检索结果-内蒙古大学图书馆

现代生物医学进展 2024年第4期24卷 617-623页

作者：木艾塔尔·艾斯卡尔阿依孜木姑·阿卜杜外力马依热·努尔买卖提朱稷蔚文滔潘文涛王汉铭卡思木江·阿西木江新疆医科大学新疆乌鲁木齐830017 新疆医科大学动物实验中心新疆乌鲁木齐830001 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830017 新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830017

目的:探讨中药缓溃乐(HKL)对溃疡性结肠炎小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴以及5-羟色胺(5-HT)信号通路相关关键分子的影响。方法:C57BL/6小鼠(38只)随机分成HKL干预组(HKL组)、5-氨基水杨酸干预组(5-ASA组)、溃疡性结肠炎模型组(UC组)和正常... 详细信息

目的:探讨中药缓溃乐(HKL)对溃疡性结肠炎小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴以及5-羟色胺(5-HT)信号通路相关关键分子的影响。方法:C57BL/6小鼠(38只)随机分成HKL干预组(HKL组)、5-氨基水杨酸干预组(5-ASA组)、溃疡性结肠炎模型组(UC组)和正常组。前三组小鼠用2%葡聚糖硫酸钠(Dextran sodium sulfate,DSS)干预7天,构建小鼠UC模型,同时分别用HKL、5-ASA和蒸馏水灌胃干预14天。每天观察动物一般状态、粪便性状。在干预结束后采集血清和结肠组织,采用HE染色法评价各组小鼠结肠组织完整性、损伤或愈合程度。酶联免疫吸附法测定血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、皮质醇(CORT)、5-羟色胺(5-HT)、犬尿氨酸(KYN)和色氨酸(TRP)的含量;RT-qPCR法检测结肠组织中5-羟色胺转运蛋白(SERT)和色氨酸羟化酶I(TPH1)的m RNA水平。结果:HKL和5-ASA组小鼠结肠组织损伤部分恢复。UC小鼠血清ACTH、KYN、TRP和5-HT含量显著高于正常组(P<0.05或P<0.01),而CRH含量显著低于正常组(P<0.001);与UC组比较,HKL组小鼠血清中CORT、ACTH、KYN和TRP的含量显著降低(P<0.05或P<0.01),CRH含量显著升高(P<0.01);与正常组相比,UC组小鼠结肠组织中TPH1的m RNA表达水平显著升高(P<0.01);与UC组相比,HKL组TPH1的m RNA表达水平显著降低(P<0.05),而SERT的m RNA表达水平显著升高(P<0.01)。结论:UC小鼠体内HPA轴过度活化,5-HT信号通路发生异常,肠道炎症明显,中药HKL抑制HPA轴的过度激活,并对5-HT信号通路相关分子的表达产生影响。

关键词：溃疡性结肠炎 HPA轴 5-HT信号通路中药缓溃乐

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肥胖小鼠血清外泌体差异表达LncRNAs筛选、功能及调控蛋白互作网络分析

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山东医药 2024年第27期64卷 35-39页

作者：王昶赞仪雯瑛李祥辉努尔比耶·努尔麦麦提新疆医科大学临床医学部乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆地方病分子生物学重点实验室

目的筛选肥胖小鼠与对照组小鼠血清外泌体差异表达的LncRNAs,分析差异表达LncRNAs相关靶基因的基因本体功能及相关信号通路,并对差异表达LncRNAs调控的蛋白进行互作网络分析,以探讨差异表达的LncRNAs与肥胖发生的关系。方法用高脂饲料(... 详细信息

