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基于NLRP3/Caspase-1焦亡通路探究西地那非对勃起功能障碍大鼠睾丸组织的影响

中国性科学 2023年第4期32卷 1-6页

作者：牛阳九张汐佳朱兵兵刘凤霞新疆医科大学基础医学院人体解剖学教研室乌鲁木齐830011 新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011

目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(NLRP3/Caspase-1)焦亡信号通路在高脂饮食诱导的勃起功能障碍(ED)大鼠模型睾丸组织中的表达及西地那非的干预的作用。方法55只SD大鼠随机抽取10只为对照大鼠(... 详细信息

目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(NLRP3/Caspase-1)焦亡信号通路在高脂饮食诱导的勃起功能障碍(ED)大鼠模型睾丸组织中的表达及西地那非的干预的作用。方法55只SD大鼠随机抽取10只为对照大鼠(对照组),45只采用高脂饲料喂养,筛选出32只ED大鼠,随机分为ED组、Sil(西地那非)组、白介素-18(IL-18)组和IL-18+Sil组。连续给药14d,HE染色观察睾丸组织形态学变化,免疫组化法检测睾丸组织IL-18和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量及分布,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blotting检测大鼠睾丸组织中IL-18、NLRP3、Caspase-1、具有细胞膜打孔活性的gasdermin D蛋白(GSDMD)和eNOS的表达。结果与对照组比较,ED组和IL-18组睾丸组织形态发生明显变化,睾丸组织中IL-18、NLRP3、Caspase-1、GSDMD的mRNA和蛋白表达增高,eNOS的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);与ED组和IL-18组比较,Sil组和IL-18+Sil组IL-18、NLRP3、Caspase-1、GSDMD的mRNA和蛋白表达降低,eNOS的mRNA和蛋白表达增高(P<0.05)。结论西地那非能够通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路减少IL-18诱导的ED大鼠睾丸组织中出现的焦亡。

关键词：勃起功能障碍西地那非焦亡睾丸

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NFE2L2对宫颈癌细胞系糖酵解关键酶及侵袭迁移的作用

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山西医科大学学报 2022年第8期53卷 935-940页

作者：哈提拉·吐尔逊李金秋艾力菲热·加帕尔文智颖阿仙姑·哈斯木新疆医科大学基础医学院病理教研室新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学第五临床医学院临床医学院新疆医科大学基础医学院新疆地方病分子生物学重点实验室

目的探讨核因子E2相关因子2(NFE2L2)对宫颈癌迁移、侵袭及糖酵解中关键酶己糖激酶(HK1)、乳酸脱氢酶(LDHA)的影响。方法培养宫颈癌细胞株SiHa(鳞癌,HPV+)和C33a(鳞癌,HPV-),用人工合成的NFE2L2过表达载体(高表达组)转染宫颈癌SiHa,NFE2L... 详细信息

目的探讨核因子E2相关因子2(NFE2L2)对宫颈癌迁移、侵袭及糖酵解中关键酶己糖激酶(HK1)、乳酸脱氢酶(LDHA)的影响。方法培养宫颈癌细胞株SiHa(鳞癌,HPV+)和C33a(鳞癌,HPV-),用人工合成的NFE2L2过表达载体(高表达组)转染宫颈癌SiHa,NFE2L2 siRNA(低表达组)转染C33a细胞株,将两者的空载组分别作为相应对照组。通过蛋白印迹法(Western blot)检测NFE2L2的本底表达,及转染后NFE2L2、HK1、LDHA蛋白水平相应改变。应用Transwell实验检测转染后NFE2L2在SiHa、C33a细胞侵袭迁移能力的变化。结果在本底检测中,C33a中NFE2L2蛋白表达水平较SiHa高,故将NFE2L2高表达慢病毒用于转染SiHa细胞,而低表达NFE2L2慢病毒转染C33a细胞。Western blot结果显示,与相应对照组比较,高表达NFE2L2组中HK1、LDHA的表达量增高(P<0.05),低表达NFE2L2组中HK1、LDHA的表达量降低(P<0.05)。迁移侵袭实验中,与相应对照组相比,NFE2L2高表达组SiHa细胞迁移的细胞数目和侵袭数目增加(P<0.05),NFE2L2低表达组C33a细胞迁移的细胞数目和侵袭数目减少(P<0.05)。结论NFE2L2增强糖酵解关键酶表达,促进宫颈癌SiHa、C33a细胞的侵袭迁移能力。

