检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2012年第9期32卷 803-807页

作者：黄青松王树芳孙启蒙赵晓楠牛艳华聂慧岩魏小辉牛志国新乡医学院微生物学教研室 453003 生命科学技术系临床医学系免疫学教研室

目的以感染性休克患者血清刺激人原代内皮细胞（HPAEC）和外周血单个核细胞（PBMC），观察内皮细胞在感染性休克细胞因子释放中的作用。方法采用密度梯度离心法分离健康人PBMC；RT-PCR及免疫印迹检测HPAEC细胞表面标志CDl44和血管假性... 详细信息

目的以感染性休克患者血清刺激人原代内皮细胞（HPAEC）和外周血单个核细胞（PBMC），观察内皮细胞在感染性休克细胞因子释放中的作用。方法采用密度梯度离心法分离健康人PBMC；RT-PCR及免疫印迹检测HPAEC细胞表面标志CDl44和血管假性血友病因子（*** factor，vWF）的表达；ELISA检测感染性休克患者和健康对照者血清中的IL-6、TNF-α、MCP-1的水平；两种血清及LPS刺激HPAEC和PBMC后，ELISA检测培养上清中IL-6、TNF-α、MCP-1的水平；流式细胞技术检测休克患者血清和LPS刺激后HPAEC膜表面ICAM-1的表达；S1P1受体激动剂CYM-Sd42预处理后，休克血清刺激HPAEC培养上清中IL-6、TNF-α、MCP-1的水平。结果HPAEC表达内皮细胞标志性分子CDl44和vWF；感染性休克患者血清中炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1水平明显高于健康对照（P〈0．01）；休克血清和LPS处理PBMC和HPAEC后，相对于对照组，均有明显升高（P〈0．01）；PBMC的休克组炎症因子与PBMC的LPS组均无明显差异（P〉0．05），而HPAEC的休克组炎症因子相对于HPAEC的LPS组均明显升高（P〈0．01）；同样地，LPS刺激两种细胞后，HPAEC的IL-6、TNF-α明显低于PBMC（P〈0．01），MCP-1的水平无明显变化（P〉0．05），但是休克血清刺激后，HPAEC的IL-6、TNF-α与PBMC无明显变化（P〉0．05），MCP-1则明显升高（P〈0．01）；休克患者血清刺激S1P1受体特异性激动剂CYM-5442预处理的HPAEC后，培养上清中炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1水平明显降低（P〈0．01）。结论内皮细胞在感染性休克细胞因子释放中起着关键作用。

关键词：感染性休克内皮细胞外周血单个核细胞细胞因子

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盐藻酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活鉴定

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生物技术通报 2011年第12期27卷 188-191页

作者：李照熙杨瑞林艳杨保胜王天云新乡医学院生命科学技术系新乡453003 新乡医学院生物化学与分子生物学教研室新乡453003

构建用于杜氏盐藻核基质结合区结合蛋白(matrix attachment region binding protein,MBP)酵母双杂交试验的诱饵载体,进行自激活及毒性验证。以含有盐藻MBP质粒为模板,经PCR扩增后连接pMD18-T载体,经测序鉴定正确后,EcoRNde双酶切获得目... 详细信息

构建用于杜氏盐藻核基质结合区结合蛋白(matrix attachment region binding protein,MBP)酵母双杂交试验的诱饵载体,进行自激活及毒性验证。以含有盐藻MBP质粒为模板,经PCR扩增后连接pMD18-T载体,经测序鉴定正确后,EcoRNde双酶切获得目的基因MBP,克隆入经同样双酶切的酵母载体pGBKT7,转化酵母菌株AH109及Y187,检测其自激活以及毒性。结果显示,成功扩增出盐藻MBP基因,重组质粒pGBKT7-MBP经酶切、测序表明序列正确,转化酵母菌株无自激活,无毒性。

关键词：核基质结合区结合蛋白酵母双杂交诱饵载体自激活

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长期铅暴露对小鼠胸腺细胞移行相关趋化性细胞因子受体的影响

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环境与健康杂志 2012年第3期29卷 219-221页

