检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2013年第4期19卷 311-315页

作者：刘丽波孟繁杰李帅薛一雪刘云会中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学病理生理学研究所辽宁沈阳110001 中国医科大学附属盛京医院神经外科辽宁沈阳110001

目的研究小剂量内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-II)对人U251胶质瘤细胞凋亡和自噬的影响。方法培养人U251胶质瘤细胞,给予小剂量EMAP-II,或者给予自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和广谱caspase抑制剂zVAD-fmk预处理后再给予小剂量EMAP-II,应... 详细信息

目的研究小剂量内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-II)对人U251胶质瘤细胞凋亡和自噬的影响。方法培养人U251胶质瘤细胞,给予小剂量EMAP-II,或者给予自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和广谱caspase抑制剂zVAD-fmk预处理后再给予小剂量EMAP-II,应用MTT法检测细胞活力;小剂量EMAP-II作用不同时间后,应用Hoechst33342染色观察U251细胞的凋亡程度;应用免疫荧光法检测微管相关蛋白轻链-3(LC3)在U251细胞的分布;Western blot方法检测bcl-2、bax和LC3-Ⅱ的蛋白表达水平。结果与对照组相比,小剂量EMAP-II显著抑制了人U251胶质瘤细胞的活力,在EMAP-II作用0.5h时效果最显著;然而,3-MA和zVAD-fmk均能显著增强U251细胞活力,二者联合应用后细胞活力恢复至对照组水平;EMAP-II作用后可见U251胶质瘤细胞核染色质凝聚、边缘化;同时伴有bcl-2蛋白表达的显著降低和bax蛋白表达的显著增强;自噬标记物LC3在胞浆内呈点状分布,荧光表达显著增强,并且LC3-II的蛋白表达水平显著上调。结论小剂量EMAP-II能够显著抑制人U251胶质瘤细胞活力,诱导人U251胶质瘤细胞的凋亡和自噬性死亡。

关键词：内皮-单核细胞激活多肽人U251胶质瘤细胞凋亡自噬

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孕酮对缺氧缺血新生鼠脑皮质HIF-1α表达的影响

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中国应用生理学杂志 2012年第4期28卷 312-314,389页

作者：白瑞樱刘雪琴王湜卿李东亮新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003 济源职业技术学院护理系河南济源454650

目的:探讨孕酮(PROG)对缺氧缺血性新生鼠脑组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法:7日龄SD大鼠80只随机分成4组(n=10):正常对照组,假手术组,缺氧缺血组和孕酮组,动物造模成功24 h后处死动物,应用RT-PCR和免疫组织化学方法观... 详细信息

目的:探讨孕酮(PROG)对缺氧缺血性新生鼠脑组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法:7日龄SD大鼠80只随机分成4组(n=10):正常对照组,假手术组,缺氧缺血组和孕酮组,动物造模成功24 h后处死动物,应用RT-PCR和免疫组织化学方法观察各组新生鼠大脑皮质中HIF-1α表达的变化。结果:孕酮组HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白表达均明显高于其他三组(P<0.01)。结论:孕酮对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用可能与其上调HIF-1α的表达有关。

关键词：孕酮缺氧缺血性脑损伤新生鼠低氧诱导因子-1α

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Apelin对急性局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑神经细胞的保护作用

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第二军医大学学报 2012年第12期33卷 1324-1328页

作者：蔡世昌张秋玲李金国白波怀化医学高等专科学校解剖学教研室怀化418000 泰山医学院基础医学院生理学教研室泰安271000 济宁医学院基础学院神经生物学研究所济宁272000

目的利用apelin在大鼠急性局灶性脑缺血再灌注早期进行干预处理,观察大脑神经细胞凋亡情况及脑组织抗氧化应激能力的变化。方法取成年雄性Wistar大鼠随机分成假手术对照(sham)组12只、缺血再灌注(I/R)组72只、缺血再灌注+apelin干预(I/R... 详细信息

