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泡球蚴蛋白通过Wnt/β-Catenin信号通路调控小鼠肝星状细胞二肽基肽酶-4的表达研究

中国病原生物学杂志 2024年第3期19卷 275-279,284页

作者：木克西娜·木拉提努尔拜提·库苏曼毕晓娟杨宁楚瑨刘辉房彬彬孙立何小龙高瑾林仁勇新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆农业大学动物医学学院

目的探讨泡球蚴蛋白对肝星状细胞中纤维化关键基因二肽基肽酶-4(Dipeptidyl Peptidase 4,DPP4)表达的调控机制。方法免疫组织化学法检测二肽基肽酶-4在泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端与远端的表达情况。体外培养小鼠肝星状细胞系JS1,以60... 详细信息

目的探讨泡球蚴蛋白对肝星状细胞中纤维化关键基因二肽基肽酶-4(Dipeptidyl Peptidase 4,DPP4)表达的调控机制。方法免疫组织化学法检测二肽基肽酶-4在泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端与远端的表达情况。体外培养小鼠肝星状细胞系JS1,以60μg/mL浓度的泡球蚴蛋白(Echinococcus multilocularis Protein,EmP)刺激JS1细胞,检测细胞活化及Wnt通路的激活情况,Wnt通路抑制剂(IWP-2)和激动剂(LY2090314)靶向干预检测肝星状细胞活化标志物COL1A1、α-SMA与PPARγ,Wnt通路关键分子Wnt5a、β-catenin、GSK3β以及DPP4的表达水平。结果免疫组化检测结果显示泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端DPP4的表达(5927±987.1)显著高于病灶远端(2478±696.9),差异有统计学意义(t=9.026,P<0.05);EmP可显著促进JS1细胞活化并促进DPP4的表达,差异有统计学意义(F_(DPP4)=10.65,P<0.05);与对照组相比,EmP刺激组Wnt通路激活,Wnt5a、β-catenin、p-GSK3β的表达水平上升,差异有统计学意义(WB:F_(Wnt5a)=18.28,Fβ-Catenin=14.98,FP-GSK3β=28.52;RT-qPCR:F_(Wnt5a)=27.29,F_(CTNNB1)=21.24,F_(GSK3β)=7.974,P<0.05);Wnt通路抑制剂IWP-2干预可抑制EmP蛋白对α-SMA、DPP4的表达的促进作用,上调PPARγ的表达,差异有统计学意义(WB:F DPP4=26.27,Fα-SMA=126.4,F_(PPAR-γ)=8.187;RT-qPCR:F_(DPP4)=41.23,F_(ACTA2)=185.2,F_(PPARG)=136.2,P<0.05);与EmP刺激组相比,Wnt通路激动剂可促进JS1细胞的活化及DPP4的表达,差异有统计学意义(WB:F_(DPP4)=151.0;RT-qPCR:F_(DPP4)=29.71,P<0.05)。结论EmP蛋白可通过激活Wnt/β-Catenin通路促进纤维化关键基因DPP4的表达。

关键词：泡球蚴肝纤维化二肽基肽酶-4 Wnt/β-Catenin通路

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6种不同人类肿瘤细胞株pp60c-Src的活性及PP2抑制效应的差异

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首都医科大学学报 2008年第4期29卷 531-532页

作者：孔璐张玉祥孙林于培兰李宝红首都医科大学基础医学院生化与分子生物教研室

pp60c-Src是一个相对分子质量为60 000的、416位点磷酸化后激活的Src蛋白,是非受体型酪氨酸激酶家族中研究最多的成员.目前大量研究显示,Src或其家族活性异常与癌症的发生发展密切相关,它们参与了肿瘤的黏附、迁移、浸润及血管形成等过程.

