检索结果-内蒙古大学图书馆

华中科技大学学报(医学版) 2025年第2期54卷 275-282页

作者：何昊金子轩李涵邹云锋彭阳广西医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室南宁530021 广西医科大学公共卫生学院卫生化学教研室南宁530021 广西医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室南宁530021

镉是一种广泛存在的环境污染物,具有极强的生物蓄积性和多系统毒性。老年人作为脆弱群体,长期的镉暴露对其认知功能的损伤尤为显著。该文综述了国内外关于镉暴露与老年人认知功能损伤及阿尔茨海默病的关联研究,并总结了其潜在的生物学... 详细信息

镉是一种广泛存在的环境污染物,具有极强的生物蓄积性和多系统毒性。老年人作为脆弱群体,长期的镉暴露对其认知功能的损伤尤为显著。该文综述了国内外关于镉暴露与老年人认知功能损伤及阿尔茨海默病的关联研究,并总结了其潜在的生物学机制。目前相关流行病学研究大多采用横断面或病例对照研究设计,多项研究发现镉暴露与老年人认知功能损伤及阿尔茨海默病的患病或死亡相关。镉对神经系统的毒性机制复杂多样,包括损伤血脑屏障、损害线粒体功能、影响突触传递、诱导细胞自噬与凋亡,以及扰乱金属离子稳态和糖原代谢等。虽然许多研究支持镉暴露可能对老年人认知功能的不利影响,但相关结论不完全一致且证据等级较低,潜在的生物学机制也尚未完全阐明。因此,未来亟需开展进一步的前瞻性队列研究和深入的生物学研究,以更好地理解镉暴露对老年人健康的危害。

关键词：认知功能损伤阿尔茨海默病老年人镉暴露

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人CD8α分子特异性核酸适配体的筛选与鉴定

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癌变.畸变.突变 2025年第2期37卷 140-146,152页

作者：李安然孙红光申晨晨阿孜姑丽·阿布都卡迪尔马艳新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆乌鲁木齐830011

目的:筛选并鉴定与人CD8α分子特异性结合的核酸适配体(Apt)。方法:以携带6×组氨酸标签的重组人CD8α蛋白为筛选靶点,设计81 nt的随机文库,利用SELEX技术进行核酸适配体筛选。将富集的文库进行高通量测序及聚类分析,以最高丰度序... 详细信息

目的:筛选并鉴定与人CD8α分子特异性结合的核酸适配体(Apt)。方法:以携带6×组氨酸标签的重组人CD8α蛋白为筛选靶点,设计81 nt的随机文库,利用SELEX技术进行核酸适配体筛选。将富集的文库进行高通量测序及聚类分析,以最高丰度序列为例,通过斑点杂交法和流式细胞术验证其与CD8α蛋白和CD8+细胞的特异结合情况。利用流式细胞术测定候选核酸适配体与CD8α蛋白和CD8+细胞结合的亲和常数(Kds)。最后以正常人外周血淋巴细胞为模型,利用流式细胞术初步评价候选核酸适配体以及现有技术公开的CD8核酸适配体在临床样本中鉴定CD8+淋巴细胞的临床应用能力,并检测Apt 1与人外周血样本中CD8+淋巴细胞的结合位点是否和CD8抗体与CD8α蛋白的结合位点一致。结果:富集文库经高通量测序后,获得了42803个有效序列读数,经Clustal Omega在线软件聚类分析,按丰度排序将前10条序列作为候选核酸适配体,分别命名为Apt 1~Apt 10。10个候选核酸适配体序列中均存在1个高度保守的一致序列(CGTGAGGAGCTTGAAATCC)。其中,Apt 1具有典型的茎环结构(△G=-12.61 kcal/mol),能与CD8α蛋白和CD8+细胞系高特异性结合。10个候选核酸适配体Apt 1~Apt 10均可与CD8α蛋白和CD8+细胞高亲和力结合,亲和常数(Kds)均在纳摩尔水平。与商业化CD8抗体及现有技术公开的CD8核酸适配体相比,候选核酸适配体均能有效鉴定人外周血样本中的CD8+淋巴细胞,Apt 1与人外周血样本中CD8+淋巴细胞的结合位点不同于CD8抗体的结合位点。结论:成功筛选出与人CD8α分子强亲和力和高特异性结合的核酸适配体,可为后续开发针对CD8靶点的临床诊断和治疗方法奠定基础。

