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由BL21DE3^(pET28C-rPAL-1-cDNA)高效表达具有酶活性的苯丙氨酸脱氨酶

中国药理学与毒理学杂志 2000年第3期14卷 211-215页

作者：蔡朱男余应年陈星若袁丽芳浙江大学医学院病理生理学教研室浙江杭州310031 中国医学科学院基础医学研究所遗传室北京100730

为了开辟苯丙酮尿症治疗新途径 ,本实验室构建了插入水稻苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) c DNA的重组表达质粒 ,并用它转化大肠杆菌 BL2 1 DE3获得工程菌 BL2 1 DE3p ET2 8C-r PAL -1-c DNA.经异丙基硫代 -β-D-半乳糖苷诱导后 ,通过 SDS- PAGE... 详细信息

为了开辟苯丙酮尿症治疗新途径 ,本实验室构建了插入水稻苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) c DNA的重组表达质粒 ,并用它转化大肠杆菌 BL2 1 DE3获得工程菌 BL2 1 DE3p ET2 8C-r PAL -1-c DNA.经异丙基硫代 -β-D-半乳糖苷诱导后 ,通过 SDS- PAGE及微型蛋白双向电泳 ,证明表达的目的蛋白的分子量为 78.6ku,主要存在于破碎菌体的沉积物中 (以包涵体形式存在 ) .按 Zucker法测定 PAL酶活性 ,并进行酶动力学实验 .测得表达蛋白的酶比活性为 462 nmol·g-1·min-1,Km,vmax分别为 0 .50 mmol·L-1和3. 0 5nmol · min-1.结果证明所建立BL2 1 DE3p ET2 8C-r PAL -1-c DNA大肠杆菌菌株能高效表达有活性的 PAL .

关键词：脱氨酶类苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸苯丙酮尿症

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青心酮对血管内皮细胞和红细胞生物力学特性的影响

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同济医科大学学报 2000年第2期29卷 116-118页

作者：叶笃筠黄云峰吴萍熊宗斌余尚斌黄引平同济医科大学基础医学院病理生理学教研室武汉430030

采用微管吸吮技术观察了体外培养肺血管内皮细胞及新鲜分离的红细胞在用青心酮处理后生物力学特性的变化。与未用药组比较 ,在加用青心酮 30 m in后 ,中、大剂量组内皮细胞弹性系数 K1 和 K2 增大 (P<0 .0 5 ) ,粘性系数 μ变化不大 ... 详细信息

采用微管吸吮技术观察了体外培养肺血管内皮细胞及新鲜分离的红细胞在用青心酮处理后生物力学特性的变化。与未用药组比较 ,在加用青心酮 30 m in后 ,中、大剂量组内皮细胞弹性系数 K1 和 K2 增大 (P<0 .0 5 ) ,粘性系数 μ变化不大 ;红细胞表观变形指数和最大变形值也明显增加 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。提示青心酮可以增加肺血管内皮细胞弹性 ,并使红细胞变形能力明显增强 ,这可能是青心酮改善血液循环的生物力学机制。

关键词：青心酮微管吸吮红细胞内皮细胞生物力学

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肺心营养合剂抑制吸烟引起的缺氧性肺血管收缩反应增强

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同济医科大学学报 2000年第4期29卷 291-294页

作者：孔炜刘声远侍效春李运峰陆博蒋海飚同济医科大学基础医学院病理生理学教研室武汉430030

20名健康男大学生 ,随机分为两组 ,分别服肺心营养合剂 (PX)和安慰剂 1个月 ,用肺阻抗血流图测定由吸烟引起的肺血管反应性的变化。结果表明 :吸烟可增强缺氧性肺血管收缩反应 (HPV) ,营养合剂则可抑制吸烟引起的 HPV增加。

关键词：吸烟缺氧性肺血管收缩反应肺心营养合剂

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先天性无肛术后患儿直肠肛管向量测压研究

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中国医科大学学报 2000年第5期29卷 338-339页

作者：赵成海王维林王伟中国医科大学基础医学院病理生理学教研室沈阳110001 第二临床学院小儿外科

目的 :分析先天性无肛患儿术后肛管内压力变化及对患儿临床排便功能的影响。方法 :采用向量测压技术对 45例先天性无肛术后患儿及 5 5例正常儿进行直肠肛管测压 ,所有数据采用 t检验进行统计学分析。结果 :患儿各组肛管内最大压力及向... 详细信息

