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HPV16 E6-295T/G和E6-350T/G变异位点影响IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的研究

石河子大学学报（自然科学版） 2024年第2期42卷 223-231页

作者：李杨杨辛慧珍郭柄轩王慧娟宋树言李洪涛李冬妹潘泽民石河子大学医学院生物化学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 新疆医科大学基础医学院生物学教研室新疆乌鲁木齐830017 石河子大学医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室新疆石河子832002

目的探讨HPV16(Human Papillomavirus Type 16)E6-295T/G和E6-350T/G变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。方法在宫颈癌细胞C33A(HPV阴性)中分别转染真核表达载体295G/350G-GV230、295T/350G-GV230和295T/350T-GV230作为实验组,以NC-GV230作为对照组。通过免疫组织化学法、Western blot方法检测HPV16 E6295T/G、350T/G不同变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。通过IBM SPSS Statistics 26软件对实验结果进行统计学分析,P<0.05为差异具有统计学意义,免疫组织化学法定量采用image J软件进行阳性细胞计数。结果Western blot结果显示,免疫分子干扰素κ(Interferon Kappa,IFNκ)的表达,HPV16 E6-295G/350G变异组较HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组降低(P<0.01,P<0.05)。HPV16 E6-295G/350G变异组的免疫分子主要组织相容性复合体I类(Major Histocompatibility Complex Class I,MHC-I)的表达显著低于HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组(P<0.05)。HPV16 E6-295G/350G变异组的信号转导子和转录激活子1(Signal Transducer and Activator of Transcription 1,STAT1)表达显著低于HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组(P<0.05,P<0.01)。变异组HPV16 E6-295G/350G与HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G变异组相比,干扰素调节因子9(Interferon Regulatory Factor 9,IRF9)表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论HPV16病毒E6蛋白质可以降低IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9的蛋白质表达水平,E6基因T295G/T350G变异降低这些分子的表达作用最强。

关键词：宫颈癌 HPV16 E6基因基因变异蛋白质表达

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泡球蚴蛋白通过Wnt/β-Catenin信号通路调控小鼠肝星状细胞二肽基肽酶-4的表达研究

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中国病原生物学杂志 2024年第3期19卷 275-279,284页

作者：木克西娜·木拉提努尔拜提·库苏曼毕晓娟杨宁楚瑨刘辉房彬彬孙立何小龙高瑾林仁勇新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆农业大学动物医学学院

目的探讨泡球蚴蛋白对肝星状细胞中纤维化关键基因二肽基肽酶-4(Dipeptidyl Peptidase 4,DPP4)表达的调控机制。方法免疫组织化学法检测二肽基肽酶-4在泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端与远端的表达情况。体外培养小鼠肝星状细胞系JS1,以60... 详细信息

目的探讨泡球蚴蛋白对肝星状细胞中纤维化关键基因二肽基肽酶-4(Dipeptidyl Peptidase 4,DPP4)表达的调控机制。方法免疫组织化学法检测二肽基肽酶-4在泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端与远端的表达情况。体外培养小鼠肝星状细胞系JS1,以60μg/mL浓度的泡球蚴蛋白(Echinococcus multilocularis Protein,EmP)刺激JS1细胞,检测细胞活化及Wnt通路的激活情况,Wnt通路抑制剂(IWP-2)和激动剂(LY2090314)靶向干预检测肝星状细胞活化标志物COL1A1、α-SMA与PPARγ,Wnt通路关键分子Wnt5a、β-catenin、GSK3β以及DPP4的表达水平。结果免疫组化检测结果显示泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端DPP4的表达(5927±987.1)显著高于病灶远端(2478±696.9),差异有统计学意义(t=9.026,P<0.05);EmP可显著促进JS1细胞活化并促进DPP4的表达,差异有统计学意义(F_(DPP4)=10.65,P<0.05);与对照组相比,EmP刺激组Wnt通路激活,Wnt5a、β-catenin、p-GSK3β的表达水平上升,差异有统计学意义(WB:F_(Wnt5a)=18.28,Fβ-Catenin=14.98,FP-GSK3β=28.52;RT-qPCR:F_(Wnt5a)=27.29,F_(CTNNB1)=21.24,F_(GSK3β)=7.974,P<0.05);Wnt通路抑制剂IWP-2干预可抑制EmP蛋白对α-SMA、DPP4的表达的促进作用,上调PPARγ的表达,差异有统计学意义(WB:F DPP4=26.27,Fα-SMA=126.4,F_(PPAR-γ)=8.187;RT-qPCR:F_(DPP4)=41.23,F_(ACTA2)=185.2,F_(PPARG)=136.2,P<0.05);与EmP刺激组相比,Wnt通路激动剂可促进JS1细胞的活化及DPP4的表达,差异有统计学意义(WB:F_(DPP4)=151.0;RT-qPCR:F_(DPP4)=29.71,P<0.05)。结论EmP蛋白可通过激活Wnt/β-Catenin通路促进纤维化关键基因DPP4的表达。

