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生理学报 2008年第2期60卷 169-174页

作者：王强岳利民张金虎田吉梅何亚萍四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

本文旨在研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对延迟着床期小鼠子宫内膜基质细胞内钙振荡的影响和机制,探讨E2对着床期子宫内膜基质细胞是否存在非基因组快速作用。实验的第一部分,小鼠分为6组,每组4只,即0.1%二甲基亚砜(dimethylsulfox... 详细信息

本文旨在研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对延迟着床期小鼠子宫内膜基质细胞内钙振荡的影响和机制,探讨E2对着床期子宫内膜基质细胞是否存在非基因组快速作用。实验的第一部分,小鼠分为6组,每组4只,即0.1%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)对照组、1×10-8mol/L牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)对照组、1×10-8mol/L E2组、1×10-8mol/L E2-BSA组、1×10-8mol/L E2+无钙液组、1×10-8mol/L E2+5μg/mL他莫西芬(tamoxifen)组。急性分离延迟着床小鼠孕第7天子宫内膜基质细胞,应用激光共聚焦显微镜技术实时检测各组基质细胞[Ca2+]i的变化。实验的第二部分,分离7只延迟着床小鼠孕第7天子宫内膜基质细胞,用免疫荧光法检测1×10-8mol/L E2作用前和作用后5min、15min、30min细胞内磷酸化磷脂酶C(phospholipase C,PLC)的变化。基质细胞[Ca2+]i的变化结果显示,在E2,E2-BSA和E2+无钙液组中[Ca2+]i均明显升高,15min达到高峰,随后下降回到基础值。但DMSO和BSA组中[Ca2+]i未见明显变化;加入传统雌激素胞浆受体阻断剂tamoxifen不能抑制E2引起的[Ca2+]i升高。免疫荧光结果显示,加入1×10-8mol/L E2后,PLC的磷酸化水平升高,15min达高峰(P<0.001),然后逐渐下降回到基础值。结果提示,E2对延迟着床小鼠子宫内膜基质细胞[Ca2+]i的变化具有快速调节效应,该作用可能是通过非基因组途径实现的,与磷酸化PLC信号途径有关。

关键词：雌激素磷脂酶C 钙基质细胞

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间变性大细胞淋巴瘤中ALK蛋白及EB病毒基因产物的表达

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四川大学学报（医学版） 2004年第4期35卷 477-479页

作者：李海燕李甘地刘卫平李俸媛廖殿英何小金四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室成都610041

目的　研究间变性大细胞淋巴瘤 (AL CL)中 AL K蛋白的表达特点及与 EBV的关系。方法　采用免疫组织化学 SP法检测 AL K蛋白表达 ,EBV基因转录产物 EBER1 / 2以 DNA- RNA原位杂交方法检测。结果　AL K蛋白在 2例皮肤原发 AL CL 均为阴性 ... 详细信息

目的　研究间变性大细胞淋巴瘤 (AL CL)中 AL K蛋白的表达特点及与 EBV的关系。方法　采用免疫组织化学 SP法检测 AL K蛋白表达 ,EBV基因转录产物 EBER1 / 2以 DNA- RNA原位杂交方法检测。结果　AL K蛋白在 2例皮肤原发 AL CL 均为阴性 ,2 0例系统性 AL CL 中有 1 2例 (6 0 % )阳性 ,其中普通型 8例 ,淋巴组织细胞型 3例、小细胞型 1例 ,AL K蛋白的表达在各组织学亚型中无显著性差异。表达模式主要为细胞浆与细胞核均为棕黄色 ,但其中有 2例仅为细胞浆着色 ;AL K蛋白阳性组和阴性组年龄差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ,AL K蛋白阳性组年龄显著低于阴性组。所有 2 2例 AL CL 病例 EBER原位杂交均为阴性。结论　 AL K蛋白的表达在AL CL 中有很高的发生率 ,尤其是低年龄的患者。本研究未发现 AL CL 与

关键词：非霍奇金淋巴瘤 ALK Epstein-Barr 病毒

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一显性营养不良型大疱性表皮松懈症家系COL7A1基因突变分析

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郑州大学学报（医学版） 2018年第3期53卷 370-373页

