检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2020年第12期36卷 1508-1513页

作者：史磊申香玉申远新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院药学院中药学教研室河南新乡453003

对大多数单细胞原生动物的分子遗传学研究,目前还缺乏行之有效的转基因手段。针对这种情况,本研究以第四双小核草履虫为对象,将包含自身调控序列的草履虫纤毛内运输蛋白(intraflagellar transport,IFT)基因IFT43或IFT46插入表达载体Pzz0... 详细信息

对大多数单细胞原生动物的分子遗传学研究,目前还缺乏行之有效的转基因手段。针对这种情况,本研究以第四双小核草履虫为对象,将包含自身调控序列的草履虫纤毛内运输蛋白(intraflagellar transport,IFT)基因IFT43或IFT46插入表达载体Pzz02-GFP中,用单细胞显微注射术将重组质粒注入到第四双小核草履虫营养大核内。蛋白质免疫印记结果显示,与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标签偶联的IFT43或IFT46在草履虫细胞中表达,利用荧光显微镜或激光共聚焦成像系统观察,IFT43-GFP与IFT46-GFP融合蛋白显示出相似的纤毛定位,同时它们在草履虫多纤毛内的运输过程被动态记录。本研究表明,显微注射方法能够在草履虫细胞中实现外源基因转入和表达,在对单细胞模式生物的研究中具有广泛的应用前景。

关键词：显微注射技术草履虫单细胞模型外源基因表达

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基于雨课堂的混合式教学法在《生物化学》理论教学中的应用

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进展 2022年第24期 65-67页

作者：陈绍恢武阳张秀花刘玲湖北科技学院基础医学院生化教研室湖北咸宁437100

混合式教学是互联网和大数据背景下产生的一种新型教学方法,主旨在于倡导学生为中心的“线上”+“线下”的个性化学习;团队基于雨课堂软件平台,面对临床医学、药学等医学专业,以生物化学课程中的糖代谢章节为例,设计实施了基于雨课堂的... 详细信息

混合式教学是互联网和大数据背景下产生的一种新型教学方法,主旨在于倡导学生为中心的“线上”+“线下”的个性化学习;团队基于雨课堂软件平台,面对临床医学、药学等医学专业,以生物化学课程中的糖代谢章节为例,设计实施了基于雨课堂的混合式教学法。该教学方法的实施改变了传统课堂沉默状态,有效促进了课堂互动和学生的学习兴趣,提高了课堂教学效果。

关键词：雨课堂混合式教学课堂教学

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基于组学方法探讨红景天苷与胃癌铁死亡的相关性分析

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南通大学学报（医学版） 2024年第4期44卷 313-319页

作者：余水红夏静查洁刘慧娟安庆医药高等专科学校基础医学院病原与生化教研室安徽246052 安庆市中医院药剂科

目的:基于网络药理学、临床数据生物信息学及分子对接探讨红景天苷调控胃癌的铁死亡机制。方法:借助Symmap和UniProt数据库检索获得红景天苷的药物靶点,通过ferrDb数据库获得铁死亡相关基因,利用GeneCards、OMIM、TTD等数据库获得胃癌... 详细信息

