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过表达微小RNA-130a-3P对LPS诱导心肌细胞损伤的干预作用及其机制

中国应用生理学杂志 2022年第4期38卷 335-340页

作者：苗莹莹袁欢欢黄敏杰付升旗新乡医学院三全学院人体解剖学教研室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系河南新乡453003

目的:探讨miRNA-130a-3p对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞自噬与凋亡的影响及分子机制。方法:H9C2心肌细胞随机分为5组,即正常对照组,LPS模型组,miRNA阴性对照组(miRNA-negative control组),miRNA-130a-3p mimics组(过表达miRNA-130a-3p),miRNA-130a-3p mimics+LY294002组(过表达miRNA-130a-3p+PI3K抑制)。LPS模型组即终浓度为10μg/ml的LPS诱导24 h,miRNA阴性对照组与miRNA-130a-3p mimics组是利用lipo3000将阴性对照miRNA及miRNA-130a-3p mimics转染至H9C2细胞,培养24 h后,再将LPS加入培养基中培养24 h。miRNA-130a-3p mimics+LY294002组是利用lipo3000将miRNA-130a-3p mimics转染至H9C2细胞,同时在培养基中加入10μmol/L(终浓度)的LY294002,培养24 h后,再将浓度为10μg/ml的LPS加入培养基中培养24 h。所有实验均重复5次以上。利用RT-qPCR检测细胞中miRNA-130a-3p mRNA的表达水平,利用CCK-8实验检测细胞活性,利用ELISA实验检测细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,利用比色法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;利用Western blot检测细胞中p-PI3K蛋白,p-AKT蛋白,Bax蛋白,Bcl-2蛋白,cleaved-caspase-3蛋白,LC3蛋白,p62蛋白的表达水平。结果:结果显示,与正常组相比较,LPS模型细胞中miRNA-130a-3p mRNA水平,p-PI3K蛋白与p-AKT蛋白的水平显著低于正常对照组(P<0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞中p-PI3K,p-AKT蛋白的表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与正常对照组相比较,LPS组细胞活性显著降低,细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量显著升高(P<0.01),SOD的含量显著降低(P<0.01),细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达和LC3II/I的比率显著降低(P<0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics可提高细胞活性,降低细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量(P<0.01,P<0.05),提高SOD的含量(P<0.05),降低细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达(P<0.01),促进Bcl-2蛋白的表达(P<0.01),提高LC3II/I的比率(P<0.05);与miRNA-130a-3p mimics组相比较,miRNA-130a-3p mimics+LY294002组,可部分逆转miRNA-130a-3p mimics对细胞的作用。结论:过表达miRNA-130a-3p可部分通过激活PI3K/AKT信号通路促进细胞的自噬与抑制细胞凋亡,减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

关键词：微小RNA-130a-3p PI3K/AKT信号通路自噬细胞凋亡细胞损伤

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miRNA-130a-3p通过调控NF-κB信号通路影响损伤心肌细胞

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中国临床解剖学杂志 2023年第2期41卷 207-211页

作者：苗莹莹安雷雷付升旗新乡医学院三全学院人体解剖学教研室新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系河南新乡453003

目的探讨miRNA-130a-3p在LPS诱导的心肌细胞损伤中的作用及可能机制。方法H9C2心肌细胞分为4组,即正常对照组、LPS模型组、miRNA阴性对照组、miRNA-130a-3p mimics组,利用RT-qPCR检测miRNA-130a-3p mRNA表达水平,CCK-8检测细胞活性,ELISA检测培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量,Western blot检测NF-κBp65、IκBα、Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平。结果RT-qPCR结果显示LPS模型细胞中miRNA-130a-3p mRNA水平显著低于正常对照组;与正常对照组相比较,LPS组细胞活性显著降低,而与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞活性显著升高;与正常对照组相比较,LPS组细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著升高,而与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著降低;与正常对照组相比较,LPS组细胞中NF-κBp65、Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达量显著升高,IκBα与Bcl-2蛋白表达量显著降低,而与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞中NF-κBp65、Bax及Cleaved-Caspase-3蛋白表达量显著降低,IκBα与Bcl-2蛋白的表达量显著升高。结论miRNA-130a-3p可通过抑制NF-κB信号通路激活,抑制细胞凋亡,提高细胞活性,减少炎性因子释放,从而减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