关键词： NFE2L2 子宫颈癌 HK1 LDHA

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2019-2023年新疆巴楚县某医院肺结核患者利福平耐药状况及影响因素

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热带医学杂志 2024年第5期24卷 739-743页

作者：李天心彭凤梅王霞刘铠雄魏怡凡苏月阳阿斯木古丽·加列勒伊娜新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830017 新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830017 巴楚县人民医院新疆喀什843800 新疆医科大学第五临床医学院新疆乌鲁木齐830017 新疆医科大学第二临床医学院新疆乌鲁木齐830017

目的分析巴楚县某医院肺结核患者的利福平耐药特征及相关危险因素,为当地结核病的防控治疗提供科学依据。方法收集巴楚县人民医院2019年7月-2023年8月经病原学、分子生物学诊断确证为肺结核阳性的1198例患者,利用倾向性评分匹配法匹配... 详细信息

目的分析巴楚县某医院肺结核患者的利福平耐药特征及相关危险因素,为当地结核病的防控治疗提供科学依据。方法收集巴楚县人民医院2019年7月-2023年8月经病原学、分子生物学诊断确证为肺结核阳性的1198例患者,利用倾向性评分匹配法匹配利福平耐药(耐药组,n=92)与利福平敏感(非耐药组,n=368)的患者,回顾性队列研究方法分析患者的临床基线资料,采用logistic回归模型分析肺结核患者利福平耐药的影响因素。结果多因素logistic回归分析显示:复治患者利福平耐药概率是初治患者的2.09(95%CI:1.28~3.42)倍,有吸烟史的患者利福平耐药概率是无吸烟史患者的3.86(95%CI:1.29~11.53)倍,合并继发性高尿酸血症患者利福平耐药概率是未合并继发性高尿酸血症患者的2.01(95%CI:1.15~3.54)倍,合并呼吸道疾病患者利福平耐药概率是未合并呼吸道疾病患者的2.32(95%CI:1.39~3.87)倍,影像学显示肺部增殖的患者利福平耐药概率是无肺部增殖患者的2.64(95%CI:1.34~5.20)倍,以上因素在耐药组和非耐药组之间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论肺结核患者中,复治、吸烟、合并继发性高尿酸血症、合并呼吸道疾病、肺部增殖是利福平耐药的危险因素,应对该类人群重点管控防治。

关键词：肺结核利福平耐药影响因素巴楚县

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泡球蚴感染对小鼠肝脏TRIF/IRF3通路和IFITM3的影响

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山西医科大学学报 2024年第5期55卷 553-559页

作者：屈晴袁振杨雨阳王菲单骄宇新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室乌鲁木齐830017 新疆地方病分子生物学重点实验室新疆医科大学第一附属医院中亚高发疾病发病机制与防治国家重点实验室

目的探索泡球蚴感染后不同时间对小鼠肝脏β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)/干扰素调节因子3(IRF3)通路及干扰素诱导的跨膜蛋白3(IFITM3)的影响。方法对泡型包虫病患者和其他非感染性肝病(肝血管瘤)手术患者的肝脏组织进行HE及免疫组织... 详细信息

目的探索泡球蚴感染后不同时间对小鼠肝脏β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)/干扰素调节因子3(IRF3)通路及干扰素诱导的跨膜蛋白3(IFITM3)的影响。方法对泡型包虫病患者和其他非感染性肝病(肝血管瘤)手术患者的肝脏组织进行HE及免疫组织化学染色,观察肝组织病理变化及IFITM3和叉头框蛋白P3(Foxp3)的表达。48只C57BL/6J雌性小鼠随机分为感染组(腹腔感染泡球蚴后8,30,60,90,180 d)和对照组。Masson染色观察小鼠肝脏纤维化病变,Western blot和实时荧光定量PCR检测小鼠肝脏TRIF/IRF3通路、IFITM3和Foxp3变化。结果泡型包虫病患者肝脏病灶周围肝组织排列紊乱,有大量炎性细胞浸润;肝血管瘤患者肝脏组织完整。免疫组化检测结果,泡型包虫病患者IFITM3和Foxp3的表达量高于肝血管瘤患者。Masson染色显示泡球蚴感染导致小鼠肝脏纤维化病变。实时荧光定量PCR结果显示,感染组小鼠肝脏TRIF、IRF3、IFNB1和IFITM3 mRNA表达在感染60 d和90 d时均高于对照组(P<0.05),但感染180 d时TRIF、IFNB1和IFITM3 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);Foxp 3 mRNA的表达随着泡球蚴感染时间呈先上升后下降再上升的趋势,在感染180 d上升到峰值(P<0.05)。Western blot结果显示,泡球蚴感染小鼠90 d,肝脏TRIF、IRF3、IFITM3蛋白表达量均高于对照组(P<0.05),但感染180 d时与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);在感染90 d和180 d时,Foxp3蛋白表达高于对照组,并在180 d上升到峰值(P<0.05)。结论晚期泡球蚴感染时,小鼠肝脏的TRIF/IRF3通路及IFITM3表达下调,影响了天然免疫的抗病原体功能,抑制宿主发挥抗病原体的作用。