目的:基于网络药理学、临床数据生物信息学及分子对接探讨红景天苷调控胃癌的铁死亡机制。方法:借助Symmap和UniProt数据库检索获得红景天苷的药物靶点,通过ferrDb数据库获得铁死亡相关基因,利用GeneCards、OMIM、TTD等数据库获得胃癌相关疾病靶点,Cytoscape 3.9.1软件构建“成分-靶点”网络,STRING数据库及Cytoscape构建蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。借助数据库UALCAN分析红景天苷靶向铁死亡核心基因的转录水平,Kaplan-Meier plotter分析核心基因表达与患者生存之间的关系。通过DAVID数据库进行基因本体论(gene ontology,GO)功能和京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。采用RCSB与AutoDock Vina 1.1.2软件完成红景天苷与核心基因的分子对接,验证其与靶点基因的结合活性。结果:红景天苷靶向基因60个,其中铁死亡基因20个;DDIT3、GSK3B、HIF1A、MAPK1、MTOR(FRAP)、PARP1、PIK3CA、RELA(NFKB3)、SIRT1、VEGFA、PRKAA1、MAPK3、PRKAA2基因mRNA在胃癌组织中异常表达(P<0.05),其中DDIT3、MAPK3、VEGFA、PRKAA2、RELA(NFKB3)、HIF1A、MAPK1、PIK3CA、SIRT1、PRKAA1、PARP1 mRNA异常表达与胃癌患者预后相关(P<0.05);GO分析主要富集于细胞分裂、细胞增殖、凋亡等调控,KEGG分析主要富集于PI3K-Akt、HIF-1、FoxO等信号通路、凋亡、自噬、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、活性氧化学致癌、癌症通路、肿瘤中PD-L1表达和PD-1检查点通路及长寿调节通路等。分子对接结果显示红景天苷与PARP1、PRKAA1、HIF1A、MAPK1、RELA(NFKB3)、MAPK3、PIK3CA均有强烈的结合活性(分数<-6.0),与PRKAA2、SIRT1、VEGFA、DDIT3具有较好的结合活性(-6.0<分数<-4.0)。结论:红景天苷调控胃癌的铁死亡机制具有多靶点、多途径的协同作用特点,主要作用于DDIT3、MAPK3、VEGFA、PRKAA2、RELA(NFKB3)、HIF1A、MAPK1、PIK3CA、SIRT1、PRKAA1、PARP1靶点,调控PI3K-Akt、HIF-1、FoxO等信号通路发挥作用。

关键词：红景天苷胃癌铁死亡作用机制

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转录组测序分析GATAD2A在食管鳞状细胞癌中的作用机制

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中华实用诊断与治疗杂志 2025年第1期39卷 1-8页

作者：李强明白玉张静姚文健王建军魏立河南省人民医院胸外科郑州大学人民医院河南郑州450003 新乡医学院基础医学院病理学教研室河南新乡453000 郑州大学第一附属医院中心手术部河南郑州450003

目的采用生物信息学方法筛选GATAD2A调控食管鳞状细胞癌(ESCC)的关键基因和通路,探讨GATAD2A在ESCC中作用的分子机制。方法取对数生长期ESCC细胞株KYSE-150,分为敲低组(转染GATAD2A-siRNA)和对照组(转染NC-siRNA)。转染60 h取2组细胞... 详细信息

目的采用生物信息学方法筛选GATAD2A调控食管鳞状细胞癌(ESCC)的关键基因和通路,探讨GATAD2A在ESCC中作用的分子机制。方法取对数生长期ESCC细胞株KYSE-150,分为敲低组(转染GATAD2A-siRNA)和对照组(转染NC-siRNA)。转染60 h取2组细胞,采用Trizol法提取总RNA,采用转录组测序(RNA-Seq)技术检测mRNA表达,应用R软件DEGseq包筛选差异表达基因,应用R软件的clusterProfiler包对差异表达基因进行基因本体(GO)功能注释分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析、基因集富集分析(GSEA)。应用STRING 12.0在线软件构建差异表达基因的蛋白互作网络(PPI),使用Cytoscape软件的MCODE插件对PPI网络进行聚类分析,筛选出得分最高的关键子网络,使用CytoHubba插件对关键子网络中的基因进行节点度计算,筛选PPI网络核心位置的节点基因,并对节点基因进行GO/KEGG分析。自TCGA数据库收集82例ESCC患者癌组织PPI分析中节点度≥10的基因表达以及预后数据,以基因表达的中位数为阈值将ESCC患者分为高、低表达组,比较高表达组与低表达组的总生存期,筛选出影响预后的基因作为关键基因。自TCGA数据库选取ESCC患者癌组织GATAD2A及关键基因的表达数据,采用Spearman法分析GATAD2A与关键基因表达的相关性。自GTEx数据库收集正常食管组织关键基因的表达数据,与ESCC组织进行比较。结果 (1)敲低组与对照组差异表达基因有888个。与对照组比较,敲低组表达上调基因275个,表达下调基因613个。(2)GO功能注释分析结果显示,前10个差异表达的基因主要参与细胞外刺激反应、细胞因子生成的正向调控、上皮细胞增殖等生物学过程。KEGG富集分析结果显示,前10个差异表达的基因主要在人乳头瘤病毒感染、PI3K/Akt信号通路、癌症相关miRNA等通路中富集。GSEA分析结果显示,差异表达基因主要在DNA合成与复制、细胞周期相关通路中富集。(3)PPI网络分析结果显示,差异表达基因共包括1 903条边缘数和486个节点基因。关键子网络包括160条边缘数和35个节点基因。GO/KEEG分析发现,节点基因主要在细胞周期调控、缺氧反应、细胞黏附等生物学过程相关。(4)PPI关键子网络筛选出13个节点度≥10的基因,Kaplan-Meier生存分析显示EGFR低表达组(EGFR表达<6.98)中位总生存期(3.99年)长于EGFR高表达组(EGFR表达≥6.98)(2.09年)(P=0.047),mTOR低表达组(mTOR表达<3.21)中位总生存期(3.73年)长于mTOR高表达组(mTOR表达≥3.21)(1.78年)(P=0.022)。ESCC组织EGFR、mTOR表达[5.30(4.47,6.38)、4.45(4.12,4.78)]均高于正常食管组织[4.44(4.14,4.70)、4.39(4.05,4.64)](U=31 720.00、52 290.00,P均<0.05)。ESCC组织GATAD2A表达为5.93(5.55,6.38),与EGFR、mTOR表达均呈正相关(r=0.295,P=0.007;r=0.398,P<0.001)。结论 GATAD2A调控ESCC的机制可能与激活EGFR和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关。