关键词：微小RNA-130a-3p NF-κB信号通路细胞损伤细胞凋亡

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椎动脉V_(3)段与第2颈神经毗邻关系的解剖学观测及其临床意义

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中国临床解剖学杂志 2025年第1期43卷 9-13页

作者：安雷雷孔祥玉刘鹏飞张宾马真杜心如新乡医学院三全学院人体解剖学教研室河南新乡453003 承德医学院人体解剖学教研室河北承德067000 首都医科大学附属北京朝阳医院北京100020

目的观察椎动脉第3段垂直段(V_(3)v)与第2颈神经(C_(2N))毗邻关系,为椎动脉型颈椎病(Cervical spondylotic arteriopathy,CSA)及枕颈痛合并眩晕的发生机制提供形态学依据。方法头颈标本33侧,解剖剥离法显露C_(2N)和V_(3)v及其相邻的结构... 详细信息

目的观察椎动脉第3段垂直段(V_(3)v)与第2颈神经(C_(2N))毗邻关系,为椎动脉型颈椎病(Cervical spondylotic arteriopathy,CSA)及枕颈痛合并眩晕的发生机制提供形态学依据。方法头颈标本33侧,解剖剥离法显露C_(2N)和V_(3)v及其相邻的结构,观测V_(3)v与C_(2N)交叉部位,范围及形态。结果所有标本中V_(3)v与C_(2N)前支均为横向交叉,跨越椎动脉后方(33/33,100%)。依据其接触程度可分为3种类型:①接触性交叉:C_(2N)的前支依其条索状原形与V_(3)v横向交叉,共6侧占18.2%;②压痕性交叉:C_(2N)横跨V_(3)v段呈扁带状或纵向凹痕状,共7侧占21.2%;③半缠绕压扁带性交叉:C_(2N)前支呈扁带状横向半环形缠绕V_(3)v,共20侧占60.6%。交叉处呈直角交叉16侧占48.5%。V_(3)v交叉前和交叉处管径分别为(3.82±0.07)mm、(3.35±0.05)mm;交叉前和交叉处C_(2N)前支宽径为(2.38±0.05)mm、(3.53±0.09)mm。交叉处距中线距离(23.25±0.39)mm;交叉处距同侧寰枢外侧关节囊距离(6.26±0.2)mm;距同侧C2-3关节突关节距离(11.78±0.3)mm。结论V_(3)v与C_(2N)前支形成横向交叉性接触,其中以半缠绕压扁带性交叉为主,这种毗邻关系可能使C_(2N)前支压迫V_(3)v使大脑供血减少,可能是CSA发生机制之一和/或高血压合并枕颈痛的形态学基础。

关键词：椎动脉第3段第2颈神经枕颈痛椎动脉型颈椎病解剖剥离标本

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NLRP3介导神经炎性反应在帕金森病中的研究进展

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中华行为医学与脑科学杂志 2023年第9期32卷 859-864页

作者：郭岩程葆华尹海燕济宁医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室济宁262067 济宁医学院基础医学院人体解剖学教研室济宁262067

帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种神经退行性疾病,主要病理表现为中脑黑质多巴胺能神经元的变性、死亡导致纹状体多巴胺缺乏,以及细胞内出现α-突触核蛋白(α-synuclein)聚集体。中脑黑质小胶质细胞过度激活介导的NLRP3炎性小体活... 详细信息

帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种神经退行性疾病,主要病理表现为中脑黑质多巴胺能神经元的变性、死亡导致纹状体多巴胺缺乏,以及细胞内出现α-突触核蛋白(α-synuclein)聚集体。中脑黑质小胶质细胞过度激活介导的NLRP3炎性小体活化引起的炎性反应促进了多巴胺能神经元的退变,在PD的发生发展中具有关键作用。α-synuclein聚集、线粒体功能障碍、自噬及多巴胺受体缺陷是小胶质细胞NLRP3炎性小体激活介导的黑质神经元退行性变的关键调节因素。本文就小胶质细胞NLRP3炎性小体激活及调节的分子机制在PD中的作用进行综述,并探讨主要的靶向NLRP3炎性小体激活机制的潜在PD治疗靶点或方法,以期为PD治疗提供理论依据和启示。

关键词：帕金森病 NLRP3炎性小体神经胶质细胞 α-突触核蛋白线粒体

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巨噬细胞胞外诱捕网对心血管疾病的调控作用研究进展

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新乡医学院学报 2024年第7期41卷 614-618页

作者：李星辰吴倩倩赵可心王润森王晓萍新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系河南新乡453003 新乡医学院第四临床学院河南新乡453003 新乡医学院弘毅书院河南新乡453003

巨噬细胞胞外诱捕网(METs)是由巨噬细胞产生的细胞外纤维网状结构。METs在动脉粥样硬化、心肌梗死和其他心血管疾病(CVDs)的发生和发展中起到重要作用。本文对METs在CVDs中的作用机制、未来的研究方向及将其作为临床疾病潜在治疗靶点的... 详细信息

巨噬细胞胞外诱捕网(METs)是由巨噬细胞产生的细胞外纤维网状结构。METs在动脉粥样硬化、心肌梗死和其他心血管疾病(CVDs)的发生和发展中起到重要作用。本文对METs在CVDs中的作用机制、未来的研究方向及将其作为临床疾病潜在治疗靶点的可能性进行阐述。

关键词：巨噬细胞胞外诱捕网心血管疾病

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多巴胺受体在小肠的分布与定位

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解剖学报 2024年第5期55卷 612-618页

作者：陈钧钧周立苏田王现伟张海龙王志勇新乡医学院人体解剖学与组织学胚胎学系河南新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 河南大学基础医学院河南开封475000

目的探讨多巴胺受体D3~D5在不同物种小肠的分布和定位。方法应用免疫组织化学和免疫印迹法,分别检测D3~D5在小鼠、大鼠和恒河猴小肠的分布及表达水平,通过免疫荧光双标技术观察小肠固有层(LP)免疫球蛋白A阳性浆细胞(IgA^(+)PC)中D3~D5... 详细信息

目的探讨多巴胺受体D3~D5在不同物种小肠的分布和定位。方法应用免疫组织化学和免疫印迹法,分别检测D3~D5在小鼠、大鼠和恒河猴小肠的分布及表达水平,通过免疫荧光双标技术观察小肠固有层(LP)免疫球蛋白A阳性浆细胞(IgA^(+)PC)中D3~D5的表达。结果D3和D5在小鼠、大鼠和恒河猴小肠的上皮层、LP、黏膜下神经丛(SMP)和肌间神经丛(MP)内广泛分布;D4在小鼠和恒河猴小肠的分布与D3和D5一致,但在大鼠小肠仅分布于上皮层和LP。小鼠和大鼠LP内的IgA^(+)PC均表达D3和D5,不表达D4。结论D3和D5在小鼠、大鼠和恒河猴小肠具有相似的分布和定位模式,D4则存在物种差异。多巴胺可能参与调节IgA^(+)PC的功能。

关键词：多巴胺受体小肠免疫球蛋白A阳性浆细胞免疫印迹法免疫荧光小鼠大鼠恒河猴

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小鼠中缝背核向屏状核投射神经通路的形态学特征

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解剖学报 2024年第4期55卷 414-421页

作者：巩涛蔡志平史娟李云庆包头医学院人体解剖学教研室内蒙古包头014040 空军军医大学人体解剖学与组织学胚胎学教研室梁銶琚脑研究中心西安710032

目的探索小鼠中缝背核(DRN)向屏状核(CLA)投射神经通路的形态学特征。方法分别将逆行示踪剂594 retrobeads和顺行示踪剂生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入CLA(n=3)和DRN(n=3),结合5-羟色胺(5-HT)免疫荧光染色,观察逆行标记神经元的分布和神... 详细信息

