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解剖学报 2007年第2期38卷 238-240页

作者：刘影唐军民唐岩常昕莹李枫北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的探索CD20阳性细胞在人早期胚中的分布及意义。方法用免疫组织化学SP法对10例6—7周人早期胚内CD20阳性细胞进行定位观察。结果 ***20阳性细胞局限于人早期胚肝内；2．在人胚肝内，CD20阳性颗粒主要局限于B细胞的细胞核内，呈不均... 详细信息

目的探索CD20阳性细胞在人早期胚中的分布及意义。方法用免疫组织化学SP法对10例6—7周人早期胚内CD20阳性细胞进行定位观察。结果 ***20阳性细胞局限于人早期胚肝内；2．在人胚肝内，CD20阳性颗粒主要局限于B细胞的细胞核内，呈不均质的颗粒状分布，细胞质和细胞膜呈阴性反应。结论在人早期胚内，CD20定位于肝内的B细胞，并分布在细胞核内；该研究结果为深入探讨CD20阳性细胞的功能和作用机制提供了重要线索。

关键词： CD20 B细胞免疫组织化学人早期胚

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人肝癌细胞RNA电转染至未成熟树突状细胞的扫描电镜观察

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解剖学报 2007年第3期38卷 334-338页

作者：战军唐军民唐岩北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的观察电转染人肝癌细胞RNA前后未成熟树突状细胞(imDCs)的表面形态学变化。方法取人外周血,纯化获取单核细胞后诱导其成为imDCs,然后通过电转染方法将人肝癌细胞RNA导入其内;用7种特异性抗体的免疫细胞化学技术对电转染前后的树突状... 详细信息

目的观察电转染人肝癌细胞RNA前后未成熟树突状细胞(imDCs)的表面形态学变化。方法取人外周血,纯化获取单核细胞后诱导其成为imDCs,然后通过电转染方法将人肝癌细胞RNA导入其内;用7种特异性抗体的免疫细胞化学技术对电转染前后的树突状细胞鉴定后,进行扫描电镜观察。结果电转染人肝癌细胞RNA后imDCs内TERT表达显著增加,其他分子表达无显著改变。电转染前,imDCs多呈圆形、椭圆形或不规则形,体积较单核细胞大,但大小不均,在细胞表面可见长短不一的微绒毛,或/和许多泡状、面纱状或云朵状细胞突起;电转染后,可在imDCs表面见到由于电转染所造成的孔,并有一定数量的细胞融合和细胞死亡,但绝大多数细胞可恢复至正常结构状态。结论电转染打孔可为外源物质(如肝癌细胞RNA或其他肿瘤细胞RNA)导入细胞内提供可行性,并为进一步利用imDCs制作肿瘤疫苗,开展肿瘤的生物治疗提供一种可行方案。

关键词：电转染肝癌细胞RNA 未成熟树突状细胞扫描电镜人

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小鼠短髓襻肾单位在外髓的分布

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解剖学报 2012年第2期43卷 246-249页

作者：张萍任昊温昱梁非翟效月辽宁医学院组织学胚胎学教研室辽宁锦州121001 中国医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室沈阳110001

目的肾外髓间质渗透梯度形成的机制与髓襻上皮转运功能及其毗邻关系有密切关系,本研究拟建立短髓袢肾单位在外髓的走行规律。方法 C57/BL/6J小鼠3只,灌流固定后取肾组织块并树脂812包埋,垂直肾长轴连续半薄切片,从肾被膜到内外髓交界处... 详细信息

