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新疆医科大学学报 2010年第6期33卷 634-636页

作者：张丽李秀梅李龙新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室乌鲁木齐市慈善医院外科新疆乌鲁木齐830011

目的探讨大鼠缺血再灌注(I/R)时细胞间黏附分子-1(intercelluar adhesion molecule-1,ICAM-1)表达与小动脉形态学改变的关系及意义。方法 70只Wistar大鼠随机分为3组:Ⅰ组:正常对照组(10只),Ⅱ组:缺血组(10只),Ⅲ组:I/R组(50只)。Ⅰ组... 详细信息

目的探讨大鼠缺血再灌注(I/R)时细胞间黏附分子-1(intercelluar adhesion molecule-1,ICAM-1)表达与小动脉形态学改变的关系及意义。方法 70只Wistar大鼠随机分为3组:Ⅰ组:正常对照组(10只),Ⅱ组:缺血组(10只),Ⅲ组:I/R组(50只)。Ⅰ组由三通管放血立即处死。Ⅱ、Ⅲ组10min内放血至血压为40mmHg,并维持45min。Ⅱ组缺血45min后处死,Ⅲ组缺血45min后进行输血输液治疗,分别于再灌注1、3、6、12、24h时点处死。免疫组化染色观测ICAM-1在各组大鼠脑、肾、四肢肌肉的小动脉内皮和平滑肌细胞表达的阳性细胞数,并用光镜和透射电镜观察小动脉形态学改变。结果 (1)Ⅰ组脑、肾及四肢肌肉的小动脉ICAM-1不表达;与Ⅰ组比较,Ⅱ组ICAM-1在大鼠脑、肾及四肢肌肉的小动脉的表达变化差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ组再灌注1h脑、肾及四肢肌肉的小动脉ICAM-1表达上调(P<0.05),再灌注3h肾及四肢肌肉的小动脉ICAM-1表达达高峰,再灌注6h脑的小动脉ICAM-1表达达高峰,持续至24h;(2)光镜和电镜下Ⅱ组小动脉内皮和平滑肌轻微损伤,Ⅲ组损伤加重,以再灌注3h损伤最为显著。结论 ICAM-1在大鼠小动脉表达上调介导了I/R小动脉的损伤。

关键词：缺血再灌注损伤 ICAM-1 小动脉

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哈萨克族食管癌中survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体

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新疆医科大学学报 2010年第7期33卷 739-742页

作者：刘玲张丽萍陈艳李卉姜孝芳李秀梅谌宏鸣赵学信李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院科研中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的构建survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究survivin基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出survivin基因,以阳性组织基因组DN... 详细信息

目的构建survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究survivin基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出survivin基因,以阳性组织基因组DNA扩增出survivin基因启动子区CpG岛,survivin基因经双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1相连,并转入甲基化酶缺陷的大肠杆菌***1793中扩增。经测序正确后,将重组质粒及survivin基因启动子区CpG岛用HindⅢ酶切,连接后再次转入***1793中扩增。将重组质粒转染至食管癌细胞株Eca-109中,荧光显微镜观察结果。结果 DNA测序证明获得了包含ORF全长的survivin基因及其启动子区CpG岛,并将双序列成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中。转染后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白。结论成功构建真核表达载体,为进一步探讨survivin基因启动子区CpG岛甲基化状态对该基因在哈萨克族食管癌细胞株中的表达及功能的影响奠定了基础。

关键词： survivin 启动子区哈萨克族食管癌载体构建

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哈萨克族食管癌中cdc42启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体

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新疆医科大学学报 2010年第7期33卷 735-738页

作者：刘玲张景萍李卉姜孝芳陈艳李秀梅谌宏鸣赵学信李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院科研中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的构建cdc42基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究cdc42基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出cdc42基因,以阳性组织基因组DNA扩增出cd... 详细信息

目的构建cdc42基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究cdc42基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出cdc42基因,以阳性组织基因组DNA扩增出cdc42基因启动子区CpG岛,cdc42基因经双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1相连,并转入甲基化酶缺陷的大肠杆菌***1793中扩增。经测序成功后,将重组质粒及cdc42基因启动子区CpG岛用HindⅢ酶切,连接后再次转入***1793中扩增。将重组质粒转染至食管癌细胞株Eca-109中,荧光显微镜观察结果。结果 DNA测序证明获得了包含ORF全长的cdc42基因及其启动子区CpG岛,并将双序列成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中。转染后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白。结论成功构建真核表达载体,为进一步探讨cdc42基因启动子区CpG岛甲基化状态对该基因在哈萨克族食管癌细胞株中的表达及功能的影响奠定了基础。

关键词： cdc42 哈萨克族食管癌载体构建

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哺乳动物双杂交技术验证HBV表面抗原大蛋白与人胰腺CDK5RAP3蛋白间的相互作用

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新疆医科大学学报 2010年第2期33卷 113-115页

作者：巩雪俐张丽张建龙张锦前新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011 北京地坛医院传染病研究所北京100015