关键词：泡型包虫病泡球蚴干扰素诱导的跨膜蛋白3 干扰素调节因子3 肝纤维化

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Ad36诱导分化的脂肪细胞中LncRNA00602的作用初探

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中华内分泌代谢杂志 2021年第6期37卷 558-566页

作者：高佳乐张晓峥焦谊努尔比耶·努尔麦麦提孟轩羽徐尤宗胜王冰丽刘迪晖关亚群新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室乌鲁木齐830011 新疆医科大学厚博学院克拉玛依834000

目的探讨腺病毒36型(Ad36)诱导分化的脂肪细胞中,长链非编码RNA(LncRNA)00602促进棕色化的可能作用。方法根据Ad36感染与否,将肥胖患者分为Ad36阴性组和Ad36感染组。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组患者网膜脂肪组织中LncRNA00602 ... 详细信息

目的探讨腺病毒36型(Ad36)诱导分化的脂肪细胞中,长链非编码RNA(LncRNA)00602促进棕色化的可能作用。方法根据Ad36感染与否,将肥胖患者分为Ad36阴性组和Ad36感染组。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组患者网膜脂肪组织中LncRNA00602 mRNA表达水平变化,并分析其与同组患者腰臀比、收缩压、舒张压、空腹血糖、三酰甘油等指标的相关性。采用HE染色检测Ad36阴性组和Ad36感染组网膜脂肪组织中脂肪细胞大小,qRT-PCR及Western印迹法检测2组患者网膜脂肪组织中解偶联蛋白1(UCP1)、PR结构域蛋白16(PRDM16)的mRNA及蛋白质表达水平。分离、培养人脂肪源性干细胞(hADSC),利用Ad36诱导hADSC分化,并分为对照组和LncRNA00602敲低组,在敲低LncRNA00602后第0、2、4天,采用氟硼二吡咯(BODIPY)及线粒体红色荧光(Mito-Tracker Red)分别对细胞内脂滴和线粒体进行荧光染色,同时用qRT-PCR及Western印迹法检测UCP1、PRDM16表达水平的变化。结果Ad36感染组中LncRNA00602基因表达水平高于Ad36阴性组(均P<0.05),Ad36阴性组中LncRNA00602表达水平与以上临床指标相关性无统计学意义,而Ad36感染组LncRNA00602表达水平与血清空腹血糖、三酰甘油呈负相关(r分别为-0.522、-0.486,P<0.05);HE染色显示,Ad36感染组平均脂肪细胞面积小于Ad36阴性组,同时UCP1、PRDM16基因表达水平均高于阴性组(均P<0.05)。在细胞水平,敲低LncRNA00602后第2、4天,LncRNA00602敲低组脂肪细胞的脂滴面积大于对照组,同时线粒体数量较对照组减少,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与对照组相比,LncRNA00602敲低组脂肪细胞棕色化标志基因UCP1、PRDM16 mRNA和蛋白质表达水平均显著降低(均P<0.05)。结论Ad36诱导的脂肪细胞分化中,LncRNA00602可能正向调控了UCP1、PRDM16的表达和脂滴的代谢变化,并引起脂肪细胞棕色化的发生。

关键词：长链非编码RNA00602 人脂肪源性干细胞人脂肪组织解偶联蛋白脂滴

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宫颈和食管鳞状细胞癌组织中DNA甲基化谱分析及肿瘤标志物初步筛选

