检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第3期39卷 311-317页

作者：李玲慧王伟侯昕伶施阳李德伟李亮王慧李静张传山新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠脾自然杀伤T细胞(NKT)及其亚群的影响。方法24只C57BL/6小鼠随机分为低、中、高感染组和对照组,每组6只。低、中、高感染组每鼠分别经肝门静脉注射50、500、2000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量生理盐... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠脾自然杀伤T细胞(NKT)及其亚群的影响。方法24只C57BL/6小鼠随机分为低、中、高感染组和对照组,每组6只。低、中、高感染组每鼠分别经肝门静脉注射50、500、2000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量生理盐水。感染后2周,无菌条件下取各组小鼠肝脏,制备肝组织切片,常规Masson染色后观察多房棘球蚴病灶和肝纤维化情况;取脾组织制备淋巴细胞悬液,流式细胞术检测NKT细胞不同亚群及分泌细胞因子的水平。结果Masson染色结果显示,感染2周后,对照组小鼠肝无明显变化;低、中感染组小鼠肝组织仅可见少量肉芽肿,炎性反应较弱,向纤维化修复转变;高感染组肝病灶形成较小的生发层结构,周围炎性细胞分布密集,可见纤维结缔增生。中、高感染组脾NKT细胞绝对数分别为(6.32±0.53)×10^(5)、(7.37±1.72)×10^(5),高于对照组的(5.02±1.08)×10^(5)和低感染组的(4.90±1.27)×10^(5)(P<0.01)。中、高感染组分泌γ干扰素(IFN-γ)的脾NKT1型细胞比例分别为(13.93±1.61)%、(10.9±3.04)%,低于对照组的(17.3±3.18)%和低感染组的(19.42±2.82)%(P<0.01);低、中、高感染组分泌IL-4的脾NKT2型细胞比例分别为(5.62±0.58)%、(5.86±1.43)%和(5.92±0.94)%,高于对照组的(4.37±0.83)%(P<0.05);低、中感染组分泌IL-17A的脾NKT17型细胞比例分别为(7.02±1.19)%和(6.62±0.41)%,高于对照组的(4.68±0.73)%和高感染组的(3.73±1.04)%(P<0.01)。中、高感染组脾CD4^(+)NKT细胞绝对数分别为(1.75±0.36)×10^(5)、(1.82±0.24)×10^(5),高于对照组的(1.24±0.26)×10^(5)(P<0.05);高感染组脾DN NKT细胞绝对数为(2.15±0.78)×10^(5),分别高于对照组的(1.27±0.36)×10^(5)、低感染组的(1.20±0.49)×10^(5)和中感染组的(1.43±0.19)×10^(5)(P<0.01)。低、中、高感染组分泌IFN-γ的脾CD4^(+)NKT1型细胞比例分别为(19.42±2.82)%、(14.40±1.81)%、(12.5±2.96)%,低于对照组的(21.16±2.83)%(P<0.01);低、中、高感染组分泌IL-17A的脾CD4^(+)NKT17型细胞比例分别为(18.73±1.99)%、(16.06±1.42)%和(14.41±3.55)%,高于对照组的(10.27±1.79)%(P<0.01)。低、中、高感染组分泌IFN-γ的CD8^(+)NKT细胞比例分别为(10.04±0.92)%、(13.43±0.92)%和(9.24±1.37)%,低于对照组的(15.83±1.59)%(P<0.01);中、高感染组分泌IL-10的脾CD8^(+)NKT细胞比例分别为(4.07±0.48)%、(3.92±0.75)%,高于对照组的(2.85±0.64)%(P<0.05)。中、高感染组分泌IFN-γ的脾DN NKT细胞比例分别为(17.48±2.50)%和(14.06±3.95)%,低于对照组的(25.18±5.78)%(P<0.01)。结论小鼠感染多房棘球蚴后,脾NKT细胞及其亚群发生明显变化,其中低、中感染组小鼠以CD4^(+)NKT17型免疫应答优势对虫体起杀伤和清除作用,高感染组小鼠以CD4^(+)NKT17型、NKT2型和NKT10型细胞亚群的混合优势,且NKT细胞呈抑制性表型,使NKT1型免疫应答能力下降,利于棘球蚴寄生。