目的探索小鼠中缝背核(DRN)向屏状核(CLA)投射神经通路的形态学特征。方法分别将逆行示踪剂594 retrobeads和顺行示踪剂生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入CLA(n=3)和DRN(n=3),结合5-羟色胺(5-HT)免疫荧光染色,观察逆行标记神经元的分布和神经化学特征以及顺标神经纤维和终末在全脑和CLA内的分布;利用钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)-Cre、谷氨酸脱羧酶67(GAD67)-Cre动物结合狂犬逆行跨突触病毒(RV)标记,观察DRN-CLA通路的下游靶神经元类型。结果DRN的吻、中、尾段均能观察到594 retrobeads阳性神经元的胞体,中段的腹侧亚核(DRV)分布较多,且90%以上的逆行标记神经元为5-HT阳性。BDA顺标纤维密集分布于腹侧被盖区、束旁核、腹侧苍白球、杏仁中央核等区,CLA内的神经纤维和终末相对稀疏。RV跨突触逆行标记结果显示,CaMKⅡ-Cre动物的DRN中含有较多的突触前神经元,而GAD67-Cre动物DRN中突触前逆行标记神经元较少。结论DRN-CLA通路是以DRV分布为主的5-HT能投射通路,其在CLA内的纤维和终末较为稀疏,主要与CLA内的CaMKⅡ阳性神经元形成突触联系。

关键词：中缝背核屏状核 5-羟色胺能神经元钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶Ⅱ阳性神经元神经束路示踪免疫荧光小鼠

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乙酰紫草素对耐药结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第19期40卷 2842-2846页

作者：李莉朱雨姜京植金雪梅朴丽花延边大学医学院解剖学教研室延边大学医学院组织胚胎学教研室延边大学附属医院病理科

目的探究乙酰紫草素对奥沙利铂耐药结肠癌HCT116细胞（HCT116/L-OHP）增殖、侵袭迁移的影响。方法将HCT116/L-OHP细胞分为空白组、对照组和低、中、高剂量实验组。对照组用10μmol·L-1奥沙利铂处理细胞；低、中、高剂量实验组分... 详细信息

目的探究乙酰紫草素对奥沙利铂耐药结肠癌HCT116细胞（HCT116/L-OHP）增殖、侵袭迁移的影响。方法将HCT116/L-OHP细胞分为空白组、对照组和低、中、高剂量实验组。对照组用10μmol·L-1奥沙利铂处理细胞；低、中、高剂量实验组分别用1.25、2.50和5.00μmol·L-1乙酰紫草素和10μmol·L-1奥沙利铂共同处理细胞；空白组给予常规培养。用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测HCT116/L-OHP细胞增殖情况，用流式细胞仪检测细胞凋亡情况，用Transwell实验法检测细胞迁移和侵袭能力，用蛋白质印迹法检测耐药侵袭相关蛋白P-糖蛋白（P-gp）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、核因子κB（NF-κB）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白的表达情况。结果空白组、对照组和低、中、高剂量实验组的细胞抑制率分别为0、（8.27±0.01）%、（10.53±0.02）%、（34.17±0.01）%和（48.47±0.05）%,细胞凋亡率分别为（0.13±0.02）%、（1.37±1.04）%、（9.73±0.87）%、（26.71±4.26）%和（40.75±4.70）%,侵袭细胞数分别为（130.70±9.81）、（127.10±9.21）、（71.83±3.57）、（28.83±1.87）和（19.63±6.11）个，迁移细胞数分别为（150.50±10.17）、（148.40±8.13）、（94.58±4.09）、（63.98±5.09）和（31.85±5.50）个，P-gp蛋白相对表达水平分别为0.91±0.01、0.89±0.02、0.75±0.04、0.61±0.07和0.25±0.03,MMP2蛋白相对表达水平分别为1.24±0.01、1.22±0.02、0.96±0.01、0.53±0.01和0.16±0.02,NF-κB-p65蛋白相对表达水平分别为1.12±0.12、1.07±0.01、0.78±0.01、0.64±0.02和0.31±0.03,HIF-1α相对表达水平分别为0.65±0.04、0.52±0.03、0.41±0.02、0.35±0.03和0.09±0.01。低、中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论乙酰紫草素联合奥沙利铂可显著抑制HCT116/L-OHP细胞的增殖、侵袭和迁移，诱导细胞凋亡，其机制可能与抑制P-gp、MMP2的表达及NF-κB/HIF-1α信号活化有关。

