 RhlR 蛋白对生物被膜形成的影响. 同时用纯化的重组蛋白免疫小鼠,菌落计数法检测免疫组和对照组鼠肺对铜绿假单胞菌的清除率. 以 PAO1 染色体 DNA 为模板的 PCR 结果显示,lasR 的全基因序列为 720 bp,rhlR 基因序列为 726 bp,经序列分析和同源性比较分别与 GenBank 中 lasR/rhlR 基因(登录号:M59425; AE004768) 的同源性为 100%. 大肠杆菌 BL21 (DE3) 分别转化重组质粒 lasR/rhlR-pGEX4T-1 后,经 IPTG诱导和 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表达的融合蛋白分子质量均为 54 ku 左右,与预期蛋白质分子质量相同. 荧光显微镜观察和测定结果表明,在硅胶膜上 PAG0305 能够形成典型的发荧光的生物被膜,LasR 或 RhlR 蛋白 (10 mg/L) 存在的情况下,PAG0305 生物被膜的形成速度在前三天比对照组平均提高 40.77%,而且两蛋白单独存在与同时存在时的作用相同. 体内实验中,免疫小鼠肺部对铜绿假单胞菌的清除率显著高于未经免疫的正常组 (P < 0.05). 上述结果表明:构建的lasR/rhlR-pGEX4T-1 重组质粒能够在大肠杆菌 BL21(DE3)中成功地表达并具有生物学活性. LasR/RhlR 蛋白在体外模型中能够加快铜绿假单胞菌生物被膜的形成速度,是调节铜绿假单胞菌生物被膜形成的重要因素之一. 免疫结果表明,重组蛋白对小鼠表现出一定的保护作用,这为进一步开展疫苗研究奠定了基础.

关键词：铜绿假单胞菌数量感知系统生物被膜免疫原性

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胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应

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解剖学报 2013年第2期44卷 219-223页

作者：吴艳芳郭林霞乐晓萍丁一郑州大学基础医学院组织学胚胎学教研室郑州450001 新乡医学院基础医学院人体解剖学实验室河南新乡453003

目的探讨胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ(Reg Ⅰ)基因转录因子的效应。方法应用巢式PCR技术从胃癌细胞SGC7901基因组DNA扩增Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段,将该片段插入pMD19-T载体,序列分析鉴定。应用随机引物法以地高辛分别标记1414bp... 详细信息

目的探讨胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ(Reg Ⅰ)基因转录因子的效应。方法应用巢式PCR技术从胃癌细胞SGC7901基因组DNA扩增Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段,将该片段插入pMD19-T载体,序列分析鉴定。应用随机引物法以地高辛分别标记1414bp及其HindⅢ酶切800bp和614bp片段,经灵敏度检测后,作为探针。应用Genomatix MatInspector在线分析软件分析Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段的转录因子结合位点。分别以10-7mol/L和10-8mol/L胃泌素G-17处理胃癌细胞SGC7901 48h,提取核蛋白。应用DNA-蛋白质印迹法(Southernblotting),分别以地高辛标记的1414bp、800bp和614bp片段为探针检测胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应。结果 1414bp探针可检测到20条蛋白主带。胃泌素孵育后,带型没有变化,但是一些条带的灰度值改变,带9、12、13、14、15和16的灰度值明显降低(P<0.05);不同浓度胃泌素处理组之间上述6个条带的灰度值差异不明显(P>0.05)。614bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和13,胃泌素处理后,此3条主带的灰度值明显降低(P<0.05)。800bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和14,胃泌素处理后,仅带14的灰度值明显降低(P<0.05)。614bp和800bp探针均未检出带15和带16。结论胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因表达由多个转录因子协同调控。降低几个转录因子的结合活性可能是胃泌素上调胃癌细胞SGC7901Reg Ⅰ基因表达的途径之一。

关键词： Reg I基因胃泌素转录因子胃癌细胞 DNA-蛋白质印迹法

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不可分型流感嗜血杆菌重组Hap蛋白免疫抗小鼠急性感染的实验研究

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第7期26卷 635-637,641页

作者：李婉宜王保宁左凤琼曾蔚丰锋邝玉蒋中华李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室

目的：观察重组Hap蛋白免疫抗不可分型流感嗜血杆菌（NHTi）感染的免疫保护效果，初步探讨其保护机制。方法：用纯化的Hap重组蛋白与黏膜免疫佐剂霍乱肠毒素B亚单位（CT-B）联合鼻腔免疫C57BL／6小鼠。NHTi琼脂珠悬液对免疫小鼠进行气... 详细信息