关键词：多房棘球蚴脾 NKT细胞 CD4^(+)NKT细胞亚群

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细粒棘球蚴感染早期对小鼠肝脏NKT细胞及其相关因子的影响

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新疆医科大学学报 2024年第5期47卷 653-659页

作者：康雪娇邓冰清李寅时王慧张传山李静新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室乌鲁木齐830054 新疆地区高发疾病研究教育部重点实验室乌鲁木齐830054 新疆维吾尔自治区地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨细粒棘球蚴感染早期对小鼠肝脏自然杀伤T(Natural killer T,NKT)细胞及其相关因子的影响。方法将24只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组与感染组,每组12只。感染组经肝门静脉接种细粒棘球蚴原头蚴,对照组注射等量生理盐水,4周后,... 详细信息

目的探讨细粒棘球蚴感染早期对小鼠肝脏自然杀伤T(Natural killer T,NKT)细胞及其相关因子的影响。方法将24只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组与感染组,每组12只。感染组经肝门静脉接种细粒棘球蚴原头蚴,对照组注射等量生理盐水,4周后,每组各取6只小鼠的肝脏组织进行Masson染色,另外6只小鼠的肝脏组织用于分离淋巴细胞以进行流式细胞术检测小鼠肝脏不同NKT细胞亚群比例和相关细胞因子干扰素-γ(Interforn-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)和白细胞介素-17A(Interleukin-17A,IL-17A)的表达。结果与对照组纤维占比比较,感染组肝脏侵袭部位及其邻近肝脏组织呈现结缔组织病变,纤维化明显,纤维占比显著增加,且分布较广,包绕肉芽肿四周形成条索状纤维间隔。与对照组比较,感染组小鼠肝脏NKT细胞比例和CD4^(+)NKT细胞比例显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.01);与对照组比较,感染组小鼠肝脏NKT细胞分泌TNF-α的比例、CD4^(+)NKT细胞分泌TNF-α的比例显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论细粒棘球蚴感染早期小鼠肝脏纤维化程度增加,肝脏NKT细胞及其亚群CD4^(+)NKT细胞产生TNF-α的水平增加,提示肝脏NKT细胞可能参与细粒棘球蚴感染早期肝脏免疫应答反应。

关键词：囊型包虫病细粒棘球蚴肝脏自然杀伤T细胞

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泡球蚴蛋白对脂肪间充质干细胞迁移和分化的影响

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中国病原生物学杂志 2021年第3期16卷 282-286页

作者：马文梅毕晓娟杨宁柯颖李亮刘辉吕国栋孙立林仁勇新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室

目的探讨泡球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)蛋白对小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose Tissue-Derived Stromal Cells, ADSCs)迁移能力、向血管内皮细胞分化能力和细胞增殖能力的影响。方法从小鼠腹股沟脂肪组织中提取和培养ADSCs,采... 详细信息

目的探讨泡球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)蛋白对小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose Tissue-Derived Stromal Cells, ADSCs)迁移能力、向血管内皮细胞分化能力和细胞增殖能力的影响。方法从小鼠腹股沟脂肪组织中提取和培养ADSCs,采用P3代ADSCs,培养基添加5μg/ml Em蛋白处理作为实验组,常规培养基处理ADSCs作为阴性对照组,培养基添加10 ng/ml PDGF-BB处理ADSCs作为阳性对照组。通过Transwell试验、CCK8试验、血管形成试验分别确定Em蛋白对ADSCs迁移能力、增殖能力、向血管内皮细胞分化能力的影响。结果分离获得的C57BL/6小鼠ADSCs细胞具有向脂肪细胞(油红O染色)、骨细胞(茜素红)分化的能力。5μg/ml Em蛋白可提高ADSCs的迁移能力,实验组和阴性对照组迁移细胞数(279.33±34.20)个和(134.27±21.98)个,差异有统计学意义(P均<0.01)。Em蛋白处理可增强ADSCs向血管内皮分化能力,分化后形成血管网的交叉点数(644.86±52.72)个,对照组为(528.60±80.75)个,差异有统计学意义(P<0.05);血管总长度(1225.14±146.42)μm,与对照组(1372.95±101.97)μm比较差异无统计学意义(P>0.05)。Em蛋白处理ADSCs 48h A450值为(0.87±0.16),对照组为(0.74±0.12),96 h A450值为(1.34±0.12),对照组为(1.33±0.19),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Em蛋白可显著提高ADSCs的迁移能力和向血管内皮细胞分化的能力,该研究为探索ADSCs移植修复泡球蚴感染所致的肝损伤提供了实验基础。