目的筛选肥胖小鼠与对照组小鼠血清外泌体差异表达的LncRNAs,分析差异表达LncRNAs相关靶基因的基因本体功能及相关信号通路,并对差异表达LncRNAs调控的蛋白进行互作网络分析,以探讨差异表达的LncRNAs与肥胖发生的关系。方法用高脂饲料(肥胖组)和普通饲料(对照组)分别饲养C57BL/6小鼠各12只,喂养8周后通过对小鼠体质量的检测确定肥胖小鼠模型构建成功。提取两组小鼠血清外泌体,进行高通量测序以筛选差异表达的LncRNAs,应用TopGO软件和KEGG数据库对差异表达基因进行GO、KEGG分析。采用STRING蛋白质相互作用网络数据库构建差异表达基因蛋白互作网络,筛选差异表达的LncRNAs调控的蛋白。结果两组血清外泌体中,共筛选出201个差异表达LncRNAs,其中32个表达上调,169个表达下调,主要存在于细胞内部分(intracellular part,其中富集712个候选基因)、细胞内(intracellular,其中富集730个候选基因)、细胞器部分(organelle part,其中富集483个候选基因),主要涉及脂肪酸降解、MAPK信号通路等相关通路。初步筛选出了8个肥胖相关LncRNAs调控的蛋白(Ehmt1、Epha3、MAPK13、Mark4、Irak2、Fgfr4、Prkce、MAPK1)。结论肥胖小鼠与对照组小鼠血清外泌体中共筛选出201个差异表达LncRNAs,其中32个表达上调,169个表达下调。差异表达LncRNAs主要涉及脂肪酸降解、MAPK信号通路等。初步筛选出8个LncRNAs调控的肥胖相关蛋白(Ehmt1、Epha3、MAPK13、Mark4、Irak2、Fgfr4、Prkce、MAPK1);差异表达LncRNAs与肥胖发生可能有关。

关键词：长链非编码RNA 外泌体肥胖

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原花青素对中枢神经系统的保护作用及其机制研究进展

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解放军医学院学报 2024年第8期45卷 904-908页

作者：田晓寒吕梦姣柴冰茹袁孙强王梦慈周晓丹廖礼彬白生宾新疆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830011

中枢神经系统疾病是一类病因及发病机制极为复杂的疾病,其治疗和干预措施的研究一直是神经科学领域的重点和难点。原花青素作为一种天然抗氧化剂,在清除自由基、抗氧化、抗炎与抗凋亡等方面的显著保护作用受到广泛关注,在中枢神经系统... 详细信息

中枢神经系统疾病是一类病因及发病机制极为复杂的疾病,其治疗和干预措施的研究一直是神经科学领域的重点和难点。原花青素作为一种天然抗氧化剂,在清除自由基、抗氧化、抗炎与抗凋亡等方面的显著保护作用受到广泛关注,在中枢神经系统损伤领域也已经取得了显著的研究进展。本文阐述国内外关于原花青素对中枢神经系统损伤保护作用及相关机制的研究进展,特别是在神经退行性疾病、化学药物引起的神经损伤、应激导致的神经损伤、脑血管疾病以及脊髓损伤等方面的应用情况。原花青素作为一种潜在的治疗中枢神经系统疾病的天然化合物,其保护作用和机制研究的不断深入,将为开发新的治疗策略提供重要依据。

关键词：中枢神经系统原花青素神经退行性疾病超氧化物歧化酶认知功能障碍

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白细胞介素-2和信号转导和转录激活因子5在宫颈病变患者血清、宫颈组织和细胞中的表达及意义

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新乡医学院学报 2022年第10期39卷 934-941页

作者：杜靖李晨王晓静李婉悦樊凯沙静新疆医科大学基础医学院生理学教研室/新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆生产建设兵团医院新疆乌鲁木齐830000

目的探讨白细胞介素-2(IL-2)、IL-2受体(IL-2R)和信号转导和转录激活因子5(STAT5)在宫颈病变患者血清、宫颈组织和细胞中的表达变化及其与宫颈病变严重程度的关系。方法选择2020年6月至2021年6月新疆生产建设兵团医院门诊或住院治疗的2... 详细信息

