检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2021年第4期41卷 270-279页

作者：杨婧文李志欣孙彦威任智宏黄晓愉王凡平张伟于莉莉王明永新乡医学院医学检验学院 453003 新乡医学院基础医学院 453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003 新乡市免疫调控与分子诊断重点实验室 453003

目的研究甘露聚糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)对3T3-L1脂肪细胞分化过程中自噬的调节及其机制,为靶向自噬在固有免疫上预防肥胖及相关病理改变提供可行性。方法体外培养3T3-L1前脂肪细胞进行诱导分化。油红O染色分析细胞分... 详细信息

目的研究甘露聚糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)对3T3-L1脂肪细胞分化过程中自噬的调节及其机制,为靶向自噬在固有免疫上预防肥胖及相关病理改变提供可行性。方法体外培养3T3-L1前脂肪细胞进行诱导分化。油红O染色分析细胞分化成熟及脂滴积累情况,CCK-8法检测不同浓度MBL(0、1、5、10μg/ml)对不同分化阶段细胞增殖能力的影响,Western blot分析MBL(10μg/ml)对不同分化阶段细胞自噬关键因子LC3B、Beclin1和p62蛋白的表达,油红O染色观察MBL干预下脂滴蓄积的改变,Western blot、qRT-PCR检测不同浓度MBL干预下自噬关键因子蛋白质及mRNA表达水平,基于自噬性降解的自噬流分析来进一步说明自噬活性,Western blot分析单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号分子的表达及磷酸化。结果油红O染色结果显示经过10 d诱导的3T3-L1前脂肪细胞可达到完全分化状态;CCK-8结果表明实验组各浓度MBL(1~10μg/ml)对不同分化阶段细胞增殖无影响;Western blot及qRT-PCR检测发现在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,MBL处理组自噬相关蛋白及mRNA表达水平增强,并呈一定浓度依赖关系;油红O染色显示不同分化阶段脂肪细胞内脂滴在MBL干预下呈不同程度的减少;荧光显微镜检测结果进一步证实MBL通过增加自噬体的合成增强脂肪细胞自噬活性;并且在MBL干预下,AMPK的磷酸化水平明显上调,mTOR的磷酸化水平明显下调,同样呈现浓度依赖关系。结论MBL通过AMPK/mTOR信号通路加快3T3-L1脂肪细胞分化过程中的自噬进程,降低脂质积累,为治疗肥胖及其相关代谢疾病提供了一种潜在的功能途径。

关键词：甘露聚糖结合凝集素 3T3-L1细胞自噬 AMPK/mTOR 成脂分化

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TLR4基因敲除对小鼠内脏脂肪组织免疫细胞及脂肪因子的影响

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中国免疫学杂志 2017年第5期33卷 665-667页

作者：孟晓燕张国俊杨灿刘国燕王秀丽宋向凤新乡医学院基础医学院/河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003

目的:探讨TLR4基因敲除对小鼠免疫细胞及脂肪因子的影响。方法:取20周龄的雄性野生型C57BL/6小鼠和TLR4^(-/-)小鼠的脾脏和附睾脂肪组织,分离细胞,用流式检测F4/80、CD11b、CD11c、CD3、CD4、CD8分子的表达;q PCR检测附睾脂肪组织内IL-6... 详细信息

目的:探讨TLR4基因敲除对小鼠免疫细胞及脂肪因子的影响。方法:取20周龄的雄性野生型C57BL/6小鼠和TLR4^(-/-)小鼠的脾脏和附睾脂肪组织,分离细胞,用流式检测F4/80、CD11b、CD11c、CD3、CD4、CD8分子的表达;q PCR检测附睾脂肪组织内IL-6、HMGB1、TNF-α、脂联素和抵抗素的表达。结果:与野生型C57BL/6小鼠相比,TLR4^(-/-)小鼠脾脏和附睾脂肪组织中M1型(F4/80^+CD11b^+CD11c^+)巨噬细胞比例上升(P<0.05),M2型(F4/80^+CD11b^+CD11c^-)巨噬细胞比例下降(P<0.05),这种趋势在附睾脂肪组织中表现更为显著。同时发现附睾脂肪组织中CD4^+T细胞比例下降(P<0.05),CD8+T细胞比例上升(P<0.05);IL-6、HMGB1、抵抗素表达升高(P<0.05);TNF-α和脂联素表达降低(P<0.05)。结论:TLR4基因敲除可导致内脏脂肪组织脂肪因子和免疫细胞的紊乱。

关键词： Toll样受体4 脂肪因子巨噬细胞 T淋巴细胞

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IFI16在HTLV-1阳性T细胞中对病毒蛋白和促炎因子表达的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第9期39卷 668-673页

作者：崔钰晗关宇鹤刘月张葛陈凡陈蒙蒙孙静靓任晓文杨波王洁新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003