目的 :分析先天性无肛患儿术后肛管内压力变化及对患儿临床排便功能的影响。方法 :采用向量测压技术对 45例先天性无肛术后患儿及 5 5例正常儿进行直肠肛管测压 ,所有数据采用 t检验进行统计学分析。结果 :患儿各组肛管内最大压力及向量容积均明显低于正常儿 (P均 <0 .0 1)。优、良两组两项指标均明显高于不良组 (P均<0 .0 1)。优组向量容积明显高于良组 (P <0 .0 1) ;患儿各组均检测出肛管内存有局部压力缺损 ,其百分率优组最低 ,不良组最高。结论 :无肛患儿术后肛管内不仅最大压力下降 ,且大部分患儿存有压力缺损。两者所致的肛管向量容积降低可能是患儿术后出现排便障碍的重要原因。

关键词：先天性无肛外科手术术后直肠肛管向量测压

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当归对TNFα导致细胞骨架重排的逆转作用

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湖北医科大学学报 2000年第1期21卷 13-15页

作者：欧阳静萍王雄 Muller S Stoltz JF 武汉基础医学院病理生理学教研室 430071 法国南锡大学医学院血管生物学和血液流变学实验室

目的 :研究当归对TNF_α所致人脐静脉内皮细胞 (ECV30 4)中细胞骨架重排的逆转作用。方法 :将培养人内皮细胞 (ECV30 4)分为 4组 ,即对照组、当归组、TNF_α损伤组和TNF_α+当归组 ,各组处理后用三维荧光显微镜观察细胞骨架F_actin分布... 详细信息

目的 :研究当归对TNF_α所致人脐静脉内皮细胞 (ECV30 4)中细胞骨架重排的逆转作用。方法 :将培养人内皮细胞 (ECV30 4)分为 4组 ,即对照组、当归组、TNF_α损伤组和TNF_α+当归组 ,各组处理后用三维荧光显微镜观察细胞骨架F_actin分布的改变。结果 :当归能逆转TNF_α所致内皮细胞的严重紊乱。结论 :当归能逆转TNF_α导致的细胞骨架重排 ,这种作用可能是其抗动脉粥样硬化的主要原因之一。

关键词：当归肿瘤坏死因子中药细胞骨架重排

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肝癌患者恶性疾病相关性DNA结合蛋白2的检测

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华西医科大学学报 2000年第3期31卷 310-311页

作者：易成赵景民黄英华西医科大学附属第一医院肿瘤中心成都610041 北京302医院病理科华西医科大学基础医学院病理生理学教研室

为探讨恶性疾病相关性DNA结合蛋白2（MAD2）在肝癌诊断中的价值，采用ELISA法检测了27例原发性肝癌、14例转移性肝癌和12例正常对照组血浆中MAD2的浓度。原发性肝癌、转移性肝癌及正常对照组血浆中MAD2的浓度分别为（30.56±11.38）... 详细信息

为探讨恶性疾病相关性DNA结合蛋白2（MAD2）在肝癌诊断中的价值，采用ELISA法检测了27例原发性肝癌、14例转移性肝癌和12例正常对照组血浆中MAD2的浓度。原发性肝癌、转移性肝癌及正常对照组血浆中MAD2的浓度分别为（30.56±11.38）μg/ml、（9.27±5.58）μg/ml和（8.43±5.62）μg/ml。原发性肝癌患者MAD2浓度明显高于转移性肝癌患者和正常对照组(P<0.001)，转移性肝癌患者和正常对照组MAD2浓度无显著性差异(P>0.05)。结果提示：MAD2在原发性肝癌的诊断中可能是一个有价值的诊断指标。

关键词：原发性肝癌 MAD2 诊断 ELISA 诊断指标

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油酸致ARDS过程脂质过氧化和一氧化氮的动态变化

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新疆医科大学学报 2000年第2期23卷 101-103页

作者：玛依努尔.伊明尔艾山张建龙买买提祖农.买苏尔冉新建新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830054

目的 :观察急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)合并左心功能降低时血浆和心肌组织脂质过氧化和一氧化氮(NO)的动态变化 ,以了解它们在左心功能降低中的作用。方法 :用油酸缓慢 (iv:耳缘静脉 )注射诱发兔肺损伤所致ARDS模型并分为 30 min、6 0 mi... 详细信息

目的 :观察急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)合并左心功能降低时血浆和心肌组织脂质过氧化和一氧化氮(NO)的动态变化 ,以了解它们在左心功能降低中的作用。方法 :用油酸缓慢 (iv:耳缘静脉 )注射诱发兔肺损伤所致ARDS模型并分为 30 min、6 0 min、90 min和 12 0 min4组。结果 :(1)油酸各时间组血浆和心肌组织的 GSH- Px和MDA含量与对照组相比有显著差异 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,而且二者呈负相关 (r =- 0 .98,P <0 .0 1) ;(2 )油酸 30min和 6 0 min组血浆 NO含量高于对照组 (P <0 .0 1) ,在油酸 90 min和 12 0 min组比油酸 6 0 min组又有显著减少 (P <0 .0 1) ;(3)心肌组织 NO含量在油酸 30 min时比对照组明显增加 (P <0 .0 1) ,而在油酸 6 0 min以后各组与油酸 30 min组相比又有所减少 (P <0 .0 1) ;(4 )电镜下见到心肌细胞结构有明显改变。结论 :油酸致 ARDS过程左心功能降低与脂质过氧化和