关键词： pp60c-Src 肿瘤细胞株活性抑制效应人类相对分子质量酪氨酸激酶结肠直肠癌

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白色脂肪棕色化的机制及研究进展

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新疆医科大学学报 2019年第9期42卷 1122-1125页

作者：关亚群刘杰努尔比耶·努尔麦麦提新疆医科大学基础医学院分子生物学教研室

随着社会的发展与人们生活方式的改变,超重和肥胖人群逐渐增多。大量研究表明[1-2],肥胖是糖尿病、高脂血症、高血压等疾病的危险因素,这些潜在危险因素不仅在于体内脂肪含量,更重要的是脂肪的种类及其分布位置。如一些受试者尽管表现... 详细信息

随着社会的发展与人们生活方式的改变,超重和肥胖人群逐渐增多。大量研究表明[1-2],肥胖是糖尿病、高脂血症、高血压等疾病的危险因素,这些潜在危险因素不仅在于体内脂肪含量,更重要的是脂肪的种类及其分布位置。如一些受试者尽管表现出肥胖的表型,却没有代谢功能障碍的表现,从代谢角度体现为"健康"肥胖。因此,并不是脂肪本身的数量,而是它的定位和个体化的定性功能特征,最终决定了脂肪与其相关性疾病的关系,本文对白色脂肪棕色化的机制及研究进展作一综述。

关键词：脂肪含量潜在危险因素代谢功能障碍相关性疾病肥胖人群生活方式高脂血症功能特征

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青春期双酚A结构类似物暴露对小鼠行为的影响

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生态毒理学报 2016年第3期11卷 140-144页

作者：高强李昕郝耀光赵亦雯周婧弘尹希史海水河北医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室石家庄050017 河北医科大学基础医学院石家庄050017 河北医科大学第四医院功能科石家庄050011 河北医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室石家庄050017

作为重要的环境内分泌干扰物,双酚A的神经发育毒性已经引起广泛关注,其结构类似物对健康影响相关研究少有报道。为探讨双酚A结构类似物长期暴露对个体抑郁行为的影响,选取60只小鼠随机分为5组,每组12只。小鼠分别灌胃给予0、5、50 mg... 详细信息

作为重要的环境内分泌干扰物,双酚A的神经发育毒性已经引起广泛关注,其结构类似物对健康影响相关研究少有报道。为探讨双酚A结构类似物长期暴露对个体抑郁行为的影响,选取60只小鼠随机分为5组,每组12只。小鼠分别灌胃给予0、5、50 mg·kg^(-1)的双酚F或双酚S,连续给药4周。给药结束后,利用强迫游泳测试和悬尾测试评价小鼠抑郁样行为,同时监测小鼠体质量增加和自发活动情况。结果表明,与溶媒对照组比较,持续4周的双酚F和双酚S给药组小鼠的体质量变化和自发活动均无显著差异;5mg·kg^(-1)的双酚F或双酚S处理均不显著改变小鼠的抑郁行为,50 mg·kg^(-1)双酚F显著增加小鼠悬尾和强迫游泳测试中的不动时间,50mg·kg^(-1)双酚S处理显著增加小鼠悬尾测试中的不动时间。研究结果提示高浓度双酚F和双酚S在青春期的暴露可导致成年后小鼠抑郁样行为异常,应当引起重视。

关键词：环境内分泌干扰物双酚F 双酚S 小鼠抑郁

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新疆维吾尔族人β_2肾上腺素能受体基因多态性与原发性高血压的相关性

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中华高血压杂志 2012年第7期20卷 679-683页

作者：张丽萍马瑞蒲红伟陈慧锦李卉杨梅新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆自治区人民医院心理科新疆医科大学高职教育学院中心实验室

目的探讨β_2肾上腺素能受体(β_2-AR)基因Arg16Gly和Gln27Glu多态性在新疆维吾尔族人原发性高血压(EH)发病中的作用。方法应用TaqMan技术检测了367例新疆维吾尔族EH患者及408例正常血压对照者Arg16Gly和Gln27Glu多态性。结果 Arg16Gly... 详细信息

