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H2S抑制高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡与P2X7受体的相关性研究

神经解剖学杂志 2017年第2期33卷 123-130页

作者：李璐王娇娇杨坤丽李超堃王国红李新娟魏林郁卢娜赵红岗李东亮新乡医学院生理学与神经生物学教研室中英脑功能损伤联合实验室新乡453003 安阳市人民医院儿科安阳455000

目的:研究H_2S对高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用和可能的机制。方法:人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞、HEK 293和HEK 293-hP2X_7R细胞,分为对照组,Na HS组,KN-62组,ATP组,ATP+Na HS组和ATP+KN-62组。倒置显微镜观察细胞形态变化,C... 详细信息

目的:研究H_2S对高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用和可能的机制。方法:人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞、HEK 293和HEK 293-hP2X_7R细胞,分为对照组,Na HS组,KN-62组,ATP组,ATP+Na HS组和ATP+KN-62组。倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活力,Hoechst 33258核染色分析细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot和RT-PCR法分别检测Caspase-3、Bcl-2在蛋白和mRNA水平的表达。结果:与对照组比较,6 mmol/L ATP处理3 h后SH-SY5Y细胞损伤明显,活力降低至62.7%±3.8%(P<0.01),而凋亡率升高至30.75%±5.1%(P<0.01)。与ATP组比较,用200μmol/L Na HS和500 nmol/L KN-62预处理30 min,SH-SY5Y细胞活力分别升高至90.1%±3.8%和84.6%±3.1%(P<0.05),凋亡率则分别降低至14.73%±3.4%和18.32%±3.1%(P<0.01)。ATP组SH-SY5Y细胞内Caspase-3表达上调,Bcl-2表达下调,但Na HS和KN-62可抑制Caspase-3表达,促进Bcl-2表达。与对照组和HEK293细胞比较,用2 mmol/L ATP分别处理HEK 293、HEK 293-h P2X7R细胞3 h,可见HEK 293-h P2X7R细胞内Caspase-3表达上调(P<0.01)。与ATP组比较,200μmol/L Na HS预处理30 min,HEK 293-h P2X7R细胞内Caspase-3表达明显下调(P<0.01)。HEK 293细胞Caspase-3表达在各组无差异(P>0.05)。结论:H2S对高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有抑制作用,且呈浓度依赖性,其作用机制可能与P2X7R相关。

关键词：硫化氢凋亡 P2X7受体神经系统疾病

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P2X_7受体阻断剂对三磷腺苷诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^(2+)水平的影响

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新乡医学院学报 2017年第7期34卷 555-559页

作者：李秀娟王国红张利彬杨坤丽李超堃王璐宋景贵赵红岗李东亮新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院河南新乡453100

目的观察三磷腺苷(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^(2+)水平变化的特点,并探讨P2X_7受体阻断剂对其的影响。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞接种于含体积分数10%胎牛血清高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)中,在37℃、体积分... 详细信息

目的观察三磷腺苷(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^(2+)水平变化的特点,并探讨P2X_7受体阻断剂对其的影响。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞接种于含体积分数10%胎牛血清高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)中,在37℃、体积分数5%CO_2培养箱中培养24 h,随机分为4组,分别加入含0、1、3、5 mmol·L^(-1)ATP的培养液,每孔100μL,各组均分别作用15、30、60 min,然后用Hank's溶液洗涤细胞3次,Fluo-3/AM染细胞内Ca^(2+),Hoechst 33258染细胞核。荧光显微镜下观察细胞内荧光发射强度。另取对数生长期的SH-SY5Y细胞悬液接种于含体积分数10%胎牛血清高糖DMEM的96孔板中,在37℃、体积分数5%CO_2培养箱中培养24 h,随机分为正常对照组、ATP组及KN-62低、中、高剂量组,正常对照组细胞在每孔100μL培养液中常规培养,ATP组细胞在每孔100μL含5 mmol·L^(-1)ATP的培养液中培养,KN-62低、中、高剂量组细胞分别每孔先用100μL含100、500、1 000 nmol·L^(-1)KN-62的培养液孵育30 min,每孔再用100μL的5 mmol·L^(-1)ATP培养液处理1 h,用Hank's溶液洗涤细胞3次,Fluro-3/AM染色细胞内Ca^(2+),Hoechst 33258染色细胞核。荧光显微镜下观察细胞内荧光发射强度变化,图像分析软件记录结果,测每组细胞中Ca^(2+)的平均荧光强度。每次实验每组设3个平行复孔,实验重复3次。结果0 mmol·L^(-1)ATP组呈现荧光的细胞数量少,荧光强度弱;1、3、5 mmol·L^(-1)ATP组随着ATP剂量增加,呈现荧光的细胞数量逐渐增多,荧光强度逐渐增强;若ATP剂量相同,则随着ATP作用时间的延长,呈现荧光的细胞数量逐渐增多,荧光强度逐渐增强。正常对照组、ATP组、KN-62低、中、高剂量组细胞荧光强度分别为468.24±45.67、3 292.35±159.64、3 013.27±321.42、2 515.77±320.98、2 486.32±318.31,ATP组细胞平均荧光强度显著强于正常对照组(P<0.05);KN-62低、中、高剂量组细胞平均荧光强度均低于ATP组(P<0.05)。结论 ATP诱导SH-SY5Y细胞内Ca^(2+)升高具有浓度和时间依赖性,KN-62可部分阻断ATP的这一作用。