关键词：食管鳞状细胞癌 KYSE-150细胞 GATAD2A 转录组测序信号通路

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刚地弓形虫巨噬细胞迁移抑制因子基因敲除虫株的构建与鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第3期40卷 349-354页

作者：王杰温红阳陈滢安然罗庆礼沈继龙都建安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室合肥230032 人畜共患病安徽高校省级重点实验室合肥230032 安徽医科大学基础医学院感染性疾病研究中心合肥230032 病原生物学安徽省重点实验室合肥230032

目的构建并鉴定刚地弓形虫RH株巨噬细胞迁移抑制因子(Tgmif)基因敲除虫株。方法设计刚地弓形虫RH株Tgmif的单向导RNA(sgRNA)和点突变引物,将pSAG1::Cas9-U6::sgUPRT质粒定点突变为针对Tgmif基因的pSAG1::Cas9-U6::sg Tgmif质粒。构建含... 详细信息

目的构建并鉴定刚地弓形虫RH株巨噬细胞迁移抑制因子(Tgmif)基因敲除虫株。方法设计刚地弓形虫RH株Tgmif的单向导RNA(sgRNA)和点突变引物,将pSAG1::Cas9-U6::sgUPRT质粒定点突变为针对Tgmif基因的pSAG1::Cas9-U6::sg Tgmif质粒。构建含有Tgmif上游1001 bp(Tgmif-up)、二氢叶酸还原酶-胸苷酸合成酶基因(dhfr-ts)和Tgmif下游1011 bp(Tgmif-down)等3个片段的Tgmif供体质粒,从Tgmif供体质粒PCR扩增获得Tgmif供体DNA。将pSAG1::Cas9-U6::sg Tgmif质粒和Tgmif供体DNA混合后电击转染野生型刚地弓形虫RH株(RH_(WT))速殖子,用乙胺嘧啶培养7 d,筛选获得稳定表达乙胺嘧啶抗性的虫株并进行单克隆筛选,PCR扩增dhfr-ts上、下游同源臂和Tgmif鉴定Tgmif基因敲除单克隆株(RH_(ΔTgmif))。提取RH_(ΔTgmif)和RH_(WT)株虫体蛋白,蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析TgMIF蛋白的表达情况。RH_(ΔTgmif)在人包皮成纤维(HFF)细胞中传代10代,吉氏染色,镜检计数100个HFF中速殖子数,评估RH_(ΔTgmif)在体外培养HFF细胞中的增殖能力,以RH_(WT)为对照。将20只BABL/c小鼠随机分为RH_(WT)组和RH_(ΔTgmif)组(10只/组),各组分别腹腔注射RH_(WT)或RH_(ΔTgmif)株速殖子(1000个/鼠),记录小鼠生存情况。弓形虫增殖能力的比较采用独立样本t检验,小鼠生存率的比较采用Log Rank检验。结果PCR检测结果显示,含Tgmif-up、dhfr-ts和Tgmif-down等3个片段的Tgmif供体DNA片段长5049 bp,与预期相符;RH_(ΔTgmif)株分别扩增出1387、1524 bp的dhfr-ts上、下游同源臂条带,RH_(WT)株无相应条带;RH_(WT)株扩增出1837 bp的Tgmif条带,RH_(ΔTgmif)株无相应条带。Western blotting分析结果显示,RH_(WT)株在相对分子质量(M_(r))12500处出现1条蛋白条带,RH_(ΔTgmif)株无相应的蛋白条带。吉氏染色镜检结果显示,100个HFF中RH_(ΔTgmif)株速殖子为(2986±69.20)个,高于RH_(WT)株的(2067±51.08)个(t=18.50,P<0.01)。体内毒力试验结果显示,RH_(WT)组小鼠在第7天出现死亡,在第9天全部死亡;RH_(ΔTgmif)组小鼠在第5天出现死亡,第7天全部死亡,两组之间的差异有统计学意义(χ^(2)=17.45,P<0.01)。结论成功构建Tgmif基因敲除弓形虫虫株RH_(ΔTgmif),RH_(ΔTgmif)株的毒力比RH_(WT)株强。

