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新疆医科大学学报 2007年第9期 925-927页

作者：黄静静库热西·玉努斯贺捷陈蓉哈木拉提·吾甫尔新疆医科大学基础医学院生物化学及分子生物学教研室新疆医科大学基础医学院机能中心新疆医科大学基础医学院科研中心新疆医科大学基础医学院新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的:构建大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为建立RNAi干扰技术平台打下基础。方法:应用siR-NA设计软件在大鼠iNOS的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,设计合成两条互补的小发夹结构的DNA序列,经退火后形成双链DNA片段,将其克隆到线性的pSil... 详细信息

目的:构建大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为建立RNAi干扰技术平台打下基础。方法:应用siR-NA设计软件在大鼠iNOS的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,设计合成两条互补的小发夹结构的DNA序列,经退火后形成双链DNA片段,将其克隆到线性的pSilencerTM1.0-U6载体中,转化DH5α大肠杆菌,提取质粒,酶切鉴定后进行测序分析。结果:酶切和序列测定结果表明,大鼠iNOS基因的siRNA表达载体构建成功。结论:成功构建了大鼠iNOS基因的siRNA表达体系,为今后借助RNA干扰技术调节iNOS基因的表达、研究iNOS基因与其它因子的关系奠定了基础。

关键词： RNA干扰 siRNA 诱导型一氧化氮合酶

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应用RNA干扰技术调节大鼠c-jun基因的表达

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现代生物医学进展 2008年第1期 7-9+3页

作者：库热西·玉努斯黄静静龙梅贺捷武贵臻哈木拉提·吾甫尔新疆医科大学基础医学院生物化学及分子生物学教研室新疆医科大学基础医学院机能中心新疆医科大学新疆地方病分子生物学实验室

目的:应用RNA干扰（RNAi）技术调节大鼠c-jun基因在Cos-7细胞中的表达。方法:分别构建大鼠c-jun基因的RNA干扰载体和真核表达GFP（绿色荧光蛋白）载体,将两者共转染Cos-7细胞,镜下观察大鼠C-Jun-GFP融合蛋白的表达,应用Western blot方... 详细信息

目的:应用RNA干扰（RNAi）技术调节大鼠c-jun基因在Cos-7细胞中的表达。方法:分别构建大鼠c-jun基因的RNA干扰载体和真核表达GFP（绿色荧光蛋白）载体,将两者共转染Cos-7细胞,镜下观察大鼠C-Jun-GFP融合蛋白的表达,应用Western blot方法检测抑制效率。结果:酶切和测序结果表明,大鼠c-jun基因的RNA干扰载体和真核表达GFP载体构建成功,镜下及Western blot共转染结果均显示随着RNA干扰载体浓度的增加C-Jun-GFP融合蛋白表达量逐渐减少。结论:在Cos-7细胞中应用RNAi技术成功调节大鼠c-jun基因的表达。

关键词： RNA干扰 c-jun RNA干扰载体基因表达调节

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蛋白酶体抑制剂Marizomib联合顺铂对人子宫颈癌细胞的细胞毒性及凋亡的影响

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临床与实验病理学杂志 2023年第1期39卷 12-18页

作者：张孜睿卓林冰洁王齐心袁芳史永华新疆医科大学基础医学院病理学教研室乌鲁木齐830017 乌鲁木齐市眼耳鼻喉专科医院乌鲁木齐830000 新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830000

目的探讨蛋白酶体抑制剂Marizomib(Mzb)联合顺铂对人子宫颈癌细胞的抗肿瘤效应及其机制。方法应用人子宫颈癌细胞系SiHa、C33A和子宫颈上皮永生化细胞H8,通过CCK-8、克隆形成实验、Western blot法和流式细胞术,分析Mzb联合顺铂对子宫颈... 详细信息