目的肾外髓间质渗透梯度形成的机制与髓襻上皮转运功能及其毗邻关系有密切关系,本研究拟建立短髓袢肾单位在外髓的走行规律。方法 C57/BL/6J小鼠3只,灌流固定后取肾组织块并树脂812包埋,垂直肾长轴连续半薄切片,从肾被膜到内外髓交界处,共得到1 200张2.5μm厚的连续切片,显微镜下获取数字图像,计算机配准,C语言编程,进而追踪来自皮质浅层和中层的120个短髓襻肾单位。结果短髓襻肾单位的53%起于肾皮质外1/3,47%起于中间肾皮质。前者髓襻襻曲分布在外髓内带中部同一水平,其襻曲或完全由细段上皮构成,或由髓襻降支细段上皮与升支粗段上皮移行构成;来自中间皮质的短髓襻襻曲位于外髓内带内侧1/2的不同水平,其深度与其肾小球在中间皮质的深度成正比。其襻曲由髓襻升支粗段上皮构成,并在襻曲前构成约50～450μm长的髓襻降支。最深的襻曲在外髓内带弯曲走行。结论髓袢襻曲在外髓的位置及上皮类型不同,提示外髓不同区域的小管对超滤液重吸收的成分也有所区别,对外髓深部渗透梯度增高的形成产生一定的影响;而襻曲的位置和上皮构成与肾小球在皮质的位置相关,提示肾小球的滤过与肾小管的重吸收功能有整体的调节。

关键词：髓襻肾三维重建小鼠

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SARS患者脾树突状细胞和巨噬细胞的免疫组织化学观察

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解剖学报 2007年第2期38卷 200-204页

作者：战军唐军民唐岩李枫梅芳王国涛顾江北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾树突状细胞、巨噬细胞数量和巨噬细胞大小进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据。方法通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾S-100+、CD68+、HLA-DR+、... 详细信息

目的对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾树突状细胞、巨噬细胞数量和巨噬细胞大小进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据。方法通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾S-100+、CD68+、HLA-DR+、CD83+细胞的分布进行观察,并采用图像分析系统对阳性细胞数量或体积进行分析。结果SARS死亡患者脾内白髓中S-100+树突状细胞数较正常平均减少80.49%,有的甚至完全消失;脾红髓中CD68+巨噬细胞数量较正常平均减少39.48%,体积是正常平均值的2.21倍。脾白髓中HLA-DR+抗原呈递细胞明显减少。SARS死亡患者脾与正常脾中均无CD83+成熟树突状细胞。结论SARS患者免疫系统中抗原呈递系统遭到严重破坏,支持SARS是一种病毒性免疫缺陷病。SARS病毒不能引发树突状细胞成熟。巨噬细胞的体积增大处于激活状态,提示巨噬细胞在SARS发病机制中起一定作用。

关键词：严重急性呼吸综合征(SARS) 树突状细胞巨噬细胞免疫组织化学脾人

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巨噬细胞条件培养液对原代培养小鼠成肌细胞生长的影响

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解剖学报 2007年第3期38卷 320-324页

作者：舒丹毅唐军民唐岩李枫北京大学基础医学院组织学胚胎学教研室北京100083

目的观察小鼠巨噬细胞条件培养液对小鼠成肌细胞生长的影响。方法小鼠腹腔内连续3d注射肌匀浆和淀粉混合物,然后分离小鼠腹腔巨噬细胞,在无血清培养液中培养48h后收集上清。取生后5d小鼠的成肌细胞,在含10%血清的DMEM/F12培养液中培养36... 详细信息

目的观察小鼠巨噬细胞条件培养液对小鼠成肌细胞生长的影响。方法小鼠腹腔内连续3d注射肌匀浆和淀粉混合物,然后分离小鼠腹腔巨噬细胞,在无血清培养液中培养48h后收集上清。取生后5d小鼠的成肌细胞,在含10%血清的DMEM/F12培养液中培养36-48h后,将血清浓度降低至0.5%。将巨噬细胞培养上清加入低浓度血清培养的成肌细胞中,作用72h后收集细胞,通过Wright染色、LDH细胞化学和免疫细胞化学方法观察成肌细胞的生长情况。结果巨噬细胞条件培养液能够在低浓度血清的条件下维持成肌细胞的正常形态和活性,并促进成肌细胞增殖。实验组LDH阳性细胞与对照组相比,其平均吸光度与积分吸光度均存在极显著性差异(分别为P<0.001和P<0.000 1)。免疫细胞化学显示,实验组desmin阳性细胞数明显多于对照组。结论巨噬细胞条件培养液中含有促进小鼠成肌细胞生长的因子。