目的探讨β_2肾上腺素能受体(β_2-AR)基因Arg16Gly和Gln27Glu多态性在新疆维吾尔族人原发性高血压(EH)发病中的作用。方法应用TaqMan技术检测了367例新疆维吾尔族EH患者及408例正常血压对照者Arg16Gly和Gln27Glu多态性。结果 Arg16Gly和Gln27Glu多态性在新疆维吾尔族群体中分布均符合Hardy-Weinberg平衡;Arg16GlyGG、AG、AA基因型频率和Gln27GluGG、CG和CC基因型频率在EH组和正常血压组间差异无统计学意义(P>0.05)。EH组和正常血压组间Arg16Gly及Gln27Glu位点的G等位基因频率分别为46.0%、42.5%和22.3%、24.5%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论β_2-AR基因Arg16Gly和Gln27Glu多态位点可能不是新疆维吾尔族人群原发性高血压的遗传易感指标。

关键词： β2肾上腺素能受体基因多态性原发性高血压维吾尔族人

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维吾尔族代谢综合征患者chemerin的表达及相关因素

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中华高血压杂志 2010年第8期18卷 733-738页

作者：关亚群赵学信孙丽丽张成艾克拜尔.艾力李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆维吾尔自治区人民医院内窥镜科新疆乌鲁木齐830000

目的研究维吾尔族代谢综合征(MS)患者chemerin在腹部大网膜、皮下脂肪组织的基因表达及其血清蛋白水平的变化,并探讨其变化在MS中的可能作用。方法选取120例慢性胆囊炎和非胆囊炎维吾尔族患者,在排除了慢性胆囊炎对临床生化指标和MS可... 详细信息

目的研究维吾尔族代谢综合征(MS)患者chemerin在腹部大网膜、皮下脂肪组织的基因表达及其血清蛋白水平的变化,并探讨其变化在MS中的可能作用。方法选取120例慢性胆囊炎和非胆囊炎维吾尔族患者,在排除了慢性胆囊炎对临床生化指标和MS可能的影响后,选择81例慢性胆囊炎择期手术患者作为chemerin研究的对象,并将其分为MS组(39例)和非MS组(42例)。用realtimeRT-PCR方法检测两组脂肪组织chemerinmRNA的表达水平,ELISA法测血浆chemerin浓度,并测量腰围、臀围、舒张压、收缩压、空腹血糖和血脂等。结果①MS组血浆chemerin水平显著高于非MS组(P<0.01);大网膜和皮下脂肪组织chemerinmRNA的表达水平差异在两组之间均无统计学意义。②血浆chemerin水平与皮下脂肪组织chemerinmRNA表达量呈正相关(r=0.469,P=0.001),与年龄、三酰甘油、腰臀围比及胰岛素抵抗指数呈正相关(r=0.434,P<0.01;r=0.368,P=0.003;r=0.251,P=0.031;r=0.225,P=0.041)。结论维吾尔族MS患者血浆chemerin水平显著升高,且与MS的几个关键指标相关,可能在维吾尔人MS的发生发展中起作用。

关键词：代谢综合征 chemerin 维吾尔族

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RITP患者血浆中利福平依赖性抗血小板抗体的特性及其作用机制

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解放军医学杂志 2017年第5期42卷 413-419页

作者：孙平吴广胜梁迅锦州医科大学附属第一医院血液科辽宁锦州121000 石河子大学医学院附属第一医院血液科新疆石河子832008 锦州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁锦州121000

目的研究利福平诱导的免疫性血小板减少症(RITP)患者血浆中的利福平依赖性抗体(Rd-Ab)的特性及其诱导出血的可能机制,并探索治疗RITP药物的效果和作用特征。方法提取RITP患者血浆,通过流式细胞术、单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法及... 详细信息

