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河北医科大学学报 2021年第12期42卷 1475-1481页

作者：闻松杨长坤(综述) 江平(审校) 河北医科大学基础医学院河北石家庄050017 河北医科大学药理学教研室河北石家庄050017

心血管疾病是造成人类死亡的主要原因之一,研究显示5-羟色胺(5-hydroxytryptamin,5-HT)与心血管疾病密切相关。笔者总结了5-HT在多种心血管疾病中的作用及其机制,并对5-HT受体拮抗剂及其再摄取抑制剂(selective serotonin reuptake inhi... 详细信息

心血管疾病是造成人类死亡的主要原因之一,研究显示5-羟色胺(5-hydroxytryptamin,5-HT)与心血管疾病密切相关。笔者总结了5-HT在多种心血管疾病中的作用及其机制,并对5-HT受体拮抗剂及其再摄取抑制剂(selective serotonin reuptake inhibitors,SSRIs)在心血管疾病中的应用现状进行综述,为心血管疾病的治疗提出新靶点和新思路。

关键词：心血管疾病 5-羟色胺 5-羟色胺受体拮抗剂

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γ-氨基丁酸Rho2受体在神经母细胞瘤细胞中的稳定表达及其在谷氨酸盐致细胞死亡中的作用

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新乡医学院学报 2019年第1期36卷 13-18页

作者：李敏楚人杰张姣韩思乐李超堃新乡医学院基础医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003

目的构建人γ-氨基丁酸(GABA) Rho2受体(GABRR2)真核表达载体,并转染神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,建立稳定表达细胞株,探讨GABRR2在谷氨酸盐致细胞死亡中的作用。方法采用快速克隆方法将人脑组织GABRR2基因克隆至p IRES2-eGFP质粒,构建重... 详细信息

目的构建人γ-氨基丁酸(GABA) Rho2受体(GABRR2)真核表达载体,并转染神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,建立稳定表达细胞株,探讨GABRR2在谷氨酸盐致细胞死亡中的作用。方法采用快速克隆方法将人脑组织GABRR2基因克隆至p IRES2-eGFP质粒,构建重组质粒p IRES2-eGFP-Rho2,利用X-fect试剂盒将其转染至SH-SY5Y细胞中,使用遗传霉素进行筛选,建立稳定表达p IRES2-eGFP-Rho2的SH-SY5Y细胞株。使用流式细胞术检测稳定转染过表达p IRES2-eGFP-Rho2的细胞,利用免疫荧光法鉴定稳定转染的SH-SY5Y细胞中p IRES2-eGFP-Rho2的表达。将野生型SH-SY5Y细胞分为A1、B1、C1组,稳定表达p IRES2-eGFP-Rho2的SH-SY5Y细胞分为A2、B2、C2组,每组设3个平行孔,其中A1、A2组细胞使用达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)孵育,B1、B2组细胞使用含有谷氨酸盐的DMEM孵育,C1、C2组细胞使用含有谷氨酸盐和GABA的DMEM孵育,将各组细胞置于细胞培养箱中培养24 h,应用乳酸脱氢酶试剂盒检测各组细胞的存活率。结果重组真核表达载体构建正确,获得了稳定表达p IRES2-eGFP-Rho2的细胞株。A1、B1、C1组细胞存活率比较差异有统计学意义(F=5. 542,P <0. 05);其中B1、C1组细胞存活率显著低于A1组(P <0. 05),C1组细胞存活率显著高于B1组(P <0. 05)。A2、B2、C2组细胞存活率比较差异有统计学意义(F=6. 588,P <0. 05);其中B2、C2组细胞存活率显著低于A2组(P <0. 05),C2组细胞存活率显著高于B2组(P <0. 01)。A2组细胞存活率与A1组比较差异无统计学意义(P> 0. 05),B2组细胞存活率显著低于B1组(P <0. 05),C2组细胞存活率显著低于C1组(P <0. 05)。结论成功构建p IRES2-eGFP-Rho2真核表达载体,建立了稳定表达p IRES2-eGFP-Rho2的SH-SY5Y细胞株,为体外研究GABRR2的功能提供了实验基础,并证明使用GABA可缓解谷氨酸盐对细胞的损伤,为缺血性脑损伤的分子生物学治疗提供了靶点。