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山西医科大学学报 2022年第1期53卷 44-50页

作者：徐丽秀李金秋马俊旗阿仙姑·哈斯木新疆医科大学基础医学院病理学教研室乌鲁木齐836001 新疆医科大学全科医学学院第七临床学院新疆医科大学第一附属医院妇科

目的初步筛选与宫颈鳞状细胞癌和食管鳞状细胞癌发生相关的差异甲基化标志物。方法采用Illumina Infinium HumanMethylation450 Bead Chips(甲基化450k芯片)技术分别检测并分析8例宫颈鳞状细胞癌和8例食管鳞状细胞癌及其相应癌旁组织的... 详细信息

目的初步筛选与宫颈鳞状细胞癌和食管鳞状细胞癌发生相关的差异甲基化标志物。方法采用Illumina Infinium HumanMethylation450 Bead Chips(甲基化450k芯片)技术分别检测并分析8例宫颈鳞状细胞癌和8例食管鳞状细胞癌及其相应癌旁组织的DNA甲基化谱,筛选差异甲基化基因;结合基因本体(Gene Ontology,GO)分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)Pathway分析差异甲基化基因生物学功能,并通过UALCAN数据库和GEPIA数据库对差异基因进行验证。结果与癌旁组织相比,宫颈鳞状细胞癌和食管鳞状细胞癌中分别检测出29505个和54009个差异甲基化位点,两种肿瘤组织的共有差异位点5421个。这些共有甲基化差异位点主要位于启动子、gene body和3′UTR等基因功能区,基于这些共有甲基化位点,鉴定出相关基因2041个。结合GO功能注释分析显示在生物进展过程注释类别中,这些基因主要富集于信号传导、细胞黏附、胚胎骨骼系统形态发生;在分子功能注释类别中,主要集中于基因序列特异性结合、基因序列特异性结合转录因子活性、钙通道活性的调节;在细胞组分注释类别中,主要以质膜、质膜的整体组成、基底膜为中心。KEGG通路分析发现差异甲基化基因与黏着斑、癌症信号通路、细胞外基质受体相互作用和肌动蛋白细胞骨架调节有关,并筛选得到ITGA6基因可以作为以上2种肿瘤发生相关的候选基因;利用UALCAN数据库和GEPIA数据库分析显示ITGA6基因在2种肿瘤中高表达。结论ITGA6基因在鳞状细胞癌的形成中发挥重要作用,可作为诊断鳞状细胞癌的重要标志物。

关键词：宫颈鳞状细胞癌食管鳞状细胞癌 DNA甲基化鳞状细胞癌肿瘤标志物共有差异基因

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1日龄乳鼠心肌梗死模型制备及标准化评估

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中国比较医学杂志 2023年第5期33卷 36-43页

作者：郝琰琰布威麦热姆·热杰普向晨莹韩国玲刘维静刘俊聂宇廉虹王玉瑶山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 新疆医科大学第一附属医院心脏外科乌鲁木齐830011 北京协和医学院中国医学科学院阜外医院国家心血管病中心心血管疾病国家重点实验室北京100037

目的优化新生1 d乳鼠急性心肌梗死手术细节,建立稳定的模型并进行标准化评估。方法出生1日龄(postnatal 1 day,P1)CD1小鼠实施三组手术操作:第一组,冠状动脉左前降支(left anterior descending,LAD)结扎(左心耳缘下方1 mm,宽度为1 mm,... 详细信息

目的优化新生1 d乳鼠急性心肌梗死手术细节,建立稳定的模型并进行标准化评估。方法出生1日龄(postnatal 1 day,P1)CD1小鼠实施三组手术操作:第一组,冠状动脉左前降支(left anterior descending,LAD)结扎(左心耳缘下方1 mm,宽度为1 mm,结扎深度<0.5 mm)为标准深度结扎组(standard myocardial infarction,SMI);第二组,LAD结扎位置和宽度不变,结扎深度>0.5 mm为深度结扎组(deep MI,DMI);第三组,只开胸不进行LAD结扎组为假手术组(Sham)。通过TTC、伊文思蓝-TTC染色明确LAD结扎是否成功;术后3、7、14、21、28 d通过HE染色和Masson染色评估P1小鼠LAD结扎的心肌组织损伤、纤维化和再生程度;术后28 d通过超声心动图检测小鼠心脏结构和功能变化。结果首先详细描述了P1乳鼠心肌梗死模型构建过程,通过实现LAD暴露、结扎、术后护理等过程提供了一种稳定再生和高存活率的MI程序。术后1 d通过TTC、伊文思蓝-TTC染色确定了SMI模型结扎成功,术后28 d超声心动图发现与假手术组相比,LVEF、LVFS、LVIDd和LVIDs无统计学差异,说明心脏结构和功能基本恢复正常,术后3、7、14、21、28 d Masson染色发现,SMI组心脏组织纤维化面积分别为15.67%、3.34%、2.99%、2.73%、1.11%,说明术后28 d心肌梗死面积几乎完全恢复;DMI组与SMI组相比,小鼠存活率降低了35.71%(SMI为85.71%,DMI为50%),术后28 d超声结果显示,LVEF、LVFS分别降低了(17.25±6.03)%、(11.37±4.06)%,LVIDd、LVIDs分别升高(0.46±0.15)%、(0.69±0.20)%(P<0.05),纤维化面积DMI组为SMI组6倍,说明>0.5 mm的深度结扎,心脏无法实现术后28 d的完全再生修复。结论本研究详细描述了1日龄小鼠标准急性心肌梗死模型建立过程,通过TTC、伊文思蓝-TTC染色、心脏超声,Masson染色方法评估了术后不同时间点心脏梗死面积、心脏结构、功能以及纤维化程度;同时明确>0.5 mm的深度结扎,心脏无法实现术后28 d的完全修复;本研究为建立稳定可靠的1日龄小鼠急性心肌梗死模型以及手术评估提供了参考数据。

