检索结果-内蒙古大学图书馆

SARS患者脾内IL-6I、FN-β和IP-10的免疫组织化学观察及定量分析

解剖学报 2009年第3期40卷 458-462页

作者：陈丽唐军民战军唐岩李枫任彩霞梅芳北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室

目的通过对严重急性呼吸综合征（SARS）患者脾内白细胞介素6（IL-6）,干扰素β（IFN-β）和干扰素γ诱导蛋白10（IP-10）的免疫组织化学结果分析,深入探讨SARS患者脾组织的病理变化及其发病机制。方法通过免疫组织化学技术观察6例SARS... 详细信息

目的通过对严重急性呼吸综合征（SARS）患者脾内白细胞介素6（IL-6）,干扰素β（IFN-β）和干扰素γ诱导蛋白10（IP-10）的免疫组织化学结果分析,深入探讨SARS患者脾组织的病理变化及其发病机制。方法通过免疫组织化学技术观察6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾组织细胞内IL-6、IFN-β和IP-10的表达情况,并进行图像分析。结果SARS患者脾红髓内含大量IL-6阳性细胞,阳性产物呈团块状分布于细胞质和细胞核。图像分析结果显示,SARS患者脾红髓内IL-6阳性细胞的平均吸光度值（AA）与正常对照组比较,有显著性差异（P〈0.05）;SARS患者脾红髓内阳性细胞的细胞核、细胞质呈IFN-β阳性,阳性产物呈棕黄色团块状,图像分析结果显示,SARS患者脾组织内IFN-β阳性细胞的AA值与正常对照组比较,有显著性差异（P〈0.05）;SARS患者脾红髓内含大量IP-10阳性细胞,阳性产物呈棕黄色团块状,分布于细胞核和细胞质。图像分析结果显示,SARS患者脾组织内IP-10阳性细胞的AA值与正常对照组比较,有显著性差异（P〈0.05）。3种细胞因子在SARS患者残存的脾白髓内均呈阴性。结论SARS患者脾内细胞的IL-6、IFN-β和IP-10反应均相对增强,提示SARS患者脾组织的病理性损伤以及免疫功能缺陷可能与上述促炎症因子、免疫抑制因子及趋化因子的相对增多有关。

关键词：严重急性呼吸综合征白细胞介素6 干扰素β 干扰素γ诱导蛋白10 脾免疫组织化学人

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细胞分选蛋白17多克隆抗体的制备和鉴定及在小鼠体内的表达

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解剖学报 2012年第6期43卷 756-761页

作者：程媛牛苗苗马博唐岩李枫战军北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100191

目的制备细胞分选蛋白家族成员细胞分选蛋白17(SNX17)的多克隆抗体,为深入研究SNX17奠定基础。方法 PCR扩增编码人SNX17C端270个氨基酸的cDNA片段,DNA重组入原核表达载体pGEX-4T-1和pMal-C2x,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,异丙基-β-D-... 详细信息

目的制备细胞分选蛋白家族成员细胞分选蛋白17(SNX17)的多克隆抗体,为深入研究SNX17奠定基础。方法 PCR扩增编码人SNX17C端270个氨基酸的cDNA片段,DNA重组入原核表达载体pGEX-4T-1和pMal-C2x,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导分别表达GST-SNX17C端和MBP-SNX17C端融合蛋白。采用电泳纯化的GST-SNX17C端融合蛋白于第1天,第28天,第42天3次免疫新西兰白兔。采用亲和层析和分子筛纯化的MBP-SNX17C端融合蛋白,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中多克隆抗体的效价,于第56天取兔全血,析出血清,纯化IgG。免疫印迹法检测SNX17兔多克隆抗体的有效性和特异性,免疫印迹法检测小鼠30种器官中SNX17的表达。结果成功构建了pGEX-4T-1/SNX17C端和pMal-C2x/SNX17C端的表达质粒,成功诱导表达纯化了GST-SNX17C端和MBP-SNX17C端融合蛋白,纯化后的IgG可识别COS-7细胞中外源转入的GFP-SNX17,并与GFP抗体识别的条带在同一位置上,通过SNX17C端多克隆抗体检测了SNX17在小鼠子宫、卵巢和乳腺中表达高而在睾丸、前列腺和输精管中表达低。结论成功制备特异而有效的兔抗人SNX17C端多克隆抗体,此抗体可用于免疫印迹法分析,初步确定了SNX17在小鼠器官中的表达谱。