关键词：油酸脂质过氧化一氧化氮多器官衰竭呼吸窘迫

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复方枸杞叶茶抗疲劳、耐缺氧、耐低温和对血脂的影响

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新疆医科大学学报 2000年第2期23卷 153-154页

作者：马琪张建龙冉新建新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830054

枸杞叶为茄科植物枸杞((LyciumbarbarumL)的嫩茎叶。经查阅大量文献资料发现国内研究较多的为枸杞果实—枸杞子,而对枸杞叶的研究甚少。据文献记载枸杞叶含有甜菜碱、芸香甙、维生素C、人体所需的各种氨基酸及微量元素[1,2]。新疆是我... 详细信息

枸杞叶为茄科植物枸杞((LyciumbarbarumL)的嫩茎叶。经查阅大量文献资料发现国内研究较多的为枸杞果实—枸杞子,而对枸杞叶的研究甚少。据文献记载枸杞叶含有甜菜碱、芸香甙、维生素C、人体所需的各种氨基酸及微量元素[1,2]。新疆是我国枸杞子主产区之一,每年有大量可用的枸杞叶被浪费。为了综合利用枸杞资源,以枸杞叶为主配以其它几种食药组成复方枸杞叶保健茶。本实验对此种茶的保健作用进行研究,为综合利用枸杞叶提供依据。1　材料与方法1.1　动物与分组　昆明种小鼠92只,雌雄各半,体重16～22g,级标准,由新疆医科大学动物室提供。抗疲劳(游泳)实验:24只雌雄各半小鼠,随机分为两组,即正常对照组和给茶实验组,每组12只。在正常饲食水情况下,给茶组每日灌服茶2次(含茶成分0.68g),连续7d。正常对照组给等容量生理盐水。第8天将两组动物分别投入盛水的圆形塑料盆内[直径60cm,水深20cm,水温(18±1)℃],使其游泳,观察记录动物下沉时间。常压耐缺氧实验:24只雌雄各半小鼠随机分为正常对照组和给茶实验组,每组12只。处理同上述游泳实验。第8天将动物投入盛有钠石灰15g的250ml容积的广口瓶中(每瓶1只)...

关键词：复方枸杞叶茶抗疲劳耐缺氧耐低温

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过氧亚硝基阴离子致豚鼠气道反应性增高的实验研究

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河北医科大学学报 2000年第1期21卷 1-3,F004页

作者：朱铁年凌亦凌赵瑞景王殿华刘满英谷振勇河北医科大学基础医学院病理生理学教研室石家庄050017

目的探讨过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ－）在气道上皮细胞损伤致气道高反应性中的作用。方法以离体豚鼠气管条建立组织胺累积－浓度反应曲线，电镜观察气道上皮细胞的形态学变化。结果豚鼠气管条与ＯＮＯＯ－孵育后，气管条的反应... 详细信息

目的探讨过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ－）在气道上皮细胞损伤致气道高反应性中的作用。方法以离体豚鼠气管条建立组织胺累积－浓度反应曲线，电镜观察气道上皮细胞的形态学变化。结果豚鼠气管条与ＯＮＯＯ－孵育后，气管条的反应性增高，同时电镜观察有气道上皮细胞损伤脱落。结论ＯＮＯＯ－参与了气道上皮细胞的损伤，并导致了气道高反应性的形成。

关键词：哮喘气道高反应性豚鼠过氢亚硝基阴离子

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猪神经元胞体和轴突神经细丝组分的初步分析

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同济医科大学学报 2000年第2期29卷 114-115页

作者：钱振宇周迎春李一鸣邓洁王建枝同济医科大学九三级七年制武汉430030 同济医科大学基础医学院病理生理学教研室武汉430030

从猪神经元胞体和轴突中分离提取了神经细丝 (NF) ,对它们各自进行了电泳以分析其亚基构成并进行磷酸化程度定量分析 ,结果表明 NF分子由大中小三种亚基构成 ,胞体和轴突两种 NF的磷酸化程度存在显著性差异。这一方法将对阐明某些神经... 详细信息

从猪神经元胞体和轴突中分离提取了神经细丝 (NF) ,对它们各自进行了电泳以分析其亚基构成并进行磷酸化程度定量分析 ,结果表明 NF分子由大中小三种亚基构成 ,胞体和轴突两种 NF的磷酸化程度存在显著性差异。这一方法将对阐明某些神经元退行性变疾病的机理提供有用的线索。

关键词：神经细丝亚基磷酸化神经元胞体组分

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