关键词：泡球蚴肝纤维化二肽基肽酶-4 Wnt/β-Catenin通路

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二肽基肽酶-4在泡球蚴感染致肝纤维化中的作用研究

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中国病原生物学杂志 2023年第1期18卷 47-51页

作者：努尔拜提·库苏曼木克西娜·木拉提毕晓娟杨宁楚瑨刘辉房彬彬吕国栋李亮张雪孙立林仁勇新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室

目的明确二肽基肽酶-4(DPP4)在泡球蚴感染所致肝纤维化中的作用。方法取泡球蚴不同感染时期(1、3、6个月)小鼠肝脏组织,HE染色检查肝脏组织病理学变化,天狼星红染色法检测肝纤维化程度,免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和... 详细信息

目的明确二肽基肽酶-4(DPP4)在泡球蚴感染所致肝纤维化中的作用。方法取泡球蚴不同感染时期(1、3、6个月)小鼠肝脏组织,HE染色检查肝脏组织病理学变化,天狼星红染色法检测肝纤维化程度,免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和DPP4的表达,采用相关分析法分析DPP4蛋白表达水平与肝纤维化的相关性。小鼠肝星状细胞(JS1),经60μg/ml泡球蚴蛋白(EmP)刺激后采用实时荧光定量PCR检测DPP4、α-SMA、COL1A1、TIMP1、MMP2的mRNA表达水平。结果与对照组比较组,模型组小鼠感染泡球蚴后1、3、6个月α-SMA表达上调(阳性面积分别为3.521±0.8862、7.846±0.9873、15.34±0.6263)(均P<0.05),且呈时间依赖;天狼星红染色病灶旁纤维组织阳性面积增加(阳性面积分别为56979±9550、69844±763.8、82687±13774)(均P<0.05),且呈时间依赖;DPP4表达上调(阳性面积分别为5038±201.2、6110±174.4、9021±697.4)(均P<0.05),且呈时间依赖。泡球蚴感染小鼠DPP4表达水平与α-SMA相对表达量呈正相关(R^(2)=0.9166,P<0.05),与天狼星红阳性区域面积呈正相关(R^(2)=0.5368,P<0.05)。泡球蚴蛋白刺激小鼠肝星状细胞系JS1,肝星状细胞活化标志物α-SMA、COL1a1、TIMP1、MMP2 mRNA表达上调,DPP4的mRNA也随之上调(均P<0.05)。结论 DPP4参与泡球蚴感染所致肝纤维化过程并随纤维化加重表达上调,为阐明泡型棘球蚴病的致病机制和寻找新的治疗靶点奠定了基础。

关键词：多房棘球蚴二肽基肽酶-4 肝纤维化

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负载干细胞外囊泡的缓释聚左旋乳酸微球在促肝细胞增殖中的作用

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中国热带医学 2023年第10期23卷 1030-1036页

作者：楚瑨木克西娜·木拉提高瑾李亮张雪吕国栋林仁勇毕晓娟省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

目的制备一种调控释放干细胞外囊泡的微粒子递送系统,仅干预1次后长期发挥增强肝细胞增殖能力的作用。方法采用差速离心法提取干细胞外囊泡并鉴定,透射电镜观察外囊泡结构和免疫印记检测外囊泡膜标志蛋白,评价所提取外囊泡符合规范。采... 详细信息