关键词：核酸适配体指数富集的配体系统进化技术 CD8 高通量测序人外周血淋巴细胞

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多环芳烃菲对C57BL/6J雌鼠肝脏组织的损伤研究

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海南医科大学学报 2025年第6期31卷 408-414页

作者：张乃凡鲁英储海燕新疆医科大学公共卫生学院新疆乌鲁木齐830011 海南医科大学公共卫生学院海南海口571199 海南医科大学Heinz Mehlhorn院士工作站海南海口571199 海南医科大学海南省创伤与灾害救援重点实验室海南海口571199 南京医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系江苏南京211166

目的:探究菲(Phe)暴露对雌鼠肝脏组织的损伤。方法:40只C57BL/6J雌鼠,随机分为4组,分别为对照组(5μL/g玉米油),Phe染毒低、中、高剂量组(依次分别为60、600、6000μg/kg),每组10只。连续灌胃染毒3周。采用尾尖采血测雌鼠空腹血糖(FPG)... 详细信息

目的:探究菲(Phe)暴露对雌鼠肝脏组织的损伤。方法:40只C57BL/6J雌鼠,随机分为4组,分别为对照组(5μL/g玉米油),Phe染毒低、中、高剂量组(依次分别为60、600、6000μg/kg),每组10只。连续灌胃染毒3周。采用尾尖采血测雌鼠空腹血糖(FPG)。染毒结束,麻醉后摘取肝脏称重。比色法检测雌鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、谷草转氨酶(AST)及谷丙转氨酶(ALT)水平。同时对雌鼠肝脏组织进行形态学苏木精-伊红染色、ROS荧光染色及透射电镜超微结构观察。结果:中、高剂量Phe染毒组雌鼠血清ALT水平均高于对照组(P<0.01);低、中、高剂量组血清TG与TC含量低于对照组(P<0.05),FPG水平高于对照组(P<0.05);高剂量组HDL水平高于对照组(P<0.01);中剂量组LDL水平高于对照组(P<0.01)。病理切片显示,染毒组雌鼠肝细胞肿胀,部分肝细胞出现灶状坏死。荧光显微镜观察发现,与对照组相比,低、中、高剂量组荧光强度增强。透射电镜结果显示,随着Phe染毒剂量的增加,雌鼠肝细胞内线粒体损伤加重、线粒体自噬增多、自噬溶酶体数量增加。结论:Phe暴露可造成雌鼠糖脂代谢紊乱及肝脏组织发生病理改变,随着染毒剂量的增加肝脏组织损伤进一步加深。

关键词：菲肝脏组织氧化损伤线粒体自噬

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亚砷酸钠通过调控ER-PI3K/AKT信号通路影响甲状腺正常细胞增殖与凋亡

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环境与职业医学 2025年第04期 467-474页

作者：江志红李宏昀马晓薇赖媛艳吴军新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室武汉市疾病预防控制中心传防所福建医科大学附属协和医院运营管理处

[背景]伴随无机砷毒性作用的深入研究发现，砷暴露可对多个内分泌器官产生影响，从而影响其功能，但砷暴露致甲状腺损伤的机制尚不明确。[目的]基于雌激素受体（ER）-磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信号通路探讨亚砷酸钠（N... 详细信息