关键词：真核表达载体 γ-氨基丁酸神经母细胞瘤 SH-SY5Y细胞细胞克隆基因表达

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杜仲、大血藤、鸡血藤和桑黄四种中药提取物的抗痛风作用研究

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海南医学院学报 2021年第19期27卷 1451-1457页

作者：吴昊霖蔡来燕樊好飞方星悦徐怡倩虞道锐唐晓亮刘启兵海南医学院基础医学与生命科学学院药理学教研室海南海口571199 海南省热带脑科学研究与转化重点实验室海南海口571199

目的:探究杜仲、大血藤、鸡血藤和桑黄四种中药提取物的抗痛风作用。方法:尿酸钠(MSU)建立小鼠痛风关节炎模型,以秋水仙碱为阳性对照组,研究杜仲、大血藤、鸡血藤和桑黄四种中药提取物对小鼠痛风性关节炎的影响;热板法观察四种中药提取... 详细信息

目的:探究杜仲、大血藤、鸡血藤和桑黄四种中药提取物的抗痛风作用。方法:尿酸钠(MSU)建立小鼠痛风关节炎模型,以秋水仙碱为阳性对照组,研究杜仲、大血藤、鸡血藤和桑黄四种中药提取物对小鼠痛风性关节炎的影响;热板法观察四种中药提取物的镇痛作用;酶联免疫法(ELISA)检测血清白介素-1β(IL-1β)表达水平;同时测定四种中药提取物对小鼠血液中白细胞、单核细胞、中性粒细胞的影响和足趾组织形态学病理变化。结果:与正常组比较,模型组不同时间点的关节直径比、血液中白细胞、单核细胞、中性粒细胞、IL-1β均显著升高(P<0.01),痛阈值明显降低(P<0.05)。与模型组比较,秋水仙碱组、杜仲组、大血藤组、鸡血藤组和桑黄组关节直径比明显降低(P<0.05),痛阈值升高(P<0.05);四种中药提取物组小鼠血液中白细胞、单核细胞、中性粒细胞明显下降(P<0.05),杜仲组、大血藤组和桑黄组IL-1β表达水平明显下降(P<0.05)。杜仲和鸡血藤减轻小鼠足趾组织病理损伤效果更为明显。结论:鸡血藤水提物的抗痛风作用明显,镇痛消肿效果最好,杜仲和大血藤抗炎作用更为明显并有一定的镇痛消肿疗效。桑黄对IL-1β抑制作用明显,但未显示出较好的抗痛风潜力。

关键词：痛风中药提取物抗炎镇痛白介素-1β

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葫芦茶苷保护活性氮诱导内皮细胞线粒体损伤的作用研究

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海南医学院学报 2021年第24期27卷 1846-1851页

作者：黄巧凡吴昊霖徐怡倩樊好飞方星悦王爱萍虞道锐孟庆雯刘启兵海南医学院基础医学与生命科学学院药理学教研室海南海口571199 海南省热带脑科学研究与转化重点实验室海南海口571199

目的:通过葫芦茶苷作用于活性氮致血管内皮细胞损伤模型,探讨其对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法:采用MTT比色法检测葫芦茶苷在5~160μmol/L浓度范围对*** 926内皮细胞存活率的影响;*** 926内皮细胞预给药葫芦茶苷1 h后,给予0.5 mmol... 详细信息