目的：观察重组Hap蛋白免疫抗不可分型流感嗜血杆菌（NHTi）感染的免疫保护效果，初步探讨其保护机制。方法：用纯化的Hap重组蛋白与黏膜免疫佐剂霍乱肠毒素B亚单位（CT-B）联合鼻腔免疫C57BL／6小鼠。NHTi琼脂珠悬液对免疫小鼠进行气管内注射，建立小鼠NHTi急性肺部感染模型。NHTi攻击5d后，收集实验小鼠的支气管肺泡灌洗液（BALF）进行白细胞计数，并取其肺组织进行肺部荷菌数检测及肺组织的病理检测。结果：Hap重组蛋白与CT—B的联合免疫能显著降低小鼠BALF中的白细胞总数、中性粒细胞渗出（P〈0．05）及感染小鼠肺组织内NTHi的荷菌数，并减轻感染小鼠支气管、细支气管周围及肺泡内的炎性浸润程度，明显改善其肺组织的病变。结论：鼻腔免疫的Hap重组蛋白在动物体内能发挥良好抗NTHi感染的免疫保护作用，为NTHi新型疫苗的研发提供了理论基础和实验依据。

关键词：重组Hap蛋白 CT—B NTHi急性肺部感染模型黏膜免疫

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当归多糖对肝细胞Hepcidin表达的影响

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中国老年学杂志 2018年第19期38卷 4749-4751页

作者：任峰李健贺国洋贾昭华千新来新乡医学院护理学院河南新乡453003 新乡医学院法医学系新乡医学院病理学教研室

目的探讨当归多糖(ASP)对人肝癌细胞Hep G2和人正常肝细胞L-02 Hepcidin表达的抑制作用。方法体外培养Hep G2和L-02细胞,RT-PCR检测不同浓度(0、100、200、400 mg/L)的ASP诱导不同时间(0、24、48、72 h和96 h)对两种细胞Hepcidin mRNA... 详细信息

目的探讨当归多糖(ASP)对人肝癌细胞Hep G2和人正常肝细胞L-02 Hepcidin表达的抑制作用。方法体外培养Hep G2和L-02细胞,RT-PCR检测不同浓度(0、100、200、400 mg/L)的ASP诱导不同时间(0、24、48、72 h和96 h)对两种细胞Hepcidin mRNA影响。Western印迹观察400 mg/L ASP诱导96 h对两种细胞Hepcidin表达的抑制作用。结果与对照组(0 mg/L)相比,浓度高于200 mg/L ASP能够显著下调Hep G2和L-02细胞Hepcidin mRNA表达(P<0. 001); 400 mg/L ASP连续作用48 h后对Hep G2和L-02细胞产生显著的Hepcidin抑制效应且抑制强度呈时间相关性; 400 mg/L ASP连续作用96 h后显著抑制Hep G2和L-02细胞Hepcidin表达(P<0. 001)。结论 ASP可以抑制Hep G2和L-02细胞中Hepcidin的表达。

关键词：当归多糖 Hepcidin 人肝癌细胞HepG2 人正常肝细胞L-02

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Caspase-14在恶性黑素瘤中的表达及意义

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第11期30卷 1180-1183,1189页

作者：王馨苑张霁承尧杜吉佩陈德高杨志梅王玉芳黄宁四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室四川成都610041

目的明确caspase-14在恶性黑素瘤细胞和组织中表达水平及其对肿瘤细胞耐药的影响。方法运用反转录PCR和Western blot技术检测人黑素细胞和恶性黑素瘤细胞内caspase-14的表达。恶性黑素瘤和皮内痣组织中caspase-14表达采用原位杂交和免... 详细信息

目的明确caspase-14在恶性黑素瘤细胞和组织中表达水平及其对肿瘤细胞耐药的影响。方法运用反转录PCR和Western blot技术检测人黑素细胞和恶性黑素瘤细胞内caspase-14的表达。恶性黑素瘤和皮内痣组织中caspase-14表达采用原位杂交和免疫组织化学方法检测。结果 Caspase-14在恶性黑素瘤细胞和黑素细胞中均有表达。T细胞识别的黑素瘤相关抗原1(MART-1)阳性肿瘤细胞中caspase-14表达高于MART-1阴性细胞。Caspase-14表达水平低的肿瘤细胞对化疗药物更敏感(P<0.01)。在临床样本中,caspase-14在皮内痣中阳性率为70%,恶性黑素瘤组织中阳性率为97%,差别有统计学意义(P<0.05)。结论 Caspase-14在恶性黑素瘤细胞和组织中均有表达。Caspase-14表达水平高的恶性黑素瘤细胞对化疗药物喜树碱和顺铂,以及放射治疗更加抵抗。