关键词：细胞分选蛋白17 蛋白纯化多克隆抗体免疫印迹法小鼠新西兰大白兔

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PI3K/Akt/mTOR自噬通路在人参皂苷Rg1延缓D-gal诱导的卵巢早衰小鼠模型卵巢早衰中的作用

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中国中药杂志 2020年第24期45卷 6036-6042页

作者：刘小虎赵志慧周玥王翠丽韩艳军周雯大理大学基础医学院组织学与胚胎学教研室云南大理671000

研究磷脂酰肌醇3-激酶(posphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)自噬信号通路在人参皂苷Rg_(-1)(ginsenoside Rg_(-1),Rg_(-1))延缓D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的卵巢早衰小鼠模型卵巢早衰中的作用。将SPF级雌性BALB/c小鼠54只随机分成PBS组、D-gal组、Rg_(-1)组。D-gal组给予颈背部皮下注射D-半乳糖200 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药42 d;PBS组给予颈背部注射等时等量磷酸盐缓冲液(PBS),连续注射42 d;Rg_(-1)组在D-gal组处理基础上,于第15天开始给予腹腔注射Rg_(-1)20 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药28 d,同时D-gal组和PBS组也在第15天开始给予腹腔注射等时等量PBS,连续给药28 d。给药后,检测小鼠动情周期改变,卵巢SA-β-Gal苷酶染色检测卵巢衰老状态改变,Western blot法检测PI3K,Akt,mTOR,S6k,LC3-Ⅱ,P16^(INK4a)蛋白表达的改变。荧光定量PCR法检测衰老调控因子PI3K,Akt,mTOR,S6k,P16^(INK4a)mRNA表达的改变。研究结果显示,与PBS组比较,D-gal组第3周开始出现动情周期紊乱,卵巢SA-β-半乳糖苷酶染色阳性率升高,衰老标记物P16^(INK4a)表达量升高,自噬信号分子LC3-Ⅱ表达量降低;Rg_(-1)作用后,Rg_(-1)组卵巢SA-β-半乳糖苷酶染色阳性率降低,衰老标记物P16^(INK4a)表达量低于D-gal组,自噬信号分子LC3-Ⅱ表达量高于D-gal组。与PBS组比较,D-gal组PI3K,Akt,mTOR,S6k蛋白和mRNA表达上调,Rg_(-1)组Akt,mTOR,S6k蛋白表达上调,PI3K,mTOR mRNA表达上调。Rg_(-1)作用后,Rg_(-1)组PI3K,Akt,mTOR,S6k蛋白表达量低于D-gal组,Akt,mTOR,S6k mRNA表达量低于D-gal组。研究结果提示,Rg_(-1)具有延缓D-gal诱导的卵巢早衰小鼠模型中卵巢早衰的作用,PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路在其中发挥重要功能。

关键词：人参皂苷Rg_(1) 卵巢早衰 PI3K Akt mTOR 自噬 D-gal

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红毛五加多糖对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和核转录因子p53、c-myc蛋白表达的影响

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解剖学报 2012年第3期43卷 387-392页

作者：程媛战军唐岩李枫唐军民北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100191

目的探讨红毛五加多糖(AGP)对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖以及对细胞核转录因子p53、c-myc表达的影响。方法在DMEM培养基内加入不同浓度AGP(0.15625、0.3125、0.625、1.25、2.5 g/L)体外培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231 1d、3d、5d、7d... 详细信息