关键词：刚地弓形虫巨噬细胞迁移抑制因子基因敲除

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中药熏蒸治疗儿童过敏性紫癜适宜温度研究

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中国中西医结合儿科学 2023年第2期15卷 99-104页

作者：张君胡桂丽王娅如王妍炜新乡医学院三全学院基础护理教研室河南新乡453000 河南中医药大学第一附属医院儿科

目的探索不同年龄阶段的过敏性紫癜患儿中药熏蒸治疗适宜温度,为中药熏蒸治疗儿童过敏性紫癜护理操作规范化应用提供参考依据。方法通过患儿年龄、熏蒸温度两个因素进行三水平析因设计,患儿年龄为3~6岁、7~12岁、13~14岁三水平、熏蒸温... 详细信息

目的探索不同年龄阶段的过敏性紫癜患儿中药熏蒸治疗适宜温度,为中药熏蒸治疗儿童过敏性紫癜护理操作规范化应用提供参考依据。方法通过患儿年龄、熏蒸温度两个因素进行三水平析因设计,患儿年龄为3~6岁、7~12岁、13~14岁三水平、熏蒸温度为39℃、41℃、43℃三水平,选取243例过敏性紫癜患儿,随机分为9组,每组各27例。观察每组患儿治疗前后临床症状评分、舒适度并评价安全性。结果(1)不同温度对不同年龄患儿的治疗后临床症状评分比较:在年龄与温度的交互作用统计分析结果中,F=0.564,P>0.05,提示年龄、温度之间的交互作用差异无统计学意义。进一步采用两因素方差分析,年龄的单独效应结果显示,F=0.022,P>0.05,差异无统计学意义。温度的单独效应结果显示,F=14.528,P<0.05,差异有统计学意义,即不同的温度对临床症状评分具有显著影响,相较于39℃温度水平,41℃、43℃温度条件下对临床症状评分影响更为显著(P<0.05),41℃与43℃对临床症状评分的影响比较,差异无统计学意义(P>0.05);每组患儿治疗后临床症状评分均低于治疗前评分,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)不同温度对不同年龄患儿的温度主观舒适度评分比较:在年龄与温度的交互作用统计分析结果中,F=50.620,P<0.05,提示年龄、温度之间的交互作用差异有统计学意义。年龄的单独效应结果中显示,F=14.665,P<0.05,差异有统计学意义。温度的单独效应结果显示,F=12.590,P<0.05,差异有统计学意义,即不同的温度对患儿舒适度具有显著影响。3~6岁患儿对39℃、41℃两个温度水平的舒适度高于43℃,7~12岁患儿在41℃温度条件下舒适度最高,13~14岁患儿在43℃条件下舒适度最高。(3)不同温度对不同年龄患儿的安全性分级比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论(1)中药熏蒸不同温度对过敏性紫癜患儿治疗效果不同,不同年龄阶段的患儿疗效并无区别,年龄不会影响治疗效果。(2)不同年龄阶段的患儿对不同温度中药熏蒸治疗舒适度不同。(3)临床建议3~6岁患儿中药熏蒸治疗采用41℃,7~12岁患儿采用41℃,13~14岁患儿采用43℃。