关键词：巨噬细胞成肌细胞体外培养免疫细胞化学小鼠

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大鼠肌卫星细胞成肌分化的体外实验研究

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解剖学报 2006年第4期37卷 455-457页

作者：张志谢富康冯英中山大学基础医学院组织学胚胎学教研室广州510080

目的探讨肌卫星细胞体外分化和烟碱型乙酰胆碱受体表达。方法采用胰蛋白酶消化SD乳鼠的骨骼肌卫星细胞,差速贴壁法纯化,进行体外培养,观察卫星细胞的分化过程,利用免疫组织化学方法进行鉴定。用银环蛇毒素鉴定细胞表面的烟碱型乙酰胆碱... 详细信息

目的探讨肌卫星细胞体外分化和烟碱型乙酰胆碱受体表达。方法采用胰蛋白酶消化SD乳鼠的骨骼肌卫星细胞,差速贴壁法纯化,进行体外培养,观察卫星细胞的分化过程,利用免疫组织化学方法进行鉴定。用银环蛇毒素鉴定细胞表面的烟碱型乙酰胆碱受体,并用乙酰胆碱刺激细胞观察其收缩功能。结果体外培养的肌卫星细胞分化为成肌细胞,融合成肌管。α-sarcomeric actin、skeletal myosin和desmin抗体鉴定为阳性。ACh可刺激卫星细胞形成的肌管收缩。卫星细胞无明显的N-ACh受体表达;而卫星细胞形成的肌管经分化培养后N-ACh受体呈局部块状聚集。结论肌卫星细胞分化后形成的肌管具有收缩功能,并且在分化过程中逐渐合成烟碱型乙酰胆碱受体。

关键词：骨骼肌卫星细胞成肌细胞乙酰胆碱受体差速贴壁法

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严重急性呼吸综合征患者肾内免疫细胞的免疫组织化学观察

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解剖学报 2008年第2期39卷 227-230页

作者：任彩霞唐军民唐岩李枫毕振伍战军北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者肾内免疫细胞的免疫组织化学变化并对其作用进行分析。方法应用免疫组织化学方法显示6例SARS死亡患者和3例意外死亡者肾内免疫细胞,进行其形态观察,并采用图像分析系统进行定量分析。结果6例SARS... 详细信息

目的探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者肾内免疫细胞的免疫组织化学变化并对其作用进行分析。方法应用免疫组织化学方法显示6例SARS死亡患者和3例意外死亡者肾内免疫细胞,进行其形态观察,并采用图像分析系统进行定量分析。结果6例SARS患者肾内CD68+单核/巨噬细胞显著增多(P<0.05),CD3+T细胞、CD20+B细胞和S-100+树突状细胞与对照组无差别(P>0.05)。结论SARS患者肾内单核/巨噬细胞为主要免疫应答细胞,提示单核/巨噬细胞在SARS肾病变中起着重要作用。而T细胞、B细胞以及树突状细胞可能受到SARS冠状病毒的攻击,其功能可能遭到破坏。

关键词：严重急性呼吸综合征(SARS) 肾免疫细胞免疫组织化学人

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胚胎干细胞源性表皮干细胞对小鼠全层皮肤缺损的修复

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解剖学报 2007年第3期38卷 296-299页

作者：刘爱军黄锦桃李海标中山大学基础医学院组织学胚胎学教研室广州510080

目的研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨ES细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用。方法以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层... 详细信息

目的研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨ES细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用。方法以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层皮肤缺损创面。术后1-8周连续取材,HE染色,β1整合素、CK15、CK19、CK10、CEA免疫组织化学和荧光双标显色。结果术后2周,创面完全长合,较厚的新生皮覆盖创面,基底层细胞增生,形成许多大小不一的细胞柱伸向真皮层,真皮层中可见管腔样结构,免疫荧光双标显示,1-3周新生表皮中可见核标记的细胞呈β1整合素、CK15阳性,真皮层中带有核标记的管状或泡状结构呈β1整合素、CK15阳性;4周后新生表皮开始变薄,基底层细胞呈CK19、CK10阳性,汗腺样结构呈CEA阳性,6-8周新生表皮下可见毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构。结论ES细胞源性表皮干细胞植入小鼠全层皮肤缺损创面,可修复缺损的表皮,并在其下真皮层内具有分化为汗腺样、毛囊样和皮脂腺样结构的潜能。