目的制备一种调控释放干细胞外囊泡的微粒子递送系统,仅干预1次后长期发挥增强肝细胞增殖能力的作用。方法采用差速离心法提取干细胞外囊泡并鉴定,透射电镜观察外囊泡结构和免疫印记检测外囊泡膜标志蛋白,评价所提取外囊泡符合规范。采用乳液-溶剂挥发法制备“壳-核”结构聚左旋乳酸(poly-L-lactic acid,PLA)微球,在微球“核”结构位置负载干细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)得到EVs-PLA微球。通过扫描、透射电镜检测微球及外囊泡形貌,粒径分析,缓释实验检测EVs-PLA微球缓释周期,扫描电镜检测缓释至8周EVs-PLA微球形貌变化;将EVs-PLA微球与肝实质细胞共培养,鬼笔环肽/DAPI染色评价EVs-PLA微球生物相容性和细胞毒性,CCK8评价EVs-PLA微球对细胞增殖活力的影响作用,免疫印记检测EVs-PLA微球共培养后细胞中增殖标志蛋白表达量并统计数据结果。结果对比EVs-PLA干细胞外囊泡微球处理组和对照组的肝实质细胞增殖能力评价,发现EVs-PLA微球未造成细胞凋亡和细胞结构发生变异,具有生物相容性无细胞毒性;EVs-PLA微球的“壳-核”结构调控所负载的干细胞外囊泡的释放速率和释放周期,EVs-PLA微球可缓慢释放EVs,单次干预后持续发挥促进肝实质细胞增殖的生物作用。结论EVs-PLA微球可缓慢释放EVs,单次干预后持续发挥增强肝细胞增殖能力的作用,为探索外囊泡促肝细胞增殖的微递送系统提供了新的思路。

关键词：干细胞外囊泡缓释肝再生 O/W乳化生物因子载体

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泡球蚴蛋白促进脂肪间充质干细胞向肝细胞分化的研究

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中国病原生物学杂志 2022年第4期17卷 425-429,434页

作者：刘辉毕晓娟杨宁柯颖孙立楚瑨孙涛吕国栋林仁勇新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室

目的探讨泡球蚴蛋白(Echinococcus multilocularis protein,EmP)促脂肪间充质干细胞(Adipose tissue Derived Mesenchymal Stem Cells,ADSCs)向肝细胞分化的作用。方法体外分离人脂肪组织来源的ADSCs,第三代(P3)ADSCs分为对照组(HDM肝细胞诱导分化组)和Em蛋白处理组(HDM+EmP组),经无血清肝细胞诱导培养基培养7、14和21 d,检测对照组和EmP处理组肝细胞样细胞(iHep)百分比、糖原染色面积、肝细胞标志物白蛋白(Albumin,ALB)的蛋白及基因表达水平。Western-Blot法检测p-GSK-3β的表达情况。结果 P3代ADSCs具有成脂及成骨分化能力并表达干细胞标志物(CD29、CD90和CD105等)。在ADSCs向肝细胞诱导分化14 d,EmP处理组iHep细胞百分比显著高于对照组(P<0.05),EmP处理组糖原染色面积显著高于对照组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示两组细胞在诱导分化7 d开始表达ALB,荧光强度随诱导时间增加呈增强趋势。qPCR结果显示在诱导分化后第14 d,EmP处理组ALB表达水平显著高于对照组,两组间具有统计学差异(P<0.05)。Western-Blot结果显示,诱导分化第7 d和14 d,EmP处理组p-GSK-3β蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.01和P<0.05)。结论 Em蛋白可能通过激活GSK-3β而具有促进ADSCs向肝细胞分化的作用,本研究为临床应用ADSCs移植治疗泡型棘球蚴病奠定了基础。

关键词：泡球蚴蛋白脂肪间充质干细胞肝细胞分化 GSK-3β

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细粒棘球绦虫TAK1基因ORF的克隆及其蛋白生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第12期17卷 1392-1398页

