检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2011年第2期27卷 124-126,131页

作者：吴芳张万江王萍曹旭东杜燕李蕾吴江东章乐石河子大学医学院基础医学系病理生理学教研室/石河子大学<新疆地方与民族高发病>教育部重点实验室石河子832002

目的构建卡介苗ERP基因缺失突变株。方法分别设计两对引物,通过聚合酶链反应(PCR)的方法扩增ERP基因两侧的2个目的片段,分别插入pKO质粒中,构建基因敲除质粒pKO-ERP,电转入至卡介苗菌株细胞内并与BCG基因组中的ERP基因同源交换,筛选出ER... 详细信息

目的构建卡介苗ERP基因缺失突变株。方法分别设计两对引物,通过聚合酶链反应(PCR)的方法扩增ERP基因两侧的2个目的片段,分别插入pKO质粒中,构建基因敲除质粒pKO-ERP,电转入至卡介苗菌株细胞内并与BCG基因组中的ERP基因同源交换,筛选出ERP基因敲除菌株。结果通过2次PCR筛选和1次蔗糖反筛选后得到的、并在含潮霉素培养基上不能生长的菌株为ERP基因敲除菌株。结论 pKO质粒可作为基因敲除有用的质粒载体,成功构建了卡介苗ERP基因缺失突变株。

关键词：基因敲除 ERP基因卡介苗菌

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灯盏花素对家兔左心缺血再灌注后肺组织白细胞介素-1β表达的影响

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新乡医学院学报 2011年第4期28卷 428-430页

作者：姬明丽王煜霞郭慧杨莹高伟王建刚付素珍新乡医学院病理生理学教研室河南新乡453003 新乡医学院新乡医学院第一附属医院儿内三科河南卫辉453100

目的探讨灯盏花素对左心缺血再灌注后肺组织白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法 60只成年健康新西兰家兔随机分为模型组和治疗组。2组家兔均结扎及再通左冠状动脉前降支复制左心缺血-再灌注模型,治疗组在缺血后10 min经静脉给予灯... 详细信息

目的探讨灯盏花素对左心缺血再灌注后肺组织白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法 60只成年健康新西兰家兔随机分为模型组和治疗组。2组家兔均结扎及再通左冠状动脉前降支复制左心缺血-再灌注模型,治疗组在缺血后10 min经静脉给予灯盏花素注射液10 ***-1。观察缺血30 min、再灌注20、40 min时2组家兔膈神经放电曲线、外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β水平、肺组织细胞IL-1β表达情况。结果治疗组各时间点膈神经放电幅度和持续时间明显比模型组增大、延长(P<0.05);治疗组外周血、BALF和肺组织细胞中IL-1β水平均低于模型组(P<0.05)。结论灯盏花素可减少IL-1β的表达,减轻因左心缺血再灌注而导致的急性肺损伤。

关键词：左心缺血再灌注急性肺损伤灯盏花素白细胞介素-1β

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siRNA沉默ZNF580基因对内皮细胞MMP-2的表达及侵袭能力的影响

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武警医学院学报 2011年第7期20卷 521-524,F0003页

作者：韦淑萍孙慧燕牟心红张文成武警医学院基础部人体解剖学教研室天津300162 武警医学院基础部生理学与病理生理学教研室天津300162

【目的】观察ZNF580基因沉默后内皮细胞MMP-2的表达及迁移和侵袭能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】针对ZNF580基因不同部位设计并化学合成3对不同靶向小干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染***926内皮细胞;应用半定... 详细信息

【目的】观察ZNF580基因沉默后内皮细胞MMP-2的表达及迁移和侵袭能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】针对ZNF580基因不同部位设计并化学合成3对不同靶向小干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染***926内皮细胞;应用半定量RT-PCR、Western blotting及明胶酶谱检测转染前后内皮细胞ZNF580和MMP-2 mRNA、蛋白的表达及活性变化;运用划痕愈合实验和Transwell小室模型检测转染前后内皮细胞迁移和侵袭能力的改变。【结果】筛选出最佳干扰序列siRNA序列3;下调ZNF580基因表达后,MMP-2 mRNA的表达及明胶酶的活性均下调(P<0.05),且内皮细胞体外迁移和侵袭能力显著降低(P<0.01)。【结论】ZNF580在内皮细胞运动转移过程中具有重要作用,可能成为肿瘤基因治疗的一个新靶点。