作者：黄青松王树芳孙启蒙赵晓楠牛艳华聂慧岩牛志国新乡医学院微生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院生命科学技术系新乡医学院临床医学系新乡医学院免疫学教研室

目的探讨铅暴露对小鼠胸腺细胞胸腺内迁移相关趋化性细胞因子受体的影响。方法将48只健康初断乳21日龄清洁级SD小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(200 mg/L)、中(400 mg/L)、高(800 mg/L)剂量乙酸铅染毒组,每组12只,雌雄各半。... 详细信息

目的探讨铅暴露对小鼠胸腺细胞胸腺内迁移相关趋化性细胞因子受体的影响。方法将48只健康初断乳21日龄清洁级SD小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(200 mg/L)、中(400 mg/L)、高(800 mg/L)剂量乙酸铅染毒组,每组12只,雌雄各半。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒12周。染毒结束后,采用石墨炉原子吸收法检测血清、胸腺中的铅含量,采用流式细胞技术检测小鼠胸腺细胞趋化因子受体CXCR4、CCR5、CCR9的表达。结果与对照组比较,各剂量乙酸铅染毒组小鼠血清、胸腺铅含量以及小鼠胸腺细胞膜分子CXCR4、CCR5、CCR9的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着乙酸铅染毒剂量的升高,小鼠血清、胸腺铅含量以及小鼠胸腺细胞膜分子CXCR4、CCR5、CCR9的表达呈上升趋势。结论趋化性细胞因子受体参与长期铅暴露小鼠胸腺的免疫损伤。

关键词：金属重铅胸腺细胞趋化因子受体

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MAR介导的非病毒附着体载体的研究进展

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生物技术通报 2012年第8期28卷 46-50页

作者：林艳李照熙王芳王天云新乡医学院生物化学与分子生物学教研室新乡453003 新乡医学院生命科学技术系新乡453003

附着体载体可以使外源基因在宿主细胞中不整合到基因组上而是以附着体的形式存在,是一种新型的高效、安全、附着体表达载体。目前研究较多的是由S/MAR(Scaffold/Matrix Attachment Region,S/MAR)元件介导的质粒。虽然此类载体均能介导... 详细信息

附着体载体可以使外源基因在宿主细胞中不整合到基因组上而是以附着体的形式存在,是一种新型的高效、安全、附着体表达载体。目前研究较多的是由S/MAR(Scaffold/Matrix Attachment Region,S/MAR)元件介导的质粒。虽然此类载体均能介导载体附着存在,但是转基因的表达量不同。最近研究发现,载体的启动子、骨架结构、CpG基序以及表达系统等方面能够影响转基因的表达,针对以上内容作一综述,希望据此进一步优化载体,为临床研究提供基础依据。

关键词：核基质附着区转基因表达附着体载体启动子骨架结构 CpG基序

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氧化乐果对雄性小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶和精液质量的影响

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中国畜牧兽医 2011年第7期38卷 148-150页

作者：徐光翠高启禹韩光亮王二曼河南新乡医学院公共卫生学系卫生毒理学教研室河南新乡453003 河南新乡医学院生命科学技术系医用生物学教研室河南新乡453003

试验旨在研究有机磷农药氧化乐果对雄性小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶(SDH)和精液质量的影响作用。将40只健康昆明雄性小鼠随机分为4组,即低、中、高3个染毒组和对照组,其中染毒组分别灌胃1.0、2.0、4.0 mg/kg氧化乐果,对照组灌胃生理盐水,采用... 详细信息

试验旨在研究有机磷农药氧化乐果对雄性小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶(SDH)和精液质量的影响作用。将40只健康昆明雄性小鼠随机分为4组,即低、中、高3个染毒组和对照组,其中染毒组分别灌胃1.0、2.0、4.0 mg/kg氧化乐果,对照组灌胃生理盐水,采用等容量灌胃法(0.2 mL/10 g体重),连续灌胃14 d。随着氧化乐果染毒剂量的逐渐增加,小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶(SDH)活力、精子密度、存活率均明显降低,与对照组相比差异显著(P<0.05);小鼠体重、睾丸重、附睾及其脏器系数与对照组相比差异均不显著(P>0.05)。氧化乐果对小鼠精子密度和精子存活率有一定的损伤作用,对睾丸琥珀酸脱氢酶有明显的抑制作用。

