检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2005年第4期26卷 396-401页

作者：杨华李连青王蓓霞徐容沈毅珺贾建安潘欣陈秋莉潘卫山西医科大学基础医学部微生物学与免疫学教研室太原030001 山西省临床检验中心太原030012 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的:构建由免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合的噬菌体展示文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选研究打下基础。方法:PCR扩增制备分别编码Protein A 的A、D结构域、Protein G的B2 结构域和Pro tein L的B3结构... 详细信息

目的:构建由免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合的噬菌体展示文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选研究打下基础。方法:PCR扩增制备分别编码Protein A 的A、D结构域、Protein G的B2 结构域和Pro tein L的B3结构域的序列片段,片段两端引入XbaⅠ酶切位点,3′端引入分别编码0、1、2、3个氨基酸大小随机连接肽的序列,并克隆于pMD 18T载体构建重组质粒。以上述16种重组质粒为模板,PCR扩增分别制备各种单结构域片段及两端部分T载体序列,XbaⅠ酶切,各种酶切片段混合后连接,并克隆于噬菌体展示载体pCANTAB5S,构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库,挑取单克隆进行序列测定,评价文库的随机性。结果:噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库库容量为2×107,滴度为1.3×1011;文库中含77%以上的阳性克隆,其中由2个以上单结构域组成的阳性克隆占24%;序列分析显示组合文库包含上述4种单结构域序列,连接方式符合随机连接的特点,随机连接肽的编码核酸也呈随机分布。结论:成功构建了免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库,该文库库容、多样性和随机性完全可满足进行体外分子进化研究的要求。

关键词：免疫球蛋白结合分子噬菌体展示组合文库结构域随机连接肽

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IL-18在抗流感病毒感染早期免疫应答中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 536-537页

作者：刘北星吕昌龙木村吉延中国医科大学基础医学院免疫学教研室福井大学医学部微生物学教室

IL-18是活化巨噬细胞产生的IFN-γ诱导因子.IL-18可增加脑实质中IFN-γ产生细胞数,增强活化小神经胶质细胞的功能[1].体外实验证明肺巨噬细胞能选择性识别和杀伤被流感病毒感染的组织细胞,抑制流感病毒的增殖[2].本研究利用IL-18基因缺... 详细信息

IL-18是活化巨噬细胞产生的IFN-γ诱导因子.IL-18可增加脑实质中IFN-γ产生细胞数,增强活化小神经胶质细胞的功能[1].体外实验证明肺巨噬细胞能选择性识别和杀伤被流感病毒感染的组织细胞,抑制流感病毒的增殖[2].本研究利用IL-18基因缺陷鼠流感病毒感染模型,探讨IL-18在调节肺巨噬细胞抗流感病毒感染早期免疫应答中的作用。

关键词：流感病毒感染 IL-18 免疫应答 IFN-γ诱导因子早期肺巨噬细胞小神经胶质细胞选择性识别基因缺陷鼠

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SAM-P1鼠对神经毒型流感病毒R404BP株中枢神经系统感染的免疫防御

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中国免疫学杂志 2005年第7期21卷 524-527页

作者：刘北星木村吉延中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳11000 福井大学医学部微生物学教室 9101193

目的:研究SAMP1鼠中枢神经系统被流感病毒感染后,机体对感染神经元的清除及病毒感染所诱导的免疫应答。方法:采用立体定位微量注射法,用神经毒型流感病毒R404BP株经嗅球感染SAMP1鼠,造成实验性流感病毒脑炎动物模型。检测感染鼠生存率,... 详细信息

目的:研究SAMP1鼠中枢神经系统被流感病毒感染后,机体对感染神经元的清除及病毒感染所诱导的免疫应答。方法:采用立体定位微量注射法,用神经毒型流感病毒R404BP株经嗅球感染SAMP1鼠,造成实验性流感病毒脑炎动物模型。检测感染鼠生存率,感染神经元清除时间以及Th1型细胞免疫。结果:SAMP1鼠对流感病毒R404BP株易感性高,感染后生存率降低,清除感染神经元所需时间延长,脾淋巴细胞NK活性及CTL杀伤活性低下。结论:老化鼠因机体Th1型免疫应答下降导致对神经毒型流感病毒免疫防御机制的降低。