目的探讨DNA识别受体干扰素诱导蛋白16(IFI16)在成人T淋巴细胞白血病1型病毒(HTLV-1)阳性T细胞中对HTLV-1病毒蛋白和促炎因子表达的影响。方法在不同的HTLV-1阳性T细胞系中,采用免疫印迹试验检测IFI16在HTLV-1阳性T细胞中的表达变化;构... 详细信息

目的探讨DNA识别受体干扰素诱导蛋白16(IFI16)在成人T淋巴细胞白血病1型病毒(HTLV-1)阳性T细胞中对HTLV-1病毒蛋白和促炎因子表达的影响。方法在不同的HTLV-1阳性T细胞系中,采用免疫印迹试验检测IFI16在HTLV-1阳性T细胞中的表达变化;构建IFI16基因沉默siRNA并用免疫印迹检测其IFI16敲低表达的效率;用siRNA在HTLV-1阳性T细胞系中敲低IFI16表达后,通过real-time PCR和采用免疫印迹分别检测HTLV-1病毒蛋白Tax在mRNA和蛋白质水平上的表达量;并通过real-time PCR检测干扰素(IFN)-α、IFN-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α和HTLV-1病毒基因Tax以及Env的表达量。结果与HTLV-1病毒阴性T细胞Jurkat相比,IFI16在HTLV-1阳性T细胞MT2、MT4以及C8166中表达均增高;在MT2和MT4细胞中用siRNA敲低IFI16表达后,HTLV-1病毒蛋白Tax表达量上升,IFN-α、IFN-γ以及TNF-α的表达量下降。结论在HTLV-1病毒稳定感染的MT2和MT4细胞中,IFI16表达量上升,从而促进干扰素和促炎因子的产生,进而抑制HTLV-1病毒蛋白的表达。

关键词： IFI16 成人T淋巴细胞白血病病毒1型干扰素 T淋巴细胞肿瘤坏死因子-α

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cGAS识别HTLV-1反转中间体并诱导STING依赖性的固有免疫应答

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第3期39卷 168-173页

作者：刘月崔钰晗宋迪关宇鹤陈凡陈蒙蒙杨波王洁新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)在成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染过程中对病毒反转中间体的识别以及诱导的下游信号通路。方法将生物素标记的HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞,采用免疫共沉淀试验检... 详细信息

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)在成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染过程中对病毒反转中间体的识别以及诱导的下游信号通路。方法将生物素标记的HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞,采用免疫共沉淀试验检测cGAS与ssDNA90的相互作用;将HeLa细胞与HTLV-1阳性细胞系MT2共培养,采用免疫共沉淀的方法检测cGAS与干扰素基因刺激蛋白(STING)的相互作用;采用siRNA的方法在HeLa细胞中敲减STING,24 h后再转染入cGAS表达质粒,24 h后与MT2细胞共培养24 h,real-time PCR实验检测HeLa细胞中干扰素(IFN)-β、调节活化正常T细胞表达和趋化因子(RANTES)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、HTLV-1病毒蛋白Tax、p19以及HBZ的表达,免疫印迹检测HeLa细胞中干扰素调节因子3(IRF3)和p65的磷酸化水平。结果cGAS与ssDNA90存在相互作用;cGAS与STING存在相互作用,且作用部位在胞质中;在敲减STING的HeLa细胞中,cGAS过表达对IFN-β、RANTES和TNF-α的表达量无明显影响,对HTLV-1病毒蛋白Tax、p19和HBZ的表达量无明显影响,对IRF3和p65的磷酸化水平无明显影响。结论cGAS可结合HTLV-1的反转中间体ssDNA90并通过STING激活固有免疫应答。

关键词：环鸟苷酸-腺苷酸合成酶成人T淋巴细胞白血病病毒1型干扰素基因刺激蛋白 DNA识别受体反转中间体

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cGAS促进HTLV-1反转中间体ssDNA90诱导的固有免疫应答

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中华微生物学和免疫学杂志 2018年第6期38卷 434-439页

作者：郭志祥宋迪刘月崔钰晗马玲玲关宇鹤杨波王洁新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室 453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003 新乡医学院河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心 453003

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）在成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）的反转中间体诱导的固有免疫信号通路中的调控功能。方法将HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞，采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞... 详细信息