目的验证HBV表面抗原大蛋白(LHBs)与人胰腺CDK5RAP3蛋白在细胞内是否存在相互作用关系,为进一步研究HBV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础。方法构建真核表达质粒pACT-CDK5RAP3,哺乳动物双杂交技术验证LHBs与人胰腺CDK5RAP3蛋白之间的相... 详细信息

目的验证HBV表面抗原大蛋白(LHBs)与人胰腺CDK5RAP3蛋白在细胞内是否存在相互作用关系,为进一步研究HBV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础。方法构建真核表达质粒pACT-CDK5RAP3,哺乳动物双杂交技术验证LHBs与人胰腺CDK5RAP3蛋白之间的相互作用。结果实验组和各阴性对照组差别均有统计学意义(P<0.05)。结论LHBs与人胰腺CDK5RAP3蛋白在细胞内存在相互作用关系,且单独转染后没有自身激活作用。

关键词： HBV表面抗原大蛋白胰腺癌细胞哺乳动物双杂交

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老龄小鼠急性心肌梗塞后NF-κB信号通路表达的变化

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新疆医科大学学报 2010年第6期33卷 620-624页

作者：黄莺马依彤杨毅宁刘芬陈邦党李晓梅陈蓉新疆医科大学第一附属医院冠心病科新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学冠心病研究室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的研究不同年龄小鼠急性心肌梗塞后NF-κB信号通路的表达差异,探讨急性心肌梗塞后心脏破裂的年龄异质性机制。方法选择3月龄(低龄组)和18月龄(老龄组)雄性C57/BL小鼠各48只,结扎左冠状动脉建立急性心肌梗塞(acute myocardial infarcti... 详细信息

目的研究不同年龄小鼠急性心肌梗塞后NF-κB信号通路的表达差异,探讨急性心肌梗塞后心脏破裂的年龄异质性机制。方法选择3月龄(低龄组)和18月龄(老龄组)雄性C57/BL小鼠各48只,结扎左冠状动脉建立急性心肌梗塞(acute myocardial infarction,AMI)模型。分为对照组(shamoperations,SH)及心梗后3、7、14d(MI3、7、14d)组,免疫组织化学及Western blot法测定左室心肌p65表达、细胞间粘附分子(ICAM)-1、血管粘附分子(VCAM)-1表达。结果心梗后p65表达较对照组高,老龄组表达高于低龄组。心梗后3d ICAM-1表达高于对照组,但不同年龄组间表达无差异。心梗后VCAM-1表达高于对照组,老龄对照组及心梗14d时表达高于低龄组。结论急性心肌梗塞后左室心肌NF-κB信号通路相关蛋白表达存在年龄异质性,其可能是老龄鼠急性心肌梗塞后心脏破裂率高和心室重构重的机制之一。

关键词：老龄心肌梗死心室重构心脏破裂 NF-κB信号通路

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 327-330页

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室、重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 详细信息

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。

关键词：登革热病毒病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠近交BALBC

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MTA1和nm23-H1与哈萨克族食管癌生物学行为的关系

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新疆医科大学学报 2010年第7期33卷 746-748,751页

作者：陈艳王洪江李卉庞作良李秀梅姜孝芳冉继华谌宏鸣李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科新疆医科大学基础医学院科研中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学兰州军区乌鲁木齐总医院检验科新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的探讨MTA1和nm23-H1蛋白表达水平及其与哈萨克族食管癌生物学行为的关系。方法应用Western blot对20例哈萨克族食管癌标本中MTA1和nm23-H1蛋白表达进行检测。结果 MTA1在食管癌癌组织中的表达率为45%,但癌组织与相应正常组织表达量... 详细信息

目的探讨MTA1和nm23-H1蛋白表达水平及其与哈萨克族食管癌生物学行为的关系。方法应用Western blot对20例哈萨克族食管癌标本中MTA1和nm23-H1蛋白表达进行检测。结果 MTA1在食管癌癌组织中的表达率为45%,但癌组织与相应正常组织表达量无明显差异;nm23-H1在食管癌癌组织及正常组织中未表达的占50%,并且90%肿瘤至少侵及肌层,其中70%的肿瘤并伴有淋巴结转移。结论在哈萨克族食管癌的浸润、转移中MTA1可能不起主导作用,而nm23-H1低表达表型可能有助于浸润和淋巴结转移,与生物学行为有关,可有望成为哈萨克族食管癌患者转移复发的参考指标。

关键词：食管癌肿瘤转移相关基因1 nm23-H1 哈萨克族

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凋亡蛋白因子c-IAP2在新疆哈萨克族食管癌中的表达及临床意义

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新疆医科大学学报 2010年第7期33卷 743-745页

作者：陈艳王洪江李卉庞作良李秀梅姜孝芳冉继华谌宏鸣李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科附属肿瘤医院胸外科新疆医科基础医学院科研中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学兰州军区乌鲁木齐总医院检验科新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的探讨新疆哈萨克族食管癌组织中凋亡蛋白因子c-IAP2 mRNA的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测30例哈萨克族食管癌患者中c-IAP2 mRNA的表达。结果 30例哈萨克族食管癌患者癌组织与正常组织(手术切缘无癌组织)中c-IAP2 mRNA表... 详细信息