关键词：泡球蚴脂肪间充质干细胞迁移血管新生

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细粒棘球绦虫TAK1基因ORF的克隆及其蛋白生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第12期17卷 1392-1398页

作者：刘丽英李军张文宝吴军杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用... 详细信息

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件分别对EgTAK1的理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、N-糖基化位点、亲/疏水性、保守结构域、跨膜结构域、信号肽序列进行预测;采用MEGA 7.0软件对不同物种来源的TAK1蛋白进行多序列比对并构建系统进化树。采用实时荧光定量PCR检测细粒棘球绦虫在不同发育阶段TAK1基因mRNA的相对表达量。结果EgTAK1基因ORF全长1116 bp,编码371个氨基酸,理论等电点为5.97,不稳定指数为49.59,属于不稳定蛋白;脂肪系数为87.22,总平均亲水系数为-0.291,为亲水性蛋白;EgTAK1蛋白含有64个磷酸化位点,3个O-糖基化潜在位点,4个N-糖基化位点;EgTAK1蛋白属于蛋白激酶C类似(PKC-like)家族;无跨膜结构和信号肽,亚细胞可能定位于细胞膜、细胞质及细胞核内。该蛋白含有7个优势B细胞抗原表位,具有良好的免疫原性。二级结构包含34.77%的α-螺旋,5.12%的β-转角,40.97%的无规卷曲,19.14%的延伸链。TAK1蛋白同源序列比对中与多房棘球绦虫的TAK1同源性最高为83%。实时荧光定量PCR显示,细粒棘球绦虫在不同发育阶段EgTAK1表达有差异,成虫阶段相对表达量最高。结论基因EgTAK1可能是细粒棘球绦虫发育分化的重要调控基因,预测该基因编码的蛋白含有B细胞抗原表位,有可能成为包虫病免疫学预防及药物研制的靶标抗原。

关键词：细粒棘球绦虫 TAK1 生物信息学分析 PCR

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利拉鲁肽激活腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路促进自噬减轻糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤的机制研究

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中国糖尿病杂志 2022年第11期30卷 854-858页

作者：房彬彬林仁勇刘芬王红丽张雪鹤张桐杨毅宁李晓梅新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆医科大学省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室第一附属医院心脏中心冠心病一科

目的探讨利拉鲁肽对DM小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法42只C57BL/6小鼠随机分为对照组(Con,n=8),DM组(DM,n=8),DM缺血再灌注组(DM+I/R,n=13),利拉鲁肽干预DM缺血再灌注组(DM+I/R+Lir,n=13)。采用STZ腹腔注射和高脂饮... 详细信息

目的探讨利拉鲁肽对DM小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法42只C57BL/6小鼠随机分为对照组(Con,n=8),DM组(DM,n=8),DM缺血再灌注组(DM+I/R,n=13),利拉鲁肽干预DM缺血再灌注组(DM+I/R+Lir,n=13)。采用STZ腹腔注射和高脂饮食诱导建立小鼠DM模型,进行缺血再灌注,利拉鲁肽200μg/kg皮下注射干预。小动物超声成像系统测量心功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑和伊文思蓝染色检测心肌梗死面积,Western blot法检测心肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白轻链3(LC3)和p62蛋白表达。结果与Con组比较,DM组FPG、p62蛋白表达升高(P<0.05),体重、p-AMPK/AMPK比值、LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低(P<0.05)。与DM+I/R组比较,DM+I/R+Lir组FPG、体重、心肌梗死面积、p-mTOR/mTOR比值、p62蛋白表达降低(P<0.05),p-AMPK/AMPK比值、LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(P<0.05)。结论利拉鲁肽改善DM小鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与激活AMPK/mTOR信号通路,增强心肌细胞自噬相关。