关键词： ZNF580 RNA干扰内皮细胞 MMP-2 迁移

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ZNF580基因对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响

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武警医学院学报 2011年第8期20卷 605-608,F0002页

作者：张文成韦淑萍孙慧燕侯兵呼文亮武警医学院基础部生理学与病理生理学教研室天津300162 武警医学院基础部人体解剖学教研室天津300162

【目的】研究人C2H2型锌指蛋白基因ZNF580在人脐静脉内皮细胞增殖和迁移中的作用。【方法】利用细胞转染技术获得瞬时过表达ZNF580的***926内皮细胞,并用半定量RT-PCR、Western blotting法检测ZNF580的表达情况;采用MTT比色法和细胞迁... 详细信息

【目的】研究人C2H2型锌指蛋白基因ZNF580在人脐静脉内皮细胞增殖和迁移中的作用。【方法】利用细胞转染技术获得瞬时过表达ZNF580的***926内皮细胞,并用半定量RT-PCR、Western blotting法检测ZNF580的表达情况;采用MTT比色法和细胞迁移实验检测ZNF580对内皮细胞功能的影响。【结果】获得瞬时过表达ZNF580的内皮细胞(转染效率为60%),且ZNF580基因过表达内皮细胞增殖和迁移能力分别增强3倍和2.5倍。【结论】ZNF580能够促进内皮细胞增殖和迁移。

关键词： ZNF580 锌指基因内皮细胞增殖迁移

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富血小板血浆对人脂肪间充质干细胞增殖及成骨分化能力的影响

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口腔医学研究 2011年第9期27卷 786-789页

作者：王悦杨旭芳周延民赵静辉朱喆马英智吉林大学口腔医院种植中心吉林长春130021 吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室牡丹江医学院病理生理学教研室空军航空大学训练基地门诊部

目的:探讨富血小板血浆(PRP)对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)增殖、分化及成骨能力的影响。方法:脂肪组织体外分离获得hADSCs,2次离心制备PRP,氯化钙加人凝血酶激活PRP。倒置相差显微镜观察成骨诱导实验中PRP对细胞增殖、分化状况的影响,... 详细信息

目的:探讨富血小板血浆(PRP)对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)增殖、分化及成骨能力的影响。方法:脂肪组织体外分离获得hADSCs,2次离心制备PRP,氯化钙加人凝血酶激活PRP。倒置相差显微镜观察成骨诱导实验中PRP对细胞增殖、分化状况的影响,钙-钴法检测PRP作用下hADSCs矿化结节形成,碱性磷酸酶(ALP)检测PRP对细胞活性及分化能力的影响。CCK-8法检测成骨诱导组和非成骨诱导组加PRP培养后2、4、6、8、16d细胞活性变化。结果:成骨诱导实验中50%PRP30μL组细胞密集、数量最多,且有剂量依赖性;钙-钴法检测见PRP原液组细胞染色最深,且有浓度依赖性;碱性磷酸酶显色见PRP原液组细胞活性最强,染色最深。CCK-8检测显示无论有无成骨诱导,各浓度PRP均可促进细胞增殖,且有浓度依赖性。结论:适宜浓度的PRP可明显促进hADSCs增殖,并有浓度及剂量依赖性。

关键词：人脂肪间充质干细胞富血小板血浆成骨诱导增殖分化

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万古霉素对人肾小管上皮细胞中肾损伤分子-1表达的影响研究

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中国药房 2011年第45期22卷 4244-4248页

作者：华春秀万英唐华刘昌明卞保平邹平泸州医学院病理生理学教研室泸州市646000 南阳医学高等专科学校基础部南阳市473058 雅安职业技术学院基础医学部雅安市625000

目的:探讨万古霉素对人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中肾损伤分子-1(KIM-1)表达的影响及其可能机制。方法:体外培养HK-2细胞,按万古霉素作用浓度和时间分为不同浓度(0、10、20、30、40、50、60μg·mL-1)和不同时间(0、3、6、12、24、4... 详细信息