目的探讨红毛五加多糖(AGP)对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖以及对细胞核转录因子p53、c-myc表达的影响。方法在DMEM培养基内加入不同浓度AGP(0.15625、0.3125、0.625、1.25、2.5 g/L)体外培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231 1d、3d、5d、7d后,用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒WST-1测定人乳腺癌细胞的增殖,倒置显微镜观察其形态变化;用免疫荧光法、免疫印迹法检测人乳腺癌细胞凋亡相关蛋白p53、c-myc的表达。结果 WST-1法显示,不同浓度AGP作用3d、5d、7d后对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的增殖具有抑制作用,与阴性对照组相比差异有显著性(P<0.05);抑制率与AGP剂量、作用时间呈依赖性。免疫荧光法及免疫印迹法显示,AGP作用于人乳腺癌细胞系MDA-MB-231后,其细胞的c-myc表达明显减弱,并向细胞质内聚集;而免疫印迹法显示p53表达显著增强。结论 AGP具有抑制人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖的作用,这可能与AGP下调c-myc表达、上调p53表达有关。

关键词：红毛五加多糖乳腺癌细胞株MDA-MB-231 c—myc p53 WST-1 免疫荧光法免疫印迹法人

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胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应

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解剖学报 2013年第2期44卷 219-223页

作者：吴艳芳郭林霞乐晓萍丁一郑州大学基础医学院组织学胚胎学教研室郑州450001 新乡医学院基础医学院人体解剖学实验室河南新乡453003

目的探讨胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ(Reg Ⅰ)基因转录因子的效应。方法应用巢式PCR技术从胃癌细胞SGC7901基因组DNA扩增Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段,将该片段插入pMD19-T载体,序列分析鉴定。应用随机引物法以地高辛分别标记1414bp... 详细信息

目的探讨胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ(Reg Ⅰ)基因转录因子的效应。方法应用巢式PCR技术从胃癌细胞SGC7901基因组DNA扩增Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段,将该片段插入pMD19-T载体,序列分析鉴定。应用随机引物法以地高辛分别标记1414bp及其HindⅢ酶切800bp和614bp片段,经灵敏度检测后,作为探针。应用Genomatix MatInspector在线分析软件分析Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段的转录因子结合位点。分别以10-7mol/L和10-8mol/L胃泌素G-17处理胃癌细胞SGC7901 48h,提取核蛋白。应用DNA-蛋白质印迹法(Southernblotting),分别以地高辛标记的1414bp、800bp和614bp片段为探针检测胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应。结果 1414bp探针可检测到20条蛋白主带。胃泌素孵育后,带型没有变化,但是一些条带的灰度值改变,带9、12、13、14、15和16的灰度值明显降低(P<0.05);不同浓度胃泌素处理组之间上述6个条带的灰度值差异不明显(P>0.05)。614bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和13,胃泌素处理后,此3条主带的灰度值明显降低(P<0.05)。800bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和14,胃泌素处理后,仅带14的灰度值明显降低(P<0.05)。614bp和800bp探针均未检出带15和带16。结论胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因表达由多个转录因子协同调控。降低几个转录因子的结合活性可能是胃泌素上调胃癌细胞SGC7901Reg Ⅰ基因表达的途径之一。

关键词： Reg I基因胃泌素转录因子胃癌细胞 DNA-蛋白质印迹法

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肝细胞生长因子和C-met在肝纤维化肝部分切除后残余肝组织中的表达

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解剖学报 2010年第1期41卷 109-113页

作者：刘恒兴胡群员岳学强韩金红新乡医学院解剖学教研室河南新乡453003 河南职工医学院组织学胚胎学教研室郑州450003

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和C-met在纤维化肝部分切除后残余肝组织中的表达变化。方法雄性SD大鼠130只,随机分为正常组(n=7)、正常肝部分切除组(n=50)、肝纤维化组(n=7)和纤维化肝部分切除组(n=66)。正常肝部分切除组和纤维化肝部分... 详细信息