[背景]伴随无机砷毒性作用的深入研究发现，砷暴露可对多个内分泌器官产生影响，从而影响其功能，但砷暴露致甲状腺损伤的机制尚不明确。[目的]基于雌激素受体（ER）-磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信号通路探讨亚砷酸钠（NaAsO2）对人甲状腺正常细胞（Nthy-ori3-1）的增殖及凋亡的作用机制。[方法]体外正常培养Nthy-ori3-1细胞，将其分为对照组(不含药物的完全培养基0μmol·L-1)、1μmol·L-1NaAsO2组、2μmol·L-1NaAsO2组、4μmol·L-1NaAsO2组；1μmol·L-1雌激素受体抑制剂（ICI182780）分别干预同剂量NaAsO2染毒组，分组为1μmol·L-1NaAsO2+ICI182780、2μmol·L-1NaAsO2+ICI182780、4μmol·L-1NaAsO2+ICI182780；采用细胞活性实验筛选NaAsO2的半数致死量；细胞计数试剂盒8（CCK-8）实验检测每组细胞分别在24、36、48 h的细胞活力；平板克隆实验检测每组细胞的集落形成能力；Hoechst33342染色实验检测每组细胞发生凋亡的情况；免疫印迹法（WB）和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）实验分别检测每组细胞内ERα、ERβ、c-MYC、Bax、Bcl-2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白及相关基因的表达水平。[结果] NaAsO2浓度为4.034μmol·L-1时，达到细胞半数致死量；24、36、48 h时，CCK-8结果显示与对照组相比，1、2、4μmol·L-1NaAsO2组抑制Nthy-ori3-1细胞增殖能力（P<0.001）；平板克隆实验结果表明，其集落形成能力呈浓度梯度降低（P<0.001）;1、2、4μmol·L-1NaAsO2组经ICI182780干预后，与Nthy-ori3-1细胞的同剂量染NaAsO2组比较，细胞存活率、集落形成能力被恢复（P<0.001, P<0.01）; Hoechst 33 342染色结果显示，与对照组相比，1、 2、4μmol·L-1NaAsO2组中凋亡的Nthy-ori3-1细胞核染色逐渐增强，细胞凋亡加重（P <0.001）；与Nthy-ori3-1细胞的同剂量染NaAsO2组比较，经ICI182780干预NaAsO2染毒组的细胞凋亡水平降低（P<0.001）;WB结果显示，与对照组相比，1、2、4μmol·L-1NaAsO2组ERα、ERβ、cMYC、Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达呈浓度梯度降低（P <0.001,P<0.01）,Bax蛋白表达呈浓度梯度增高（P <0.001），而PI3K、AKT蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）；与Nthy-ori3-1细胞的同剂量染NaAsO2组比较，经ICI182780干预NaAsO2染毒组的细胞内ERα、ERβ、c-MYC、Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达升高（P <0.001,P<0.01）,Bax蛋白表达降低（P <0.001），而PI3K、AKT蛋白表达无统计学差异（P>0.05）;ERα、ERβ、c-MYC、Bcl-2、Bax mRNA的表达结果与WB结果一致。[结论] NaAsO2作用于Nthy-ori3-1细胞后，将抑制Nthy-ori3-1细胞增殖能力，促进其凋亡发生，并表现出剂量依赖；其机制可能是NaAsO2通过抑制ER-PI3K/AKT信号通路，作用于下游增殖/凋亡相关基因而发生。

关键词：亚砷酸钠雌激素样效应雌激素受体 PI3K/AKT信号通路增殖凋亡

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Eg Innexin-unc9重组蛋白的表达纯化及诊断价值

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新疆医科大学学报 2025年第04期 421-425+431页

作者：吴军范宇黎飞海李军张文宝郭宝平杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆地方病及分子生物学重点实验室

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(EgInnexin unc9,EgInx)重组蛋白，制备多抗评估其诊断潜力及组织定位，为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-EgInx原核表达质粒；将重组质粒转... 详细信息

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(EgInnexin unc9,EgInx)重组蛋白，制备多抗评估其诊断潜力及组织定位，为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-EgInx原核表达质粒；将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)在不同温度下诱导表达，利用镍亲和层析柱纯化重组EgInx蛋白(rEgInx),并通过蛋白质免疫印迹(Western blotting, WB)验证其特异性；制备多克隆抗体进行免疫组化；采用生物素-亲和素放大系统酶联免疫吸附实验(Biotin-avidin system-enzyme linked immunosorbent assay, BAS-ELISA)检测22份健康人血清及7份囊型棘球蚴病患者血清，初步评估其诊断价值。结果成功表达并纯化rEgInx, WB检测显示其可被组氨酸标签抗体特异性识别。免疫组化表明，在胆盐诱导后EgInx在原头蚴头节及体表皮层高表达，成虫则表达在生殖系统，主要位于孕节。BAS-ELISA检测敏感度为85.71%(6/7),特异度95.45%(21/22)。结论 rEgInx具有高诊断特异性，其发育阶段差异性定位提示其参与虫体发育及繁殖调控，可作为囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis, CE)新型诊断标志物及犬用疫苗潜在靶点。

关键词：细粒棘球绦虫重组蛋白免疫诊断

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甘油二酯对胰岛素抵抗HepG2细胞脂质代谢PRKCQ/NF-κB通路的作用及机制