关键词：过敏性紫癜年龄温度中药熏蒸

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疫情期间钉钉结合超星学习通的PBL教学法在病理学教学中的应用

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科技创新导报 2021年第2期18卷 229-233页

作者：朱会芳贺国洋张哲莹胡育菡新乡医学院基础医学院病理学教研室河南新乡453000

探讨疫情期间采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论式基于问题的学习(PBL)教学法在病理学教学中的应用。选取新乡医学院2018级本科临床医学专业学生90人,随机分为三组:(1)研究组:采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论... 详细信息

探讨疫情期间采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论式基于问题的学习(PBL)教学法在病理学教学中的应用。选取新乡医学院2018级本科临床医学专业学生90人,随机分为三组:(1)研究组:采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论式PBL教学法;(2)对照组1:采用基于钉钉直播平台的病例讨论式PBL教学法;(3)对照组2:采用基于超星学习通平台的病例讨论式PBL教学法。每组30人。授课结束后,围绕授课内容的重点难点进行测验,然后对三组学生的测验成绩做分析并进行问卷调查以评价教学效果。从测验成绩来看,研究组学生的成绩明显优于对照组1和对照组2(P<0.05),而对照组1和对照组2的学生成绩差异无统计学意义(P>0.05)。通过在病理学教学中采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论式PBL教学法教学效果好,有利于提高课堂教学效率及学生满意度,并有助于提升学生的综合素质,符合新冠肺炎疫情期间病理学教学的需求。

关键词：钉钉直播平台超星学习通病理学教学 PBL教学新冠肺炎疫情

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屎肠球菌QH06能减轻溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜损伤

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南方医科大学学报 2022年第7期42卷 976-987页

作者：库尔班乃木·卡合曼赵健锋穆凯代斯·艾合买提王汉铭朱稷蔚潘文涛卡思木江·阿西木江新疆医科大学第一附属医院康复医学科新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第五临床医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第二临床医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院物生化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830017

目的探讨屎肠球菌QH06对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道菌群与肠道免疫的影响及其机制。方法36只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、UC模型组和屎肠球菌组(12只/组)。除正常对照组外,其余2组以5%TNBS/乙醇灌肠法建立UC模型。造模成功... 详细信息