目的研究利福平诱导的免疫性血小板减少症(RITP)患者血浆中的利福平依赖性抗体(Rd-Ab)的特性及其诱导出血的可能机制,并探索治疗RITP药物的效果和作用特征。方法提取RITP患者血浆,通过流式细胞术、单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法及血小板聚集试验检测血清中Rd-Ab的特性。取NOD/SCID小鼠,建立RITP模型,观察抗体对血小板的破坏机制,评价糖皮质激素和静脉注射免疫球蛋白(IVIG)单独或联合使用对保护血小板的疗效。结果体外实验证实RITP患者血清中存在利福平依赖性抗体(Rd-Ab),该抗体与血小板的结合可被抗糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单抗AP2完全阻断,证明其与糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的结合位点是钙离子依赖性抗原决定簇。血小板聚集试验显示,Rd-Ab可抑制血小板聚集。小鼠体内实验结果显示,Rd-Ab可致小鼠体内人血小板被迅速清除,单用糖皮质激素可阻断Rd-Ab诱导的人血小板清除,延长血小板平均寿命(MPL),该作用在24h后起效,72h疗效达最佳,而IVIG可即刻起效。与RITP小鼠模型组相比(MPL 1.1±0.2h),糖皮质激素单独治疗组和IVIG单独治疗组的MPL分别延长至4.7±0.7h和4.2±1.1h(P<0.05),两药联合治疗组血小板MPL达6.2±1.5h(P<0.05)。结论 Rd-Ab与血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上的钙离子依赖性抗原决定簇结合,从而抑制血小板聚集。Rd-Ab可导致小鼠血中人血小板的迅速清除,糖皮质激素和IVIG干预均可在一定程度上抑制血小板清除,IVIG起效更快,但两药联合效果更好。

关键词：利福平血小板减少症糖蛋白Ⅱb/Ⅲa 模型,动物

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36型人腺病毒腺病毒基因早期转录区4可读框基因1(E4ORF1)的原核表达及多克隆抗体制备

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第9期37卷 839-843页

作者：徐尤宗胜梁小弟陈哲焦谊高佳乐王冰丽刘迪晖关亚群新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆乌鲁木齐830011

目的利用分子克隆技术构建36型腺病毒(Ad36)腺病毒基因早期转录区4可读框基因1(E4ORF1)重组原核表达质粒pET30a-E4ORF1,经诱导表达后,制备并纯化获得E4ORF1抗原,经免疫兔后获得多克隆抗体。方法根据NCBI数据库中人Ad36基因组全序列,设... 详细信息

目的利用分子克隆技术构建36型腺病毒(Ad36)腺病毒基因早期转录区4可读框基因1(E4ORF1)重组原核表达质粒pET30a-E4ORF1,经诱导表达后,制备并纯化获得E4ORF1抗原,经免疫兔后获得多克隆抗体。方法根据NCBI数据库中人Ad36基因组全序列,设计引物、PCR扩增其中的E4ORF1基因全长并将其克隆至原核表达载体中、测序。将测序正确的原核表达质粒pET30a-E4ORF1转化至***21(DE3)菌株中,通过探索E4ORF1蛋白的最佳诱导条件后,对重组蛋白进行大量诱导表达和纯化。将纯化获得的重组蛋白免疫新西兰白兔,在5次免疫后分离血清,ELISA检测抗体效价。抗原亲和纯化出E4ORF1多克隆抗体,Western blot法检测抗体的特异性。结果成功扩增E4ORF1基因,经测序比对与GenBank序列一致,大小为408 bp,证明成功构建原核重组表达质粒。经鉴定重组蛋白的相对分子质量(M_(r))约14000,ELISA检测5次免疫后兔血清抗体效价达1∶320000。Western blot法证明该抗体具较高的特异性。结论成功表达E4ORF1蛋白,并制备了高特异性的兔抗E4ORF1多克隆抗体。

关键词： 36型人腺病毒(Ad36) E4可读框基因1(E4ORF1) 原核表达抗体

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双链RNA结合蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡作用

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新疆医科大学学报 2019年第9期42卷 1105-1110页

作者：胡婷婷巩雪俐高佳乐徐尤宗盛孟轩羽关亚群新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院病理生理教研室乌鲁木齐830011