目的:通过葫芦茶苷作用于活性氮致血管内皮细胞损伤模型,探讨其对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法:采用MTT比色法检测葫芦茶苷在5~160μmol/L浓度范围对*** 926内皮细胞存活率的影响;*** 926内皮细胞预给药葫芦茶苷1 h后,给予0.5 mmol/L S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)损伤内皮细胞12 h,通过MTT比色法检测葫芦茶苷对*** 926细胞存活率的影响;Real-time PCR法检测*** 926细胞线粒体特异性因子细胞色素氧化酶1(COX-1)、NADH脱氢酶亚单位1(ND-1)和炎症因子白介素-1β(IL-1β)基因的表达效果,同时采用Western blot法检测Bcl-2关联X蛋白(Bax)和B细胞肿瘤因子2(Bcl-2)经时蛋白表达量的变化;通过线粒体膜电位荧光探针(JC-1)检测葫芦茶苷对*** 926细胞线粒体膜电位的变化规律。结果:MTT法结果表明葫芦茶苷在5~160μmol/L范围内对*** 926细胞无明显细胞毒性且最佳药物保护浓度为40μmol/L。Western Blot法显示GSNO经时损伤*** 926细胞后Bax蛋白表达量呈时间依赖性增高,Bcl-2蛋白表达量与之相反。Real time-PCR结果显示,葫芦茶苷能明显上调COX-1基因(P<0.05),且能明显抑制活性氮GSNO诱导的ND-1(P<0.05)和IL-1β基因上调(P<0.01)。同时JC-1结果显示葫芦茶苷能明显保护线粒体膜电位免受GSNO损伤的作用。结论:活性氮GSNO损伤模型可能通过线粒体DNA损伤诱发Bax等促凋亡蛋白的增加,使抗凋亡因子Bcl-2表达降低。葫芦茶苷对活性氮诱导的内皮细胞线粒体损伤具有一定的保护作用,其机制与抑制ND-1和IL-1β基因表达,上调COX-1基因表达相关。

关键词：活性氮线粒体葫芦茶苷内皮细胞

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芍药苷提取工艺和抗氧化活性

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滨州医学院学报 2020年第5期43卷 373-376页

作者：李娜李金莲刘玉玲栾海云滨州医学院基础医学院机能学实验室山东烟台264003 滨州医学院基础医学院药理学教研室山东烟台264003

目的探索赤芍抗氧化活性组分最佳提取工艺,并对其有效组分芍药苷进行含量测定。方法采用超声波提取法对赤芍中抗氧化活性组分进行提取,筛选最佳提取方案;利用硅胶柱层析对有效组分进行分离纯化,高效液相色谱法测定芍药苷含量。结果选用... 详细信息

目的探索赤芍抗氧化活性组分最佳提取工艺,并对其有效组分芍药苷进行含量测定。方法采用超声波提取法对赤芍中抗氧化活性组分进行提取,筛选最佳提取方案;利用硅胶柱层析对有效组分进行分离纯化,高效液相色谱法测定芍药苷含量。结果选用浓度为70%的乙醇溶液,按照1∶30的料液比对赤芍进行超声50 min的提取,正丁醇萃取后通过硅胶柱层析可得到浓度为2.34%的芍药苷;正丁醇萃取得到产物的抗氧化活性最好。结论超声提取后分离纯化的芍药苷具有较强的抗氧化活性。

关键词：芍药苷超声波提取法分离纯化抗氧化

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Blimp-1在淋巴细胞及免疫相关疾病中的研究进展

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国际免疫学杂志 2021年第6期44卷 642-644页

作者：王垚王兵国添柱韩东卫黑龙江中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室哈尔滨150040 黑龙江中医药大学基础医学院内经教研室哈尔滨150040 黑龙江中医药大学基础医学院药理学教研室哈尔滨150040 黑龙江中医药大学基础医学院北药基础与应用研究重点实验室哈尔滨150040

B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(B lymphocyte-induced maturation protein 1,Blimp-1)是一种调节B淋巴细胞和T淋巴细胞功能的重要转录分子。在抗原刺激B淋巴细胞分化为浆细胞分泌抗体的过程中,可下调维持B细胞表型和功能的重要基因的表达,同... 详细信息