目的探讨新疆哈萨克族食管癌组织中凋亡蛋白因子c-IAP2 mRNA的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测30例哈萨克族食管癌患者中c-IAP2 mRNA的表达。结果 30例哈萨克族食管癌患者癌组织与正常组织(手术切缘无癌组织)中c-IAP2 mRNA表达阳性率分别为93.33%(28/30)与70.0%(21/30)。半定量光密度扫描后c-IAP2 mRNA表达量在哈萨克族食管鳞癌患者癌组织及正常组织中差异有统计学意义(P<0.05),但c-IAP2的表达与分化程度、病理分期及有无淋巴结转移均无相关性。结论 c-IAP2 mRNA在哈萨克族食管癌患者癌组织中的表达高于正常组织,表明c-IAP2通过抑制细胞凋亡,可能促进了哈萨克族食管癌的发生。

关键词：食管癌哈萨克族 c-IAP2

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新疆妇女子宫颈病变组织中HPV16E6基因突变分析

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临床与实验病理学杂志 2009年第5期25卷 513-518页

作者：海米提.阿布都力木米开热木.麦麦提拉莱.苏祖克新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室乌鲁木齐830011 喀什地区第一人民医院病理科喀什844000 新疆医科大学基础医学院病理解剖学教研室乌鲁木齐830011

目的通过检测HPV16E6基因突变在新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈癌组织中的分布规律,以探讨该突变与宫颈癌发生的关系。方法取汉族宫颈炎(含石蜡包埋组织及宫颈刷液基标本)125例,维吾尔族宫颈炎(含石蜡包埋组织及宫颈刷液基标本)124例;汉族... 详细信息

目的通过检测HPV16E6基因突变在新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈癌组织中的分布规律,以探讨该突变与宫颈癌发生的关系。方法取汉族宫颈炎(含石蜡包埋组织及宫颈刷液基标本)125例,维吾尔族宫颈炎(含石蜡包埋组织及宫颈刷液基标本)124例;汉族石蜡包埋宫颈癌35例,维吾尔族石蜡包埋宫颈癌共109例。用以上HPV16阳性DNA模板PCR扩增HPV16E6全长基因,PCR产物直接测序,分析新疆女宫颈癌组织HPV16E6基因的突变。结果PCR检测结果显示汉族族宫颈炎组织中HPV16E6阳性率为35.71%(15/42);维吾尔族宫颈炎组织中HPV16E6阳性率为30.46%(14/46);汉族族宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为33.33%(2/6),维吾尔族宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为22.22%(12/54);宫颈炎与宫颈癌中HPV16E6阳性表达无统计学意义(P>0.05),对21份(上皮内低度病变1例,原位癌1例,低分化宫颈癌4例,中分化宫颈癌4例,高分化1例,轻度炎症4例,中度炎症3例,重度炎症1例,正常宫颈2例)HPV16E6扩增片段的双向测序,其中5例成功测序得到一级结构,并且序列分析表明,2例(维吾尔族宫颈癌低分化1例,中分化1例)其E6基因与原型相同,3例(汉族轻度炎症1例,汉族宫颈癌中分化1例,上皮内低度病变1例)其发生了L83V突变。结论中国新疆HPV16E6基因发生变异,其原型和变异型在该地区汉族、维吾尔族妇女宫颈癌患者组织中的分布可能与该地区宫颈癌高发存在一定的联系。

关键词：子宫颈肿瘤人乳头瘤病毒16型基因突变

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单侧睾丸动脉结扎/再通对小鼠生精上皮、血清抗精子抗体的影响

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黑龙江动物繁殖 2009年第3期17卷 1-3页

作者：张冰玛依拉.阿布拉克王新星买尔江.艾合买提新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830054

采用单侧睾丸动脉结扎/再通以研究其对小鼠睾丸生精功能以及血清中抗精子抗体IgG、IgM含量的影响。实验选择健康成年BALB/c雄性小鼠于显微镜下行单侧睾丸动脉结扎,再于2h、4h、6h后开通血管。ELISA法检测血清抗精子抗体IgG、IgM水平,光... 详细信息

采用单侧睾丸动脉结扎/再通以研究其对小鼠睾丸生精功能以及血清中抗精子抗体IgG、IgM含量的影响。实验选择健康成年BALB/c雄性小鼠于显微镜下行单侧睾丸动脉结扎,再于2h、4h、6h后开通血管。ELISA法检测血清抗精子抗体IgG、IgM水平,光镜观察睾丸生精小管内变化。结果表明:与非术侧相比,术侧睾丸生精小管内生精细胞不同程度地凋亡坏死,生精上皮脱落。各手术组血清中抗精子抗体IgG、IgM含量均有明显增长(P<0.05)。实验结论:单侧睾丸动脉结扎/再通可引起睾丸生精细胞的凋亡坏死,同时血清抗精子抗体IgG、IgM含量增加。

关键词：抗精子抗体 BALB/c小鼠动脉结扎/再通

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