检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2021年第12期41卷 2404-2410页

作者：朱梦含刘英玉蒋金豆卢玮夏利宁衡昭君新疆农业大学动物医学学院自治区重点实验室“新疆草食动物新药研究与创制重点实验室”新疆乌鲁木齐830052

为了解乌鲁木齐市周边绵羊养殖农户的沙门菌污染及其耐药性和致病力,采集乌鲁木齐市周边5家农户绵羊源的285份样品,按照国家标准GB 4789.4-2016进行沙门菌的分离培养,结合PCR方法鉴定,检测了19种毒力基因的编码情况,采用琼脂稀释法测定... 详细信息

为了解乌鲁木齐市周边绵羊养殖农户的沙门菌污染及其耐药性和致病力,采集乌鲁木齐市周边5家农户绵羊源的285份样品,按照国家标准GB 4789.4-2016进行沙门菌的分离培养,结合PCR方法鉴定,检测了19种毒力基因的编码情况,采用琼脂稀释法测定了13种抗菌药物的耐药情况。共分离鉴定出62株沙门菌,分离率为24.03%,其中粪便、肛拭子、饲料、体表拭子的检出率依次为13.82%(10/78),30.21%(29/96),13.33%(2/15),30.43%(21/69);19种毒力基因检出了16种,有沙门菌毒力岛上的sipB(100.00%)、invJ(98.39%)、mogA(87.10%)、spiA(98.39%)、sifA(87.10%)、ssaQ(100.00%)、sseL(66.13%)、mgtC(80.65%)、araB(98.39%)、sopB(93.55%),毒力质粒上的spvA(16.13%)、spvR(16.13%),菌毛上的lpfC(87.10%)、bcf(66.13%)以及肠毒素stn(96.77%);菌株的耐药率依次为:阿莫西林-克拉维酸钾和四环素(93.5%)、氨苄西林(91.9%)、头孢噻呋(80.6%)、多黏菌素E(79.0%)、头孢曲松钠(69.4%)、头孢西丁钠(66.1%)、卡那霉素(64.5%)、庆大霉素(59.7%)、恩诺沙星(40.3%)、氯霉素和阿奇霉素(1.6%);沙门菌的多重耐药最高达到10耐,依次从高到低是8耐(23.3%)、9耐(21.7%)、10耐(16.7%)、5耐和6耐(11.7%)、7耐(8.3%)、3耐(5.0%)、4耐(3.3%)。乌鲁木齐市周边散农户羊场的沙门菌污染率较高,具有较高的致病性,耐药性现象严重。

关键词：绵羊沙门菌分离鉴定毒力基因耐药性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

野山杏总黄酮对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用

引用

南京农业大学学报 2024年

作者：阿力米热·阿布都外力吉利伟冯慧勇卫丁一海婷玉万政良冯浩强戴小华新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室山东鲁抗舍里乐药业有限公司

[目的]野山杏作为药食两用的天然植物，多数研究表明野山杏具有良好的抗炎作用，尤其是其总黄酮成分，但是相关的抗炎机制尚较缺乏。[方法]该研究基于脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激RAW264.7细胞产生炎症，构建体外细胞炎症模... 详细信息

[目的]野山杏作为药食两用的天然植物，多数研究表明野山杏具有良好的抗炎作用，尤其是其总黄酮成分，但是相关的抗炎机制尚较缺乏。[方法]该研究基于脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激RAW264.7细胞产生炎症，构建体外细胞炎症模型，以MTT法检测不同浓度野山杏总黄酮对RAW264.7巨噬细胞活性的影响以筛选适宜的实验浓度；分别采用Griess法和酶联免疫吸附试验（ELISA）测定50、100、200 μg·mL-1野山杏总黄酮作用后各组细胞中NO、TNF-α、PEG2、IL-1β、IL-6、IL-10和COX-2的释放量；RT-PCR分析各组中COX-2、IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA的相对表达水平；免疫印迹实验（WB）观察各组中NF-κBp65、p-NF-κB p65以及COX-2的蛋白表达。[结果]细胞活力实验表明野山杏总黄酮在50～200 μg·mL-1内对细胞无毒性作用，为安全浓度范围。野山杏总黄酮可以显著抑制LPS刺激RAW264.7细胞NO释放，且呈剂量依赖性抑制。野山杏总黄酮不同剂量组(50、100、200 μg·mL-1)呈剂量依赖性抑制COX-2、TNF-α的mRNA表达，100 μg·mL-1和200 μg·mL-1时显著抑制IL-1β的mRNA表达。蛋白印迹结果表明，经野山杏总黄酮处理可显著下调NF-κB p65、p-NF-κB p65以及COX-2的蛋白表达。[结论]野山杏总黄酮可能通过抑制NF-κB/COX-2信号通路减少细胞炎症因子的释放和炎症相关蛋白的表达，从而发挥良好的抗炎作用。