目的利用apelin在大鼠急性局灶性脑缺血再灌注早期进行干预处理,观察大脑神经细胞凋亡情况及脑组织抗氧化应激能力的变化。方法取成年雄性Wistar大鼠随机分成假手术对照(sham)组12只、缺血再灌注(I/R)组72只、缺血再灌注+apelin干预(I/R+AP)组72只。I/R组和I/R+AP组又根据灌注时间分为再灌注3、6、12、24、72、120h亚组,每亚组12只。I/R+AP组在再灌注早期(30min)用10-7 mol/L apelin(10μl)进行侧脑室注射给药干预处理。利用RT-PCR测定各组大鼠损伤侧大脑皮质caspase-3、caspase-12mRNA表达的变化;用流式细胞术检测各组大鼠大脑神经细胞凋亡率;用试剂盒测定脑组织丙二醛(MDA)含量、总谷胱甘肽过氧化物酶活性以及总抗氧化能力。结果 RT-PCR检测结果显示,与假手术组比较,I/R组和I/R+AP组caspase-3、caspase-12mRNA在损伤侧大脑皮质的表达升高;apelin干预可下调caspase-12mRNA的表达,而caspase-3mRNA的表达变化不明显。流式细胞术检测结果显示,apelin+AP组缺血区神经细胞凋亡率较I/R组降低(P<0.05),且随时间增加变明显。脑组织氧化应激功能检测结果显示,与假手术组比较,I/R组脑组织MDA含量升高(P<0.05),总谷胱甘肽过氧化物酶活性和总抗氧化能力降低(P<0.05);apelin干预后,MDA含量下降,总谷胱甘肽过氧化物酶活性和总抗氧化能力升高,与I/R组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠急性局灶性脑缺血再灌注后apelin的早期干预对脑神经细胞有一定的保护作用。

关键词：卒中脑缺血再灌注损伤 apelin

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环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用

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食品科学 2012年第8期33卷 216-220页

作者：李丽华白瑞樱孙远明沈玉栋徐振林雷红涛张挺王弘杨金易广东省食品质量安全重点实验室华南农业大学食品学院广东广州510642 新乡医学院基础医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003

建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧... 详细信息

建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明:在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC5 0)为4.32μg/L,线性范围(IC20～IC80)为1.14～28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%～100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%～95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。

关键词：环丙沙星时间分辨荧光免疫分析抗体添加回收

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葡萄糖转运蛋白介导孕酮对于氧糖剥夺PC12细胞的防护作用

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中风与神经疾病杂志 2012年第6期29卷 510-512页

作者：吴春平李颖虹张勇李超堃李东亮新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院形态学实验室河南新乡453003 河南省生物精神病学重点实验室河南新乡453002

目的探讨葡萄糖转运蛋白抑制剂细胞松弛素B(CB)对孕酮抗氧糖剥夺(OGD)防护PC12细胞的作用及机制。方法选取生长状态良好及诱导分化均一的PC12细胞随机分为5组:正常(normal)组、氧糖剥夺(OGD)组、孕酮(PROG)组、孕酮+细胞松弛素B(PROG+CB... 详细信息

目的探讨葡萄糖转运蛋白抑制剂细胞松弛素B(CB)对孕酮抗氧糖剥夺(OGD)防护PC12细胞的作用及机制。方法选取生长状态良好及诱导分化均一的PC12细胞随机分为5组:正常(normal)组、氧糖剥夺(OGD)组、孕酮(PROG)组、孕酮+细胞松弛素B(PROG+CB)组、细胞松弛素B(CB)组,后4组均行氧糖剥夺。XTT检测细胞活力,胎盘蓝染色法计数活细胞,氧化酶法测定培养基中糖含量。上述检测在OGD后24h进行。结果 OGD后PC12细胞肿胀变圆,突起减少或消失,细胞活力(P<0.01)和活细胞数(P<0.05)降低,培养液葡萄糖含量明显升高(P<0.05)。PROG减轻胞体水肿,增加细胞活力(P<0.01)和活细胞数(P<0.05),降低培养液葡萄糖含量(P<0.05)。先用CB抑制葡萄糖转运蛋白,再给PROG(PROG+CB组)则抵消PROG的防护作用。单用CB(CB组)则细胞活力仅为1.8%,活细胞数为2.9%,培养液中葡萄糖含量明显升高。可见,孕酮对氧糖剥夺PC12细胞防护作用可被葡萄糖转运蛋白的抑制剂抵消。结论葡萄糖转运蛋白可能是介导孕酮防护氧糖剥夺PC12细胞的重要分子靶标。

