检索结果-内蒙古大学图书馆

RAC1在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮-间质转化、迁移、侵袭的影响

新疆医科大学学报 2025年第2期48卷 119-125页

作者：曹玲玲欧阳云珊吾米丹·阿不都热合曼赵倩杨旺林晨新疆医科大学基础医学院病理学教研室新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830017

目的探讨Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物1(RAC1)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮-间质转化、迁移、侵袭的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组化(IHC)检测宫颈癌组织中的RAC1表达水平,分析其表达与宫颈癌临床病理... 详细信息

目的探讨Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物1(RAC1)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮-间质转化、迁移、侵袭的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组化(IHC)检测宫颈癌组织中的RAC1表达水平,分析其表达与宫颈癌临床病理特征的关系;构建RAC1低表达的慢病毒载体(shRAC1)和空载载体(shNC),选取低表达RAC1的HeLa、SiHa细胞作为shRAC1组,感染空载载体的HeLa、SiHa细胞作为shNC组;采用qRT-PCR检测各组细胞中RAC1 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测RAC1、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin的蛋白表达水平;EdU实验、平板克隆实验检测细胞增殖情况;划痕实验、Transwell检测细胞的迁移和侵袭能力。结果宫颈癌组织中RAC1 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01)。RAC1表达水平与淋巴结转移和肌层浸润深度有关(P<0.05)。与shNC组相比较,shRAC1组细胞的RAC1 mRNA和蛋白表达水平下降,E-Cadherin表达上调,N-Cadherin和Vimentin表达下调,细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论RAC1在宫颈癌组织和细胞中表达上调,下调其表达可抑制宫颈癌细胞HeLa、SiHa的增殖、上皮-间质转化、迁移和侵袭。RAC1可能成为宫颈癌治疗的潜在靶点。

关键词：宫颈癌上皮-间质转化 RACl 转移

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细粒棘球蚴重组蛋白EgG1Y162诱导表达条件的优化及其蛋白结构预测

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新疆医科大学学报 2025年第4期48卷 426-431页

作者：陈娜菲李小坡马西智彭学臻曹春宝周晓涛新疆医科大学基础医学院免疫学教研室新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830017

目的探索优化重组质粒pET30a-EgG1Y162表达条件并预测其蛋白结构模型。方法通过使用EgG1Y162原始菌种进行诱导表达,探索不同浓度异丙基硫代半乳糖苷(IPTG,sopropylβ-D-Thiogalactoside)、孵育时间对EgG1Y162蛋白诱导表达水平的影响。... 详细信息

目的探索优化重组质粒pET30a-EgG1Y162表达条件并预测其蛋白结构模型。方法通过使用EgG1Y162原始菌种进行诱导表达,探索不同浓度异丙基硫代半乳糖苷(IPTG,sopropylβ-D-Thiogalactoside)、孵育时间对EgG1Y162蛋白诱导表达水平的影响。原始菌种经诱导表达后,通过超声处理离心得到细菌裂解液上清与沉淀,利用SDS-PAGE分析上清和沉淀中EgG1Y162重组蛋白的表达情况,分析最佳诱导表达条件;纯化蛋白,且通过Western blot鉴定抗原蛋白的表达;利用生物信息学技术预测EgG1Y162蛋白的空间结构模型。结果EgG1Y162蛋白在28℃,IPTG终浓度为0.2 mmoL/L,诱导6 h条件下的表达量较高,蛋白相对分子质量约为25 kDa;用HisTrap纯化柱纯化蛋白,EgG1Y162蛋白在20 mmol/L咪唑浓度的洗脱下,洗脱效果较佳,可获取大量纯化蛋白;纯化蛋白能被鼠抗His-Tag抗体识别,与预期结果相符;生物信息学预测结果显示该蛋白中β折叠占5.00%,无规则卷曲占50.83%,成功构建出EgG1Y162蛋白三级结构模型。结论通过统计学方法获得了重组蛋白EgG1Y162的最佳诱导表达及纯化条件,预测了该蛋白的空间结构,为后续大量获得细粒棘球蚴疫苗抗原蛋白EgG1Y162,进而用于研究其免疫效果与免疫机制创造了条件。

关键词：细粒棘球蚴 EgG1Y162 原核表达条件优化生物信息学

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骆驼蓬总碱通过诱导细胞自噬促进Tau蛋白和α-突触核蛋白的降解

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中华神经医学杂志 2021年第11期20卷 1081-1091页

