检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2022年第4期51卷 361-364页

作者：陈波李志杰中国医科大学附属盛京医院医学研究中心辽宁省环境与代谢疾病动物模型研究与应用重点实验室沈阳110004

解旋酶是核酸代谢所必需的酶,普遍存在于生物体内。Pif1是5’-3’方向ATP依赖的超家族ⅠB类解旋酶,几乎存在于所有真核生物中。Pif1不同程度地影响端粒、线粒体DNA的复制和冈崎片段的成熟。此外,Pif1可通过破坏稳定的核蛋白复合物来影... 详细信息

解旋酶是核酸代谢所必需的酶,普遍存在于生物体内。Pif1是5’-3’方向ATP依赖的超家族ⅠB类解旋酶,几乎存在于所有真核生物中。Pif1不同程度地影响端粒、线粒体DNA的复制和冈崎片段的成熟。此外,Pif1可通过破坏稳定的核蛋白复合物来影响这些过程。基于Pif1对维持基因组稳定性的重要性,为肿瘤相关疾病提供新的潜在治疗方向。本文论述了Pif1维持基因组稳定性在肿瘤中所发挥的作用。

关键词： Pif1 解旋酶基因组稳定性复制肿瘤

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SIVmac239病毒感染CEMx174细胞过程分析

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中国比较医学杂志 2018年第7期28卷 7-11页

作者：李想童玲丛喆薛婧中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫计委人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的运用不同的技术方法,观察SIVmac239感染CEMx174细胞的全过程。方法 SIVmac239病毒感染CEMx174细胞后,分别在不同的时间点收集培养上清和细胞,应用实时荧光定量PCR方法检测培养上清中的病毒载量;IFA检测并用激光扫描共聚焦显微镜观... 详细信息

目的运用不同的技术方法,观察SIVmac239感染CEMx174细胞的全过程。方法 SIVmac239病毒感染CEMx174细胞后,分别在不同的时间点收集培养上清和细胞,应用实时荧光定量PCR方法检测培养上清中的病毒载量;IFA检测并用激光扫描共聚焦显微镜观察病毒定位及复制情况;胞内流式、Western blot检测细胞内病毒蛋白p27的表达量。结果 SIVmac239吸附并感染CEMx174后,第0.5 h时,细胞胞膜上检测到病毒颗粒;第12h时,培养上清中的病毒RNA水平出现下降;此后至第96 h,病毒持续复制,细胞胞浆内病毒蛋白p27表达量逐渐增加,培养上清中病毒RNA水平持续升高。结论病毒感染细胞时,首先吸附在细胞膜上,然后进入细胞持续复制和表达。

关键词：猴免疫缺陷病毒 CEMx174细胞病毒蛋白p27 吸附感染

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FEM1B促进TRAIL诱导的HIV潜伏库细胞ACH-2的细胞凋亡

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中国比较医学杂志 2023年第5期33卷 1-7页

作者：杨晨波陆佳涵丛喆薛婧北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的探究FEM1B对HIV潜伏库细胞ACH-2的凋亡影响及作用。方法利用慢病毒转染构建FEM1B过表达的ACH-2细胞株,采用FITC-Annexin-V/7-AAD染色检测FEM1B过表达的ACH-2细胞株的细胞自发凋亡以及TRAIL作用24 h后的细胞凋亡情况,以及用qPCR检测T... 详细信息

目的探究FEM1B对HIV潜伏库细胞ACH-2的凋亡影响及作用。方法利用慢病毒转染构建FEM1B过表达的ACH-2细胞株,采用FITC-Annexin-V/7-AAD染色检测FEM1B过表达的ACH-2细胞株的细胞自发凋亡以及TRAIL作用24 h后的细胞凋亡情况,以及用qPCR检测TRAIL作用前后细胞上清病毒载量。结果FEM1B过表达的细胞株的细胞自发凋亡没有显著变化,但在TRAIL作用下,过表达FEM1B的细胞株的凋亡率显著增加,同时FEM1B过表达后TRAIL作用下ACH-2的上清病毒载量明显上升。结论FEM1B能够促进TRAIL作用下HIV潜伏细胞的细胞凋亡和病毒载量。

关键词：细胞凋亡 FEM1B TRAIL HIV潜伏库

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HIV潜伏库治疗策略研究

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中国比较医学杂志 2018年第6期28卷 121-126页

作者：童玲薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生和计划生育委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

HIV潜伏库是指在免疫反应和抗病毒治疗压力下,HIV潜伏的细胞和组织。尽管高效抗逆转录病毒疗法(HAART)的出现,有效地控制了HIV感染,使得血浆中的病毒载量抑制在低水平或检测线以下,但是却不能彻底清除潜伏库中的病毒,一旦停止抗病毒治疗... 详细信息