关键词：利拉鲁肽糖尿病缺血再灌注损伤自噬

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细粒棘球蚴感染对小鼠脾脏NKT细胞免疫功能的影响

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中国病原生物学杂志 2021年第8期16卷 902-908页

作者：尚琳琳李玲慧李静李亮林仁勇张传山新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆农业大学动物医学学院新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室

目的探讨不同剂量细粒棘球蚴感染对小鼠脾脏NKT细胞(natural killer T cells)免疫功能的影响。方法经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立C57BL/6小鼠感染模型,对照组注射生理盐水。感染组分为低剂量组(50个原头蚴,LD)、中剂量组(500个原头蚴,MD... 详细信息

目的探讨不同剂量细粒棘球蚴感染对小鼠脾脏NKT细胞(natural killer T cells)免疫功能的影响。方法经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立C57BL/6小鼠感染模型,对照组注射生理盐水。感染组分为低剂量组(50个原头蚴,LD)、中剂量组(500个原头蚴,MD)和高剂量组(2 000个原头蚴,HD)。于造模后12周采集小鼠肝脏和脾脏标本,采用HE及Masson染色检查肝脏病灶和纤维化程度;采用流式细胞术检测小鼠脾脏NKT细胞表型、不同NKT亚群比例,以及相关细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-10及IL-17A)的表达情况。结果不同剂量细粒棘球蚴感染组小鼠肝脏均可见囊泡结构样病灶,病灶周围出现胶原沉积,对照组肝脏仅汇管区可见少量胶原沉积。中、高剂量感染组小鼠脾脏NKT细胞比例分别为(1.34±0.27)%和(1.33±0.21)%,与对照组(2.54±0.43)%和低剂量组(2.41±0.53)%比较差异有统计学意义(F=16.451,P<0.05)。中、高剂量感染组小鼠脾脏CD69^(+)CD4^(+) NKT细胞比例分别为(15.6±2.00)%和(17.5±3.98)%,与对照组(11.1±2.82)%和低剂量组(11.1±1.31)%比较差异有统计学意义(F=8.130,P<0.05)。高剂量感染组小鼠脾脏CD69^(+)CD8^(+) NKT细胞比例为(70.1±7.52)%,与对照组(85.3±2.68)%和低剂量组(83.1±3.90)%比较差异有统计学意义(F=12.42,P<0.05)。中、高剂量感染组小鼠脾脏CD69^(+)DN NKT细胞比例分别为(29.3±2.02)%和(27.2±5.20)%,与对照组(35.6±4.26)%比较差异有统计学意义(F=3.277,P<0.05)。中、高剂量感染组小鼠脾脏NKT1型细胞分泌IFN-γ比例低于对照组和低剂量组(F=40.00,P<0.01)。高剂量感染组小鼠脾脏NKT2型细胞分泌IL-4比例高于对照组、低剂量组和高剂量组(F=10.54,P<0.001)。中、高剂量感染组脾脏NKT17型细胞分泌IL-17A比例低于对照组和低剂量组(F=13.00,P<0.01)。低、中、高剂量感染组脾脏NKT10型细胞分泌IL-10比例高于对照组(F=45.59,P<0.01)。中、高剂量感染组脾脏CD4^(+)NKT1型细胞分泌IFN-γ比例分别为(14.55±2.12)%和(10.43±0.85)%,与对照组(25.88±6.82)%和低剂量组(22.13±4.36)%比较差异有统计学意义(F=16.73,P<0.01)。低、中、高剂量感染组脾脏CD4^(+)NKT2型细胞分泌IL-4比例分别为(10.14±1.00)%、(10.64±0.73)%和(12.97±1.66)%,与对照组(7.07±0.72)%比较差异有统计学意义(F=19.99,P<0.01)。中、高剂量感染组脾脏CD4^(+)NKT17型细胞分泌IL-17A比例分别为(2.46±0.72)%和(2.26±0.57)%,与对照组(4.11±1.07)%和低剂量组(4.56±0.91)%比较差异有统计学意义(F=10.54,P<0.01)。低、中、高剂量感染组脾脏CD4^(+)NKT10型细胞分泌IL-10比例分别为(8.42±1.38)%、(12.65±4.19)%和(15.7±3.72)%,与对照组(4.66±0.87)%比较差异有统计学意义(F=15.78,P<0.01)。中、高剂量感染组脾脏CD8^(+)NKT型细胞分泌IFN-γ比例与对照组和低剂量组比较差异有统计学意义(F=20.08,P<0.01)。低、中、高剂量感染组脾脏CD8^(+)NKT型细胞分泌IL-10与高于对照组比较差异有统计学意义(F=24.41,P<0.01或P<0.001)。中、高剂量感染组脾脏DN NKT型细胞分泌IFN-γ比例与对照组和低剂量组比较差异有统计学意义(F=26.82,P<0.01)。低、中、高剂量感染组脾脏DN NKT型细胞分泌IL-10比例与对照组比较差异有统计学意义(F=22.96,P<0.05)。结论细粒棘球蚴感染中期,不同剂量感染诱导小鼠机体产生的细胞免疫反应由NKT1型和NKT17型模式转向NKT2型和NKT10型亚群优势,导致NKT细胞亚群之间的偏移失衡,造成细粒棘球蚴在宿主体内慢性寄生。