关键词：三磷腺苷人神经母细胞瘤 SH-SY5Y细胞 Ca^2+ P2X7受体

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大黄酸对便秘小鼠肠道传输功能和结肠肌电及结肠黏膜水通道蛋白3表达的影响

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中国老年学杂志 2017年第17期37卷 4169-4172页

作者：姜洪波孙莉莉刘伯语王昊阳何瑞芳张瑞玲张玉姣杜爱林新乡医学院第三附属医院营养科河南新乡453003 新乡医学院生理学与神经生物学教研室中英脑功能损伤联合实验室河南省高校脑研究重点实验室培育基地新乡医学院第二附属医院河南省生物精神病学重点实验室

目的探讨大黄酸对便秘小鼠肠道传输功能、结肠肌电及结肠黏膜水通道蛋白(AQP)3表达的影响。方法 90只小鼠随机分为对照组、便秘组和大黄酸组。用复方地芬诺脂片复制小鼠便秘模型后,大黄酸组用大黄酸灌胃治疗。测量3组首便时间,6 h排便数... 详细信息

目的探讨大黄酸对便秘小鼠肠道传输功能、结肠肌电及结肠黏膜水通道蛋白(AQP)3表达的影响。方法 90只小鼠随机分为对照组、便秘组和大黄酸组。用复方地芬诺脂片复制小鼠便秘模型后,大黄酸组用大黄酸灌胃治疗。测量3组首便时间,6 h排便数量,大便性状,小肠推进率,结肠肌电信号和结肠黏膜AQP3的表达。结果便秘组首粒排便时间较对照组显著延长(P<0.01),6 h内排便粒数显著减少(P<0.01),小肠推进率显著降低(P<0.01);大黄酸组首次排便时间较便秘组显著缩短(P<0.01),6 h内排便粒数显著增加(P<0.01),小鼠小肠推进率显著提高(P<0.01)。3组结肠慢波近似于正弦波样曲线,便秘组结肠慢波较不规则。与对照组相比,便秘组结肠慢波频率显著减慢(P<0.05)。与便秘组相比,大黄酸组结肠慢波频率显著增快(P<0.05)。与对照组相比,便秘组结肠慢波频率变异系数显著增大(P<0.05);与便秘组相比,大黄酸组结肠慢波频率变异系数显著降低(P<0.05);与对照组相比,便秘组结肠慢波振幅显著降低(P<0.05);与便秘组相比,大黄酸组结肠慢波振幅显著升高(P<0.05)。与对照组相比,便秘组结肠慢波振幅变异系数显著增大(P<0.05);与便秘组相比,大黄酸组结肠慢波振幅变异系数显著减小(P<0.05)。便秘组结肠AQP3平均光密度值及阳性面积表达率明显高于对照组,大黄酸组结肠AQP3平均光密度值及阳性面积表达率明显低于便秘组(均P<0.05)。结论大黄酸能够有效地提高便秘小鼠的肠道传输功能,减少便秘小鼠结肠黏膜AQP3的表达,对缓解便秘具有显著疗效。

关键词：便秘大黄酸推进率肌电结肠水通道蛋白3

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翻转课堂式生理学双语教学在口腔医学专业的实践与思考

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包头医学院学报 2017年第10期33卷 105-107页

作者：郑超张环环黄宏平邵德翠汪萌芽皖南医学院生理与神经生物学教研室安徽芜湖241002

目的:训练学生直接从英文教材获取知识的能力。方法:基于前期的教学实践与成果,首次为口腔医学专业开设翻转课堂式生理学双语教学课程,创新性应用美国医师执照考试专用教材作为学生自学英语资料,通过课前提问、集体讨论的形式检查自学情... 详细信息