目的探讨白细胞介素-2(IL-2)、IL-2受体(IL-2R)和信号转导和转录激活因子5(STAT5)在宫颈病变患者血清、宫颈组织和细胞中的表达变化及其与宫颈病变严重程度的关系。方法选择2020年6月至2021年6月新疆生产建设兵团医院门诊或住院治疗的25例宫颈鳞状细胞癌患者(宫颈鳞状细胞癌组)、40例慢性宫颈炎患者(慢性宫颈炎组)和50例体检健康女性(健康对照组)为研究对象,应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测3组受试者人乳头瘤病毒(HPV)16/18感染情况,酶联免疫吸附试验法检测3组受试者血清和宫颈脱落细胞中IL-2水平,实时荧光定量PCR法检测3组受试者宫颈脱落细胞中IL-2、IL-2R、STAT5a和STAT5b mRNA水平。另外,收集新疆医科大学第一附属医院和新疆生产建设兵团医院病理科石蜡包埋的慢性宫颈炎组织35例和宫颈鳞状细胞癌组织87例(高分化30例,中分化42例,低分化15例),免疫组织化学法检测慢性宫颈炎和宫颈鳞状细胞癌组织中IL-2、IL-2R、STAT5和磷酸化STAT5(p-STAT5)蛋白的表达。结果慢性宫颈炎组和宫颈鳞状细胞癌组患者HPV16/18阳性率高于健康对照组(χ^(2)=6.762、13.868,P<0.05);宫颈鳞状细胞癌组患者HPV16/18阳性率显著高于慢性宫颈炎组(χ^(2)=7.870,P<0.05)。慢性宫颈炎组和宫颈鳞状细胞癌组HPV16/18阳性患者血清和宫颈脱落细胞中IL-2水平低于健康对照组,宫颈鳞状细胞癌组HPV16/18阳性患者血清和宫颈脱落细胞中IL-2水平低于慢性宫颈炎组(P<0.05);慢性宫颈炎组和宫颈鳞状细胞癌组HPV16/18阴性患者血清和宫颈脱落细胞中IL-2水平低于健康对照组,宫颈鳞状细胞癌组HPV16/18阴性患者血清和宫颈脱落细胞中IL-2水平低于慢性宫颈炎组(P<0.05);3组HPV16/18阳性受试者血清和宫颈脱落细胞中IL-2水平低于HPV16/18阴性受试者(P<0.05)。HPV16/18阳性受试者宫颈脱落细胞中与血清中IL-2水平呈正相关(r=0.665,P<0.05)。慢性宫颈炎组和宫颈鳞状细胞癌组患者宫颈脱落细胞中IL-2、IL-2R、STAT5a和STAT5b mRNA相对表达量低于健康对照组,宫颈鳞状细胞癌组患者宫颈脱落细胞中IL-2、IL-2R、STAT5a和STAT5b mRNA相对表达量低于慢性宫颈炎组(P<0.05)。宫颈鳞状细胞癌宫颈组织中IL-2、IL-2R阳性表达率显著低于慢性宫颈炎组织,STAT5和p-STAT5阳性表达率显著高于慢性宫颈炎组织(P<0.05)。高分化型宫颈鳞状细胞癌宫颈组织中IL-2、IL-2R阳性表达率显著高于中分化型和低分化型,STAT5和p-STAT5阳性表达率低于中分化型和低分化型(P<0.05);中分化型宫颈鳞状细胞癌宫颈组织中IL-2、IL-2R阳性表达率显著高于低分化型,STAT5和p-STAT5阳性表达率低于低分化型(P<0.05)。结论HPV16/18阳性者血清和宫颈脱落细胞中IL-2水平低于HPV16/18阴性者,且随宫颈病变程度加重而降低;宫颈病变组织和细胞中IL-2和IL-2R表达随宫颈病变分化程度加重而降低,IL-2可能通过JAK/STAT通路激活STAT家族蛋白STAT5a、STAT5b参与宫颈癌的发生、发展;宫颈脱落细胞和血清IL-2联合检测可预测宫颈病变的进展。

关键词：人乳头瘤病毒宫颈病变白细胞介素-2 白细胞介素-2受体信号转导和转录激活因子5

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低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响机制

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中国现代医学杂志 2025年第5期35卷 24-31页

作者：吕梦姣杨毅田晓寒廖礼彬阿不都热西提·库提彼丁王梦慈周晓丹袁孙强白生宾新疆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室(新疆地方病分子生物学重点实验室) 新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院骨科新疆乌鲁木齐830011

目的探究低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响机制。方法将鼠源性巨噬细胞系(RAW264.7)与鼠源性BMSCs系CP-M131细胞培养至第3代,用白细胞介素-4诱导巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞,提取并鉴定常氧与低氧... 详细信息