作者：雷秀英伊力亚斯·艾萨张瑜陈倩冯学召西仁阿依·西热甫米娜新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院药理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院生药学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830011

目的:探讨骆驼蓬总碱(TAH)能否诱导神经细胞自噬并促进神经毒性蛋白Tau蛋白和α-突触核蛋白(α-Syn)的降解。方法:(1)将体外培养的PC12细胞分为空白对照组及1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH组,分别加入0、1、2.5、5、10、20、50μg/mL ... 详细信息

目的:探讨骆驼蓬总碱(TAH)能否诱导神经细胞自噬并促进神经毒性蛋白Tau蛋白和α-突触核蛋白(α-Syn)的降解。方法:(1)将体外培养的PC12细胞分为空白对照组及1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH组,分别加入0、1、2.5、5、10、20、50μg/mL TAH作用24 h,观察细胞形态及数目的变化,采用MTT法检测细胞存活率;(2)将PC12细胞分为空白对照组、雷帕霉素组及1、2.5、5、10、20μg/mL TAH组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L自噬激活剂雷帕霉素及1、2.5、5、10、20μg/mL TAH作用4 h,采用免疫荧光染色检测细胞自噬体数;(3)将PC12细胞分为空白对照组、雷帕霉素组、10μg/mL TAH组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L雷帕霉素、10μg/mL TAH作用4 h,Western blotting检测细胞p62和微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ蛋白的表达;(4)将PC12细胞分为空白对照组、氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L自噬抑制剂氯喹、10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹作用4 h,Western blotting检测细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达;(5)将PC12细胞分为TAH组和空白对照组,分别加入10μg/mL TAH和等量溶剂处理4 h后,Western blotting检测细胞磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶(p-p70S6K)的表达;(6)将过表达Tau-绿色荧光蛋白(GFP)的Tet on HEK293细胞分为空白对照组、TAH组、强力霉素组、强力霉素+TAH组、强力霉素+TAH+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、强力霉素+TAH+氯喹组,后4组细胞加入200 ng/mL强力霉素处理24 h后,空白对照组加入等量溶剂,TAH组加入10μg/mL TAH,后3组细胞分别加入10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+5 mmol/L 3-MA、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹,作用24 h后在激光共聚焦显微镜下观察细胞绿色荧光强度的变化,Western blotting检测细胞Tau-GFP和LC3-Ⅱ蛋白的表达;(7)将稳定表达α-Syn的HEK293细胞分为空白对照组、氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组,分别加入等量溶剂、50 nmol/L氯喹、10μg/mL TAH、10μg/mL TAH+50 nmol/L氯喹作用24 h,Western blotting检测细胞α-Syn和LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果:(1)与空白对照组比较,20、50μg/mL TAH组细胞存活率降低,且50μg/mL TAH组细胞存活率低于20μg/mL TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)与空白对照组比较,雷帕霉素组、10、20μg/mL TAH组细胞自噬体数增多,且10μg/mL TAH组细胞自噬体数多于20μg/mL TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05),因此,选择10μg/mL TAH用于后续实验;(3)与空白对照组比较,雷帕霉素组、TAH组细胞p62蛋白的表达均降低,LC3-Ⅱ蛋白的表达均增加,差异均有统计学意义(P<0.05);(4)与空白对照组比较,氯喹组、TAH组、TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达均增加,且TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达高于氯喹组,差异均有统计学意义(P<0.05);(5)与空白对照组比较,TAH组细胞p-mTOR、p-p70S6K的表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);(6)强力霉素组细胞Tau-GFP蛋白的表达较空白对照组增加,强力霉素+TAH组细胞Tau-GFP蛋白的表达较强力霉素组降低,强力霉素+TAH+3-MA组、强力霉素+TAH+氯喹组细胞Tau-GFP蛋白的表达较强力霉素+TAH组增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。TAH组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较空白对照组增加,强力霉素+TAH组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素组增加,强力霉素+TAH+3-MA组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素+TAH组降低,强力霉素+TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达较强力霉素+TAH组增高,差异均有统计学意义(P<0.05);(7)与空白对照组比较,TAH组HEK293细胞α-Syn蛋白的表达降低,LC3-Ⅱ蛋白的表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);TAH+氯喹组细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达高于氯喹组,TAH+氯喹组细胞α-Syn蛋白的表达高于TAH组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:TAH可能通过抑制mTOR/p70S6K信号通路激活神经细胞