目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）在成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）的反转中间体诱导的固有免疫信号通路中的调控功能。方法将HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞，采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞中的表达变化；将cGAS表达质粒，转染入HeLa细胞，24 h后再转染入ssDNA90，real-time PCR试验检测HeLa细胞中干扰素（IFN）-β、干扰素诱导蛋白10（IP-10）、调节活化正常T细胞表达和趋化因子（RANTES）和肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达，免疫印迹试验检测HeLa细胞中干扰素调节因子3（IRF3）和p65的磷酸化水平；采用siRNA的方法在HeLa和佛波酯（phorbol-12-myristate-13-acetate，PMA）诱导分化的THP1（PMA-THP1）细胞中沉默cGAS的表达，24 h后再转染入ssDNA90，real-time PCR试验检测HeLa和PMA-THP1细胞中IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达，免疫印迹试验检测HeLa和PMA-THP1细胞中IRF3和p65的磷酸化水平。结果ssDNA90转染后，HeLa细胞中cGAS的表达升高；转染有cGAS表达质粒的HeLa细胞与对照组细胞相比，在ssDNA90刺激后，IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量增加，IRF3和p65的磷酸化水平升高；沉默cGAS表达的HeLa和PMA-THP1细胞与对照组细胞相比，在ssDNA90刺激后，IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量降低，IRF3和p65的磷酸化水平下降。结论cGAS在HTLV-1的反转中间体ssDNA90诱导的固有免疫应答中可能具有促进功能。

关键词：环鸟苷酸-腺苷酸合成酶成人T淋巴细胞白血病病毒1型 DNA识别受体反转中间体固有免疫应答

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吉西他滨对人非小细胞肺癌HCC827活性和凋亡的影响

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中国免疫学杂志 2016年第10期32卷 1450-1453页

作者：张婧婧赵庆伟杨景瑞段巨洪于海川河南省新乡医学院医学检验学院分子诊断与医学检验技术河南省协同创新中心新乡453003

目的：研究吉西他滨对人非小细胞肺癌HCC827细胞活性以及凋亡的影响,以及与Bcl-2表达的关系。方法：采用cell counting kit-8法、细胞核Hochest33258染色法、流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法等多种方法,体外研究吉西他滨对人非小细... 详细信息

目的：研究吉西他滨对人非小细胞肺癌HCC827细胞活性以及凋亡的影响,以及与Bcl-2表达的关系。方法：采用cell counting kit-8法、细胞核Hochest33258染色法、流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法等多种方法,体外研究吉西他滨对人非小细胞肺癌HCC827的活性、凋亡和细胞周期的影响;采用Western blot法,观察药物作用后细胞中Bcl-2蛋白表达的变化。结果：吉西他滨（0.1～1 000 ng/ml）对人非小细胞肺癌HCC827活性具有抑制作用,并有促凋亡效应。此外,可以将细胞阻滞在S期。在吉西他滨诱导的细胞凋亡过程中,凋亡因子Bcl-2蛋白的表达下调。结论：吉西他滨可以抑制人非小细胞肺癌HCC827细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,S期周期阻滞,其诱导的凋亡可能是其杀死肿瘤细胞的主要机制之一,此外,凋亡与相关基因Bcl-2蛋白的表达具有一定关系。

关键词：细胞凋亡人非小细胞肺癌HCC827细胞吉西他滨 Bcl-2蛋白

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脂滴与免疫应答反应关系的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第12期31卷 1724-1727页

作者：张高丽隋娟李平法于海川新乡医学院医学检验学院河南省分子诊断与检验医学协同创新中心河南新乡453003

脂滴是一个复杂且活动旺盛的多功能细胞器,基本功能主要参与脂类合成和贮存,脂滴相关蛋白参与了多种脂质关联生物学过程,包括细胞信号转导、脂代谢的调控、膜运输、炎症相关蛋白的合成与分泌等。近年来关于脂滴与免疫应答反应的研究表明... 详细信息

脂滴是一个复杂且活动旺盛的多功能细胞器,基本功能主要参与脂类合成和贮存,脂滴相关蛋白参与了多种脂质关联生物学过程,包括细胞信号转导、脂代谢的调控、膜运输、炎症相关蛋白的合成与分泌等。近年来关于脂滴与免疫应答反应的研究表明,根据细胞所处的阶段或状态不同脂滴存在不同的亚群,发挥特异性细胞功能。病原微生物的感染与细胞内脂积累密切相关,在免疫因子合成、抗原递呈、自噬等免疫过程中脂滴参与并起到关键的作用。本文针对脂滴在免疫应答反应方面的最新研究进行综述。

关键词：脂滴抗原提呈自噬免疫反应综述

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甘露聚糖结合凝集素(MBL)对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的调节作用及机制

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中华微生物学和免疫学杂志 2020年第2期40卷 122-128页

作者：杨泳慧杨婧文李志欣孙彦威杨易孟张伟王凡平于莉莉王明永新乡医学院医学检验学院 453003 新乡医学院国际教育学院 453003 新乡医学院基础医学院 453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003 新乡市免疫调控与分子诊断重点实验室 453003

目的研究甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的调节及其机制。方法体外诱导3T3-L1前脂肪细胞成脂分化,同时给予不同浓度的MBL(0、1、10、20μg/ml)干预。CCK-8法检测细胞增殖能力变化,油红O染色... 详细信息