目的探究双链RNA结果蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡的影响。方法以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,将pCMV6-Entry STAU1真核表达质粒,通过脂质体转染3T3-L1前脂肪细胞(实验组),对照组转染pCMV6-Entry空载体。分别利用RTq-PCR和Wes... 详细信息

目的探究双链RNA结果蛋白STAU1对3T3-L1前脂肪细胞增殖与凋亡的影响。方法以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,将pCMV6-Entry STAU1真核表达质粒,通过脂质体转染3T3-L1前脂肪细胞(实验组),对照组转染pCMV6-Entry空载体。分别利用RTq-PCR和Western blot检测stau1、caspase3、caspase9、cyclinD1、cyclinE1 mRNA及蛋白质的表达水平;对照组和实验组采用CCK-8细胞计数法及Annexin V-FITC/PI双染法检测STAU1对细胞数量及凋亡情况的影响。结果(1)与对照组比较,实验组stau1、caspase3、caspase9 mRNA和蛋白质的表达水平均显著上升(P<0.05),cyclinE1 mRNA和蛋白质的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),cyclinD1 mRNA表达水平降低而蛋白质表达水平无明显变化。(2)与对照组相比,实验组细胞数量显著减少,凋亡率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 STAU1可能通过下调cyclinE1的表达抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖;通过上调caspase3、caspase9的表达水平促进细胞凋亡。

关键词： STAU1 3T3-L1前脂肪细胞细胞增殖细胞凋亡

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血管紧张素Ⅱ-CaMK-CREB-CYP11B2和肾上腺素-PKA-CREB-CYP11B2途径在应激性高血压发病中的研究

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新疆医科大学学报 2019年第1期42卷 29-34页

作者：楚岚鹏吴桂霞钟莉黄静静卡思木江.阿西木江希林古丽.吾守尔纳菲沙.卡德尔库热西.玉努斯新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院机能中心实验室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学维吾尔医学院乌鲁木齐830011

目的探讨血管紧张素Ⅱ-CaMK-CREB-CYP11B2和肾上腺素-PKA-CREB-CYP11B2途径在应激性高血压(SIH)发病中的作用。方法选取鼠龄在6～8w的SPF级雄性Wistar大鼠28只,适应性喂养7d后,按照完全随机法分为SIH模型组与正常组,每组14只。通过每天... 详细信息

目的探讨血管紧张素Ⅱ-CaMK-CREB-CYP11B2和肾上腺素-PKA-CREB-CYP11B2途径在应激性高血压(SIH)发病中的作用。方法选取鼠龄在6～8w的SPF级雄性Wistar大鼠28只,适应性喂养7d后,按照完全随机法分为SIH模型组与正常组,每组14只。通过每天声光间断足底电、夹尾持续刺激12w构建SIH大鼠模型。采用放射免疫法检测SIH模型大鼠血浆血管紧张素Ⅱ含量,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测SIH模型大鼠血清肾上腺素含量,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组织化学方法检测SIH模型大鼠肾上腺组织Creb、Nr4a1、Nr4a2、Cyp11b2基因mRNA表达和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平及醛固酮合酶(CYP11B2)蛋白表达水平的变化。结果与正常组比较,SIH模型组大鼠体质量增长明显缓慢,收缩压与舒张压均明显升高(P <0.05),血浆血管紧张素Ⅱ含量无明显变化(P>0.05),血清肾上腺素含量明显升高(P <0.05),肾上腺组织Creb基因mRNA表达水平明显上调(P <0.05),Nr4a1与Nr4a2基因mRNA表达水平有下调趋势(P>0.05),Cyp11b2基因mRNA表达水平明显上调(P <0.05);与正常组比较,SIH模型组大鼠肾上腺CREB磷酸化水平及CYP11B2蛋白表达水平明显上调(P <0.05)。结论SIH模型组大鼠肾上腺组织肾上腺素-PKA-CREBCYP11B2途径的激活是血液醛固酮含量增多、应激性高血压发病的原因之一。

关键词：应激性高血压血管紧张素Ⅱ 肾上腺素 CREB Nr4a1 Nr4a2 CYP11B2

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