关键词：骆驼蓬总碱细胞自噬 Tau蛋白 α-突触核蛋白

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肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧大鼠的血管重塑作用

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现代生物医学进展 2023年第23期23卷 4412-4419页

作者：李晨樊凯刘毅冯向阳杜靖新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生理学教研室/新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830011

目的:探究肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧(CIH)大鼠的血管重塑作用。方法:将32只大鼠随机分为慢性间歇性空气(CIA)假手术组、CIA手术组、CIH假手术组、CIH手术组。制备CIH模型,手术组在缺氧前行肾上腺髓质切除术,假手术组行相同操作但... 详细信息

目的:探究肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧(CIH)大鼠的血管重塑作用。方法:将32只大鼠随机分为慢性间歇性空气(CIA)假手术组、CIA手术组、CIH假手术组、CIH手术组。制备CIH模型,手术组在缺氧前行肾上腺髓质切除术,假手术组行相同操作但不切除肾上腺髓质。测量尾动脉血压;ELISA法检测血清肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)含量;HE、Masson染色和荧光显微镜观察胸主动脉形态,计算胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数和弹性纤维紊乱断裂比例;IHC观察胸主动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;TUNEL观察胸主动脉细胞凋亡率;WB检测胸主动脉天冬氨酸半胱氨酸酶-3(Caspase-3)蛋白表达。结果:与CIA假手术组比较,CIH假手术组E、NE、尾动脉收缩压、舒张压、胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数、弹性纤维紊乱断裂比例、α-SMA水平、细胞凋亡率、Caspase-3表达升高(P<0.05);与CIH假手术组比较,CIH手术组E、NE、尾动脉收缩压、舒张压、胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数、弹性纤维紊乱断裂比例、α-SMA水平、细胞凋亡率、Caspase-3表达降低(P<0.05)。结论:切除肾上腺髓质可改善由慢性间歇性缺氧引起的大鼠胸主动脉重塑。

关键词：慢性间歇性缺氧肾上腺髓质血管重塑

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伊木萨克片联合NLRP3炎症小体抑制剂MCC950通过抑制氧化应激改善DMED大鼠勃起功能的研究

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中国性科学 2025年第1期34卷 9-14页

作者：张蕊杨承霞刘玉莲朱兵兵牛立盼金秀芳夏玉为刘凤霞新疆医科大学基础医学院人体解剖学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第五临床医学院乌鲁木齐830011 新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011

目的探讨伊木萨克片联合核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制剂MCC950是否可通过抑制阴茎组织中氧化应激水平改善糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠的勃起功能。方法选取32只正常雄性SD大鼠构建糖尿病大鼠模型,造模第2、4... 详细信息

目的探讨伊木萨克片联合核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制剂MCC950是否可通过抑制阴茎组织中氧化应激水平改善糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠的勃起功能。方法选取32只正常雄性SD大鼠构建糖尿病大鼠模型,造模第2、4、6、8周后通过阿扑吗啡(APO)和交配实验筛选出24只DMED大鼠。连续药物干预2周后,采用免疫荧光法检测大鼠阴茎组织中NLRP3蛋白表达,采用试剂盒法检测阴茎组织中活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)表达水平,采用Western blot法检测阴茎组织中超氧化物歧化酶(SOD)-1、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)1、NOX2蛋白表达。结果DMED组阴茎组织中NLRP3蛋白表达高于N组、MCC950组、Y组、MCC950+Y组,MCC950+Y组阴茎组织中NLRP3蛋白表达低于MCC950组、Y组(P<0.05)。DMED组阴茎组织中ROS和MDA表达水平高于N组、MCC950组、Y组、MCC950+Y组,MCC950+Y组阴茎组织中ROS和MDA表达水平低于MCC950组、Y组(P<0.05)。DMED组阴茎组织中NOX1和NOX2蛋白表达高于N组、MCC950组、Y组、MCC950+Y组,SOD-1蛋白表达低于N组、MCC950组、Y组、MCC950+Y组;MCC950+Y组阴茎组织中NOX1和NOX2蛋白表达低于MCC950组、Y组,SOD-1蛋白表达高于MCC950组、Y组(P<0.05)。结论伊木萨克片和MCC950均可通过抑制阴茎组织中氧化应激水平改善DMED大鼠的勃起功能,且两者联合干预效果更佳。

关键词：糖尿病性勃起功能障碍氧化应激核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3 MCC950 伊木萨克片