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热带医学杂志 2025年第04期 445-452页

作者：徐逸凡蒋靓王银梅木也赛·买合木提胡扎尔·加纳提帕它木·莫合买提新疆医科大学公共卫生学院劳动与环境卫生教研室

目的利用高浓度胰岛素构建胰岛素抵抗HepG2(IR-HepG2)细胞模型，探究甘油二酯（DAG）对胰岛素抵抗（IR）状态下脂质代谢的影响及可能的机制。方法体外使用10-7μmol/L胰岛素诱导24 h，以葡萄糖消耗量和细胞存活率为指标，确定IR-HepG... 详细信息

目的利用高浓度胰岛素构建胰岛素抵抗HepG2(IR-HepG2)细胞模型，探究甘油二酯（DAG）对胰岛素抵抗（IR）状态下脂质代谢的影响及可能的机制。方法体外使用10-7μmol/L胰岛素诱导24 h，以葡萄糖消耗量和细胞存活率为指标，确定IR-HepG2细胞模型的最佳作用浓度及时间。建立HepG2组、IR-HepG2组、HepG2+DAG组、IR-HepG2+DAG组、IR-HepG2+二甲双胍（MET）组、IR-HepG2+DAG+MET组，检测DAG干预下各组细胞葡萄糖消耗量和存活率。利用RT-qPCR和Western blot探讨DAG可能的作用机制。采用人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫吸附测定试剂盒、人高敏白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒检测各组TNF-α、IL-1β炎症因子水平。结果不同浓度的DAG降低了葡萄糖消耗量。PCR结果显示，与IR-HepG2组比较，IR-HepG2+DAG组PRKCQ、IκB基因表达水平升高（t=3.994、3.608,P均<0.05）,GLUT4基因表达水平降低（t=3.150,P<0.05），差异均有统计学意义。Western blot结果显示，与IR-HepG2组比较，IR-HepG2+DAG组PRKCQ蛋白表达水平升高（t=3.763,P<0.05）,IR-HepG2+DAG组、IR-HepG2+DAG+MET组p-IκB/IκB蛋白表达水平升高（t=7.162、29.190,P均<0.05）,IR-HepG2+MET组和IR-HepG2+DAG+MET组p-NF-κB/NF-κB蛋白表达水平降低（t=6.719、11.150,P均<0.05），差异均有统计学意义。ELISA检测结果显示，与IR-HepG2组比较，IR-HepG2+DAG组TNF-α和IL-1β水平升高（t=171.400、20.410,P均<0.05）,IR-HepG2+DAG+MET组TNF-α和IL-1β水平降低（t=77.070、4.297,P均<0.05），差异均有统计学意义。结论 DAG通过激活PRKCQ，活化下游IκB/NF-κB相关脂质代谢通路，提高胰岛素抵抗状态下的炎症水平。

关键词：甘油二酯胰岛素抵抗 HepG2细胞 PRKCQ/NF-κB通路

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2022年石家庄市卫生村与非卫生村农村环境卫生状况和居民卫生行为分析

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环境卫生学杂志 2025年第4期15卷 317-322页

作者：武瑞婷牛玉杰范尉尉陈凤格石家庄市疾病预防控制中心公共卫生监测与评价所石家庄050011 新疆科技学院医学院库尔勒841000 河北医科大学劳动卫生与环境卫生学教研室河北省环境与人群健康重点实验室中国疾病预防控制中心环境与健康研究基地(石家庄) 河北省疑难病原研究重点实验室

目的通过开展农村环境卫生监测,掌握农村环境卫生健康危害因素水平,探索卫生村创建对石家庄市农村环境的影响,为制订政策措施提供参考。方法2022年根据地理位置、经济水平等选择出六个项目县,每个县采用分层随机抽样方法选择120个村,每... 详细信息

目的通过开展农村环境卫生监测,掌握农村环境卫生健康危害因素水平,探索卫生村创建对石家庄市农村环境的影响,为制订政策措施提供参考。方法2022年根据地理位置、经济水平等选择出六个项目县,每个县采用分层随机抽样方法选择120个村,每个村随机选择5户家庭,使用统一的调查表,通过现场访谈、问卷等方法收集数据,包括一般情况、厕所粪便情况、垃圾污水情况等。结果调查结果显示,卫生村与非卫生村关于居民行为的比较有差异的是使用的主要燃料、卫生厕所的使用、粪便处理和生活污水处理等14个方面(均P<0.05),采用Bonferroni法两两比较结果显示,省级卫生村和市级卫生村在家庭使用的主要燃料、家庭使用厕所情况、污水排放点、家庭周围的积水容器以及废弃包装处理方面要优于非卫生村;省级卫生村在施药时防护情况方面优于市级卫生村和非卫生村;市级卫生村在粪便处理方式、家庭生活污水的排放、厨房内有无发现鼠迹和苍蝇、购买农药的地点以及农药的储存方面要优于非卫生村;饭前便后洗手情况、卫生厕所类型在不同级别卫生村间均有统计学差异(校正后的P<0.05)。结论2022年石家庄市农村环境卫生管理情况较好,卫生村创建在农村改厕行动、粪便无害化处理、病媒生物情况等方面均发挥了积极作用。