目的探究低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响机制。方法将鼠源性巨噬细胞系(RAW264.7)与鼠源性BMSCs系CP-M131细胞培养至第3代,用白细胞介素-4诱导巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞,提取并鉴定常氧与低氧培养条件下M2型巨噬细胞的外泌体。将CP-M131细胞分为PBS组、N-M2 exo组与H-M2 exo组,分别与PBS、90 ng/mL N-M2 exo及90 ng/mL H-M2 exo共孵育72 h。孵育结束后,通过免疫荧光观察BMSCs系CP-M131细胞对不同氧气条件下M2型巨噬细胞外泌体的摄取情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与Western blotting检测BMSCs中摄取不同实验组外泌体后骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、碱性磷酸酶(ALP)、成骨特异性转录因子(Runx)基因和蛋白表达,以及细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)的蛋白表达。采用ALP染色评估不同氧气条件M2型巨噬细胞外泌体对BMSCs成骨能力的影响。结果成功诱导巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞,且提取到不同处理组的外泌体。qRT-PCR和Western blotting结果表明,与N-M2 exo组比较,H-M2 exo组的CP-M131细胞BMP-2、ALP、Runx基因和蛋白表达均上调(P<0.05);H-M2 exo组的ERK与p-ERK蛋白表达均上调(P<0.05)。ALP染色观察到低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体促进CP-M131细胞成骨分化。结论低氧条件下M2型巨噬细胞外泌体可以促进BMSCs成骨分化。

关键词：骨髓间充质干细胞 M2型巨噬细胞外泌体骨分化氧条件

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伊木萨克片联合NLRP3炎症小体抑制剂MCC950通过抑制氧化应激改善DMED大鼠勃起功能的研究

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中国性科学 2025年第1期34卷 9-14页

作者：张蕊杨承霞刘玉莲朱兵兵牛立盼金秀芳夏玉为刘凤霞新疆医科大学基础医学院人体解剖学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第五临床医学院乌鲁木齐830011 新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011

目的探讨伊木萨克片联合核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制剂MCC950是否可通过抑制阴茎组织中氧化应激水平改善糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠的勃起功能。方法选取32只正常雄性SD大鼠构建糖尿病大鼠模型,造模第2、4... 详细信息

目的探讨伊木萨克片联合核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制剂MCC950是否可通过抑制阴茎组织中氧化应激水平改善糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠的勃起功能。方法选取32只正常雄性SD大鼠构建糖尿病大鼠模型,造模第2、4、6、8周后通过阿扑吗啡(APO)和交配实验筛选出24只DMED大鼠。连续药物干预2周后,采用免疫荧光法检测大鼠阴茎组织中NLRP3蛋白表达,采用试剂盒法检测阴茎组织中活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)表达水平,采用Western blot法检测阴茎组织中超氧化物歧化酶(SOD)-1、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)1、NOX2蛋白表达。结果DMED组阴茎组织中NLRP3蛋白表达高于N组、MCC950组、Y组、MCC950+Y组,MCC950+Y组阴茎组织中NLRP3蛋白表达低于MCC950组、Y组(P<0.05)。DMED组阴茎组织中ROS和MDA表达水平高于N组、MCC950组、Y组、MCC950+Y组,MCC950+Y组阴茎组织中ROS和MDA表达水平低于MCC950组、Y组(P<0.05)。DMED组阴茎组织中NOX1和NOX2蛋白表达高于N组、MCC950组、Y组、MCC950+Y组,SOD-1蛋白表达低于N组、MCC950组、Y组、MCC950+Y组;MCC950+Y组阴茎组织中NOX1和NOX2蛋白表达低于MCC950组、Y组,SOD-1蛋白表达高于MCC950组、Y组(P<0.05)。结论伊木萨克片和MCC950均可通过抑制阴茎组织中氧化应激水平改善DMED大鼠的勃起功能,且两者联合干预效果更佳。

关键词：糖尿病性勃起功能障碍氧化应激核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3 MCC950 伊木萨克片

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受体相互作用蛋白激酶3特异性抑制剂GSK872联合伊木萨克片对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响

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中国性科学 2024年第1期33卷 12-16页

作者：杨培牛立盼朱兵兵杨承霞金秀芳刘凤霞新疆医科大学基础医学院人体解剖学教研室乌鲁木齐830011 新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011

目的探究受体相互作用蛋白激酶3(RIP3)特异性抑制剂GSK872联合伊木萨克片对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠勃起功能的影响。方法150只雄性SD大鼠随机选取20只为正常对照组(N组),其余130只通过连续2 d注射链脲佐菌素(45 mg/kg)建立DMED... 详细信息