目的研究甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的调节及其机制。方法体外诱导3T3-L1前脂肪细胞成脂分化,同时给予不同浓度的MBL(0、1、10、20μg/ml)干预。CCK-8法检测细胞增殖能力变化,油红O染色和细胞内甘油三酯含量测定法分析脂质积累情况。Western blot及qRT-PCR检测脂肪细胞成脂分化相关因子PPARγ及C/EBPα的蛋白质及mRNA表达水平。Western blot分析脂肪合成调控信号分子Akt的表达及磷酸化。结果实验组各浓度MBL(0、1、10、20μg/ml)对3T3-L1前脂肪细胞增殖都无影响。3T3-L1前脂肪细胞诱导分化3 d,甘油三酯检测发现MBL处理组细胞内甘油三酯水平下降,并呈剂量依赖关系;油红O染色结果进一步显示,MBL处理组的脂滴数量显著减少,吸光度值也显著降低,同样呈现浓度依赖关系。Western blot及qRT-PCR检测结果证实,MBL处理组PPARγ和C/EBPα的蛋白质及mRNA表达水平均显著下降,呈剂量依赖性。在MBL干预下,Akt的磷酸化水平也明显下调。结论MBL通过Akt信号通路调控3T3-L1前脂肪细胞的成脂分化。

关键词：甘露聚糖结合凝集素 3T3-L1前脂肪细胞 Akt 成脂分化

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HLA-G在人T淋巴细胞白血病1型病毒阳性T细胞中的表达及功能

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中华微生物学和免疫学杂志 2022年第5期42卷 376-382页

作者：董航王李想薛浡于小佳赵桂增张晨光新乡医学院医学检验学院新乡453003 新乡医学院第三附属医院耳鼻喉科新乡453003 新乡医学院第一附属医院新乡453100 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003

目的观察人白细胞抗原G(human leukocyte antigen G,HLA-G)在人T淋巴细胞白血病1型病毒(human T-cell leukemia virus type 1,HTLV-1)阳性T细胞中的表达情况,研究其在影响HTLV-1感染发生发展中的作用。方法采用Western blot及real-time PCR检测HLA-G在HTLV-1阳性T细胞系(MT2和MT4)中的表达。构建HLA-G基因沉默的siRNA,用于敲低MT2和MT4细胞中的HLA-G,在mRNA和蛋白质水平观察HLA-G对HTLV-1蛋白Tax、P19表达的影响,同时在RNA水平监测HLA-G基因沉默后MT2和MT4细胞中细胞因子的表达变化。CCK8法观察MT2和MT4细胞的增殖能力,Western blot检测信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路相关蛋白。结果与HTLV-1阴性T细胞(Jurkat和MOLT4)比较,MT2和MT4细胞均高表达HLA-G分子。siRNA敲低MT2和MT4细胞中的HLA-G后,HTLV-1 Tax和P19的mRNA和蛋白质表达水平均下降,抗病毒因子IFN-γ和TNF-α表达升高,MT2和MT4细胞的增殖能力和STAT3磷酸化水平均降低。结论HTLV-1能诱导T细胞高表达免疫耐受分子HLA-G,抑制HLA-G表达可促进抗病毒因子的产生,降低IL-6及STAT3磷酸化水平,从而有效抑制HTLV-1的复制。

关键词：人白细胞抗原G 人T淋巴细胞白血病1型病毒 T淋巴细胞感染

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不同方向内含子对重组CHO细胞中神经生长因子表达的影响（英文）

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生物工程学报 2019年第6期35卷 1071-1078页

作者：董卫华李翠萍杨赟王天云王芳新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心河南新乡453003

为了研究不同方向的嵌合体内含子对重组神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)基因表达的影响,以人β-珠蛋白第一内含子5’端剪接序列和人免疫球蛋白重链可变区内含子3’端剪接序列组合而成的嵌合体内含子作为研究对象,在NGF基因5’端... 详细信息

为了研究不同方向的嵌合体内含子对重组神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)基因表达的影响,以人β-珠蛋白第一内含子5’端剪接序列和人免疫球蛋白重链可变区内含子3’端剪接序列组合而成的嵌合体内含子作为研究对象,在NGF基因5’端插入不同方向的嵌合体内含子,构建含不同方向内含子的NGF基因表达载体。转染至CHO细胞后,G418筛选稳定转染的细胞,荧光定量PCR、ELISA和Western blotting检测不同载体NGF基因的表达情况。结果显示内含子可以大幅度提高NGF基因的表达,且正向内含子对NGF基因表达的增强作用无论是在mRNA水平还是在蛋白水平都要高于反向内含子。所以内含子能够提高外源NGF基因的表达,且内含子调控转基因表达具有方向性。

关键词： CHO细胞基因表达内含子神经生长因子

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