关键词：农村环境卫生监测

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2016—2022年石家庄市农田土壤铬污染变化及健康风险

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环境卫生学杂志 2025年第2期15卷 136-142页

目的明确石家庄市2016-2022年农村农田土壤铬污染情况以及评估对人群健康的潜在健康风险。方法选择无极、赞皇、鹿泉、栾城、藁城、正定六个项目县(区)开展农田土壤重金属铬监测项目,每个县每年采集20份样本,利用地累积指数法、潜在... 详细信息

目的明确石家庄市2016-2022年农村农田土壤铬污染情况以及评估对人群健康的潜在健康风险。方法选择无极、赞皇、鹿泉、栾城、藁城、正定六个项目县(区)开展农田土壤重金属铬监测项目,每个县每年采集20份样本,利用地累积指数法、潜在生态风险指数法和健康风险评价模型进行评估。结果石家庄各项目县土壤中铬均值均未超出标准限值;土壤中铬总体均数从2016年的29.94 mg/kg增加到2022年的51.45 mg/kg,共增加了40.66 mg/kg,总体有上升趋势且差异具有统计学意义(Z=2.28,P=0.023)。地累积指数污染级别从高到低依次为:无极>赞皇>鹿泉>栾城。潜在生态风险远低于风险值,生态风险可忽略不计;非致癌风险结果显示:儿童非致癌风险均要高于成人且差异均有统计学意义(均为P<0.001);其中经口摄入>皮肤接触>呼吸吸入,且三种暴露途径在儿童和成人之间的差异均有统计学意义(均为P<0.001)。致癌风险结果显示:成人通过呼吸吸入重金属铬的致癌风险大于对儿童的风险,且差异均有统计学意义(P<0.001)。结论六个项目县中,正定、赞皇和鹿泉农田土壤中铬含量有逐年上升趋势,但整体污染程度较轻,对人体的非致癌风险超过了阈值而致癌风险在可接受范围内。

关键词：农田土壤铬潜在生态风险健康风险评估

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砷暴露对大鼠E2和TRH及其受体mRNA表达的影响

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环境与职业医学 2023年第1期40卷 89-94页

作者：赖媛艳李宏昀马晓薇江志红吴军新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室新疆乌鲁木齐830011

[背景]砷能够进入下丘脑诱导雌激素效应并干扰神经内分泌系统正常功能。甲状腺内分泌系统(下丘脑-垂体-甲状腺轴)作为主要的内分泌系统之一,砷对其毒性机制尚不明确。[目的]为了解不同砷暴露水平下对大鼠雌二醇(E2)、下丘脑促甲状腺激... 详细信息