关键词：孕酮细胞松弛素B PC12细胞氧糖剥夺葡萄糖转运蛋白

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salusins通过减轻内质网应激保护缺血心肌

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中国科学：生命科学 2012年第4期42卷 480-488页

作者：王键飞王茵单世富胡甜甜陈虎艳田晶任安经周旭袁文俊林丽宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学教研室银川750004 上海浦南医院妇产科上海200125 长海医院超声科上海200433 第二军医大学生理学教研室教育部分子神经生物重点实验室上海200433

salusins是影响心血管功能的多肽,salusin-α和-β能调节内质网应激的标志分子GRP78,从而减轻血清剥夺所致的培养心肌细胞损伤.本研究探讨了salusin-α和-β能否减轻心肌缺血所致的内质网应激.在整体大鼠冠状动脉左前降支(LAD)结扎2h所... 详细信息

salusins是影响心血管功能的多肽,salusin-α和-β能调节内质网应激的标志分子GRP78,从而减轻血清剥夺所致的培养心肌细胞损伤.本研究探讨了salusin-α和-β能否减轻心肌缺血所致的内质网应激.在整体大鼠冠状动脉左前降支(LAD)结扎2h所致心肌缺血模型上,于结扎前15min静脉注射salusin-α或-β(5或15nmol/kg),观察到高剂量组心功能和血流动力学的显著改善,缺血性心律失常尤其是室性心动过速显著减少.salusins抑制了缺血引起的GRP78以及内质网应激相关促凋亡因子caspase-12和CHOP的高表达,改善了抑凋亡因子Bcl-2的低表达.此外,在培养的大鼠H9c2心肌细胞中,salusin-α和-β均能抑制tunicamycin所诱导的内质网应激.结果表明,salusins能抑制内质网应激以及内质网应激相关的凋亡,从而保护缺血心肌.

关键词： salusin 心肌缺血内质网应激大鼠

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缓激肽诱发胶质瘤细胞释放的肿瘤坏死因子-α对体外血瘤屏障的影响

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中国肿瘤临床 2012年第12期29卷 822-825页

作者：秦丽娟薛一雪张田谷艳婷张文丽孙娜王建军贾永森郭静河北联合大学基础医学院生理学教研室河北省唐山市063000 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳药科大学生命科学与生物制药学院生理学教研室河北联合大学医学实验研究中心河北联合大学中医学院

目的:探讨缓激肽(bradykinin,BK)诱发胶质瘤细胞释放的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对体外血瘤屏障的影响及其作用机制。方法:分别用缓激肽和生理盐水作用于C6胶质瘤细胞及神经胶质细胞后,放射免疫法检测0、5、10、15、30和60 min时培养液内... 详细信息

目的:探讨缓激肽(bradykinin,BK)诱发胶质瘤细胞释放的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对体外血瘤屏障的影响及其作用机制。方法:分别用缓激肽和生理盐水作用于C6胶质瘤细胞及神经胶质细胞后,放射免疫法检测0、5、10、15、30和60 min时培养液内TNF-α的浓度。用原代培养的脑微血管内皮细胞(BMEC)和C6细胞共培养构建血瘤屏障模型。将缓激肽处理C6细胞不同时间点的条件培养液(C6CM)作用于屏障模型后,动态观察屏障的通透性及跨内皮阻抗(TER)的改变,并用免疫荧光技术检测脑微血管内皮细胞的紧密连接蛋白occludin的表达,RT-PCR法检测屏障模型脑微血管内皮细胞中核因子-κB(NF-κB)的变化。结果:缓激肽作用于C6细胞后,培养液内TNF-α浓度较对照组明显增加(P<0.05),而神经胶质细胞无明显变化。C6CM作用于血瘤屏障模型后,血瘤屏障通透性增加,跨内皮阻抗减小,而内皮细胞间的紧密连接蛋白occludin表达和核因子-κB的转录水平降低,直至30 min后NF-κB转录水平逐渐增强。结论:缓激肽诱发了胶质瘤细胞释放TNF-α,释放的TNF-α可通过NF-KB影响紧密连接蛋白occludin表达而影响血瘤屏障通透性。