目的探讨蛋白酶体抑制剂Marizomib(Mzb)联合顺铂对人子宫颈癌细胞的抗肿瘤效应及其机制。方法应用人子宫颈癌细胞系SiHa、C33A和子宫颈上皮永生化细胞H8,通过CCK-8、克隆形成实验、Western blot法和流式细胞术,分析Mzb联合顺铂对子宫颈癌细胞的细胞毒性和凋亡的影响。结果CCK-8结果显示,Mzb浓度在0、0.001~0.5μmol/L时,H8细胞的增殖活性分别为100%、101.92%~28.73%,SiHa细胞的增殖活性分别为100%、100.48%~3.54%,C33A细胞增殖活性分别为100%、83.7%~17.08%。顺铂(0、0.3~40μmol/L)与Mzb(0.01μmol/L)联用后,SiHa细胞增殖活性分别为98.41%、88.06%~55.04%,C33A细胞增殖活性分别为65.58%、61.04%~44.49%。克隆形成实验结果显示,Mzb浓度分别为0、0.01、0.025μmol/L时,SiHa细胞克隆数分别为535、391、318,C33A细胞克隆数分别为472、293、172。与子宫颈上皮永生化细胞H8相比,Mzb显著抑制子宫颈癌细胞增殖并呈剂量依赖性(P<0.05),与顺铂联用后效果更显著(P<0.05)。Western blot结果显示,Mzb促进SiHa和C33A细胞内多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)和Caspase 3裂解(P<0.05),与顺铂联用后效果更显著。流式细胞术结果显示,顺铂组SiHa和C33A细胞凋亡率分别为5.8%、21.5%;Mzb组细胞凋亡率分别为6.8%、28%,两药联合组细胞凋亡率分别为8.8%、33.7%。说明Mzb促进子宫颈癌细胞凋亡,与顺铂联用后凋亡更显著(P<0.05)。结论Mzb对体外子宫颈癌细胞有较强的抗肿瘤效应,能够敏感化子宫颈癌细胞对顺铂的治疗。在治疗子宫颈癌的临床试验中,顺铂联合Mzb可能是可行且有效的治疗选择。

关键词：子宫颈肿瘤 Marizomib 顺铂细胞凋亡

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新疆哈萨克族食管癌双向凝胶电泳研究

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新疆医科大学学报 2010年第7期33卷 749-751页

作者：张景萍李卉刘玲陈艳姜孝芳李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830000 新疆医科大学基础医学院科研中心新疆乌鲁木齐830000

目的建立分辨率高和重复性好的哈萨克族食管癌癌组织及正常组织的电泳图谱,分析其差异表达的蛋白质,为进一步寻找癌标志物奠定基础。方法收集3对新疆哈萨克族食管癌癌组织/正常组织,提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳分离,获得蛋白质差... 详细信息

目的建立分辨率高和重复性好的哈萨克族食管癌癌组织及正常组织的电泳图谱,分析其差异表达的蛋白质,为进一步寻找癌标志物奠定基础。方法收集3对新疆哈萨克族食管癌癌组织/正常组织,提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳分离,获得蛋白质差异表达谱。结果共找到63种差异表达的蛋白,其中在癌组织中上调的有20种,下调的35种,6种蛋白质在正常组织中存在而癌组织中不存在,2种蛋白质只在癌组织中出现。结论对差异蛋白进一步进行质谱分析,将获得和新疆哈萨克族食管癌发病相关的蛋白质,这些数据将有助于深入研究哈萨克族食管癌的发病机制。

关键词：食管癌 2-DE 差异蛋白哈萨克族

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维药西帕依溃结安对大鼠溃疡性结肠炎的实验研究

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新疆医科大学学报 2008年第12期31卷 1651-1654页

作者：贺捷阿孜古力.克热木勾小玉苟萍库热西.玉努斯新疆医科大学基础医学院机能中心新疆医科大学基础医学院生物化学及分子生物学教研室新疆大学生命科学学院生化教研室新疆乌鲁木齐830000

目的:建立2,4-二硝基氯苯(DNCB)+乙酸大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,观察维药西帕依溃结安对溃疡性结肠炎的治疗作用。方法:采用"DNCB复合乙酸法"复制溃疡性结肠炎大鼠模型。造模成功后将大鼠随机分为维药西帕依溃结安大、中、小... 详细信息