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寒证ED大鼠模型动脉差异表达蛋白质的TMT技术筛查与生物信息学分析

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中国男科学杂志 2023年第2期37卷 20-27页

作者：王冰华斯依提·阿木提阿地力江·伊明谢毅沙丽帕·艾尼瓦尔侯鹏程刘文娟新疆医科大学基础医学院人体解剖学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的筛查寒证勃起功能障碍(ED)大鼠模型动脉差异表达蛋白质,并进行生物信息学分析,为研究寒证ED发病机制提供新的思路与实验依据。方法将100只雄性性成熟SD大鼠随机分为正常对照组(N组,15只)、寒证造模组(M组,85只),分别在正常环境(22&#... 详细信息

目的筛查寒证勃起功能障碍(ED)大鼠模型动脉差异表达蛋白质,并进行生物信息学分析,为研究寒证ED发病机制提供新的思路与实验依据。方法将100只雄性性成熟SD大鼠随机分为正常对照组(N组,15只)、寒证造模组(M组,85只),分别在正常环境(22±2)℃及冷环境(4±0.5)℃饲养,干预24周并建立稳定的寒证模型后,通过APO勃起实验筛选出ED大鼠并分为寒证ED组(ED组)和寒证ED干预组(用于其它研究),剩余大鼠为寒证证候组(S组)。采用TMT技术筛查并鉴定寒证ED大鼠动脉差异表达蛋白质,并进行功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果(1)模型的建立:1)生物学表征结果为:与N组相比,M组大鼠反应迟钝,舌苔苍白,大便湿软,小便色淡,体重增长显著减缓(P<0.05),饮食量、饮水量显著升高(P<0.05);2)APO实验结果为:与N组相比,M组大鼠勃起潜伏期显著延长,勃起次数显著减少(P<0.05),ED成模率为47.95%;(2)蛋白质组学:通过TMT技术共鉴定出差异蛋白质364种,其中上调蛋白281种,下调蛋白83种。GO分析显示差异蛋白质主要参与小分子代谢,氧化还原过程,在线粒体和线粒体外膜均有分布,且具有催化活性、氧化还原酶活性等。KEGG信号通路分析发现差异蛋白质涉及氧化磷酸化通路、PPAR信号通路、铁死亡通路等152条信号通路。结论(1)长期冷刺激可成功诱导建立寒证ED证候与病证结合大鼠模型,其生物学表征符合中医临床证候特点;(2)寒证ED大鼠动脉差异表达蛋白质涉及到复杂的生物学过程、分子功能与信号通路,为进一步基于动脉病理改变层面开展寒证ED发病机制研究奠定了基础。

关键词：寒证勃起功能障碍 TMT技术蛋白质组学

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新发2型糖尿病网膜素1与肠道菌属相关性研究

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安徽医学 2023年第1期44卷 1-6页

作者：热比亚·努力张冰赵炳尧王玲关亚群新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室新疆乌鲁木齐市830017 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐市830017

目的探讨新发2型糖尿病(T2DM)的血清网膜素1(Omentin-1)及其基因Val109Asp多态性位点与肠道梭菌属和乳杆菌属的相关性。方法选取2020年5月至2022年6月在新疆医科大学第一附属医院和第五附属医院就诊的98例新发2型糖尿病(T2DM)患者和同... 详细信息

目的探讨新发2型糖尿病(T2DM)的血清网膜素1(Omentin-1)及其基因Val109Asp多态性位点与肠道梭菌属和乳杆菌属的相关性。方法选取2020年5月至2022年6月在新疆医科大学第一附属医院和第五附属医院就诊的98例新发2型糖尿病(T2DM)患者和同期来院体检的99例糖耐量正常(NGT)健康人作为研究对象,分为T2DM组和NGT组,利用一般资料问卷收集研究对象的年龄、性别、身高和体质量等一般资料;用酶联免疫吸附法(ELISA)测血清Omentin-1。使用限制性核酸内切酶对Omentin-1基因多态性位点Val109Asp进行基因分型。采用16S rRNA实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)定量检测粪样中梭菌属和乳杆菌属的相对丰度水平;分析梭菌属和乳杆菌属与空腹血糖、血脂、Omentin-1及其基因多态性位点Val109Asp的相关性,探讨肠道菌群和Omentin-1及其两者交互作用对新发T2DM影响。结果T2DM组血清Omentin-1水平低于NGT组,差异有统计学意义(P<0.05)。T2DM组和NGT组的Omentin-1基因Val109Asp多态性位点分析结果显示差异无统计学意义(P>0.05);根据Pearson相关分析,梭菌属相对丰度与身体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)皆呈负相关(r=-0.172、-0.183、-0.455、-0.238、-0.143,P均<0.05),与收缩压(SBP)、乳杆菌属水平、Omentin-1水平呈正相关(r=0.325、0.381、0.166,P均<0.05);logistic回归分析显示,血清胰岛素水平、LDL-C、乳杆菌属和梭菌属丰度是新发T2DM的影响因素(P<0.05)。结论维吾尔族新发T2DM患者血清Omentin-1水平、肠道乳杆菌属和梭菌属的相对丰度发生变化,梭菌属的相对丰度与血清Omentin-1水平正相关。