目的:探讨万古霉素对人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中肾损伤分子-1(KIM-1)表达的影响及其可能机制。方法:体外培养HK-2细胞,按万古霉素作用浓度和时间分为不同浓度(0、10、20、30、40、50、60μg·mL-1)和不同时间(0、3、6、12、24、48h)组。显微镜观察HK-2细胞形态学变化,反转录-聚合酶链反应检测KIM-1mRNA表达,细胞免疫荧光法和免疫印迹法检测KIM-1蛋白表达,硫代巴比妥酸法检测HK-2细胞上清液中丙二醇(MDA)的含量。结果:镜下显示,0μg·mL-1组贴壁细胞生长良好,20、40μg·mL-1组部分贴壁细胞脱落和坏死,60μg·mL-1组大部分细胞脱落和坏死;与0μg·mL-1组比较,各浓度组KIM-1mRNA的表达均明显增强(P<0.05或P<0.01),10、20μg·mL-1组KIM-1蛋白表达明显增强(P<0.01),30、40、50、60μg·mL-1组MDA含量明显增强(P<0.01);与0h组比较,24、48h组KIM-1mRNA和蛋白表达、MDA含量均显著增强(P<0.05或P<0.01)。结论:万古霉素刺激可促进HK-2细胞KIM-1mRNA和蛋白的表达,其机制可能与万古霉素致HK-2细胞氧化应激有关。

关键词：万古霉素肾损伤分子-1 表达人肾小管上皮细胞反转录-聚合酶链反应细胞免疫荧光法免疫印迹法

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黄芪多糖对小鼠学习记忆能力的影响

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延边大学医学学报 2011年第1期34卷 23-25页

作者：万朋王师王军金清华延边大学基础医学院生理学与病理生理学教研部吉林医药学院生理学教研室

[目的]观察黄芪多糖对小鼠学习记忆能力的影响.[方法]将昆明种小鼠随机分成对照组(生理盐水20.0 mL/kg)及黄芪多糖小(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、大(800 mg/kg)剂量组,灌胃给予相应剂量的药物,3周后进行Morris水迷宫实验,测量并记录小... 详细信息

[目的]观察黄芪多糖对小鼠学习记忆能力的影响.[方法]将昆明种小鼠随机分成对照组(生理盐水20.0 mL/kg)及黄芪多糖小(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、大(800 mg/kg)剂量组,灌胃给予相应剂量的药物,3周后进行Morris水迷宫实验,测量并记录小鼠上台潜伏期、总路程、穿越站台次数和站台象限停留时间,并检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]黄芪多糖中、大剂量组小鼠的上台潜伏期和总路程明显缩短(P<0.05),穿越站台次数和站台象限停留时间显著增加(P<0.05);黄芪多糖中、大剂量组小鼠血清中SOD活性明显增强(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05).[结论]黄芪多糖可增强小鼠的空间学习记忆能力,其作用机制可能与黄芪多糖的抗自由基作用有关.

关键词：学习记忆黄芪多糖超氧化物歧化酶丙二醛小鼠

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小鼠原代呼吸道上皮细胞分离培养的新方法

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生理学报 2011年第6期63卷 581-585页

作者：王达李煜生南方医科大学第一临床医学院南方医科大学基础医学院病理生理学教研室广东省蛋白质组学重点实验室和教育部重大疾病的转录组和蛋白质组学重点实验室

现有的呼吸道上皮细胞系大多来源于肿瘤组织或成系时与肿瘤细胞融合,其生物学行为与正常呼吸道上皮细胞差异较大。为更准确反映呼吸道疾病条件下该类细胞的生物学效应,本文对小鼠呼吸道上皮细胞分离的新技术和培养方法进行了探索。利用... 详细信息

现有的呼吸道上皮细胞系大多来源于肿瘤组织或成系时与肿瘤细胞融合,其生物学行为与正常呼吸道上皮细胞差异较大。为更准确反映呼吸道疾病条件下该类细胞的生物学效应,本文对小鼠呼吸道上皮细胞分离的新技术和培养方法进行了探索。利用链霉蛋白酶消化法分离获得小鼠呼吸道上皮细胞,利用特殊的完全培养基和I型胶原包被的培养皿进行原代培养。镜下可观察到呼吸道上皮细胞的纤毛节律性的定向摆动,证明本法所获得的细胞较完整地保留了其原有生理功能。本实验所建立的分离技术和培养方法简单、稳定、有效、可靠,为研究呼吸道疾病的细胞模型创造了条件。同时,此法可为其它实验动物呼吸道上皮细胞的培养提供借鉴。