作者：黄艳梅董双双曹靓磊郭利伟张咏鹤李茜杨保胜新乡医学院法医学院法医物证学教研室河南新乡453003

目的:检测一常染色体显性遗传营养不良型大疱性表皮松懈症(DEB)家系的COL7A1基因突变情况。方法:采用PCR技术和直接测序法分析该家系成员COL7A1基因全部外显子及内含子序列,并与50名健康个体及Gen Bank数据库中序列进行比较分析,筛选有... 详细信息

目的:检测一常染色体显性遗传营养不良型大疱性表皮松懈症(DEB)家系的COL7A1基因突变情况。方法:采用PCR技术和直接测序法分析该家系成员COL7A1基因全部外显子及内含子序列,并与50名健康个体及Gen Bank数据库中序列进行比较分析,筛选有意义突变。结果:在该家系COL7A1基因上共发现了5个突变位点,包括1个插入突变、1个错义突变和3个同义突变。COL7A1基因第13号外显子上存在1个插入突变c.1731_1732ins A,造成编码区阅读框架的移位,最终导致蛋白终止密码的产生。COL7A1基因第73号外显子上第6 016位的G错义突变为A,即c.6016G→A(p.G2006S)。其余3个同义突变分别为COL7A1基因上的c.1641G→T、c.5451A→G和c.5508G→C。结论:COL7A1基因的插入突变c.1731_1732ins A和错义突变c.6016G→A(p.G2006S)可能是该DEB家系患者临床表型的病因,其中c.1731_1732ins A为新发突变。

关键词：营养不良型大疱性表皮松懈症突变类型 COL7A1基因

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成都地区汉族人群X染色体3个STR基因座的遗传多态性及其法医学应用

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四川大学学报（医学版） 2004年第4期35卷 473-476页

作者：石美森应斌武邓建强李英碧吴谨颜静张霁侯一平四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室成都610041

目的　了解 X染色体 3个 STR基因座在中国成都汉族群体的遗传多态性及其法医学应用价值。方法　利用 PCR和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对中国成都地区无亲缘关系汉族个体 X染色体 3个 STR基因座进行分型 ,自动激光荧光测序仪测定 DNA序列 ... 详细信息

目的　了解 X染色体 3个 STR基因座在中国成都汉族群体的遗传多态性及其法医学应用价值。方法　利用 PCR和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对中国成都地区无亲缘关系汉族个体 X染色体 3个 STR基因座进行分型 ,自动激光荧光测序仪测定 DNA序列 ,并检验女性基因型频率分布是否符合 Hardy- Weinberg平衡 ,计算法医学常用各种概率。结果　 3个 STR基因座在成都地区汉族群体均具有遗传多态性 ,χ2检验表明女性的基因型频率分布符合 Hardy- Weinberg平衡。结论　为人类群体研究提供了 X染色体 3个 STR基因座的中国成都汉族群体数据。

关键词：成都地区汉族 X染色体 STR基因座遗传多态性法医学

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模式识别受体与自噬关系的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2017年第1期33卷 133-137页

作者：刘国燕于莉莉宋向凤新乡医学院基础医学院免疫学教研室河南新乡453003

天然免疫能够被迅速启动来抵御入侵的微生物,是机体防御病原微生物感染的第一道防线。外来微生物通过作用于模式识别受体(PRR)激活天然免疫反应,激活核因子κB(NF-κB)通路并产生1型干扰素。自噬通过降解细胞内细胞自身物质或胞内病原... 详细信息

天然免疫能够被迅速启动来抵御入侵的微生物,是机体防御病原微生物感染的第一道防线。外来微生物通过作用于模式识别受体(PRR)激活天然免疫反应,激活核因子κB(NF-κB)通路并产生1型干扰素。自噬通过降解细胞内细胞自身物质或胞内病原体为机体提供防御,并且能在多种水平下调节PRR启动的天然免疫反应。PRR与自噬之间可以相互调节,主要包括Toll/白细胞介素1受体(TIR)与自噬、视黄酸诱导基因1样受体(RLR)与自噬、炎症小体与自噬、DNA感受器与自噬之间的相互作用。

关键词：自噬天然免疫模式识别受体核因子κB(NF-κB) 1型干扰素综述

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Sirt1去乙酰化酶抑制剂诱导成人白血病细胞系MT2生长阻滞及凋亡

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中国免疫学杂志 2012年第9期28卷 787-791页