关键词： 2型糖尿病梭菌属乳杆菌属网膜素1

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诱导小鼠白色脂肪来源的SVF分化为米色脂肪细胞的方法初探

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现代生物医学进展 2023年第10期23卷 1822-1828页

作者：蒋硕陈思远孟轩羽刘迪晖梁小弟新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院机能中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学附属肿瘤医院病理科新疆乌鲁木齐830011

目的:探究将小鼠白色脂肪来源的SVF细胞诱导为米色脂肪细胞的方法,为米色脂肪的研究提供细胞模型。方法:分离培养小鼠脂肪组织来源的SVF细胞,观察其细胞形态及生长特性,分别用鸡尾酒法和米色脂肪诱导法处理细胞,在诱导的第0、2、4、6、8... 详细信息

目的:探究将小鼠白色脂肪来源的SVF细胞诱导为米色脂肪细胞的方法,为米色脂肪的研究提供细胞模型。方法:分离培养小鼠脂肪组织来源的SVF细胞,观察其细胞形态及生长特性,分别用鸡尾酒法和米色脂肪诱导法处理细胞,在诱导的第0、2、4、6、8、10天收取细胞样品进行Western blot和RT-qPCR实验,油红O染色观察不同时间点培养皿中的脂质生成情况,并对针对脂滴大小定量。结果:实验分离的SVF细胞随着接种时间的延长逐渐呈长梭形,在+接种120 h后有呈螺旋式生长的趋势。Western blot和RT-qPCR结果显示两种诱导方法皆使过氧化物酶体增殖物受体γ(Peroxisomeproliferator activated receptor γ,PPARγ)和CCAAT-增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding proteins α,C/EBPα)基因表达升高(P<0.05),油红O染色结果显示,在两种方法的诱导下,脂质生成水平无差异,但与鸡尾酒法相比,米色脂肪诱导法的脂肪细胞脂滴面积明显减少(P<0.05),并且小体积脂滴所占百分比较高。Western blot和RT-qPCR结果显示,与鸡尾酒法相比,米色脂肪诱导法使解偶联蛋白1(Uncoupling protein 1,UCP1)和含PR结构域蛋白16(PRD1-BF1-RIZ1 homologous domain containing 16,PRDM16)基因表达升高(P<0.05)。结论:与鸡尾酒法相比,该方法能够成功诱导SVF细胞向米色脂肪细胞分化,脂滴具备米色脂肪特征,并表达米色脂肪标记基因。

关键词： SVF细胞米色脂肪细胞 UCP1 PRDM16 鸡尾酒诱导法

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蛋白酶体抑制剂Marizomib联合顺铂对人子宫颈癌细胞的细胞毒性及凋亡的影响

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临床与实验病理学杂志 2023年第1期39卷 12-18页

作者：张孜睿卓林冰洁王齐心袁芳史永华新疆医科大学基础医学院病理学教研室乌鲁木齐830017 乌鲁木齐市眼耳鼻喉专科医院乌鲁木齐830000 新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830000

目的探讨蛋白酶体抑制剂Marizomib(Mzb)联合顺铂对人子宫颈癌细胞的抗肿瘤效应及其机制。方法应用人子宫颈癌细胞系SiHa、C33A和子宫颈上皮永生化细胞H8,通过CCK-8、克隆形成实验、Western blot法和流式细胞术,分析Mzb联合顺铂对子宫颈... 详细信息