作者：刘丽英李军张文宝吴军杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用... 详细信息

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件分别对EgTAK1的理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、N-糖基化位点、亲/疏水性、保守结构域、跨膜结构域、信号肽序列进行预测;采用MEGA 7.0软件对不同物种来源的TAK1蛋白进行多序列比对并构建系统进化树。采用实时荧光定量PCR检测细粒棘球绦虫在不同发育阶段TAK1基因mRNA的相对表达量。结果EgTAK1基因ORF全长1116 bp,编码371个氨基酸,理论等电点为5.97,不稳定指数为49.59,属于不稳定蛋白;脂肪系数为87.22,总平均亲水系数为-0.291,为亲水性蛋白;EgTAK1蛋白含有64个磷酸化位点,3个O-糖基化潜在位点,4个N-糖基化位点;EgTAK1蛋白属于蛋白激酶C类似(PKC-like)家族;无跨膜结构和信号肽,亚细胞可能定位于细胞膜、细胞质及细胞核内。该蛋白含有7个优势B细胞抗原表位,具有良好的免疫原性。二级结构包含34.77%的α-螺旋,5.12%的β-转角,40.97%的无规卷曲,19.14%的延伸链。TAK1蛋白同源序列比对中与多房棘球绦虫的TAK1同源性最高为83%。实时荧光定量PCR显示,细粒棘球绦虫在不同发育阶段EgTAK1表达有差异,成虫阶段相对表达量最高。结论基因EgTAK1可能是细粒棘球绦虫发育分化的重要调控基因,预测该基因编码的蛋白含有B细胞抗原表位,有可能成为包虫病免疫学预防及药物研制的靶标抗原。

关键词：细粒棘球绦虫 TAK1 生物信息学分析 PCR

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AMPK激活剂在腺病毒36诱导肥胖研究中的进展

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黑龙江医学 2024年第23期48卷 2930-2932页

作者：张哲铭董剑洪俊高亮高挚逸艾孜哈尔·艾海提张弘睿张晓峥新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室·省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室·新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830017

肥胖是影响人类生活的许多疾病之一,其发生机制与炎症因子、激素作用、酶调节等多种作用有关,人类腺病毒36(Ad36)后会出现胰岛素敏感性,但血清脂质水平正常,这与肥胖似乎是矛盾的。5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)作为AMP-激活的蛋白... 详细信息

肥胖是影响人类生活的许多疾病之一,其发生机制与炎症因子、激素作用、酶调节等多种作用有关,人类腺病毒36(Ad36)后会出现胰岛素敏感性,但血清脂质水平正常,这与肥胖似乎是矛盾的。5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)作为AMP-激活的蛋白激酶(AMPK)的激活剂,可进一步探究AMPK在Ad36引起的肥胖中发挥调节糖脂代谢的作用。

关键词：肥胖 AMP-激活的蛋白激酶腺病毒36 5-氨基味唑-4-甲酰胺核苷酸信号转导通路

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Eg Innexin-unc9重组蛋白的表达纯化及诊断价值

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新疆医科大学学报 2025年第4期48卷 421-425,431页

作者：吴军范宇黎飞海李军张文宝郭宝平杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆地方病及分子生物学重点实验室乌鲁木齐830054

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化... 详细信息

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)在不同温度下诱导表达,利用镍亲和层析柱纯化重组Eg Inx蛋白(r Eg Inx),并通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)验证其特异性;制备多克隆抗体进行免疫组化;采用生物素-亲和素放大系统酶联免疫吸附实验(Biotin-avidin system-enzyme linked immunosorbent assay,BAS-ELISA)检测22份健康人血清及7份囊型棘球蚴病患者血清,初步评估其诊断价值。结果成功表达并纯化r Eg Inx,WB检测显示其可被组氨酸标签抗体特异性识别。免疫组化表明,在胆盐诱导后Eg Inx在原头蚴头节及体表皮层高表达,成虫则表达在生殖系统,主要位于孕节。BAS-ELISA检测敏感度为85.71%(6/7),特异度95.45%(21/22)。结论r Eg Inx具有高诊断特异性,其发育阶段差异性定位提示其参与虫体发育及繁殖调控,可作为囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis,CE)新型诊断标志物及犬用疫苗潜在靶点。

关键词：细粒棘球绦虫重组蛋白免疫诊断

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新疆地区妇女宫颈感染人乳头瘤病毒16型E1、E2的遗传变异分析

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石河子大学学报（自然科学版） 2021年第6期39卷 741-747页