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和C-met在纤维化肝部分切除后残余肝组织中的表达变化。方法雄性SD大鼠130只,随机分为正常组(n=7)、正常肝部分切除组(n=50)、肝纤维化组(n=7)和纤维化肝部分切除组(n=66)。正常肝部分切除组和纤维化肝部分切除组分别在术后12h、1d、3d、5d、7d和14d取材,运用免疫组织化学和Western blotting方法,检测残肝组织中HGF、C-met的表达。结果免疫组织化学显示,正常肝部分切除组,HGF表达于术后12h达高峰,并维持高峰平台,7d后逐渐降低,于14d接近术前水平;C-met术后迅速上升,3d达到高峰,而后逐步下降,14d降回术前水平。纤维化肝部分切除组,HGF表达于术后迅速下降,12h又迅速上升,于1d时达高峰,然后逐步下降,14d降至最低点;C-met术后迅速下降,12h开始缓慢下降,于术后3d达最低点,后缓慢上升,7d又迅速上升,14d达最高点。Western blotting显示,HGF、C-met蛋白条带变化规律与免疫组织化学结果吻合。结论HGF和C-met同时高水平表达有利于肝细胞的分裂增殖,提示HGF和C-met表达不同步,可能是纤维化肝术后再生困难的重要原因。

关键词：肝纤维化肝部分切除肝细胞生长因子 C-met 免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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P型铜转运ATP酶和增殖细胞核抗原在大、小鼠肝的表达

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解剖学杂志 2010年第2期33卷 179-181页

作者：侯锐曹兴玥王国栋王杰玉李勇莉高福莲新乡医学院组织学与胚胎学教研室新乡453003

目的：研究P型铜转运ATP酶（ATP7B）与增殖细胞核抗原（PCNA）在大鼠和小鼠肝组织中的表达.方法：采用免疫组织化学法检测肝中ATP7B与PCNA的表达.结果：ATP7B在大鼠和小鼠的肝细胞质表达,表达较广泛.肝细胞PCNA的表达强弱不一,强阳性细... 详细信息

目的：研究P型铜转运ATP酶（ATP7B）与增殖细胞核抗原（PCNA）在大鼠和小鼠肝组织中的表达.方法：采用免疫组织化学法检测肝中ATP7B与PCNA的表达.结果：ATP7B在大鼠和小鼠的肝细胞质表达,表达较广泛.肝细胞PCNA的表达强弱不一,强阳性细胞较少,大鼠和小鼠肝的ATP7B和PCNA积分光密度间的差异均无统计学意义;在大鼠或小鼠肝,ATP7B与PCNA的免疫反应阳性物积分光密度间无显著相关性.结论：ATP7B和PCNA在大鼠和小鼠肝组织均有表达,表达的关联性不明显.

关键词： P型铜转运ATP酶增殖细胞核抗原肝小鼠大鼠

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SIRT1在人参皂苷Rg1延缓D-gal诱导的卵巢早衰小鼠模型卵巢早衰中的作用

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中国中药杂志 2020年第19期45卷 4699-4704页

作者：刘小虎赵志慧周玥王翠丽韩艳军周雯大理大学基础医学院组织学与胚胎学教研室云南大理671000

探索沉默信息调节因子2相关酶1(slient mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)在人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,Rg1)延缓D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的卵巢早衰小鼠模型卵巢早衰中的作用。将SPF级雌性BALB/c小鼠54只随机分成PBS组、D-gal组、Rg1组。D-gal组给予颈背部皮下注射D-半乳糖200 mg·kg^-1·d^-1,连续给药42 d;PBS组给予颈背部注射等时等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS),连续注射42 d;Rg1组在D-gal组处理基础上,于第15天开始给予腹腔注射Rg120 mg·kg^-1·d^-1,连续给药28 d,同时D-gal组和PBS组也在第15天开始给予腹腔注射等时等量PBS,连续给药28 d;给药后,检测小鼠体质量变化和卵巢质量系数改变,检测外周血雌二醇(estradiol 2,E2)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)水平,HE染色法检测卵巢形态学改变,荧光定量PCR和Western blot法检测衰老调控因子SIRT1表达的改变。结果显示,与PBS组比较,D-gal组小鼠体质量增长率明显减缓,卵巢质量系数下降;血清E2,LH,SOD,CAT水平明显降低,FSH水平明显升高。Rg1作用后,Rg1组体质量增长率,卵巢质量系数以及血清E2,LH,SOD,CAT水平均高于D-gal组,FSH水平低于D-gal组。HE染色检测显示PBS组卵巢卵泡形态结构正常;D-gal组卵泡数量减少,黄体空泡化明显,闭锁卵泡数量增多;与D-gal组比较,Rg1组卵泡数量增多,黄体数量减少。与PBS组比较,D-gal组SIRT1表达下调;与D-gal组比较,Rg1组SIRT1表达上调。研究结果提示,Rg1具有延缓D-gal诱导的卵巢早衰小鼠模型中卵巢早衰的作用,衰老调控因子SIRT1在其中发挥重要功能。