关键词：雄性生殖系统氧化乐果琥珀酸脱氢酶精液质量

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鸡胚脊髓发育过程中神经钙黏蛋白的基因表达

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实用儿科临床杂志 2010年第14期25卷 1098-1099页

作者：王聪睿王小引徐振平新乡医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院生命科学技术系河南新乡453003

目的分析神经钙黏蛋白(NCdh)在鸡胚脊髓发育过程中的表达模式及可能的作用。方法收集孵育第3天(E3)、E4、E6和E8鸡胚,冷冻切片获得脊髓连续切片;分别应用原位杂交和荧光免疫组织化学方法分析NCdh mRNA和蛋白质的表达定位。结果原位杂交... 详细信息

目的分析神经钙黏蛋白(NCdh)在鸡胚脊髓发育过程中的表达模式及可能的作用。方法收集孵育第3天(E3)、E4、E6和E8鸡胚,冷冻切片获得脊髓连续切片;分别应用原位杂交和荧光免疫组织化学方法分析NCdh mRNA和蛋白质的表达定位。结果原位杂交及荧光免疫组织化学检测结果显示,在脊髓发育早期E3时期,NCdh主要表达在神经上皮层和脊索部位,随发育时间延长,E3～E8时期NCdh表达量总体呈减弱趋势,特别在脊索部位随发育时间延长呈明显减弱,但在背根神经节表达有所增强,具有严格的时空特异性。结论 NCdh在脊髓中的表达变化说明该基因在脊髓发生和发育过程中起重要作用。

关键词：神经钙黏蛋白脊髓发育原位杂交基因表达

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MAR介导的逆转录病毒包装细胞系的建立

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生物技术通报 2010年第12期26卷 182-185页

作者：张靖王天云张俊河杨保胜张继红新乡医学院三全学院生命科学技术系新乡453003 新乡医学院生物化学与分子生物学教研室新乡453003

根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达载体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒载体。酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染... 详细信息

根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达载体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒载体。酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染PA317细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,提取病毒液上清,测定逆转录病毒颗粒滴度,逆转录病毒颗粒的最高滴度为1.6×106CFU/mL,成功建立了MAR介导的逆转录病毒包装细胞系。

关键词：核基质结合区逆转录病毒载体包装细胞系

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酶工程课程教学模式改革的探索与实践

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新乡医学院学报 2012年第1期29卷 77-78,80页

作者：高启禹张文博李小英李延兰刘涌涛新乡医学院生命科学技术系医用生物学教研室河南新乡453003

酶工程作为一门应用科学,在生命科学领域占据着极其重要的地位,如何使生物技术专业的酶工程教学满足时代发展的要求,培养合格的从事酶工程研究及生产的技术人才,使酶的应用与研究开发得到进一步拓展,是酶工程教学的首要任务。本文旨在... 详细信息

酶工程作为一门应用科学,在生命科学领域占据着极其重要的地位,如何使生物技术专业的酶工程教学满足时代发展的要求,培养合格的从事酶工程研究及生产的技术人才,使酶的应用与研究开发得到进一步拓展,是酶工程教学的首要任务。本文旨在探讨新的教学模式,发展新的教学方法,为进一步培养高素质科技人才提供保证。

关键词：酶工程教学改革教学模式

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体外转染CyclinA2基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响

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解剖学报 2015年第1期46卷 57-62页

作者：卢杏张进忠郭志坤常玉巧贾银明徐振平新乡医学院生命科学技术学院新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 安阳市中医院心内科河南安阳455000 河南医学高等专科学校基础医学部生物学教研室郑州451191