B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(B lymphocyte-induced maturation protein 1,Blimp-1)是一种调节B淋巴细胞和T淋巴细胞功能的重要转录分子。在抗原刺激B淋巴细胞分化为浆细胞分泌抗体的过程中,可下调维持B细胞表型和功能的重要基因的表达,同时上调维持浆细胞表型及特征的关键基因的表达,在浆细胞分化过程中起关键作用。CD4+T细胞中非滤泡性T细胞(Follicular T cells,Tfh)高表达Blimp-1;生理水平的Blimp-1会严重损害CD4+T细胞向Tfh细胞分化的能力,还可通过调控淋巴细胞而调节免疫相关疾病,有望成为治疗免疫相关疾病的新靶点。

关键词： Blimp-1 淋巴细胞免疫相关疾病

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环状RNAcirc-ccnb1通过抑制细胞周期蛋白核转位对食管鳞癌增殖和迁移的影响

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西部医学 2021年第8期33卷 1101-1105页

作者：杨瑜刘耀河秦宁谭柳宋锐侯歌袁金金张艳刘宗文郑州大学第二附属医院放射治疗科河南郑州450014 郑州大学基础医学院药理学教研室河南郑州450014

目的探讨环状RNA circ-ccnb1对细胞周期蛋白(cyclinb1、ccnb1)的作用,以及对食管鳞癌增殖和迁移的影响。方法①收集60例食管鳞癌组织及癌旁正常组织标本,按癌组织及正常组织分为两组,通过免疫组化检测两组组织中ccnb1的表达,并分析食管... 详细信息

目的探讨环状RNA circ-ccnb1对细胞周期蛋白(cyclinb1、ccnb1)的作用,以及对食管鳞癌增殖和迁移的影响。方法①收集60例食管鳞癌组织及癌旁正常组织标本,按癌组织及正常组织分为两组,通过免疫组化检测两组组织中ccnb1的表达,并分析食管鳞癌中ccnb1表达与临床病理因素(淋巴结转移、病理分期)之间的相关性。②培养食管鳞癌细胞,并分为两组:正常食管上皮细胞(Het1-A)和食管鳞癌细胞109(EC109)。采用蛋白免疫印迹法(WB)检测两组中ccnb1蛋白的表达。③用携带circ-ccnb1的质粒转染EC109,检测其中ccnb1的核转位情况,将细胞分为3组:未转染组(Blank组)、转染空载体组(Vector组)及转染circ-ccnb1组(cir-ccnb1组)。转染成功后进行核桨分离,采用WB检测转移至胞核内的ccnb1蛋白量的变化,细胞增殖实验(CCK-8法)及划痕实验检测细胞增殖率、迁移率。结果食管鳞癌组织中ccnb1蛋白的表达高于正常组织,EC109细胞中ccnb1蛋白的表达高于Het1-A细胞(均P<0.05)。与Blank组相比,cir-ccnb1组细胞中ccnb1蛋白的核转位水平明显降低,细胞增值率、迁移率降低(均P<0.05)。结论cir-ccnb1可以通过抑制ccnb1在食管鳞癌细胞中的核转位进而影响食管鳞癌的发展,即抑制癌细胞增殖和迁移。

关键词： circ-ccnb1 ccnb1 食管鳞癌增殖迁移

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基于尿液代谢物质的膀胱癌诊断标志物研究分析

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四川生理科学杂志 2021年第3期43卷 522-525,519页

作者：金愈茗曹力仁朱玲四川大学华西临床医学院四川成都610041 四川大学华西口腔医学院四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院药理学教研室四川成都610041

膀胱癌常用检测手段是膀胱镜与尿细胞学检查,但存在费用昂贵、并发症多、检测效果不稳定、检测水准受到检测者水平影响等缺点。尿液中含有大量的代谢物质,其中不乏可以对膀胱癌进行诊断的物质,本文对尿液中对膀胱癌有诊断意义的生物学... 详细信息