[背景]砷能够进入下丘脑诱导雌激素效应并干扰神经内分泌系统正常功能。甲状腺内分泌系统(下丘脑-垂体-甲状腺轴)作为主要的内分泌系统之一,砷对其毒性机制尚不明确。[目的]为了解不同砷暴露水平下对大鼠雌二醇(E2)、下丘脑促甲状腺激素释放激素(TRH)及其受体(ERα、ERβ、TRHR)m RNA的影响及其可能的下丘脑毒作用途径与机制。[方法]70只Wister大鼠随机分组为:正常对照组(无菌水);低、中、高剂量砷染毒组(0.8、4.0、20.0 mg·kg^(-1)亚砷酸钠);雌激素受体抑制剂(ICI182780)干预低、中、高剂量砷染毒组;每组10只,雌雄各半。染毒组大鼠给予19周NaAsO_(2)饮水染毒,干预组于第9周经尾静脉注射0.5 mg·kg^(-1)ICI182780,每周3次。通过ELISA检测大鼠血清中的E2、TRH水平;实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测大鼠下丘脑组织中雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)和TRH受体(TRHR)m RNA表达水平。[结果](1)E2及其受体m RNA:与对照组相比,雌性大鼠血清E2水平在低、中剂量砷染毒组上升(P<0.05),雄性大鼠血清E2水平在低、中、高剂量砷染毒组上升(P<0.05),雌性E2变化大于雄性;在下丘脑组织中,与对照组相比,雌性大鼠ERα、ERβm RNA相对表达量在低、中、高剂量砷染毒组上升(P<0.05),雄性大鼠ERαm RNA相对表达量在低、中、高剂量砷染毒组上升(P<0.05)。(2)TRH及其受体TRHR m RNA:与对照组相比,雌性大鼠血清TRH水平在高剂量砷染毒组上升(P<0.05),雌性大鼠TRHR m RNA相对表达量在低、中、高剂量砷染毒组上升(P<0.05)。(1)和(2)结果提示雌性较雄性更易出现砷暴露后E2及其受体和TRH及其受体基因的异常改变。(3)与雌性大鼠中高剂量砷染毒组相比,增加ICI182780干预后,抑制了砷暴露诱导TRH、TRHR的表达(P<0.05),提示在下丘脑中砷可能是通过诱发类雌激素效应对TRH、TRHR产生毒作用。[结论]砷暴露可以在下丘脑诱发类雌激素效应,干扰甲状腺功能,并表现出剂量依赖及性别差异。E2及TRH及其受体可能是砷类雌激素效应的毒作用途径。

关键词：砷下丘脑类雌激素效应促甲状腺激素释放激素促甲状腺激素释放激素受体

来源：评论

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砷酸氢钠对人肝星状细胞凋亡和自噬的影响

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环境与职业医学 2020年第10期37卷 1011-1016页

作者：惠瑜袁艳杰孙立吴顺华新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室新疆乌鲁木齐830011

[背景]肝星状细胞是肝脏主要的效应细胞,其活化被认为是促进肝纤维化发展的主要机制之一。自噬和凋亡在肝星状细胞的激活中起关键作用。[目的]探讨砷酸氢钠(Na2HAsO4)对人肝星状细胞(LX-2细胞)凋亡和自噬的影响。[方法]体外培养LX-2细胞... 详细信息

[背景]肝星状细胞是肝脏主要的效应细胞,其活化被认为是促进肝纤维化发展的主要机制之一。自噬和凋亡在肝星状细胞的激活中起关键作用。[目的]探讨砷酸氢钠(Na2HAsO4)对人肝星状细胞(LX-2细胞)凋亡和自噬的影响。[方法]体外培养LX-2细胞株,使用红色荧光蛋白(RFP)-绿色荧光蛋白(GFP)-微管相关蛋白轻链3(LC3)慢病毒稳定感染LX-2细胞,采用流式细胞仪进行筛选和感染率的测定。用不同浓度Na2HAsO(40、0.6、6、60μmol·L^-1)孵育慢病毒稳定感染的LX-2细胞,同时设立未经慢病毒感染正常培养的LX-2细胞为空白组。采用CCK-8法检测LX-2细胞活性;采用流式细胞仪检测LX-2细胞凋亡;采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测自噬指标[LC3、重组人自噬效应蛋白(Beclin-1)、泛素结合蛋白P62(SQSTM-1/P62)]以及凋亡指标[B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)]。[结果]RFP-GFP-LC3慢病毒稳定感染后,LX-2细胞慢病毒感染率为70%,在激光共聚焦下观察RFP和GFP的荧光强度无明显差异。Na2HAsO4处理LX-2细胞24、48、72 h后,与Na2HAsO4(0μmol·L^-1)比较,除LC3+Na2HAsO(40μmol·L^-1)组外,其余各剂量组细胞抑制率均升高(P<0.05)。随着Na2HAsO4染毒剂量的增加,凋亡率呈上升趋势,且与Na2HAsO(40μmol·L^-1)组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组间LC3(F=5.64,340.66)、Beclin-1(F=20.59,87.70)、SQSTM-1/P62(F=15.91,107.24)、BCL-2(F=113.29,9.41)mRNA和蛋白表达水平差异均具有统计学意义(P<0.05)。[结论]Na2HAsO4可诱导LX-2细胞发生细胞凋亡和自噬,凋亡和自噬之间可能存在拮抗作用。

关键词：砷肝星状细胞凋亡自噬

来源：评论

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