目的探讨体外转染细胞周期素A2（Cyclin A2）基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响,为心脏再生提供细胞学依据。方法 SD乳鼠12只,分离、培养、鉴定原代乳鼠心肌细胞并分为3组,实验组：转染带有强化绿色荧光蛋白（GFP）和Cyclin A2基因的重... 详细信息

目的探讨体外转染细胞周期素A2（Cyclin A2）基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响,为心脏再生提供细胞学依据。方法 SD乳鼠12只,分离、培养、鉴定原代乳鼠心肌细胞并分为3组,实验组：转染带有强化绿色荧光蛋白（GFP）和Cyclin A2基因的重组腺病毒（Ad-Cyclin A2-GFP）;空病毒组：转染不含目的基因带有GFP的重组腺病毒（Ad-Null-GFP）;阴性对照组：未做转染处理,仅加入等量的培养基。利用GFP示踪技术,评估原代心肌细胞转染效率;转染后的细胞继续体外培养3～5d,利用免疫荧光技术分别检测Cyclin A2、磷酸化组蛋白H3（H3P）、心肌肌钙蛋白-T（c Tn T）。结果 1.荧光GFP示踪表明原代心肌细胞的转染效率高达（97±0.74）%;2.免疫荧光标记显示,空病毒组和对照组结果相似;心肌细胞特异性标记蛋白c Tn T分布于细胞质,原代心肌细胞纯度高达（95±0.62）%;心肌细胞Cyclin A2主要在胞核内聚集,少数分布于细胞质。H3P为核蛋白在细胞核内分布。3.转染Cyclin A2后,实验组H3P阳性率明显高于空病毒组和对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;实验组可见大量多核细胞,以双核为主,伴少量3核细胞。结论腺病毒作为转染载体对原代心肌细胞有很好的侵染效率;Cyclin A2超表达促进原代心肌细胞形成双核。

关键词： Cyclin A2 心肌细胞增殖基因转染免疫荧光大鼠

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过表达IL-18抑制人结直肠癌细胞HCT-116的增殖

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中国肿瘤生物治疗杂志 2018年第2期25卷 142-147页

作者：陈亚楠杨如许芝山吴敏娜路平钟根深新乡医学院第一附属医院生命科学技术研究中心河南卫辉453100 新乡医学院基础医学院微生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院肿瘤内二科河南卫辉453100

目的:研究过表达IL-18基因对人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)HCT-116细胞体内外增殖的影响及其可能的机制。方法:构建含人IL-18基因片段的载体,采用慢病毒转染法获得稳定过表达人IL-18的CRC HCT-116细胞株HCT-116/IL-18,CCK-8法检测H... 详细信息

目的:研究过表达IL-18基因对人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)HCT-116细胞体内外增殖的影响及其可能的机制。方法:构建含人IL-18基因片段的载体,采用慢病毒转染法获得稳定过表达人IL-18的CRC HCT-116细胞株HCT-116/IL-18,CCK-8法检测HCT-116/IL-18细胞与野生型HCT-116细胞的增殖,Western blotting检测两组细胞内IL-18、Cyclin D1、增殖细胞核抗原(PCNA)、DNA损伤修复酶(PARP)蛋白的表达。将HCT-116、HCT-116/IL-18细胞分别接种于裸鼠左右两侧腋下,观察成瘤性及移植瘤的生长情况,免疫组化法检测移植瘤组织中IL-18及PCNA的表达。结果:IL-18基因在HCT-116细胞内过表达,可延缓HCT-116的增殖(P<0.05或P<0.01);与HCT-116细胞相比,HCT-116/IL-18细胞内PARP表达明显增强,PCNA、Cyclin D1表达减弱(P<0.01)。HCT-116/IL-18细胞系在裸鼠体内成瘤率明显降低,成瘤率为43%,与对照组比较其移植瘤成瘤时间晚、生长慢、肿块小,且HCT-116/IL-18异种移植瘤PCNA蛋白表达下调(P<0.01)。结论:过表达IL-18基因对HCT-116细胞生长增殖具有抑制作用,其机制可能与IL-18调控细胞周期和促进DNA损伤有关。

关键词：结直肠癌白介素-18 细胞增殖移植瘤

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