关键词：老化鼠神经毒型流感病毒R404BP株 Th1型免疫应答

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HIV-1 Gag蛋白P2/NC蛋白酶切割位点序列的随机化及噬菌体展示

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第二军医大学学报 2005年第11期26卷 1243-1247页

作者：周波贾建安温宗梅邓松华蒋少华陈秋莉潘欣潘卫安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的:构建HIV-1 Gag PR蛋白P2/NC切割位点序列随机化的噬菌体展示文库,研究HIV-1蛋白酶(protease PR)耐药性突变对其敏感切割序列的影响。方法:PCR扩增制备重组HIV-1gag基因上的CAP2和NC片段,在CAP2片段5′端引入StuⅠ酶切位点,3′端PR... 详细信息

目的:构建HIV-1 Gag PR蛋白P2/NC切割位点序列随机化的噬菌体展示文库,研究HIV-1蛋白酶(protease PR)耐药性突变对其敏感切割序列的影响。方法:PCR扩增制备重组HIV-1gag基因上的CAP2和NC片段,在CAP2片段5′端引入StuⅠ酶切位点,3′端PR切割位点处的氨基酸序列进行随机化;在NC片段5′端设计重叠区域,3′端引入SalⅠ酶切位点。应用Overlapping PCR将CAP2和NC片段拼接并克隆于噬菌体展示载体LD3-pCANTAB5S上,建立HIV-1PR靶蛋白CAP2和NC之间切割位点随机化的噬菌体展示文库。结果:该噬菌体展示文库库容量为2.1×106,滴度为3.0×1012TU/ml,CAP2/NC片段插入率为52.1%;12个样品的序列分析显示切割位点中随机化的核苷酸与氨基酸均呈随机性分布;10个阳性单克隆噬菌体CAP2/NC-LD3-pCANTAB5S样品中9个与IgG特异结合。结论:成功地对HIV-1PR靶蛋白CAP2和NC之间切割位点进行了随机化并展示于噬菌体表面,构建了其噬菌体展示文库,为筛选耐药性突变的PR敏感切割序列及构建蛋白酶抑制剂噬菌体筛选模型打下基础。

关键词： HIV-1 蛋白酶切割位点序列随机化噬菌体展示文库

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和田地区维吾尔族长寿与非长寿家族DNA断裂水平研究

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新疆医科大学学报 2005年第1期28卷 33-34,37页

作者：孙玉萍地力夏提.亚和甫艾德尔.艾力阿有普阿布来提.卡德尔买买提明.库尔班西热力.努买买提新疆医科大学基础医学院病原微生物学教研室新疆医科大学基础医学院公共卫生学院流行病学与统计学教研室新疆乌鲁木齐830054 新疆和田地区传染病专科医院新疆和田838400 和田地区疾病控制与预防中心新疆和田838400

目的:研究和田地区洛浦县长寿与非长寿家族的DNA断裂水平的基础值及其相关因素.方法:在征得调查对象同意后采集血液样本,用彗星实验方法检测其血淋巴细胞DNA断裂水平.统计分析采用t检验、秩和检验和相关分析等方法.结果:长寿与非长寿家... 详细信息

目的:研究和田地区洛浦县长寿与非长寿家族的DNA断裂水平的基础值及其相关因素.方法:在征得调查对象同意后采集血液样本,用彗星实验方法检测其血淋巴细胞DNA断裂水平.统计分析采用t检验、秩和检验和相关分析等方法.结果:长寿与非长寿家族的DNA断裂率及其校正均数差异都有统计学意义(P<0.01),断裂分级之间差异也有统计学意义(P<0.01),且断裂率与年龄呈正相关,有随年龄增高而增加的趋势,20～39岁组、40～59岁组及60～79岁组之间差异有统计学意义,但是性别之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:长寿与非长寿家族的DNA断裂率均数的基础值在排除年龄、性别、吸烟、饮酒等因素的影响后差异仍有统计学意义,长寿与非长寿家族寿命的长短可能与遗传背景产生的DNA损伤不同有一定的关系.