关键词：人参皂苷Rg1 卵巢早衰 SIRT1 D-半乳糖

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透射电镜观察缺血再灌注对大鼠心脏胶原的影响

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解剖学杂志 2004年第4期27卷 366-369页

作者：王琦郭志坤韩金珠新乡医学院组织学与胚胎学教研室新乡453003

目的 :探讨正常大鼠心肌间质胶原纤维的形态及缺血、缺血—再灌注对其的影响。方法 :成年大鼠随机分成对照组、缺血组、缺血—再灌注组。夹闭左冠状动脉旋支制备缺血模型。在左冠状动脉旋支分布的左室前壁取心肌 ,透射电镜观察心肌间质... 详细信息

目的 :探讨正常大鼠心肌间质胶原纤维的形态及缺血、缺血—再灌注对其的影响。方法 :成年大鼠随机分成对照组、缺血组、缺血—再灌注组。夹闭左冠状动脉旋支制备缺血模型。在左冠状动脉旋支分布的左室前壁取心肌 ,透射电镜观察心肌间质胶原纤维。结果 :对照组胶原纤维含量丰富 ;缺血组胶原纤维发生了形态改变 ;缺血—再灌注组胶原纤维数量明显减少。结论 :缺血使心肌间质胶原纤维破坏 ,再灌注使其破坏加重。心肌间质胶原的破坏是影响心功能恢复的原因之一。

关键词：透射电镜缺血再灌注大鼠心脏胶原心肌缺血

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硒对氧化偶氮甲烷所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部促肾上腺皮质激素阳性细胞的影响

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解剖学报 2008年第4期39卷 493-497页

作者：孙红亚唐军民唐岩甄昱扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室扬州225001 北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的观察硒对致癌剂氧化偶氮甲烷(AOM)所致大鼠结肠癌形成过程中,垂体远侧部ACTH阳性细胞的影响。方法随机将20只3周龄SPF级断乳雄性SD大鼠分为正常对照组、实验对照组、致癌剂前补硒组、致癌剂后补硒组。用AOM(15mg/kg)每周腹腔注射,连... 详细信息

目的观察硒对致癌剂氧化偶氮甲烷(AOM)所致大鼠结肠癌形成过程中,垂体远侧部ACTH阳性细胞的影响。方法随机将20只3周龄SPF级断乳雄性SD大鼠分为正常对照组、实验对照组、致癌剂前补硒组、致癌剂后补硒组。用AOM(15mg/kg)每周腹腔注射,连续2周,诱导大鼠结肠癌形成。亚硒酸钠(Na2SeO3)水溶液(4mg/L)分别在AOM前、后干预,并持续至实验结束。各组均于34周后取大鼠垂体,用免疫组织化学SP法,观察垂体远侧部ACTH阳性细胞的形态结构及免疫组织化学反应强度,并进行图像分析。结果亚甲基蓝染色光镜下观察,可见AOM腹腔注射的大鼠结肠黏膜出现异常隐窝(AC)和异常隐窝灶(ACF)。免疫组织化学法显示,实验对照组大鼠垂体远侧部ACTH阳性细胞与正常对照组比较,阳性反应显著性增强(P<0.01);硒干预的各组与实验对照组相比,ACTH阳性细胞的阳性反应进一步增强(P<0.01)。结论硒可增强AOM所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部ACTH阳性细胞的功能。

关键词：结肠癌亚硒酸钠 ACTH阳性细胞垂体氧化偶氮甲烷免疫组织化学大鼠

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