关键词：野山杏总黄酮小鼠巨噬细胞脂多糖炎症信号通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

BVDV囊膜蛋白E2重组腺病毒的构建及免疫效果研究

引用

中国预防兽医学报 2024年第10期46卷 1065-1071页

作者：吕雯雯塞力克·杰恩斯叶鸿艳张亚平刘芯怡史慧君付强新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆草食动物新药研究与创制自治区重点实验室新疆乌鲁木齐830052

为构建牛病毒性腹泻病毒(BVDV)囊膜蛋白E2重组腺病毒并分析其免疫效果。本研究通过PCR扩增获得目的基因BVDV E2,将其与穿梭载体pDC316-CMV-EFla-copGFP连接得到重组腺病毒载体,抽提质粒后酶切鉴定。将目的质粒与腺病毒骨架质粒p BHGlox-... 详细信息

为构建牛病毒性腹泻病毒(BVDV)囊膜蛋白E2重组腺病毒并分析其免疫效果。本研究通过PCR扩增获得目的基因BVDV E2,将其与穿梭载体pDC316-CMV-EFla-copGFP连接得到重组腺病毒载体,抽提质粒后酶切鉴定。将目的质粒与腺病毒骨架质粒p BHGlox-ΔE1,3cre采用AdMax系统共转染至Low Passage 293细胞中得到重组腺病毒rAdv-E2,同时包装重组腺病毒rAdv-EGFP用于阴性对照并均经PCR和测序鉴定;将重组腺病毒rAdv-E2和rAdv-EGFP分别感染Low Passage 293细胞后扩繁,并采用RT-PCR和TCID_(50)检测目的基因的表达及腺病毒滴度;将BVDV E2基因克隆至原核表达载体pET-28a中,转化至大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞,使用IPTG诱导表达后经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化获得重组E2蛋白(rE2),用于后续特异性抗体的检测;以1×10^(8)TCID_(50)/只分别将重组腺病毒r Adv-E2和r Adv-EGFP经肌肉注射免疫BALB/c小鼠,分别于第0、14 d两次免疫,首免后分别于7 d、14 d、21 d、28 d断尾采血,通过间接ELISA方法检测各组小鼠血清抗体水平;于首免后21 d时分别以BVDV TC株攻毒,于攻毒后0、5 d、10 d及15 d从各组小鼠中随机剖杀3只,取肝脏、肺脏、肾脏组织,使用福尔马林溶液固定小鼠各组织后,经脱水浸蜡、包埋、切片、HE染色后观察攻毒后各组小鼠的组织病理变化情况。结果显示,RT-PCR鉴定结果表明重组腺病毒r Adv-E2表达E2基因;ELISA检测结果显示,rAdv-E2组小鼠在免疫后7 d、14 d、21 d时抗体水平升高,28 d时显著升高,rAdv-EGFP组小鼠抗体水平无明显变化,rAdv-E2组小鼠的抗体水平整体极显著高于rAdv-EGFP组(P<0.001、P<0.0001),表明rAdv-E2诱导小鼠产生了良好的体液免疫反应;组织病理切片观察结果显示,BVDV攻毒后,接种rAdv-EGFP的对照组小鼠肝脏组织出现肝细胞变性坏死、水肿、炎性细胞增多,中央静脉有淤血产生;肺脏组织病变特征主要为肺泡破裂融合,炎性细胞浸润、出血、充血,黏膜脱落;肾脏组织有炎症产生,出现淋巴细胞浸润等病变特征,rAdv-E2免疫组小鼠各组织仅出现较轻的细胞病变,表明重组腺病毒r Adv-E2可以保护BALB/c小鼠免受BVDV的感染而致病。综上结果表明,重组腺病毒r Adv-E2将有望成为防控BVDV感染的新型疫苗。