关键词：胚胎干细胞表皮干细胞定向分化皮肤附属结构免疫组织化学人羊膜小鼠

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整体显示大鼠骨骼和软骨的复合染色法

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解剖学报 2006年第1期37卷 117-119页

作者：赵荧张栩胤北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的探讨显示不同时期大鼠（胎鼠、仔鼠、近成年鼠）骨骼和软骨的复合染色方法。方法将大鼠整体标本去除皮肤、皮下脂肪组织及内脏，固定于95％酒精；丙酮脱脂；0．1％茜素红S和0．15％-0．3％阿利新蓝染骨骼和软骨；0．5％。2％氢氧化... 详细信息

目的探讨显示不同时期大鼠（胎鼠、仔鼠、近成年鼠）骨骼和软骨的复合染色方法。方法将大鼠整体标本去除皮肤、皮下脂肪组织及内脏，固定于95％酒精；丙酮脱脂；0．1％茜素红S和0．15％-0．3％阿利新蓝染骨骼和软骨；0．5％。2％氢氧化钾溶液分色和透明。结果含钙骨骼呈玫瑰红色，软骨呈蓝色，其他组织均为无色透明状。结论去除皮肤、皮下脂肪组织及内脏的整体大鼠标本采用茜素红S和阿利新蓝复合染色法，可使骨和软骨获得最佳染色效果。

关键词：骨骼软骨茜素红S 阿利新蓝复合染色大鼠

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甲强龙、电针联合羊膜上皮细胞移植对脊髓损伤大鼠轴浆运输功能及GFAP表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2010年第4期36卷 620-624,F0002页

作者：李一帆陈东薛辉刘佳梅吉林大学基础医学院组织学与胚胎学教研室吉林长春130021 长春中医药大学基础医学院解剖学教研室吉林长春130117 广东医学院组织学与胚胎学教研室广东湛江524023

目的:探讨甲强龙(MP)、电针与羊膜上皮细胞(AECs)联合治疗对脊髓损伤(SCI)大鼠轴浆运输功能的影响,为临床治疗脊髓损伤寻找一种更为有效的方法。方法:将60只成年雌性Wistar大鼠随机分成5组,每组12只。脊髓损伤对照组:做脊髓损伤模型,不... 详细信息

目的:探讨甲强龙(MP)、电针与羊膜上皮细胞(AECs)联合治疗对脊髓损伤(SCI)大鼠轴浆运输功能的影响,为临床治疗脊髓损伤寻找一种更为有效的方法。方法:将60只成年雌性Wistar大鼠随机分成5组,每组12只。脊髓损伤对照组:做脊髓损伤模型,不进行治疗;甲强龙组:脊髓损伤后,用大量甲强龙药物冲击治疗,共3d;甲强龙+电针组:在甲强龙治疗基础上,脊髓损伤后4h,行华佗夹脊穴电针治疗;甲强龙+电针+AECs组:在甲强龙+电针组基础上,脊髓损伤后第7天,在脊髓损伤处移植大鼠AECs联合治疗;假手术组:只打开椎板,暴露脊髓,不造成脊髓损伤。各组每隔6d进行行为学观察(BBB评分),术后30d行荧光红(FR)顺行示踪和GFAP免疫荧光组织化学观察。结果:BBB评分显示,脊髓损伤后经过治疗各组都有不同程度的后肢功能恢复,其中以甲强龙+电针+AECs组恢复最为明显,第30天,BBB评分可恢复到15.23±1.01。荧光红(FR)顺行示踪,甲强龙+电针+AECs组可见大量有序的FR阳性神经纤维,神经示踪剂能被运输到脊髓损伤区远侧端较远的距离;100倍荧光显微镜下观察,损伤区FR阳性神经纤维数为312.67±34.06,与其他治疗组比较差异有显著性(P<0.01);GFAP表达结果,各组GFAP阳性细胞较假手术组均明显增高,而甲强龙+电针+AECs组的表达量低于其他损伤组,200倍荧光显微镜下观察,损伤区GFAP阳性细胞数为633.61±54.4,与其他治疗组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:甲强龙、电针与AECs联合治疗脊髓损伤能够有效地抑制星形胶质细胞的过度增生,恢复脊髓轴浆运输功能,促进神经纤维再生。

关键词：甲强龙电针羊膜上皮细胞轴浆运输胶质纤维酸性蛋白

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