目的探究受体相互作用蛋白激酶3(RIP3)特异性抑制剂GSK872联合伊木萨克片对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠勃起功能的影响。方法150只雄性SD大鼠随机选取20只为正常对照组(N组),其余130只通过连续2 d注射链脲佐菌素(45 mg/kg)建立DMED大鼠模型。造模8周后筛选出DMED大鼠115只,随机选取80只分为DMED模型组(DMED组)、GSK872干预组(RIP3i组)、伊木萨克片干预组(Y组)及GSK872与伊木萨克片联合干预组(RIP3i+Y组),每组20只。干预14 d后,通过随机血糖检测、阿扑吗啡(APO)实验和性行为学实验综合评价干预效果。结果与N组比较,DMED组大鼠随机血糖升高,阴茎勃起能力和性功能降低(P<0.05);与DMED组比较,RIP3i组、Y组及RIP3i+Y组大鼠随机血糖差异无统计学意义(P>0.05),但阴茎勃起能力和性功能升高(P<0.05),其中RIP3i+Y组升高更显著(P<0.05)。结论RIP3特异性抑制剂GSK872和伊木萨克片干预均可改善DMED大鼠勃起功能,而二者联合的干预效果优于单独干预。

关键词：受体相互作用蛋白激酶3 GSK872 伊木萨克片糖尿病性勃起功能障碍

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LncRNA NEAT1/miR-101-3p/RAC1在宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及机制研究

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新疆医科大学学报 2024年第7期47卷 945-953页

作者：吾米丹·阿不都热合曼曹玲玲欧阳云珊林晨新疆医科大学基础医学院病理学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830017 新疆医科大学研究生学院乌鲁木齐830017

目的探讨lncRNA NEAT1在宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用机制。方法采用RT-qPCR法检测宫颈腺癌细胞系HeLa、宫颈鳞癌细胞系SiHa和人子宫内膜上皮细胞系EM中lncRNA NEAT1的表达;干扰或过表达lncRNA NEAT1后,通过CCK-8和Transwell... 详细信息

目的探讨lncRNA NEAT1在宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用机制。方法采用RT-qPCR法检测宫颈腺癌细胞系HeLa、宫颈鳞癌细胞系SiHa和人子宫内膜上皮细胞系EM中lncRNA NEAT1的表达;干扰或过表达lncRNA NEAT1后,通过CCK-8和Transwell观察宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化,扫描电镜观察细胞侵袭性伪足的变化;采用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA NEAT1与miR-101-3p的靶向关系;通过免疫荧光、Transwell、CCK-8等方法检测lncRNA NEAT1/miR-101-3p/RAC1对SiHa和HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果相比于EM细胞(0.99±0.04),宫颈癌SiHa(7.59±0.10,P<0.01)和HeLa(1.50±0.07,P<0.05)细胞中lncRNA NEAT1的表达明显升高。相比于sh-NC组,sh-NEAT1组(加入NEAT1敲低质粒)细胞增殖、迁移、侵袭及侵袭性伪足数量明显减少(P<0.05);相比于OE-NC组,OE-NEAT1组(加入NEAT1过表达质粒)SiHa、HeLa细胞增殖、迁移、侵袭及侵袭性伪足数量显著增加(P<0.05)。miR-101-3p与突变的NEAT1共转染后,相比于对照组(3.10±0.16)荧光素酶活性无显著变化(2.99±0.11,P>0.05),而与野生型NEAT1共转染后,相比于对照组(2.97±0.13)荧光素酶活性显著降低(1.15±0.05,P<0.01),提示lncRNA NEAT1与miR-101-3p靶向结合。RT-qPCR结果显示,与sh-NC组(SiHa,0.97±0.09;HeLa,1.07±0.06)相比,sh-NEAT1组miR-101-3p mRNA表达明显升高(SiHa,3.86±0.39;HeLa,2.62±0.51,P<0.01);与OE-NC组(SiHa,0.98±0.20;HeLa,1.05±0.18)相比,OE-NEAT1组miR-101-3p mRNA表达显著降低(SiHa,0.35±0.05;HeLa,0.14±0.03,P<0.05),提示lncRNA NEAT1与miR-101-3p的表达呈负相关。CCK-8、Transwell结果显示,siRNA-RAC1、miR-101-3p mimic使SiHa和HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制(P<0.05),上调lncRNA NEAT1可部分逆转以上现象,使细胞增殖、迁移和侵袭数目增加(P<0.05)。结论宫颈癌细胞中lncRNA NEAT1的表达显著升高,它作为miR-101-3p的竞争性内源RNA(ceRNA),通过竞争性结合miR-101-3p并部分控制其对RAC1的调控,进而调节宫颈癌细胞侵袭性伪足的形成并诱导细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词： NEAT1 miR-101-3p RAC1 宫颈癌侵袭