关键词：乳鼠心肌梗死冠状动脉左前降支模型评估

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氟化钠对人成骨肉瘤Saos-2细胞PI3K/Akt信号表达及凋亡的影响

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中华地方病学杂志 2021年第3期40卷 190-194页

作者：蒋香菊张利贺怡张荣尚香玉谢玉贺梦雅张亚楼新疆医科大学厚博学院克拉玛依834000 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室乌鲁木齐830011

目的观察氟化钠(NaF)对人成骨肉瘤Saos-2细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号表达及凋亡的影响。方法采用成组设计,按NaF剂量将Saos-2细胞分为0(对照)、5、10、20、40 mg/L染氟组(n=3)。体外培养24、48 h后收集细胞,采用蛋... 详细信息

目的观察氟化钠(NaF)对人成骨肉瘤Saos-2细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号表达及凋亡的影响。方法采用成组设计,按NaF剂量将Saos-2细胞分为0(对照)、5、10、20、40 mg/L染氟组(n=3)。体外培养24、48 h后收集细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PI3K、Akt和线粒体凋亡途径相关分子Forkhead转录因子(FoxO)1的蛋白表达,采用流式细胞仪检测Saos-2细胞的凋亡水平。结果体外培养24、48 h时,各组Saos-2细胞PI3K、Akt蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。24 h时,5、10、20、40 mg/L染氟组磷酸化PI3K(p-PI3K)蛋白表达(0.40±0.06、0.45±0.02、0.37±0.06、0.32±0.06)均高于对照组(0.28±0.04,P均<0.05);48 h时,5、10 mg/L染氟组p-PI3K蛋白表达(0.46±0.06、0.58±0.03)均高于对照组(0.29±0.04,P均<0.05),而40 mg/L染氟组(0.21±0.03)低于对照组(P<0.05)。24 h时,5、10、20 mg/L染氟组磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达(0.27±0.01、0.30±0.03、0.27±0.03)均高于对照组(0.20±0.02,P均<0.05);48 h时,5、10 mg/L染氟组p-Akt蛋白表达(0.42±0.04、0.60±0.02)均高于对照组(0.27±0.01,P均<0.05),而40 mg/L组(0.18±0.02)低于对照组(P<0.05)。24 h时,10、20、40 mg/L染氟组FoxO1蛋白表达(0.38±0.07、0.41±0.06、0.47±0.08)均高于对照组(0.34±0.04,P均<0.05);48 h时,5、10、20、40 mg/L染氟组FoxO1蛋白表达(0.36±0.08、0.37±0.10、0.54±0.04、0.73±0.04)均高于对照组(0.28±0.04,P均<0.05)。24、48 h时,对照组和5、10、20、40 mg/L染氟组细胞凋亡率分别为(2.867±0.583)%、(3.647±0.035)%、(3.773±0.095)%、(5.440±0.325)%、(7.203±0.476)%,(3.707±0.286)%、(4.023±0.241)%、(4.970±0.368)%、(12.473±0.949)%、(19.387±1.892)%。24 h时,40 mg/L染氟组凋亡水平高于对照组(P<0.05);48 h时,20、40 mg/L染氟组凋亡水平均高于对照组(P均<0.05)。结论氟可以直接激活成骨细胞内的PI3K/Akt信号通路,进而产生抗凋亡作用。