目的:建立2,4-二硝基氯苯(DNCB)+乙酸大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,观察维药西帕依溃结安对溃疡性结肠炎的治疗作用。方法:采用"DNCB复合乙酸法"复制溃疡性结肠炎大鼠模型。造模成功后将大鼠随机分为维药西帕依溃结安大、中、小剂量组、生理盐水(NS)阴性对照组,给药治疗20d,同时设正常对照组,以各组实验大鼠处理前后整体状态、病理形态学为检测指标,对其疗效进行观察。结果:一般状态:正常组大鼠明显优于模型组大鼠,治疗组用药20d后,模型组大鼠的状态能明显改善。光镜观察:正常组结肠各层结构清晰,无炎性改变。模型组结肠粘膜炎症显著,重者有溃疡形成。治疗组组织粘膜损伤程度均有一定改善。在组织标本大体病理变化比较及组织病理学比较方面:治疗组与模型组有统计学差异(P<0.05);治疗组与生理盐水(NS)阴性对照组有统计学差异(P<0.05);治疗组大、中剂量间的疗效差异无统计学意义,而大、中剂量治疗组与小剂量治疗组间疗效差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维药西帕依溃结安对大鼠溃疡性结肠炎治疗有效。

关键词：溃疡性结肠炎西帕依溃结安实验研究

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宫颈癌组织中Ⅲ型和Ⅴ型胶原蛋白的表达水平研究

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新疆医科大学学报 2020年第9期43卷 1176-1179,1191页

作者：艾尔肯·肉孜比拉力焦谊木叶斯尔·买买提林晨新疆医科大学基础医学院生物化学暨分子生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院病理学教研室乌鲁木齐830011

目的探讨宫颈癌发生与Ⅲ型、Ⅴ型胶原蛋的关系。方法收集宫颈癌新鲜组织标本36例和对照组织25例,提取总RNA后,利用实时荧光定量PCR方法对COL3A1、COL5A1和COL5A2 mRNA进行定量分析。另选取宫颈癌和对照组组织石蜡包埋切片各30例,通过免... 详细信息

目的探讨宫颈癌发生与Ⅲ型、Ⅴ型胶原蛋的关系。方法收集宫颈癌新鲜组织标本36例和对照组织25例,提取总RNA后,利用实时荧光定量PCR方法对COL3A1、COL5A1和COL5A2 mRNA进行定量分析。另选取宫颈癌和对照组组织石蜡包埋切片各30例,通过免疫组化方法检测COL3A1蛋白表达水平。结果与对照组相比,宫颈癌组织中COL3A1 mRNA表达水平下调,差异具有统计学意义(P<0.05),但COL5A1和COL5A2 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。COL3A1蛋白在宫颈癌组织中表达下调,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌组织中COL3A1基因和蛋白的表达水平下调。

关键词：宫颈癌胶原蛋白 COL3A1 COL5A1 COL5A2

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大鼠IL-6基因siRNA表达载体的构建

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新疆医科大学学报 2007年第9期 932-934页

作者：阿孜古力·克热木龙梅哈木拉提·吾甫尔纳斯尔阿吉·买买提艾力黄静静库热西·玉努斯新疆医科大学高职学院机能教研室新疆医科大学基础医学院机能中心新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室新疆医科大学基础医学院生物化学及分子生物学教研室

目的:构建具有特异性阻断大鼠白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）基因的小干扰RNA（small interfe-rening RNA,si RNA）表达载体。方法:应用si RNA设计软件在大鼠IL-6基因的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,并设计合成两条互补小发夹... 详细信息

目的:构建具有特异性阻断大鼠白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）基因的小干扰RNA（small interfe-rening RNA,si RNA）表达载体。方法:应用si RNA设计软件在大鼠IL-6基因的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,并设计合成两条互补小发夹结构的DNA序列,经退火后形成双链DNA片段,采用基因克隆技术,将其克隆到pSilencerTM1.0-U6的载体中,转化DH5α大肠杆菌,提取质粒,酶切方法和测序法对重组体进行鉴定。结果:酶切和测序结果表明,成功构建了大鼠IL-6基因的si RNA表达载体。结论:成功构建了si RNA表达载体,为今后利用RNAi技术在大鼠动物模型上研究疾病的发病机理、药物作用靶点提供先进的技术平台。

关键词： IL-6 siRNA pSilencerTM1.0-U6载体

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哈萨克族食管癌中survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体

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新疆医科大学学报 2010年第7期33卷 739-742页

作者：刘玲张丽萍陈艳李卉姜孝芳李秀梅谌宏鸣赵学信李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院科研中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的构建survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究survivin基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出survivin基因,以阳性组织基因组DN... 详细信息