目的:训练学生直接从英文教材获取知识的能力。方法:基于前期的教学实践与成果,首次为口腔医学专业开设翻转课堂式生理学双语教学课程,创新性应用美国医师执照考试专用教材作为学生自学英语资料,通过课前提问、集体讨论的形式检查自学情况,作为形成性评价,并以不记名调查问卷的方式收集学生的反馈信息。结果:期末总评成绩优秀(85分以上)率为30.77%,良好(75-84分)率为30.77%;调查问卷显示,学生普遍认为有必要或非常有必要开设生理学双语教学、采用循序渐进的双语教学等。结论:这一教学模式不仅调动了学生主动学习的积极性、提高了专业英语水平,还实现了早临床、多临床、反复临床的教学理念,利于培养集知识、能力、素质为一身的高水平、高质量的口腔医学人才。

关键词：生理学双语教学翻转课堂调查问卷

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创新型互助提问法在生理学课堂教学中的应用

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佳木斯职业学院学报 2017年第3期33卷 220-221页

作者：査盈盈邵德翠郑超张环环汪萌芽皖南医学院生理与神经生物学教研室安徽芜湖241002

课堂教学提问是一门艺术,运用得好,能吸引学生的注意力,激发学生的自主思维,加深印象,提高教学质量。本文立足于"使学生学会自主学习"的理念,运用"互助提问法",设计一种新型且有效的动态教学模式,以增强学生学习兴... 详细信息

课堂教学提问是一门艺术,运用得好,能吸引学生的注意力,激发学生的自主思维,加深印象,提高教学质量。本文立足于"使学生学会自主学习"的理念,运用"互助提问法",设计一种新型且有效的动态教学模式,以增强学生学习兴趣,促进自主思维训练,活跃教学课堂气氛,最终提高学生发现问题和解决问题的综合能力。

关键词：互助提问法生理学课堂教学自主学习教学方法改革

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以大学生创新能力训练为导向的生理学教学设计与实践

以大学生创新能力训练为导向的生理学教学设计与实践

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中国生理学会第二届全国高校生理学教研室主任高峰论坛

作者：汪萌芽皖南医学院生理与神经生物学教研室

＜正＞～～

关键词：大学生创新能力启明星创新训练计划生理学教学设计与实践

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硫化氢对肾血管性高血压大鼠动脉舒张功能的调节作用

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中国药理学通报 2016年第7期32卷 956-959页

作者：潘国聘张小毅李东亮赵红岗刘瑞丽新乡医学院药学院药理学教研室新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003

目的探讨硫化氢(H2S)对肾血管性高血压模型大鼠血压及颈总动脉血管舒张功能的影响。方法采用"两肾一夹(2K1C)"法建立肾血管性高血压模型。大鼠随机分为假手术组、双肾一夹(2K1C)模型组、2K1C+Na HS(H2S供体)组及PPG(H2S代谢... 详细信息

目的探讨硫化氢(H2S)对肾血管性高血压模型大鼠血压及颈总动脉血管舒张功能的影响。方法采用"两肾一夹(2K1C)"法建立肾血管性高血压模型。大鼠随机分为假手术组、双肾一夹(2K1C)模型组、2K1C+Na HS(H2S供体)组及PPG(H2S代谢酶抑制剂)组。术前及术后每周测量1次大鼠尾动脉收缩压(SBP)。测定颈总动脉血管形态学指标(血管外周、壁厚、壁厚与外周径的比值),观察颈总动脉的ACh介导的内皮依赖性舒张作用;免疫组化检测颈总动脉一氧化氮合成酶(e NOS)、内皮素-1(ET-1)的表达。结果PPG组及2K1C组大鼠尾动脉血压与sham组比较明显升高(P<0.05);与模型组比较,2K1C+Na HS组血压明显降低,大鼠颈总动脉壁厚外径比减小,颈总动脉对ACh介导的内皮依赖性舒张效应增强,颈总动脉一氧化氮合成酶(e NOS)含量升高、ET-1含量降低。结论给予外源性的硫化氢供体可降低血压,缓解肾血管性高血压的形成,其作用可能与改善颈总动脉血管功能有关。

关键词：硫化氢肾血管性高血压两肾一夹内皮依赖性 eNOS ET-1

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便秘小鼠结肠肌的电生理变化

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中国老年学杂志 2017年第11期37卷 2641-2642页