作者：王露月王芳付少伟张春贺刘依萌者湘漪李洪涛李冬妹潘泽民石河子大学医学院生物化学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 天津医科大学基础医学院临床医学系天津300070 石河子大学医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室新疆石河子832002

目的新疆是宫颈癌高发的地区之一,人乳头瘤病毒的基因变异可能会增加其感染人体的风险并增强该病毒介导的免疫逃逸能力,HPV(Human Papillomavirus)16 E1、E2是病毒在转录及复制过程中的重要蛋白质,E1、E2核苷酸位点的突变可能导致蛋白... 详细信息

目的新疆是宫颈癌高发的地区之一,人乳头瘤病毒的基因变异可能会增加其感染人体的风险并增强该病毒介导的免疫逃逸能力,HPV(Human Papillomavirus)16 E1、E2是病毒在转录及复制过程中的重要蛋白质,E1、E2核苷酸位点的突变可能导致蛋白质的改变,从而影响宫颈癌的发生发展。方法收集80例HPV16感染阳性宫颈粘液样本,提取DNA后进行PCR扩增,将纯化后的PCR产物进行一代测序,并对E1、E2基因进行进化学分析,了解HPV16在新疆地区的基因多态性,统计病理信息分析相关突变位点与宫颈癌的进展关系。结果80个HPV16阳性样本中,E1发生突变的样本有34个,发生核苷酸突变的位点有25个,(11个错义突变,14个同义突变)。HPV16 E2发生突变的样本有53个,发生核苷酸突变的位点有14个,(11个错义突变,3个同义突变)。在HPV16 E1上常见的核苷酸突变位点为A978G(14/80)、G1473A(10/80)所对应的氨基酸改变为I326M、M491I,在HPV16 E2上常见的核苷酸突变位点为C2295A(14/80)、C2546T(20/80),所对应的氨基酸改变为T135K、P219S。结论由系统发育树结果可看出有77个样本属于欧洲株,3个样本属于亚洲株。没有发现非洲株和北美/亚裔株。

关键词：宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒 E1和E2基因基因多态性一代测序

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36型人腺病毒腺病毒基因早期转录区4可读框基因1(E4ORF1)的原核表达及多克隆抗体制备

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第9期37卷 839-843页

作者：徐尤宗胜梁小弟陈哲焦谊高佳乐王冰丽刘迪晖关亚群新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆乌鲁木齐830011

目的利用分子克隆技术构建36型腺病毒(Ad36)腺病毒基因早期转录区4可读框基因1(E4ORF1)重组原核表达质粒pET30a-E4ORF1,经诱导表达后,制备并纯化获得E4ORF1抗原,经免疫兔后获得多克隆抗体。方法根据NCBI数据库中人Ad36基因组全序列,设... 详细信息

目的利用分子克隆技术构建36型腺病毒(Ad36)腺病毒基因早期转录区4可读框基因1(E4ORF1)重组原核表达质粒pET30a-E4ORF1,经诱导表达后,制备并纯化获得E4ORF1抗原,经免疫兔后获得多克隆抗体。方法根据NCBI数据库中人Ad36基因组全序列,设计引物、PCR扩增其中的E4ORF1基因全长并将其克隆至原核表达载体中、测序。将测序正确的原核表达质粒pET30a-E4ORF1转化至***21(DE3)菌株中,通过探索E4ORF1蛋白的最佳诱导条件后,对重组蛋白进行大量诱导表达和纯化。将纯化获得的重组蛋白免疫新西兰白兔,在5次免疫后分离血清,ELISA检测抗体效价。抗原亲和纯化出E4ORF1多克隆抗体,Western blot法检测抗体的特异性。结果成功扩增E4ORF1基因,经测序比对与GenBank序列一致,大小为408 bp,证明成功构建原核重组表达质粒。经鉴定重组蛋白的相对分子质量(M_(r))约14000,ELISA检测5次免疫后兔血清抗体效价达1∶320000。Western blot法证明该抗体具较高的特异性。结论成功表达E4ORF1蛋白,并制备了高特异性的兔抗E4ORF1多克隆抗体。

关键词： 36型人腺病毒(Ad36) E4可读框基因1(E4ORF1) 原核表达抗体

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