关键词：和田地区维吾尔族长寿非长寿家族 DNA断裂彗星试验

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重组人淋巴毒素随机点突变组合文库的构建

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生物工程学报 2004年第1期20卷 43-48页

作者：沈毅珺潘卫徐容潘欣王罗春王征曹峰谭靖伟吴劲松吴芳刘彦君第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 上海复旦张江生物医药股份有限公司上海201203

构建重组人淋巴毒素 (rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究。应用含随机核苷酸序列的引物 ,通过OverlapPCR的方法分别对rhLT的 4 6、10 6和 130位氨基酸进行定点随机突变 ,获得各单点随机突变体库。通过基因... 详细信息

构建重组人淋巴毒素 (rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究。应用含随机核苷酸序列的引物 ,通过OverlapPCR的方法分别对rhLT的 4 6、10 6和 130位氨基酸进行定点随机突变 ,获得各单点随机突变体库。通过基因操作将这三个单点随机突变体库拼接并克隆于pMD_18T载体建立三点组合突变体文库 ,DNA测序鉴定突变位点的随机性和多样性 ,原核表达该变异体库 ,体外测定生物学活性。成功获得rhLT三点随机点突变组合文库 ,其转化克隆数达到 1 5× 10 5,是多样性理论值的 4 5倍。 5 0个样品的序列分析显示各个位点的核苷酸和氨基酸序列的突变都呈随机性分布。对原核表达的 30个样品进行生物学活性测定 ,结果 70 % (2 1个 )的样品无活性、2 3 3% (7个 )的样品活性低于rhLT、6 7% (2个 )的样品活性高于rhLT。成功构建了rhLT随机点突变组合文库 ,该库不仅在一级结构上具有良好的随机性和多样性 ,而且具有生物学活性的多样性 ,为应用噬菌体展示等高通量筛选策略对淋巴毒素进行体外分子进化和结构与功能的深入研究打下了基础。

关键词：淋巴毒素随机突变分子进化点突变组合文库

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新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L的构建

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第二军医大学学报 2003年第3期24卷 298-302页

作者：沈毅珺潘卫易进华徐容陈秋莉潘欣冯春芝邓松华戚中田刘彦君第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 上海复旦张江生物医药股份有限公司安徽医科大学病理生理学教研室

目的 :将柔性多肽接头和多克隆位点引入噬菌粒载体 pCANTAB5X中 ,构建适用于展示各种随机肽库、功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量 (>30 0个氨基酸 )功能蛋白的新型噬菌粒展示载体。方法 :应用 5′端含XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ... 详细信息

目的 :将柔性多肽接头和多克隆位点引入噬菌粒载体 pCANTAB5X中 ,构建适用于展示各种随机肽库、功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量 (>30 0个氨基酸 )功能蛋白的新型噬菌粒展示载体。方法 :应用 5′端含XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ识别序列的引物 ,PCR扩增获得XbaⅠ StuⅠ SalⅠ KpnⅠ [G4S]3 NotⅠ衔接片段 ,将该PCR产物克隆到pMD 18T中 ,再将该片段插入 pCANTAB 5X中构建成新型噬菌粒展示载体 pCANTAB5L。结果 :限制性内切酶酶谱及DNA序列分析证明[G4S]3多肽接头和限制性内酶切位点XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ序列被引入到新构建的噬菌粒载体pCANTAB 5L中。结论 :成功构建了新型噬菌粒展示载体 pCANTAB5L ,并能有效展示功能靶蛋白。

关键词：噬菌体展示噬菌粒载体多克隆位点多肽接头

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金属基托承托区与非承托区口腔粘膜菌丛比较

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新疆医科大学学报 2003年第1期26卷 54-55页

作者：何惠宇朱明阿达莱提.阿合买提江新疆医科大学第一附属医院口腔科新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院微生物学教研室新疆乌鲁木齐830054

目的:研究戴用可摘局部义齿后金属基托对粘膜微环境的影响。方法:对 17例戴用金属基托的可摘局部义齿进行基托承托区与非承托区粘膜菌丛的培养、分类和计数 ,并进行统计学分析。结果:金属基托承托区粘膜上链球菌、奈瑟氏菌、放线菌、... 详细信息