关键词：牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2 腺病毒载体免疫效果病理变化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一例牛源产气荚膜梭菌的分离鉴定和药敏试验

引用

草食家畜 2025年第1期 23-28页

作者：宫震付修龙金映红薛晶李月张凌夏俊新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心乌鲁木齐830000 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830000 农业农村部草食动物疫病防控重点实验室(省部共建) 乌鲁木齐830000

【目的】新疆某牛场2头犊牛突然死亡,本试验旨在明确此次发病的病原,为牛场疫病防控提供指导。【方法】无菌采集2份突然死亡的犊牛脏器和肠道样品,从脏器中分离纯化出1株细菌,对其进行培养特性观察、PCR鉴定和药敏试验。【结果】结果显... 详细信息

【目的】新疆某牛场2头犊牛突然死亡,本试验旨在明确此次发病的病原,为牛场疫病防控提供指导。【方法】无菌采集2份突然死亡的犊牛脏器和肠道样品,从脏器中分离纯化出1株细菌,对其进行培养特性观察、PCR鉴定和药敏试验。【结果】结果显示分离细菌为产气荚膜梭菌,该分离菌株对氨苄西林、头孢噻呋钠、环丙沙星等抗生素敏感性较高,对链霉素、卡那霉素、替米考星等不敏感。【结论】结果表明,此次导致牛场犊牛突然死亡的病原为产气荚膜梭菌,对氨苄西林、头孢噻呋钠、环丙沙星等抗生素敏感,对链霉素、卡那霉素、替米考星等抗生素耐药。

关键词：分离鉴定产气荚膜梭菌药敏试验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牛冠状病毒N蛋白的原核表达及对小鼠免疫原性的初步评价

引用

中国兽医学报 2024年第12期44卷 2540-2548页

作者：蒋倩闵芳马志刚梁宇萌陶芯宇丁晓军李添庆钟旗姚刚马雪连新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室新疆乌鲁木齐830052 新疆畜牧科学院动物科学研究所新疆乌鲁木齐830011

牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)可引起新生犊牛腹泻和呼吸道疾病,严重时可导致犊牛死亡,给养牛业造成巨大的经济损失。目前我国尚未有自主研发的针对BCoV的疫苗,导致BCoV流行性高、传播范围广,因此开发具有保护性BCoV的疫苗是当... 详细信息

牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)可引起新生犊牛腹泻和呼吸道疾病,严重时可导致犊牛死亡,给养牛业造成巨大的经济损失。目前我国尚未有自主研发的针对BCoV的疫苗,导致BCoV流行性高、传播范围广,因此开发具有保护性BCoV的疫苗是当务之急。本研究旨在表达BCoV N蛋白并分析其免疫原性,首先用PCR方法扩增N蛋白基因,构建pET-30a-N重组质粒,表达并纯化N蛋白,再将N蛋白与佐剂配伍免疫小鼠;采用间接ELISA检测小鼠IgG和IgA抗体水平及滴度,利用流式细胞术检测小鼠脾脏T淋巴细胞分群比例以及相关免疫细胞因子的释放情况。结果显示,成功获得BCoV可溶性N蛋白,大小约为55kDa;ELISA检测结果显示,免疫组小鼠血清IgG抗体效价为1∶51200,免疫组小鼠血清IgA抗体效价为1∶3200;流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,免疫组CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群比例极显著升高(P<0.01),TNF-α释放显著增多(P<0.05),产生偏向辅助性T细胞增加和TNF-α分泌增多的细胞免疫应答。研究表明,通过原核表达系统能成功实现BCoV N蛋白的可溶性表达,且获得的BCoV N蛋白免疫原性良好,可诱导免疫小鼠产生强烈的体液免疫和细胞免疫反应。为开发安全有效的BCoV亚单位疫苗提供了重要的技术支持。