目的探讨屎肠球菌QH06对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道菌群与肠道免疫的影响及其机制。方法36只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、UC模型组和屎肠球菌组(12只/组)。除正常对照组外,其余2组以5%TNBS/乙醇灌肠法建立UC模型。造模成功后屎肠球菌组用屎肠球菌QH06灌胃干预,剂量为0.21 g/kg,正常对照组和UC组用等体积的蒸馏水灌胃干预。干预14 d后用HE染色法观察各组大鼠结肠病理改变并评分,用RT-qPCR和ELISA法检测细胞因子IL-4、IL-10、IL-12和IFN-γ的mRNA和蛋白表达水平,用免疫组化和ELISA法检测TLR2蛋白表达量。利用Illumina Miseq平台对各组大鼠肠道菌群测序同时进行生物信息学分析。最后肠道菌群和TLR2蛋白表达量、细胞因子等指标进行相关性分析。结果与正常对照组相比,UC组大鼠体质量下降(P<0.01),结肠组织损伤严重,病理学评分显著升高(P<0.01);ELISA和RT-qPCR结果显示,IFN-γ(P<0.01),IL-12(P<0.01),TLR2(P<0.01)的蛋白表达水平和IFN-γ(P<0.05),IL-12(P<0.05),IL-10(P<0.05)的mRNA表达水平上调。Illumina Miseq测序和分析显示,UC组大鼠肠道菌群多样性Shannon指数(P<0.05)、Ace指数(P<0.01)和Chao指数(P<0.05)降低。Enterobacteriaceae(P<0.01)增多,Burkholderiaceae(P<0.05)减少。与UC组相比,屎肠球菌组大鼠体质量增加(P<0.05),损伤减轻,病理学评分下降(P<0.05),结肠组织中IFN-γ(P<0.01),IL-12(P<0.05)、TLR2蛋白表达量(P<0.01)下调,IL-4蛋白表达量上调(P<0.05),IFN-γ(P<0.05)、IL-12(P<0.05)的mRNA表达量下调,肠道菌群多样性Shannon指数(P<0.05)、Ace指数(P<0.05)和Chao指数(P<0.05)升高。Enterobacteriaceae(P<0.05)减少,Burkholderiaceae(P<0.05)和Rikenellaceae(P<0.01)增多;肠道菌群、细胞因子含量和TLR2蛋白表达量相关性分析结果显示,IFN-γ与Enterobacteriaceae呈正相关、而与Prevotellaceae,Desulfovibrionaceae、norank_o__Mollicutes_RF39,Clostridiales_vadinBB60_group呈负相关;TLR2表达水平与Clostridiales_vadinBB60_group,norank_o__Mollicutes_RF39和Prevotellaceae呈负相关。结论屎肠球菌QH06能减轻TNBS诱导的UC大鼠的结肠黏膜损伤,其机制可能与普氏菌科等短链脂肪酸产生菌丰度的升高,TLR2介导的异常免疫反应的抑制有关。

关键词：屎肠球菌溃疡性结肠炎肠道菌群 TLR2 细胞因子

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情绪体验在慢性心力衰竭患者主要照顾者精力与照顾者负担间的中介作用

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新乡医学院学报 2021年第5期38卷 422-426页

作者：张全英孙俊俊张朝辉王玉钊李秋萍张希中朱玉花新乡医学院第一附属医院护理部河南卫辉453100 新乡医学院护理学院基础护理教研室河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院神经内科河南卫辉453100 新乡医学院三全学院羲和书院河南新乡453000 新乡医学院第一附属医院肾脏病医院二病区河南卫辉453100 新乡医学院第一附属医院介入科河南卫辉453100 新乡医学院第一附属医院规培中心河南卫辉453100

目的探讨情绪体验在慢性心力衰竭患者主要照顾者精力与照顾者负担间的中介作用。方法采用便利抽样方法,选择2018年6~12月在新乡医学院第一附属医院住院的慢性心力衰竭患者主要照顾者152例为研究对象。采用一般资料调查表获取研究对象的... 详细信息

目的探讨情绪体验在慢性心力衰竭患者主要照顾者精力与照顾者负担间的中介作用。方法采用便利抽样方法,选择2018年6~12月在新乡医学院第一附属医院住院的慢性心力衰竭患者主要照顾者152例为研究对象。采用一般资料调查表获取研究对象的人口学资料,采用简明健康调查量表中的精力分量表、正性负性情绪量表、Zarit照顾者负担量表评估研究对象的精力、正性负性情绪及负担情况。分析主要照顾者的精力、情绪、负担之间的关系。结果文化程度为大专及以上主要照顾者的正性情绪得分高于初中及以下主要照顾者(P<0.01),高中或中专主要照顾者的负性情绪得分低于初中及以下者(P<0.01)。家庭人均月收入<1000元主要照顾者精力得分低于1000~2999元者及≥3000元者(P<0.01),家庭人均月收入<1000元主要照顾者负性情绪、照顾者负担得分高于家庭人均月收入≥3000元者(P<0.01)。身体状况差的主要照顾者精力得分低于身体状况一般者及较好者,负性情绪及照顾者负担得分高于身体状况一般者及较好者(P<0.01)。主要照顾者精力与正性情绪呈正相关(r=0.354,P<0.01),与负性情绪、照顾负担均呈负相关(r=-0.506、-0.477,P<0.01);负性情绪与照顾负担呈正相关(r=0.753,P<0.01)。慢性心力衰竭患者主要照顾者的负性情绪在精力与照顾负担之间的中介效应占总效应的73.39%。结论精力、负性情绪是慢性心力衰竭患者主要照顾者负担的主要影响因素,负性情绪在精力与照顾者负担间起部分中介作用。