关键词：呼吸道上皮细胞小鼠分离培养

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黄芪对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响

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吉林医药学院学报 2011年第2期32卷 69-73页

作者：万朋王师郎茂林王军邴艳华延边大学基础医学院生理学与病理生理学教研部吉林延吉133002 吉林医药学院生理学教研室吉林吉林132013

目的观察黄芪对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法将40只W istar大鼠随机分成4组(每组10只),即阴性组(蒸馏水)、阳性组(脑复康)、黄芪小剂量组和黄芪大剂量组,用D-半乳糖50 mg/(kg.d)腹腔注射6周,建... 详细信息

目的观察黄芪对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法将40只W istar大鼠随机分成4组(每组10只),即阴性组(蒸馏水)、阳性组(脑复康)、黄芪小剂量组和黄芪大剂量组,用D-半乳糖50 mg/(kg.d)腹腔注射6周,建立大鼠亚急性衰老模型,并在此基础上往海马内注入Aβ1-40(4μg)建立阿尔茨海默病模型。用脑部微量透析法和高效液相色谱法测定海马齿状回区的乙酰胆碱浓度,以确认模型的建立。建立模型后,用相应药物灌胃2周,进行Morris水迷宫实验,检测大鼠的学习、记忆能力,并采用生物化学方法测定大鼠海马组织中的胆碱酯酶含量。结果与阴性组比较,黄芪小剂量组、大剂量组大鼠的上台潜伏期明显缩短(P<0.05);黄芪小剂量组、大剂量组大鼠的穿越站台次数显著增多(P<0.05);黄芪小剂量组、大剂量组大鼠海马组织中的胆碱酯酶含量均显著提高(P<0.01)。结论黄芪能改善阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆的能力,增加阿尔茨海默病大鼠海马组织内的胆碱酯酶含量,对阿尔茨海默病具有一定的治疗作用。

关键词：阿尔茨海默病黄芪学习记忆胆碱酯酶海马

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载脂蛋白J在实验性脑缺血再灌注大鼠脑内的表达

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中风与神经疾病杂志 2011年第10期28卷 898-902页

作者：石磊孙鲁宁顾鹏毅卢杰李琳黄长荣费菲王珏沈阳医学院沈洲医院干诊三科辽宁沈阳110002 中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学实验技术中心一部辽宁沈阳110001

目的探索载脂蛋白J(Apo-J)及其mRNA在大鼠脑缺血再灌注模型各脑区的表达情况及其可能的作用机制。方法清洁级Wistar成年大鼠150只,首先分为空白对照组(NC组,10只)、假手术组(SO组,70只)、缺血再灌注组(IR组,70只);后两组再随机分为造模... 详细信息

目的探索载脂蛋白J(Apo-J)及其mRNA在大鼠脑缺血再灌注模型各脑区的表达情况及其可能的作用机制。方法清洁级Wistar成年大鼠150只,首先分为空白对照组(NC组,10只)、假手术组(SO组,70只)、缺血再灌注组(IR组,70只);后两组再随机分为造模后3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d各7个亚组,每亚组10只。NC组及以上各亚组再各自随机分为RT-PCR组(5只)、免疫组化及TUNEL组(5只)。制作脑缺血再灌注(IR)模型,用Real Time RT-PCR检测IR区及其前后脑区Apo-J mRNA的表达;用免疫组化检测IR组再灌注周边区及SO组、NC组与之对应的相同区域Apo-J的表达,并用TUNEL法检测前述免疫组化检测区的细胞凋亡情况。结果Apo-J mRNA在IR周边区表达增加,各时点中以IR 1d亚组最高(P<0.01),各亚组均显著高于相同时点的SO组、NC组(P<0.01);并且与再灌注前区、后区比较,均显著增加(P<0.01)。Apo-J在IR组再灌注周边区的表达增加,以1d亚组最高(P<0.01),各亚组均显著高于相同时点的SO组、NC组(P<0.01)。TUNEL显示了与Apo-J表达平行的细胞凋亡情况。结论大鼠脑缺血再灌注后再灌注局部Apo-J mRNA、Apo-J的表达增加,且其增加与细胞凋亡增多有关,推测局部表达的Apo-J可能起保护细胞、延缓细胞凋亡的作用。

关键词：载脂蛋白J 脑缺血再灌注 Real Time RT-PCR TUNEL 细胞凋亡

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