关键词：乙酰紫草素结肠癌 P糖蛋白耐药性侵袭转移

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银莲花素A对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第6期40卷 830-833页

作者：朱雨姜京植金雪梅李莉朴丽花延边大学医学院组织胚胎学教研室延边大学附属医院病理科延边大学医学院解剖学教研室

目的探究银莲花素A（RA）对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡及β-连环蛋白（β-catenin）/c-Myc通路的影响。方法体外培养人结肠癌HCT116细胞，将细胞分为对照组和低、中、高剂量实验组。低、中、高剂量实验组分别用5、10和20μmol·L... 详细信息

目的探究银莲花素A（RA）对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡及β-连环蛋白（β-catenin）/c-Myc通路的影响。方法体外培养人结肠癌HCT116细胞，将细胞分为对照组和低、中、高剂量实验组。低、中、高剂量实验组分别用5、10和20μmol·L-1RA处理细胞。用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测RA对结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用；用荧光显微镜观察细胞核的形态学改变；用流式细胞术检测细胞凋亡率；用蛋白质印迹法检测细胞β-catenin/c-Myc信号通路相关蛋白的表达情况。结果对照组和低、中、高剂量实验组的细胞抑制率分别为0、（19.15±0.65）%、（35.11±0.40）%和（49.93±1.13）%,细胞凋亡率分别为（0.16±0.18）%、（9.26±0.42）%、（17.87±2.54）%和（38.10±2.70）%,β-catenin蛋白相对表达水平分别为0.74±0.03、0.69±0.01、0.33±0.02和0.16±0.04,c-Myc蛋白相对表达水平分别为0.89±0.01、0.54±0.03、0.29±0.03和0.13±0.04,细胞周期素D1（Cyclin D1）蛋白相对表达水平分别为0.84±0.04、0.66±0.01、0.48±0.06和0.21±0.03,Cleaved-Caspase3相对表达水平分别为0.19±0.03、0.26±0.04、0.45±0.04和0.78±0.01。低、中、高剂量实验组的上述指标与对照组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 RA可抑制结肠癌HCT116细胞增殖，并诱导细胞凋亡，可能与抑制β-catenin/c-Myc信号通路有关。

关键词：银莲花素A β-连环蛋白结肠癌细胞增殖凋亡

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椎动脉第3段的临床解剖研究进展

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中国临床解剖学杂志 2024年第6期42卷 734-740页

作者：安雷雷孔祥玉杜心如新乡医学院三全学院人体解剖学教研室河南新乡453003 首都医科大学附属北京朝阳医院北京100020

随着老龄人口的增多,椎动脉(vertebral artery,VA)供血不足导致的眩晕越来越多见,有关VA形态学研究已逐渐引起重视。由于其第3段(V3)行程复杂、弯曲多,与寰枕、寰枢关节毗邻,头颈部活动其血流受到影响。骨关节增龄性改变如韧带肥厚、关... 详细信息

随着老龄人口的增多,椎动脉(vertebral artery,VA)供血不足导致的眩晕越来越多见,有关VA形态学研究已逐渐引起重视。由于其第3段(V3)行程复杂、弯曲多,与寰枕、寰枢关节毗邻,头颈部活动其血流受到影响。骨关节增龄性改变如韧带肥厚、关节不稳及椎动动脉硬化等,均有可能使椎动脉受压、血管管道变窄,导致脑血流量减少,所以椎动脉V3段是近年研究热点,现将相关研究进行综述,以期为临床应用提供参考。

关键词：椎动脉第3段形态特征变异临床应用

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