关键词：缓激肽肿瘤坏死因子-α 血瘤屏障模型紧密连接蛋白

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尼古丁胆碱能受体激活对内侧纵膈-海马系统网络振荡的影响

尼古丁胆碱能受体激活对内侧纵膈-海马系统网络振荡的影响

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中南地区第八届生理学学术大会

作者：路承彪新乡医学院生理与神经生物学教研室

内侧隔斜角带区(MSDB)对海马theta的网络振荡的产生和维护起着重要作用。这个研究旨在探讨烟碱受体在离体theta振荡(4-12Hz)产生的作用及机制。电生理方法用于记录MSDBtheta振荡。免疫荧光和共聚焦显微镜用于检测VGLUT2-GFP和

关键词：尼古丁胆碱能受体系统网络

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细胞内钙对烟碱型受体激活诱导网络振荡的调控

细胞内钙对烟碱型受体激活诱导网络振荡的调控

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中南地区第八届生理学学术大会

作者：王湛王建刚郭直岳王亚莉李晓娟路承彪新乡医学院生理与神经生物学教研室

海马网络振荡(θ节律)与学习记忆功能密切相关。θ节律主要源于纵隔对角带区域(MS/DB)GABA能(GABAergic)和胆碱能神经元(cholinergic)的输入。在离体脑片,胆碱能受体(nAChR)激活可以诱导纵膈和海马节律性θ频率振荡活动。这种作用与选... 详细信息

海马网络振荡(θ节律)与学习记忆功能密切相关。θ节律主要源于纵隔对角带区域(MS/DB)GABA能(GABAergic)和胆碱能神经元(cholinergic)的输入。在离体脑片,胆碱能受体(nAChR)激活可以诱导纵膈和海马节律性θ频率振荡活动。这种作用与选择性α4或α7nAChR亚型激活有关。α7nAChR亚型对钙有通透性,

关键词：细胞内钙 θ节律

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原代培养大鼠海马神经元谷氨酸受体介导钙信号的发育调控

原代培养大鼠海马神经元谷氨酸受体介导钙信号的发育调控

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中南地区第八届生理学学术大会

作者：郭直岳王亚丽李晓娟路承彪新乡医学院生理与神经生物学教研室

谷氨酸(Glu)是中枢神经系统中一种最重要的兴奋性神经递质,其受体功能和数量的改变在兴奋性突触传递和各种形式的突触可塑性中发挥重要作用。研究这些受体蛋白介导的钙信号转导通路在生长发育中的改变为我们从细胞分子水平揭示可能存在... 详细信息

谷氨酸(Glu)是中枢神经系统中一种最重要的兴奋性神经递质,其受体功能和数量的改变在兴奋性突触传递和各种形式的突触可塑性中发挥重要作用。研究这些受体蛋白介导的钙信号转导通路在生长发育中的改变为我们从细胞分子水平揭示可能存在的衰老机制提供了新的认识。在本研究中,我们利用钙荧光成像技术对不同培养阶段的原代大鼠海马神经元胞内钙信号进行了监测。谷氨酸诱导了钙反应,这种反应具有明显的发育依赖性。在细胞培养的早期阶段(3-7DIV),谷氨酸诱导的钙反应可以被AMPARs阻断剂和电压门控钙通道(VDCC)阻断剂所阻断,提示这种胞内钙变化是通过激活AMPA受体导致细胞膜的去极化,从而继发性引起VDCC开放所导致的。而在更成熟的细胞培养阶段(14-18DIV),谷氨酸诱导的钙反应对AMPARs和VDCC阻断剂敏感性显著下降。进一步的实验表明,AMPA诱导的胞内钙反应在培养初期(7DIV)较为显著,而NMDA诱导的钙反应则要在更成熟的细胞发育阶段才表现的比较明显(14DIV)。在细胞培养的早期阶段,谷氨酸诱导的胞内钙升高主要是通过AMPA受体激活和VDCC开放实现的,而在更成熟的细胞培养阶段,这种钙信号的变化则主要是由NMDA激活而非VDCC开放来介导的。大鼠海马神经元发育成熟的过程中,谷氨酸诱导的钙信号呈现出由AMPA-VDCC向NMDA-Ca信号通路转变的趋势。

关键词：海马神经元 AMPA受体电压门控钙离子通道细胞培养

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