作者：朱小飞郭晓芳孙瑞利高志涛马淑君张婧婧王辉新乡医学院医学检验系新乡453003 新乡医学院基础医学院微生物教研室新乡453003

目的:研究Sirtuin1(Sirt1)去乙酰化酶抑制剂对成人T细胞白血病细胞系MT2增殖及存活的影响。方法:采用RT-PCR方法,比较了成人白血病细胞系MT2与其他两种白血病细胞系(Jurkat,MOLT-4)中Sirt1 mRNA表达水平;通过Sirt1抑制剂尼克酰胺(Nicoti... 详细信息

目的:研究Sirtuin1(Sirt1)去乙酰化酶抑制剂对成人T细胞白血病细胞系MT2增殖及存活的影响。方法:采用RT-PCR方法,比较了成人白血病细胞系MT2与其他两种白血病细胞系(Jurkat,MOLT-4)中Sirt1 mRNA表达水平;通过Sirt1抑制剂尼克酰胺(Nicotinamide)处理MT2细胞后,观察其细胞形态学的变化,并采用MTT、流式细胞术等方法检测Nico-tinamide对MT2细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果:成人白血病细胞系MT2中Sirt1表达水平明显高于Jurkat细胞系(P<0.05),而与MOLT-4细胞系无明显差异;抑制Sirt1的去乙酰化酶活性能明显抑制MT2细胞的增殖,引起细胞G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡;镜下观察到细胞膜皱缩、卷曲及破裂等凋亡样形态改变。结论:抑制Sirt1去乙酰化酶活性可能是治疗成人T细胞白血病的可行途径之一。

关键词：成人T细胞白血病 MT2细胞系 Sirt1去乙酰化酶细胞凋亡

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过表达微小RNA-130a-3P对LPS诱导心肌细胞损伤的干预作用及其机制

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中国应用生理学杂志 2022年第4期38卷 335-340页

作者：苗莹莹袁欢欢黄敏杰付升旗新乡医学院三全学院人体解剖学教研室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系河南新乡453003

目的:探讨miRNA-130a-3p对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞自噬与凋亡的影响及分子机制。方法:H9C2心肌细胞随机分为5组,即正常对照组,LPS模型组,miRNA阴性对照组(miRNA-negative control组),miRNA-130a-3p mimics组(过表达miRNA-130a-3p),miRNA-130a-3p mimics+LY294002组(过表达miRNA-130a-3p+PI3K抑制)。LPS模型组即终浓度为10μg/ml的LPS诱导24 h,miRNA阴性对照组与miRNA-130a-3p mimics组是利用lipo3000将阴性对照miRNA及miRNA-130a-3p mimics转染至H9C2细胞,培养24 h后,再将LPS加入培养基中培养24 h。miRNA-130a-3p mimics+LY294002组是利用lipo3000将miRNA-130a-3p mimics转染至H9C2细胞,同时在培养基中加入10μmol/L(终浓度)的LY294002,培养24 h后,再将浓度为10μg/ml的LPS加入培养基中培养24 h。所有实验均重复5次以上。利用RT-qPCR检测细胞中miRNA-130a-3p mRNA的表达水平,利用CCK-8实验检测细胞活性,利用ELISA实验检测细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,利用比色法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;利用Western blot检测细胞中p-PI3K蛋白,p-AKT蛋白,Bax蛋白,Bcl-2蛋白,cleaved-caspase-3蛋白,LC3蛋白,p62蛋白的表达水平。结果:结果显示,与正常组相比较,LPS模型细胞中miRNA-130a-3p mRNA水平,p-PI3K蛋白与p-AKT蛋白的水平显著低于正常对照组(P<0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞中p-PI3K,p-AKT蛋白的表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与正常对照组相比较,LPS组细胞活性显著降低,细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量显著升高(P<0.01),SOD的含量显著降低(P<0.01),细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达和LC3II/I的比率显著降低(P<0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics可提高细胞活性,降低细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量(P<0.01,P<0.05),提高SOD的含量(P<0.05),降低细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达(P<0.01),促进Bcl-2蛋白的表达(P<0.01),提高LC3II/I的比率(P<0.05);与miRNA-130a-3p mimics组相比较,miRNA-130a-3p mimics+LY294002组,可部分逆转miRNA-130a-3p mimics对细胞的作用。结论:过表达miRNA-130a-3p可部分通过激活PI3K/AKT信号通路促进细胞的自噬与抑制细胞凋亡,减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

关键词：微小RNA-130a-3p PI3K/AKT信号通路自噬细胞凋亡细胞损伤

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不同还原性巯基氨基酸对人脐静脉内皮细胞的损伤作用研究

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华西医科大学学报 2002年第3期33卷 372-374页