关键词：牛冠状病毒 N蛋白亚单位疫苗小鼠免疫原性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于RAA-CRISPR/Cas12a建立牛肠道病毒的可视化快速检测方法与初步应用

引用

中国动物传染病学报 2024年

作者：热则古丽·艾科拜尔秦刚陈俊贞李迎新杨莉马雪连姚刚史慧君付强新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制自治区重点实验室新疆巴楚县畜牧兽医站

为建立一种基于重组酶介导的扩增技术（RAA）和CRISPR/Cas12a相结合的牛肠道病毒（BEV）可视化检测方法，本研究基于BEV VP1基因保守区域设计RAA反应的特异性引物和探针，优化RAA-CRISPR/Cas12a检测方法，并验证其特异性、灵敏性和重复... 详细信息

为建立一种基于重组酶介导的扩增技术（RAA）和CRISPR/Cas12a相结合的牛肠道病毒（BEV）可视化检测方法，本研究基于BEV VP1基因保守区域设计RAA反应的特异性引物和探针，优化RAA-CRISPR/Cas12a检测方法，并验证其特异性、灵敏性和重复性。同时使用PCR和RAA-CRISPR/Cas12a检测251份犊牛腹泻样品，分析BEV感染情况，完成PCR和RAA-CRISPR/Cas12a平行对比分析。结果表明，在RAA-CRISPR/Cas12a检测方法中，检测结果为可视化荧光，分析得出BEV的灵敏度为3×100copies/μL，具有良好的特异性和重复性，检测时间为30 min；分布使用PCR和RAA-CRISPR/Cas12a检测251份腹泻样本，BEV阳性检出率分别为9.96%和30.27%。本试验建立的RAA-CRISPR/Cas12a检测方法比PCR方法更加灵敏、高效、稳定，可用于BEV的可视化快速检测，为犊牛腹泻的病原鉴别诊断提供了技术支持。

关键词：牛肠道病毒重组酶介导等温核酸扩增技术 CRISPR/Cas12a

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于网络药理学及分子对接探究益母草碱治疗肠道炎症的分子机制

引用

中国畜牧兽医 2023年第5期50卷 2103-2113页

作者：许丞惠张旭梅杨彤李嘉蕙孙亚伟史慧君付强杨莉新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 新疆草食动物新药研究与创制重点实验室乌鲁木齐830052 新疆农业大学畜牧学博士后流动站乌鲁木齐830052

【目的】运用网络药理学、分子对接和动力学模拟技术研究益母草碱治疗肠道炎症的分子机制。【方法】采用Pubchem、PharmMapper和SwissTargetPrediction数据库收集益母草碱与肠道炎症的潜在靶点,利用Venny 2.1在线作图工具平台系统获取... 详细信息

【目的】运用网络药理学、分子对接和动力学模拟技术研究益母草碱治疗肠道炎症的分子机制。【方法】采用Pubchem、PharmMapper和SwissTargetPrediction数据库收集益母草碱与肠道炎症的潜在靶点,利用Venny 2.1在线作图工具平台系统获取益母草碱治疗肠道炎症的交集靶点;通过STRING与DAVID数据库获取蛋白-蛋白相互作用(PPI)关系并绘制交集靶点的PPI网络图,对交集靶点进行GO功能与KEGG通路富集分析,运用Cytoscape 3.8.2软件筛选得到核心靶点蛋白,应用分子对接技术与分子动力学模拟对核心靶点进行验证。【结果】共收集到379个与益母草碱相关的潜在靶点蛋白,15464个与肠道炎症相关的潜在靶点,获得170个益母草碱治疗肠道炎症的潜在交集靶点,筛选出丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、抑癌基因TP 53、前列腺素氧化环化酶2(PTGS2)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)等16个核心靶点。GO功能及KEGG通路富集分析结果显示,益母草碱通过调控蛋白质磷酸化、细胞增殖、凋亡过程负调控、蛋白水解、炎症反应等144个生物过程和Fc epsilon RI信号通路、Fcγ-R介导的吞噬作用、MAPK信号通路、mTOR信号通路等55条信号通路治疗肠道炎症。分子对接结果表明,益母草碱与核心靶点中PTGS2、mTOR、PARP1对接结果良好,有较强的结合活性,分子动力学模拟发现益母草碱与3个蛋白之间主要以氢键和疏水键相结合。【结论】益母草碱通过mTOR、PARP1、PTGS2等多个靶点,多个信号通路、多途径发挥其对肠道炎症的治疗效果。本研究结果为益母草碱在临床中的应用奠定基础。