目的探讨蛋白酶体抑制剂Marizomib(Mzb)联合顺铂对人子宫颈癌细胞的抗肿瘤效应及其机制。方法应用人子宫颈癌细胞系SiHa、C33A和子宫颈上皮永生化细胞H8,通过CCK-8、克隆形成实验、Western blot法和流式细胞术,分析Mzb联合顺铂对子宫颈癌细胞的细胞毒性和凋亡的影响。结果CCK-8结果显示,Mzb浓度在0、0.001~0.5μmol/L时,H8细胞的增殖活性分别为100%、101.92%~28.73%,SiHa细胞的增殖活性分别为100%、100.48%~3.54%,C33A细胞增殖活性分别为100%、83.7%~17.08%。顺铂(0、0.3~40μmol/L)与Mzb(0.01μmol/L)联用后,SiHa细胞增殖活性分别为98.41%、88.06%~55.04%,C33A细胞增殖活性分别为65.58%、61.04%~44.49%。克隆形成实验结果显示,Mzb浓度分别为0、0.01、0.025μmol/L时,SiHa细胞克隆数分别为535、391、318,C33A细胞克隆数分别为472、293、172。与子宫颈上皮永生化细胞H8相比,Mzb显著抑制子宫颈癌细胞增殖并呈剂量依赖性(P<0.05),与顺铂联用后效果更显著(P<0.05)。Western blot结果显示,Mzb促进SiHa和C33A细胞内多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)和Caspase 3裂解(P<0.05),与顺铂联用后效果更显著。流式细胞术结果显示,顺铂组SiHa和C33A细胞凋亡率分别为5.8%、21.5%;Mzb组细胞凋亡率分别为6.8%、28%,两药联合组细胞凋亡率分别为8.8%、33.7%。说明Mzb促进子宫颈癌细胞凋亡,与顺铂联用后凋亡更显著(P<0.05)。结论Mzb对体外子宫颈癌细胞有较强的抗肿瘤效应,能够敏感化子宫颈癌细胞对顺铂的治疗。在治疗子宫颈癌的临床试验中,顺铂联合Mzb可能是可行且有效的治疗选择。

关键词：子宫颈肿瘤 Marizomib 顺铂细胞凋亡

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负载干细胞外囊泡的缓释聚左旋乳酸微球在促肝细胞增殖中的作用

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中国热带医学 2023年第10期23卷 1030-1036页

作者：楚瑨木克西娜·木拉提高瑾李亮张雪吕国栋林仁勇毕晓娟省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

目的制备一种调控释放干细胞外囊泡的微粒子递送系统,仅干预1次后长期发挥增强肝细胞增殖能力的作用。方法采用差速离心法提取干细胞外囊泡并鉴定,透射电镜观察外囊泡结构和免疫印记检测外囊泡膜标志蛋白,评价所提取外囊泡符合规范。采... 详细信息

目的制备一种调控释放干细胞外囊泡的微粒子递送系统,仅干预1次后长期发挥增强肝细胞增殖能力的作用。方法采用差速离心法提取干细胞外囊泡并鉴定,透射电镜观察外囊泡结构和免疫印记检测外囊泡膜标志蛋白,评价所提取外囊泡符合规范。采用乳液-溶剂挥发法制备“壳-核”结构聚左旋乳酸(poly-L-lactic acid,PLA)微球,在微球“核”结构位置负载干细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)得到EVs-PLA微球。通过扫描、透射电镜检测微球及外囊泡形貌,粒径分析,缓释实验检测EVs-PLA微球缓释周期,扫描电镜检测缓释至8周EVs-PLA微球形貌变化;将EVs-PLA微球与肝实质细胞共培养,鬼笔环肽/DAPI染色评价EVs-PLA微球生物相容性和细胞毒性,CCK8评价EVs-PLA微球对细胞增殖活力的影响作用,免疫印记检测EVs-PLA微球共培养后细胞中增殖标志蛋白表达量并统计数据结果。结果对比EVs-PLA干细胞外囊泡微球处理组和对照组的肝实质细胞增殖能力评价,发现EVs-PLA微球未造成细胞凋亡和细胞结构发生变异,具有生物相容性无细胞毒性;EVs-PLA微球的“壳-核”结构调控所负载的干细胞外囊泡的释放速率和释放周期,EVs-PLA微球可缓慢释放EVs,单次干预后持续发挥促进肝实质细胞增殖的生物作用。结论EVs-PLA微球可缓慢释放EVs,单次干预后持续发挥增强肝细胞增殖能力的作用,为探索外囊泡促肝细胞增殖的微递送系统提供了新的思路。

关键词：干细胞外囊泡缓释肝再生 O/W乳化生物因子载体

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