作者：杨志梅王玉芳张霁顾玲王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医医学院物证教研室

目的　探讨三种还原性巯基氨基酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于三种还原性巯基氨基酸 2 4小时后 ,测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋白含量、凋亡及脂质过氧化的程度。结果　 1同型半胱氨酸 (Hcy)... 详细信息

目的　探讨三种还原性巯基氨基酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于三种还原性巯基氨基酸 2 4小时后 ,测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋白含量、凋亡及脂质过氧化的程度。结果　 1同型半胱氨酸 (Hcy)不仅促进脂质过氧化 ,而且可诱导细胞凋亡并可致细胞坏死。 2谷胱甘肽(GSH)呈还原性 ,对细胞有全面的保护作用。 3Hcy的氧化性最强 ,GSH则呈现出完全的还原性 ,半胱氨酸 (Cys)可能处于二者之间。结论　同型半胱氨酸可能是通过特异的抑制谷光甘肽过氧化物酶并减弱了细胞内的还原缓冲能力等机制 ,发挥与 Cys和 GSH不同的生物学效应 ,从而导致内皮细胞出现坏死和凋亡等损伤性的改变。

关键词：同型半胱氨酸半胱氨酸谷胱甘肽内皮细胞脐静脉

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中国汉族、蒙古族和泰国人群中D8S1132基因座的遗传多态性研究

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四川大学学报（医学版） 2004年第2期35卷 201-203页

作者：周斌张林廖淼贾怡吕梅励梁伟波吴梅筠四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室成都610041

目的　获得 D8S1132基因座的群体遗传学数据并分析其基因频率在不同群体间是否有差异。方法　采用PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术分析中国成都地区汉族、海拉尔蒙古族和泰国曼谷地区泰国人群三个群体中D8S1132基因座的遗传多态性 ,... 详细信息

目的　获得 D8S1132基因座的群体遗传学数据并分析其基因频率在不同群体间是否有差异。方法　采用PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术分析中国成都地区汉族、海拉尔蒙古族和泰国曼谷地区泰国人群三个群体中D8S1132基因座的遗传多态性 ,获得三个群体 D8S1132基因座的群体遗传学数据。结果　从 380份分别采自成都地区汉族、海拉尔蒙古族和曼谷泰国人三个群体的无血缘关系个体的静脉血 ,共发现 11个等位基因 ,观测到 4 2种基因型。观测杂和度为 85 .0 %～ 89.5 % ,个人识别机率为 94 .1%～ 95 .5 % ,观测到的基因型频率分布符合 Hardy- Weinberg平衡定律。等位基因频率的分布在三个群体间有显著差异。结论　 D8S1132基因座个人识别能力高 ,方法简便、灵敏 ,重复性好。

关键词：短串联重复序列聚合酶链反应 D8S1132 遗传多态性

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人食管壁内血管和神经的分布特点

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解剖学报 2014年第2期45卷 242-247页

作者：黄小勇李艳邓义波黄建朱磊陈道邦四川大学华西基础医学与法医学院解剖学教研室成都610041

目的探讨人食管壁内血管和神经的分布特点及两者之间的关系。方法幼年尸体标本14例和成人标本4例,共计18例,采用硅胶血管灌注和再改良Sihler神经染色法相结合来显示人食管壁内血管及神经。结果人食管壁内血管整体分布以胸下段及腹段较密... 详细信息

目的探讨人食管壁内血管和神经的分布特点及两者之间的关系。方法幼年尸体标本14例和成人标本4例,共计18例,采用硅胶血管灌注和再改良Sihler神经染色法相结合来显示人食管壁内血管及神经。结果人食管壁内血管整体分布以胸下段及腹段较密集,而颈段和胸上段相对较稀疏,整体前壁内血管较后壁内稀疏,壁内血管的细小分支间形成广泛的网状吻合。人食管壁内神经整体分布以腹段分布最稀疏,胸段壁内神经分布最多密集,但颈胸段壁内神经均衡分布,颈段上部可与来自于咽丛的神经分支形成吻合,食管壁内神经形成网状环路吻合。食管壁内血管与神经之间无明显的伴行关系。结论人食管壁内血管和神经分布均呈现网状吻合,但两者之间无明显伴行关系。

关键词：壁内血管壁内神经食管再改良Sihler染色硅胶血管灌注人

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