关键词：恶性黑素细胞瘤 caspase-14 化学疗法

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大鼠心肌缺血再灌注交界区P53和caspase-3表达的变化

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基础医学与临床 2010年第5期30卷 544-546页

作者：张艳芳杨瑞王芳杨廷桐新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院分子生物学研究室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院形态学实验室河南新乡453003

缺血再灌注会引起心肌不可逆损伤,诱发细胞凋亡^[1]。本文通过动态检测P53和caspase-3,评价其与心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的关系,并观察药物的影响,为临床上治疗MIRI提供依据。[第一段]

关键词：心肌缺血再灌注损伤 caspase-3表达 P53 交界区 ischemia 大鼠细胞凋亡动态检测

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成都汉族群体五个短串联重复序列基因频率及其种属特异性研究

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中华医学遗传学杂志 2006年第6期23卷 685-688页

作者：张林李英碧颜静张霁廖淼朱振东候一平吴谨四川大学基础医学与法医学院物证教研室成都610041 四川大学基础医学与法医学院组织学与胚胎学教研室成都610041

目的对成都汉族群体5个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)基因座的等位基因频率及其种属特异性进行研究,探讨其在法医学中的应用价值。方法用PCR扩增、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色方法,对100名成都汉族无血缘关系健康个... 详细信息

目的对成都汉族群体5个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)基因座的等位基因频率及其种属特异性进行研究,探讨其在法医学中的应用价值。方法用PCR扩增、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色方法,对100名成都汉族无血缘关系健康个体的5个STR基因座的等位基因频率及其种属特异性进行研究。结果D18S979、D11S2014、D18S548、D1S1667和GATA164F07在成都汉族群体中等位基因个数分别为6、5、5、7、6;基因型个数分别为12、11、13、19、14;基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。通过种属特异性分析发现5个STR基因座中,猴在D18S979、D11S2014和D1S1667基因座均检测出扩增产物,但未在人类基因座分型区内;D18S979位点人类分型区内可检测到牛、狗、鳝鱼有扩增产物,猪、鸭、鼠、兔有微弱扩增产物;D18S548位点人类分型区内只检测到牛有微弱扩增产物;D1S1667位点人类分型区内检测到狗、羊、鳝鱼有扩增产物;GATA164F07位点人类分型区内只检测到狗有微弱扩增产物;泥鳅、鸡、豚鼠在5个基因座均未检测到扩增产物。结论5个短串联重复序列中D18S979、D18S548、D1S1667和GATA164F07在成都汉族群体中具有较好的遗传多态性,D11S2014、D18S548和GATA164F07具有较好的种属特异性,在法医学个人识别和亲子鉴定中有应用价值。

关键词：短串联重复序列等位基因频率种属特异性

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干燥综合征抗原B基因在大鼠早期心肌缺血组织中的表达及其意义

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四川大学学报（医学版） 2010年第3期41卷 408-411页

作者：陈天义高林波梁伟波王艳云薛晖刘云潘新民房文亮张录顺朱怡张林四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室成都610041 安徽理工大学医学院组织病理学教研室淮南232001 四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室成都610041

目的探讨干燥综合征抗原B基因(SSB)在早期心肌缺血组织中的表达及其意义。方法健康SD大鼠随机分为手术组、假手术组和正常对照组,并将手术组心肌标本按缺血区和非缺血区又分为手术缺血组和手术非缺血组,手术组和假手术组老鼠根据设定的... 详细信息

目的探讨干燥综合征抗原B基因(SSB)在早期心肌缺血组织中的表达及其意义。方法健康SD大鼠随机分为手术组、假手术组和正常对照组,并将手术组心肌标本按缺血区和非缺血区又分为手术缺血组和手术非缺血组,手术组和假手术组老鼠根据设定的时间段又分为0 min、15 min、30 min、60 min和120 min 5个亚组,通过实时荧光定量PCR测定每个样本的目的基因的表达水平(mRNA),同时以大鼠β-actin基因片段作为内参对照以消除样本误差。结果 SSB基因表达在急性心肌缺血早期呈下调趋势,缺血120 min组SSBmRNA表达降低,与0 min组及正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),其它组间SSBmRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SSB基因可能参与早期缺血心肌的病理生理的调节过程。

关键词：干燥综合症抗原B 心肌缺血实时荧光定量PCR

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