目的构建survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究survivin基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出survivin基因,以阳性组织基因组DNA扩增出survivin基因启动子区CpG岛,survivin基因经双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1相连,并转入甲基化酶缺陷的大肠杆菌***1793中扩增。经测序正确后,将重组质粒及survivin基因启动子区CpG岛用HindⅢ酶切,连接后再次转入***1793中扩增。将重组质粒转染至食管癌细胞株Eca-109中,荧光显微镜观察结果。结果 DNA测序证明获得了包含ORF全长的survivin基因及其启动子区CpG岛,并将双序列成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中。转染后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白。结论成功构建真核表达载体,为进一步探讨survivin基因启动子区CpG岛甲基化状态对该基因在哈萨克族食管癌细胞株中的表达及功能的影响奠定了基础。

关键词： survivin 启动子区哈萨克族食管癌载体构建

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哈萨克族食管癌中cdc42启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体

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新疆医科大学学报 2010年第7期33卷 735-738页

作者：刘玲张景萍李卉姜孝芳陈艳李秀梅谌宏鸣赵学信李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院科研中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的构建cdc42基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究cdc42基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出cdc42基因,以阳性组织基因组DNA扩增出cd... 详细信息

目的构建cdc42基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究cdc42基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出cdc42基因,以阳性组织基因组DNA扩增出cdc42基因启动子区CpG岛,cdc42基因经双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1相连,并转入甲基化酶缺陷的大肠杆菌***1793中扩增。经测序成功后,将重组质粒及cdc42基因启动子区CpG岛用HindⅢ酶切,连接后再次转入***1793中扩增。将重组质粒转染至食管癌细胞株Eca-109中,荧光显微镜观察结果。结果 DNA测序证明获得了包含ORF全长的cdc42基因及其启动子区CpG岛,并将双序列成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中。转染后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白。结论成功构建真核表达载体,为进一步探讨cdc42基因启动子区CpG岛甲基化状态对该基因在哈萨克族食管癌细胞株中的表达及功能的影响奠定了基础。

关键词： cdc42 哈萨克族食管癌载体构建

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负载干细胞外囊泡的缓释聚左旋乳酸微球在促肝细胞增殖中的作用

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中国热带医学 2023年第10期23卷 1030-1036页

作者：楚瑨木克西娜·木拉提高瑾李亮张雪吕国栋林仁勇毕晓娟省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

目的制备一种调控释放干细胞外囊泡的微粒子递送系统,仅干预1次后长期发挥增强肝细胞增殖能力的作用。方法采用差速离心法提取干细胞外囊泡并鉴定,透射电镜观察外囊泡结构和免疫印记检测外囊泡膜标志蛋白,评价所提取外囊泡符合规范。采... 详细信息

目的制备一种调控释放干细胞外囊泡的微粒子递送系统,仅干预1次后长期发挥增强肝细胞增殖能力的作用。方法采用差速离心法提取干细胞外囊泡并鉴定,透射电镜观察外囊泡结构和免疫印记检测外囊泡膜标志蛋白,评价所提取外囊泡符合规范。采用乳液-溶剂挥发法制备“壳-核”结构聚左旋乳酸(poly-L-lactic acid,PLA)微球,在微球“核”结构位置负载干细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)得到EVs-PLA微球。通过扫描、透射电镜检测微球及外囊泡形貌,粒径分析,缓释实验检测EVs-PLA微球缓释周期,扫描电镜检测缓释至8周EVs-PLA微球形貌变化;将EVs-PLA微球与肝实质细胞共培养,鬼笔环肽/DAPI染色评价EVs-PLA微球生物相容性和细胞毒性,CCK8评价EVs-PLA微球对细胞增殖活力的影响作用,免疫印记检测EVs-PLA微球共培养后细胞中增殖标志蛋白表达量并统计数据结果。结果对比EVs-PLA干细胞外囊泡微球处理组和对照组的肝实质细胞增殖能力评价,发现EVs-PLA微球未造成细胞凋亡和细胞结构发生变异,具有生物相容性无细胞毒性;EVs-PLA微球的“壳-核”结构调控所负载的干细胞外囊泡的释放速率和释放周期,EVs-PLA微球可缓慢释放EVs,单次干预后持续发挥促进肝实质细胞增殖的生物作用。结论EVs-PLA微球可缓慢释放EVs,单次干预后持续发挥增强肝细胞增殖能力的作用,为探索外囊泡促肝细胞增殖的微递送系统提供了新的思路。

关键词：干细胞外囊泡缓释肝再生 O/W乳化生物因子载体

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