目的:研究戴用可摘局部义齿后金属基托对粘膜微环境的影响。方法:对 17例戴用金属基托的可摘局部义齿进行基托承托区与非承托区粘膜菌丛的培养、分类和计数 ,并进行统计学分析。结果:金属基托承托区粘膜上链球菌、奈瑟氏菌、放线菌、厌氧菌、念珠菌的检出率均高于非承托区 ,但差异无统计学意义。结论:可摘局部义齿对口腔粘膜微生态的确存在影响。

关键词：基托承托区基托非承托区金属粘膜菌丛

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多重PCR技术检测宫颈癌组织中HPV16、18和11/6E_6基因的研究

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新疆医科大学学报 2001年第1期24卷 18-20页

作者：陈晓周宜男张月明赵富玺新疆医科大学基础医学院病理学教研室山西大同037008 新疆医科大学基础医学院营养与癌研究室新疆乌鲁木齐830054 山西大同医学专科学校微生物学教研室山西大同037008

目的 :研究宫颈癌发病与 HPV16、18E6基因的关系。方法 :采用多重 PCR技术检测 83例宫颈癌组织中 HPV16、18及 11/ 6 E6基因。结果 :( 1)新疆地区 36例宫颈癌中 HPV E6基因检出率为 86 .11% ( 31/ 36 ) ,其中HPV16 E6占构成比 80 .5 6 %... 详细信息

目的 :研究宫颈癌发病与 HPV16、18E6基因的关系。方法 :采用多重 PCR技术检测 83例宫颈癌组织中 HPV16、18及 11/ 6 E6基因。结果 :( 1)新疆地区 36例宫颈癌中 HPV E6基因检出率为 86 .11% ( 31/ 36 ) ,其中HPV16 E6占构成比 80 .5 6 % ( 2 5 / 31)。 ( 2 )山西地区宫颈癌中 HPV DNA阳性检出率 5 1.0 6 % ( 2 4/ 47) ,其中HPV16 E6占构成比 5 0 .0 0 % ( 12 / 2 4)。 ( 3)两组 HPV E6阳性检出率比较 P <0 .0 1,差异有显著性。两组 HPV16E6构成比比较 ,P >0 .0 5 ,差异无显著性。结论 :宫颈癌发生与 HPV感染的关系密切 ,且新疆地区比山西地区更为密切。两组 HPV感染以

关键词：人类乳头状瘤病毒多重聚合酶链反应宫颈癌 HPV16 HPV18 11/6E6基因

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动物细胞系的染色体组型与遗传变异率分析

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Acta Genetica Sinica 2001年第4期28卷 327-344,T001,T002页

作者：张德礼李六金夏耕田何旭玉高步先白晓鸿黄高升刘尚高阎隆飞方福德胡春雷王黎军姜焕宏冯阿曼张广民安社刚任远强郭建民胡淑贤樊军喜牛永利宋占军李迎樊胜军北京大学医学部免疫学系北京100083 北京军区联勤部卫生防疫队西安710032 第四军医大学动物保健品研制中心毒理学研究室西安710032 第四军医大学基础部病理学教研室西京医院病理科中国癌症研究基金会肿瘤研究所北京100094 中国农业大学动物医学院传染病微生物学教研室生物学院生物化学与分子生物学系农业生物技术国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院实验动物研究所

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、... 详细信息

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、结构畸变率分析，了解７种细胞系传代培养不同代次的染色体变异情况。以相应的细胞株皮下接种裸鼠形成肿瘤实验、软琼脂细胞克隆形成率与植物凝集素作用下细胞凝集实验为对照，筛选出无致癌／致瘤性、符合细胞遗传学要求、无传染因子污染的细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２）或极低致癌性的ＭＤＣＫ细胞系用于制苗，发现肿瘤细胞系高变异率株可在裸鼠体内快速选育成功。细胞系染色体遗传特征决定致瘤性质并具有种属特异性，得到一些１００％成瘤和１００％不成瘤的细胞株并探讨了与染色体组型的关系。对于肿瘤的发病机理及实验治疗，都是非常好的模型。一些细胞系不仅成瘤而且还可转移（致恶性横纹肌样瘤的ＢＨＫ－２１和Ｖｅｒｏ细胞株），其他致瘤细胞株只成瘤不转移或不明显转移。

关键词：动物肾细胞系人类子宫颈癌细胞系猪肾原代细胞染色体核型 G带核型遗传变异率数目变异结构畸变

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