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细粒棘球绦虫TAK1基因ORF的克隆及其蛋白生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第12期17卷 1392-1398页

作者：刘丽英李军张文宝吴军杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用... 详细信息

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件分别对EgTAK1的理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、N-糖基化位点、亲/疏水性、保守结构域、跨膜结构域、信号肽序列进行预测;采用MEGA 7.0软件对不同物种来源的TAK1蛋白进行多序列比对并构建系统进化树。采用实时荧光定量PCR检测细粒棘球绦虫在不同发育阶段TAK1基因mRNA的相对表达量。结果EgTAK1基因ORF全长1116 bp,编码371个氨基酸,理论等电点为5.97,不稳定指数为49.59,属于不稳定蛋白;脂肪系数为87.22,总平均亲水系数为-0.291,为亲水性蛋白;EgTAK1蛋白含有64个磷酸化位点,3个O-糖基化潜在位点,4个N-糖基化位点;EgTAK1蛋白属于蛋白激酶C类似(PKC-like)家族;无跨膜结构和信号肽,亚细胞可能定位于细胞膜、细胞质及细胞核内。该蛋白含有7个优势B细胞抗原表位,具有良好的免疫原性。二级结构包含34.77%的α-螺旋,5.12%的β-转角,40.97%的无规卷曲,19.14%的延伸链。TAK1蛋白同源序列比对中与多房棘球绦虫的TAK1同源性最高为83%。实时荧光定量PCR显示,细粒棘球绦虫在不同发育阶段EgTAK1表达有差异,成虫阶段相对表达量最高。结论基因EgTAK1可能是细粒棘球绦虫发育分化的重要调控基因,预测该基因编码的蛋白含有B细胞抗原表位,有可能成为包虫病免疫学预防及药物研制的靶标抗原。

关键词：细粒棘球绦虫 TAK1 生物信息学分析 PCR

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LINC00324对黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制

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山西医科大学学报 2024年第1期55卷 29-35页

作者：马诗淇丁毅李敏王梦慈张思宇冯树梅新疆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011 南京医科大学基础医学院病理学教研室新疆第二医学院基础医学院解剖学教研室

目的探讨LINC00324对黑色素瘤增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法基于基因表达谱交互式分析平台(GEPIA)数据库分析LINC00324在黑色素瘤组织和癌旁组织中的表达水平以及对患者预后的影响。在黑色素瘤细胞株SK-MEL-2中转染LINC00... 详细信息

目的探讨LINC00324对黑色素瘤增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法基于基因表达谱交互式分析平台(GEPIA)数据库分析LINC00324在黑色素瘤组织和癌旁组织中的表达水平以及对患者预后的影响。在黑色素瘤细胞株SK-MEL-2中转染LINC00324过表达载体和siRNA,并标记为过表达阴性对照组(NC组)、过表达组(OE组)、沉默阴性对照组(si-NC组)和沉默组(si-LINC00324组);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LINC00324转染效率以及Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA表达水平;CCK-8实验检测细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western blot实验检测关键蛋白表达水平。结果与癌旁组织相比,LINC00324在黑色素瘤组织中低表达(P<0.05),且低表达患者的预后较差。qRT-PCR结果显示,LINC00324的过表达载体和siRNA在黑色素瘤细胞中转染成功(P<0.01)。与NC组相比,OE组SK-MEL-2细胞增殖、迁移以及侵袭能力明显减弱(P<0.01);与si-NC组相比,si-LINC00324组SK-MEL-2细胞增殖、迁移能力提高(P<0.01)。与NC组相比,OE组细胞中Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA水平下调(P<0.01);与si-NC组相比,si-LINC00324组细胞中Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA水平上调(P<0.01)。Western blot结果显示,与NC组相比,OE组细胞中p62和Bcl-2的蛋白水平上调(P<0.05),LC3BⅡ蛋白水平下调(P<0.01);与si-NC组相比,si-LINC00324组细胞中p62和Bcl-2的蛋白水平下调(P<0.05),LC3BⅡ蛋白水平上调(P<0.05)。结论LINC00324在黑色素瘤组织和细胞系中低表达,可以通过上调Bcl-2抑制自噬影响黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

关键词：黑色素瘤 LINC00324 自噬 Bcl-2 细胞增殖细胞迁移细胞侵袭

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