HIV潜伏库是指在免疫反应和抗病毒治疗压力下,HIV潜伏的细胞和组织。尽管高效抗逆转录病毒疗法(HAART)的出现,有效地控制了HIV感染,使得血浆中的病毒载量抑制在低水平或检测线以下,但是却不能彻底清除潜伏库中的病毒,一旦停止抗病毒治疗,即发生病毒反弹。因此,清除潜伏于宿主体内的HIV是根治艾滋病的重大挑战。本文将对近年来艾滋病潜伏库的治疗策略做一综述。

关键词：人类免疫缺陷病毒潜伏库治疗策略

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HIV-1病毒与浆细胞样树突状细胞的相互作用

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中国比较医学杂志 2017年第6期27卷 77-81页

作者：彭卓颖薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

浆细胞样树突状细胞(plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(interferonα,IFN-α)的固有免疫细胞。在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制并激活适应性免疫应答。在HIV慢性感染期,pDCs通过调节免疫细胞发挥免疫抑制的作用,不断破坏淋巴细胞,从而造成免疫系统崩溃,促进疾病进程。本文将就HIV-1与pDCs之间的相互作用做一综述。

关键词：浆细胞样树突状细胞人类免疫缺陷病毒 Ⅰ型干扰素

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艾滋病模型中关键指标SIV DNA绝对定量微滴式数字PCR技术的创新应用

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中国比较医学杂志 2020年第5期30卷 27-30,53页

作者：张丽丽陆佳涵薛婧丛喆魏强中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫健委人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)作为关键指标,实现精准检测艾滋病动物模型中细胞及组织中SIV DNA载量,用于储存库隐匿病毒实时动态评估。方法根据成熟的qPCR方法,对微滴式dPCR的反应条件进行了优化,确定最适退... 详细信息

目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)作为关键指标,实现精准检测艾滋病动物模型中细胞及组织中SIV DNA载量,用于储存库隐匿病毒实时动态评估。方法根据成熟的qPCR方法,对微滴式dPCR的反应条件进行了优化,确定最适退火温度;通过对10倍系列稀释pGEM-SIVgag477质粒标准品的检测,确定ddPCR检测范围。并通过对若干DNA样品的多次检测,判断该检测方法的稳定性。结果ddPCR的退火温度为60℃;检测范围是0.3~3.96×104 copies/μL;微滴式dPCR与qPCR有良好的相关性,相关系数r=0.9981。结论本研究建立了基于微滴式dPCR的SIV病毒DNA的绝对定量方法,可有效的对细胞和组织中病毒储存库样本中病毒DNA载量进行动态绝对定量,极大提高了模型应用评价的准确度。

关键词：微滴式数字PCR 猴免疫缺陷病毒 DNA 绝对定量

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利用Pdl1敲除的巨噬细胞转录谱分析结核感染中PD-L1作用相关的候选基因

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中国比较医学杂志 2020年第5期30卷 31-39页

作者：石亚男唐军李军丽王杰占玲俊中国医学科学院医学实验动物研究所卫健委人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心中国医学科学院结核病中心北京100021

目的分析结核菌(Mtb)感染的程序性死亡配体1(Pdl1)特异性敲除的巨噬细胞(MΦ)转录谱变化,筛选MΦ内PD-L1作用相关的候选基因。方法构建敲除小鼠(Pdl1^Flox/-),通过Cre-loxp技术培育出MΦ上Pdl1特异性敲除的纯合和杂合小鼠(Pdl1^Flox/Flo... 详细信息

目的分析结核菌(Mtb)感染的程序性死亡配体1(Pdl1)特异性敲除的巨噬细胞(MΦ)转录谱变化,筛选MΦ内PD-L1作用相关的候选基因。方法构建敲除小鼠(Pdl1^Flox/-),通过Cre-loxp技术培育出MΦ上Pdl1特异性敲除的纯合和杂合小鼠(Pdl1^Flox/Flox-Cre,Pdl1^Flox/--Cre),用PCR和流式细胞术验证。分离上述小鼠腹腔MΦ,利用转录组测序技术检测Mtb感染MΦ24 h的表达谱,以同窝阴性小鼠(Pdl1^Flox/Flox)为对照,进行生物信息学分析。结果PCR和流式细胞术证实小鼠敲除成功。纯合、杂合及同窝阴性小鼠感染前后相比,差异表达基因最显著富集项为参与免疫反应和免疫过程的GO(P<0.01;P<0.01),筛出17个PD-L1相关的候选基因。通过KEGG富集分析,最显著富集的通路有Toll样受体、NF-κB信号通路等(P<0.01;P<0.01),筛出6个候选基因。结论通过转录谱分析,确定与免疫反应及免疫过程有关的Ccl2、Qa5、Il12a等17个基因,免疫及炎症相关代谢通路的Ptgs2、Cd40、Card11等6个基因为Mtb感染的MΦ内PD-L1相关的候选基因,除Il6外均为本研究新筛选的候选基因。

关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞 Pdl1基因敲除 Cre/loxp重组酶系统转录组测序