作者：姜洪波杜爱林刘伯语张越孙莉莉黄静静张瑞岭罗晓秋许予明新乡医学院第三附属医院营养科河南新乡453003 郑州大学第一附属医院神经内科新乡医学院生理学与神经生物学教研室中英脑功能损伤联合实验室河南省高校脑研究重点实验室培育基地新乡医学院第二附属医院河南省生物精神病学重点实验室

目的观察便秘小鼠结肠肌的电生理变化。方法用复方地芬诺酯混悬液对小鼠进行灌胃建立便秘模型,然后测定其小肠结肠段的肌电,并分析其电生理活动变化。结果与对照组比较,便秘组慢波肌电频率明显增快(P<0.01);结肠肌电慢波频率的变异... 详细信息

目的观察便秘小鼠结肠肌的电生理变化。方法用复方地芬诺酯混悬液对小鼠进行灌胃建立便秘模型,然后测定其小肠结肠段的肌电,并分析其电生理活动变化。结果与对照组比较,便秘组慢波肌电频率明显增快(P<0.01);结肠肌电慢波频率的变异系数明显增大(P<0.01);结肠肌电慢波振幅明显减少(P<0.01);结肠肌电慢波振幅变异系数明显增大(P<0.01)。结论便秘小鼠结肠肌电慢波频率及振幅的异常改变可能是导致结肠传输减慢的重要原因。

关键词：便秘肌电结肠

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多索茶碱片联合布地奈德混悬液治疗支气管哮喘患者的疗效及对肺功能和细胞因子水平的影响

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慢性病学杂志 2017年第2期17卷 182-184页

作者：李娜王国红谢静新乡医学院第三附属医院重症医学科河南新乡453003 新乡医学院基础医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院三全学院临床学院诊断教研室河南新乡453003

目的探讨多索茶碱片联合布地奈德混悬液治疗支气管哮喘(BA)患者的疗效及对肺功能与细胞因子水平的影响。方法选取2014年3月—2016年6月新乡医学院第三附属医院104例BA患者,随机分为对照组和观察组,各52例。对照组给予布地奈德混悬液治疗... 详细信息

目的探讨多索茶碱片联合布地奈德混悬液治疗支气管哮喘(BA)患者的疗效及对肺功能与细胞因子水平的影响。方法选取2014年3月—2016年6月新乡医学院第三附属医院104例BA患者,随机分为对照组和观察组,各52例。对照组给予布地奈德混悬液治疗,观察组在此基础上联合多索茶碱片,均治疗3个月。统计两组临床疗效并对比治疗前后肺功能指标[1秒率(FEV1/FVC)、1秒用力呼气容积与预计值百分比(FEV1%)、呼气峰值流速(PEF)]及细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-17(IL-17)]水平。结果观察组治疗总有效率94.23%高于对照组80.77%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组FEV1/FVC、FEV1%、PEF及TNF-α、IL-17水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组FEV1/FVC、FEV1%、PEF高于对照组,TNF-α、IL-17低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论给予BA患者多索茶碱片与布地奈德混悬液联合治疗,可有效改善患者肺功能,降低细胞炎性因子水平。

关键词：支气管哮喘多索茶碱片布地奈德混悬液肺功能细胞因子

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面向临床的医学神经生物学教学模式探索

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右江民族医学院学报 2017年第4期39卷 326-328页

作者：郑超黄宏平张艳张环环秦雯邵德翠王邦安汪萌芽皖南医学院生理与神经生物学教研室细胞电生理研究室安徽芜湖241002

基于前期的教学实践与体会,首次为临床医学实验班开设面向临床实践的《医学神经生物学》课程,创新性安排部分内容在实验室结合实践进行教学,结合应用美国医师执照考试专用教材作为辅助英语教材,发放调查问卷收集学生的反馈信息。通过这... 详细信息

基于前期的教学实践与体会,首次为临床医学实验班开设面向临床实践的《医学神经生物学》课程,创新性安排部分内容在实验室结合实践进行教学,结合应用美国医师执照考试专用教材作为辅助英语教材,发放调查问卷收集学生的反馈信息。通过这些教学改革措施的实施,在进一步提高教学质量的前提下,加强学生实践能力和专业英语水平的培养,以实现当代医学教育向"生物—心理—社会医学模式"的转变。

关键词：医学神经生物学实践教学双语教学调查问卷生物—心理—社会医学模式

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