关键词：益母草碱肠道炎症网络药理学分子对接分子动力学模拟作用机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小檗碱对沙门菌LPS诱导的猪肠道上皮细胞屏障损伤的改善作用

引用

畜牧与兽医 2022年第12期54卷 64-71页

作者：杨彤杨莉张旭梅徐丞惠温馨赵顺婷史慧君付强新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆草食动物新药研究与创制重点实验室新疆乌鲁木齐830052 新疆农业大学畜牧学博士后流动站新疆乌鲁木齐830052

试验旨在研究小檗碱(BBR)对沙门菌脂多糖(LPS)诱导的猪肠上皮细胞(IPEC-J2)炎症的调控作用。首先采用CCK-8法测定LPS和BBR处理IPEC-J2的最佳处理浓度、最佳处理时间以及给药顺序,后将IPEC-J2分为对照组、BBR组(80μmol/L)、LPS组(5μg/... 详细信息

试验旨在研究小檗碱(BBR)对沙门菌脂多糖(LPS)诱导的猪肠上皮细胞(IPEC-J2)炎症的调控作用。首先采用CCK-8法测定LPS和BBR处理IPEC-J2的最佳处理浓度、最佳处理时间以及给药顺序,后将IPEC-J2分为对照组、BBR组(80μmol/L)、LPS组(5μg/mL)和BL组(5μg/mL LPS+80μmol/L BBR);采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测4个组中IL-1β、IL-6及紧密连结蛋白ZO-1和Occludin的mRNA表达量;采用免疫荧光技术检测4个组中Occludin、ZO-1蛋白分布定位情况及其荧光强度;采用Western blot法检测各组中Occludin、ZO-1表达水平。研究结果显示:与对照组相比,LPS组的炎性细胞因子IL-6和IL-1β的mRNA表达水平显著上升(P<0.05);与BBR组和LPS组相比,BL组的IL-6和IL-1β的mRNA表达水平显著下调(P<0.05),而ZO-1和Occludin的mRNA表达水显著上升(P<0.05);免疫荧光结果与Western blot结果均显示,与LPS组相比,BL组的Occludin和ZO-1的蛋白表达量均显著上升(P<0.05)。研究结果表明BBR可抑制LPS诱导IPEC-J2的炎症反应,保护肠上皮细胞的屏障功能。

关键词：小檗碱沙门菌脂多糖 IPEC-J2 Western blot 实时荧光定量PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于网络药理学和试验验证分析小檗碱治疗鸡沙门菌感染的作用机制

引用

畜牧兽医学报 2023年第8期54卷 3557-3570页

作者：张旭梅魏玉荣许丞惠杨彤史慧君付强杨莉新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 新疆动物疫病研究重点实验室乌鲁木齐830013 新疆畜牧科学院兽医研究所乌鲁木齐830013 新疆农业大学畜牧学博士后流动站乌鲁木齐830052 新疆草食动物新药研究与创制重点实验室乌鲁木齐830052

采用网络药理学、分子对接、分子动力学模拟等方法,结合沙门菌攻毒试验初步验证小檗碱(berberine,BBR)干预肉鸡肠炎的潜在靶点及作用机制。首先利用PharMapper数据库和Swisstargets数据库预测药物靶点;通过GeneCards数据库收集疾病靶点... 详细信息