关键词：氟化钠人成骨肉瘤细胞磷脂酰肌醇-3-激酶蛋白激酶B 细胞凋亡

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细粒棘球蚴重组蛋白HIS-CTLA-4IgV-EgG1Y162的诱导表达及3D结构预测

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中国预防医学杂志 2021年第6期22卷 401-406页

作者：周彦霞刘斌孔慧芳赵商岐董炎鑫曹春宝龚巧巧丁剑冰周晓涛新疆医科大学基础医学院免疫学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院检验科新疆医科大学护理学院

目的探索重组蛋白HIS-CTLA-4IgV-EgG1Y162最佳的表达条件,大量诱导及鉴定蛋白质,并预测重组蛋白质的三维结构模型。方法将原核重组质粒pET30a-CTLA-4IgV-EgG1Y162转化至***21(DE)菌株中,在不同条件下诱导重组蛋白进行表达,SDS-PAGE分析... 详细信息

目的探索重组蛋白HIS-CTLA-4IgV-EgG1Y162最佳的表达条件,大量诱导及鉴定蛋白质,并预测重组蛋白质的三维结构模型。方法将原核重组质粒pET30a-CTLA-4IgV-EgG1Y162转化至***21(DE)菌株中,在不同条件下诱导重组蛋白进行表达,SDS-PAGE分析上清及沉淀中重组蛋白表达并用Western blot鉴定。I-TASSER在线预测重组蛋白HIS-CTLA-4IgV-EgG1Y162的三维结构。结果可溶性重组蛋白HIS-CTLA-4IgV-EgG1Y162在异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG)(终浓度0.2 mmol/L),28℃4 h诱导条件下表达量较高;包涵体中的重组蛋白在IPTG(终浓度0.8 mmol/L),28℃2 h并37℃2 h诱导条件下表达量最高。Western blot鉴定该蛋白的相对分子量约为32×10^(3),与预期相符。利用I-TASSER在线预测重组蛋白质HIS-CTLA-4IgV-EgG1Y162的3D结构模型,结果显示相邻的蛋白CTLA-4IgV与蛋白EgG1Y162能抵抗空间位阻的影响进行正常折叠。结论探索出重组蛋白HIS-CTLA-4IgV-EgG1Y162的最佳诱导表达条件并对重组蛋白成功鉴定,根据预测的重组蛋白3D结构验证选用linker序列"GTDDDDKAMADIGSEF"能使其前后相邻的两个蛋白独立正常折叠,为进一步深入研究细粒棘球蚴重组疫苗创造了条件。

关键词：细粒棘球蚴病 HIS-CTLA-4IgV-EgG1Y162 原核表达蛋白质3D结构预测

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Innexin在生物体中的研究进展

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职业与健康 2022年第17期38卷 2424-2430页

作者：杨梅黎飞海吴军新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆乌鲁木齐830011

缝隙连接蛋白或称内联蛋白(innexin,Inx;connexin,Cx和pannexin,Px)存在于无脊椎或脊椎动物体内并构成细胞之间的缝隙连接(gap junction,GJ),或在细胞膜上形成半通道,其生物学功能主要表现在细胞间信号(电和化学)交流、物质运输及离子... 详细信息

缝隙连接蛋白或称内联蛋白(innexin,Inx;connexin,Cx和pannexin,Px)存在于无脊椎或脊椎动物体内并构成细胞之间的缝隙连接(gap junction,GJ),或在细胞膜上形成半通道,其生物学功能主要表现在细胞间信号(电和化学)交流、物质运输及离子交换等方面。近年来研究发现缝隙连接蛋白Inx在物种进化中有着密切的关系,同一个体存在多种异构体,而在不同的物种有相同基序,编码Inx的基因(Inx或inx)的表达对生物个体周期中(特别是生命早期)有着非常重要的作用,主要是在卵子形成、胚胎发育及中枢神经发育中表达程度较高。然而Inx在无脊椎动物(主要是节肢动物和蠕虫)中的种类与作用缺乏系统的阐述,我们主要综述Inx基因及其表达的蛋白在节肢动物和蠕虫体内的种类、生物学结构及功能,Inx蛋白有望成为寄生虫病防治的干预靶点,为寄生虫病的防治提供新思路。

关键词：缝隙连接蛋白基因表达结构功能

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