关键词：慢性心力衰竭主要照顾者精力照顾者负担情绪中介效应

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miR-27 a调控Sfrp1对肾小管上皮细胞EMT的影响

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贵州医科大学学报 2022年第9期47卷 1007-1013页

作者：田平平邹琴卢雨微郭兵石明隽新乡医学院三全学院护理学院河南新乡453003 贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州贵阳550025

目的探讨高糖培养肾小管上皮细胞中miR-27 a调控分泌型卷曲相关蛋白1(Sfrp1)对细胞向间质细胞转分化(EMT)的影响。方法将NRK-52E细胞分为正常糖(NG组)和高糖(HG组)两组,利用RT-qPCR检测NRK-52E细胞中miR-27 a、Sfrp 1的表达情况,Western... 详细信息

目的探讨高糖培养肾小管上皮细胞中miR-27 a调控分泌型卷曲相关蛋白1(Sfrp1)对细胞向间质细胞转分化(EMT)的影响。方法将NRK-52E细胞分为正常糖(NG组)和高糖(HG组)两组,利用RT-qPCR检测NRK-52E细胞中miR-27 a、Sfrp 1的表达情况,Western blot检测NRK-52E细胞中Sfrp1、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(col-Ⅳ)的蛋白表达;将NRK-52E细胞分为野生型Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mimics阴性对照组(wt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mnc组)、野生型Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mimics组(wt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a m组)、突变型Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mimics阴性对照组(mt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mnc组)以及突变型Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mimics组(mt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a m),通过双荧光素酶报告基因检测系统检测萤火虫荧光值与海肾荧光值的比值,验证miR-27 a对Sfrp1表达的影响;在高糖诱导下,利用细胞转染实验将NRK-52E细胞设miR-27 a mimics阴性对照组(miR-27 a mnc组)、miR-27 a mimics组(miR-27 a m组)、miR-27 a inhibitor阴性对照组(miR-27 a inc组)以及miR-27 a inhibitor组(miR-27 a i组),通过RT-qPCR检测各组细胞中miR-27 a、Sfrp 1 mRNA的表达,Western blot检测各组细胞中Sfrp1、E-cadherin、α-SMA、col-Ⅳ蛋白的表达水平。结果RT-qPCR结果显示,与NG组比较,HG组miR-27 a表达水平增高(P<0.05),Sfrp 1 mRNA表达水平降低(P<0.05);Western blot结果显示,与NG组比较,HG组α-SMA、col-Ⅳ蛋白水平增高(P<0.05),Sfrp1、E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05);荧光素酶报告基因显示,wt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a m组荧光素酶活性明显低于wt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mnc组(P<0.05),而mt Sfrp 1-3′UTR+miR-27a mnc组与mt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a m组荧光素酶活性未见明显变化(P>0.05);细胞转染RT-qPCR结果显示,与miR-27 a mnc组比较,miR-27 a m组miR-27 a表达增加(P<0.05),而Sfrp 1 mRNA表达降低(P<0.05);与miR-27 a inc组比较,miR-27 a i组miR-27 a表达降低(P<0.05),而Sfrp 1 mRNA表达增加(P<0.05);Western blot结果显示,与miR-27 a mnc组比较,miR-27 a m组α-SMA、col-Ⅳ蛋白表达增加(P<0.05),Sfrp1、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05);与miR-27a inc组比较,miR-27 a i组α-SMA、col-Ⅳ蛋白表达降低(P<0.05),Sfrp1、E-cadherin蛋白表达增加(P<0.05)。结论miR-27 a可以通过抑制Sfrp1的表达促进肾小管EMT,参与糖尿病肾病肾纤维化的发生。

关键词： miR-27 a 分泌型卷曲相关蛋白1 NRK-52E 上皮细胞向间质细胞转分化肾脏纤维化糖尿病肾病

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