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关于实验动物福利伦理审查的几点建议

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中国比较医学杂志 2020年第5期30卷 104-107页

作者：苏美洋伊邓巍中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

作为基础而重要的科研资源,实验动物已成为生命探索、医学研究、药物研发等领域不断发展的重要基石和关键支撑。随着人类伦理道德的发展和实验数据准确性的需要,实验动物福利日益被国际社会和科研共同体所重视。为了维护实验动物福利,... 详细信息

作为基础而重要的科研资源,实验动物已成为生命探索、医学研究、药物研发等领域不断发展的重要基石和关键支撑。随着人类伦理道德的发展和实验数据准确性的需要,实验动物福利日益被国际社会和科研共同体所重视。为了维护实验动物福利,规范实验动物伦理审查和实验动物从业人员的职业行为,参考国际惯例,我国很多科研机构建立了实验动物使用和管理委员会(IACUC),设立了实验动物福利伦理审查制度。该制度的设立提升了国内实验动物福利伦理水平,但也存在着一些意识、流程、操作上的问题。本文从行政管理的角度,阐述当前实验动物福利伦理审查的现状,并提出了几点建议,供实验动物福利伦理相关人员参考。

关键词：实验动物动物实验伦理实验动物福利伦理审查

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CAST/EiJ小鼠外周血和脾中免疫细胞及亚群分析

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中国比较医学杂志 2024年第4期34卷 1-10页

作者：刘琪侯勇志李娜张京京陆佳涵丛喆朱林薛婧中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的探索CAST/EiJ小鼠对多种病原体易感的可能原因,分析CAST/EiJ小鼠外周血和脾内的免疫细胞表型,明确CAST/EiJ小鼠的免疫细胞构成。方法利用流式细胞术,通过细胞表面标记物CD3、CD4、CD8、CD11b、CD11c、CD19、CD27、CD49b和TCRβ检测C... 详细信息

目的探索CAST/EiJ小鼠对多种病原体易感的可能原因,分析CAST/EiJ小鼠外周血和脾内的免疫细胞表型,明确CAST/EiJ小鼠的免疫细胞构成。方法利用流式细胞术,通过细胞表面标记物CD3、CD4、CD8、CD11b、CD11c、CD19、CD27、CD49b和TCRβ检测CAST/EiJ小鼠和C57BL/6J小鼠外周血和脾内经典型树突状细胞(cDCs)、自然杀伤细胞(NK)、B淋巴细胞、T淋巴细胞及其亚群的细胞比例。结果CAST/EiJ小鼠与C57BL/6J小鼠的cDCs细胞比例无明显差异,但cDC1细胞亚群比例偏低;CAST/EiJ小鼠的NK细胞(主要是成熟NK细胞亚群)和T淋巴细胞(主要是CD8+T细胞)比例都显著低于C57BL/6J小鼠,而CAST/EiJ小鼠的B淋巴细胞比例高于C57BL/6J小鼠。结论CAST/EiJ小鼠中NK和T淋巴细胞比例显著低于C57BL/6J小鼠。

关键词： CAST/EiJ小鼠 C57BL/6J小鼠经典型树突状细胞自然杀伤细胞 B淋巴细胞 T淋巴细胞

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PDCD2促进TRAIL刺激下T细胞及HIV潜伏感染T细胞的凋亡

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中国比较医学杂志 2022年第5期32卷 1-6页

作者：余雯惠杨晨波丛喆薛婧北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的研究程序性细胞死亡蛋白2(programmed cell death protein 2,PDCD2)过表达对T淋巴细胞株Jurkat及HIV潜伏感染T细胞株ACH2凋亡的影响。方法用T淋巴细胞株Jurkat及HIV潜伏感染T细胞株ACH2作为细胞模型,采用慢病毒转染技术分别在上... 详细信息

目的研究程序性细胞死亡蛋白2(programmed cell death protein 2,PDCD2)过表达对T淋巴细胞株Jurkat及HIV潜伏感染T细胞株ACH2凋亡的影响。方法用T淋巴细胞株Jurkat及HIV潜伏感染T细胞株ACH2作为细胞模型,采用慢病毒转染技术分别在上述细胞株过表达PDCD2基因,在未刺激和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor (TNF)-related apoptosis-inducing ligand, TRAIL)刺激24 h后,经PE-Annexin V、7-AAD检测细胞凋亡的情况。结果在无刺激剂的情况下,Jurkat和ACH2细胞的凋亡率并未因细胞内PDCD2表达量的增加而改变;在TRAIL刺激下,与对照组相比,高表达PDCD2基因的Jurkat和ACH2细胞凋亡率显著增高,有统计学差异(P<0.05)。结论 PDCD2能促进TRAIL刺激下T细胞及HIV潜伏感染T细胞的凋亡水平。

关键词：程序性细胞死亡2 T细胞 HIV潜伏感染凋亡

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