膀胱癌常用检测手段是膀胱镜与尿细胞学检查,但存在费用昂贵、并发症多、检测效果不稳定、检测水准受到检测者水平影响等缺点。尿液中含有大量的代谢物质,其中不乏可以对膀胱癌进行诊断的物质,本文对尿液中对膀胱癌有诊断意义的生物学标志物进行综述,并分析其诊断特点,为临床寻找无创、准确度高的诊断膀胱癌的方法提供相应依据。

关键词：膀胱癌尿液标志物

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外泌体作为药物递送系统的研究进展

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四川生理科学杂志 2022年第4期44卷 749-752页

作者：巫瑶于洋朱玲王霞万莉红四川大学华西基础医学与法医学院药理学教研室四川成都610041 四川大学华西医院神经外科四川成都610041 四川大学华西第二医院检验科四川成都610041

外泌体是一种由细胞分泌的直径约40-100 nm的盘状囊泡,具有天然脂质双分子层,其内包含了复杂的RNA和蛋白质。大多数细胞在正常及病理状态下均能产生外泌体,这些外泌体主要存在于体液中,在细胞间物质运输和信号交流中发挥着重要作用。作... 详细信息

外泌体是一种由细胞分泌的直径约40-100 nm的盘状囊泡,具有天然脂质双分子层,其内包含了复杂的RNA和蛋白质。大多数细胞在正常及病理状态下均能产生外泌体,这些外泌体主要存在于体液中,在细胞间物质运输和信号交流中发挥着重要作用。作为天然内源性纳米级载体,外泌体具有毒性小、稳定性好、、渗透性好、靶向归巢性强、能透过血脑屏障、可包载的物质种类多等特点,故可能成为具有良好应用前景的药物递送载体。本文主要介绍外泌体的基本性质、制备、载药方式,并归纳了其作为药物递送载体的研究进展。

关键词：外泌体药物递送系统天然内源性纳米级载体靶向

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基于UHPLC-MS/MS法,中毒量氯化琥珀胆碱在大鼠体内分布的研究

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中国药理学通报 2020年第5期36卷 670-675页

作者：盛洁姜荣文继月陈林解启文方俊杰万阳秦明李婧陈冠军陈志武安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032 安徽省公安厅物证鉴定中心安徽合肥230061 安徽医科大学科研实验中心安徽合肥230032

目的建立适当的超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)法,测定中毒量氯化琥珀胆碱(succinylcholine chloride,Suc)在大鼠体内的分布。方法大鼠分别皮下注射3种剂量的Suc,4 h后取大鼠血清和各主要脏器组织进行乙腈蛋白沉淀并过固相萃取WC... 详细信息

目的建立适当的超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)法,测定中毒量氯化琥珀胆碱(succinylcholine chloride,Suc)在大鼠体内的分布。方法大鼠分别皮下注射3种剂量的Suc,4 h后取大鼠血清和各主要脏器组织进行乙腈蛋白沉淀并过固相萃取WCX柱进行纯化;色谱采用Luna NH2色谱柱(2 mm×100 mm,3μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈等度洗脱,质谱测定采用正离子扫描下多反应监测模式(MRM)。对Suc离子对(m/z 145.1→93.3,m/z 145.1→115.4)进行定性、定量分析。结果Suc的检测限是0.01μg·L^-1,回收率为89.5%~95.4%,日内、日间RSD均小于15%。除NS对照组外,3种剂量的Suc组大鼠的血清及心、肝、肾等主要脏器组织中均检测到Suc,并且肾组织中的Suc最高。结论大鼠Suc中毒时在血清及心、肝、肾等组织中均有分布,其中肾脏中含量最高;UHPLC-MS/MS法是检测Suc中毒大鼠体内药量的一个有效、可靠的方法。

关键词：超高效液相色谱串联质谱法氯化琥珀胆碱大鼠血清固相萃取肾脏

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