采用网络药理学、分子对接、分子动力学模拟等方法,结合沙门菌攻毒试验初步验证小檗碱(berberine,BBR)干预肉鸡肠炎的潜在靶点及作用机制。首先利用PharMapper数据库和Swisstargets数据库预测药物靶点;通过GeneCards数据库收集疾病靶点,并筛选出药物和疾病靶点的交集,将得到的交集靶点构建蛋白质互作网络及GO与KEGG富集分析;对筛选出的核心靶点进行分子对接验证和动力学模拟;后续建立肉鸡肠道炎症模型,观察其肠道组织形态变化,并利用RT-qPCR验证BBR对靶点蛋白mRNA表达量的影响。结果显示:最终筛选得到BBR潜在靶点374个,与肠炎交集174个;GO与KEGG富集分析分别得到197条目和73条目,主要涉及信号转导、蛋白磷酸化过程及PI3K-Akt、趋化因子及Ras等信号通路;分子对接和动力学模拟结果显示,BBR与核心靶点之间均能较好地结合,主要通过疏水作用力、氢键结合;组织切片结果发现,BBR可显著缓解肠道组织损伤;RT-qPCR结果显示,给药后仔鸡盲肠组织中HSP90AA1表达量显著下降(P<0.001),PIK3CA表达量显著上升(P<0.01)。通过网络药理学和试验验证发现,BBR可能通过调节HSP90AA1和PIK3CA表达量来调控肠道炎症的发生发展,可能涉及PI3K-Akt、cAMP、AMPK等信号通路,为深入进行BBR治疗肠炎的作用机制研究提供新思路与新方法。

关键词：网络药理学小檗碱肠炎分子对接作用机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TRAF2和SNED1基因敲低对牛病毒性腹泻病毒复制的影响

引用

农业生物技术学报 2024年第9期32卷 2150-2158页

作者：刘芯怡权冉刘昱成陈俊贞倪慧莹付强史慧君新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室/新疆农垦科学院畜牧兽医研究所

牛病毒性腹泻/粘膜病(bovine viral diarrhea/mucosal disease, BVD/MD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)引起的接触性传染病，会导致持续性感染，感染犊牛(Bos taurus)会不断向外界排出病毒。本课题组前期使用... 详细信息

牛病毒性腹泻/粘膜病(bovine viral diarrhea/mucosal disease, BVD/MD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)引起的接触性传染病，会导致持续性感染，感染犊牛(Bos taurus)会不断向外界排出病毒。本课题组前期使用RNA-蛋白质相互作用检测(RNA-protein interaction detection,RaPID)技术，筛选出了与BVDV互作的肿瘤坏死因子受体相关因子2 (tumor necrosis factor receptor associated factor 2, TRAF2)和Sushi、Nidogen和EGF样结构域1 (Sushi, Nidogen and EGF like domains 1,SNED1)基因。为了确定TRAF2和SNED1基因对BVDV复制的影响，本研究利用小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)技术敲低牛肾细胞(madin-darby bovine kidney cells, MDBK)中TRAF2和SNED1基因，通过qPCR检测TRAF2和SNED1基因的敲低效率和BVDV感染TRAF2和SNED1敲低细胞的BVDV 5'UTR RNA水平变化；使用免疫荧光染色法检测BVDV复制的中间产物双链RNA (double stranded RNA, dsRNA)的积累变化；通过荧光倒置显微镜观察致细胞病变效应(cytopathic effect, CPE)，使用Karber法计算子代病毒滴度变化。结果表明，TRAF2和SNED1的mRNA水平显著性降低(P<0.05)，表明成功构建了TRAF2以及SNED1敲低细胞(TRAF2 KD和SNED1 KD);BVDV感染对照组(NC) 36 h开始出现明显的空斑、脱落、死亡等CPE现象，TRAF2 KD细胞和SNED1 KD细胞的CPE现象减弱；与对照组(NC)相比，在BVDV感染TRAF2 KD和SNED1 KD细胞后，BVDV 5'UTR RNA水平在24、36和48 h显著下降(P<0.05)；通过免疫荧光染色检测BVDV复制的中间产物dsRNA形成和累积，在TRAF2 KD和SNED1 KD细胞中36和48 h绿色荧光强度明显降低；BVDV感染TRAF2 KD和SNED1 KD细胞后48 h子代病毒滴度极显著降低(P<0.01)。以上结果表明，敲低TRAF2和SNED1会抑制BVDV复制，本研究为揭示BVDV致病机制提供重要依据。

关键词：牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 小干扰RNA (siRNA)技术肿瘤坏死因子受体相关因子2 (TRAF2) Sushi、Nidogen和EGF样结构域1 (SNED1)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：