关键词：细粒棘球蚴细粒棘球蚴病脾脏自然杀伤T细胞

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骨形态发生蛋白Ⅰ型受体抑制剂LDN-212854对多房棘球蚴原头节的体外作用研究

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中国病原生物学杂志 2021年第11期16卷 1280-1284页

作者：李静李德伟李亮施阳侯昕伶王慧张传山新疆医科大学基础医学院生理教研室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室新疆医科大学基础医学院生物学教研室

目的探讨骨形态发生蛋白Ⅰ型受体(bone morphogenetic protein typeⅠreceptor,BMPRⅠ)新型抑制剂LDN-212854对多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)原头节的体外作用。方法建立体外培养多房棘球蚴体系,随机设置空白对照组(RPMI 1640)、DMSO溶剂对照组(RPMI 1640+DMSO)及药物干预组(RPMI+DMSO+LDN-212854),其中药物干预组又设1、50及100μmol/L LDN-212854三个浓度梯度,分别与原头节共培养3、6、9、12 d。伊红染色与扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察各干预组虫体存活率,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察虫体病理形态变化。结果各时间段空白对照组与DMSO对照组原头节存活率比较差异无统计学意义(P>0.05);50μmol/L与100μmol/L LDN-212854组干预6 d原头节无存活,与DMSO组比较差异有统计学意义(P<0.01);1μmol/L LDN-212854组干预3 d和6 d原头节存活率分别为(84.85±2.77)%、(82.92±0.59)%,显著低于以往实验中1μmol/L LDN-193189组的(99.75±0.35)%和(99.11±0.22)%(P<0.01);1、50、100μmol/L LDN-212854组干预12 d原头节存活率分别为(38.05±1.29)%、0和0,与DMSO组存活率(98.31±0.14)%比较差异有统计学意义(P<0.01)。随LDN-212854浓度的增加,药物干预组原头节较空白对照及DMSO组HE染色变深、体积变小;SEM显示虫体体表结构改变,主要表现为顶突变形、头部固缩、内部结构暴露以及微绒毛成簇聚集。结论BMPR I新型抑制剂LDN-212854体外抗多房棘球蚴效应较LDN-193189强,低浓度下即有杀伤作用,为新型药物研发奠定了理论基础。

关键词：多房棘球蚴 BMP信号通路抑制剂LDN-212854 体外培养

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Eg Innexin-unc9重组蛋白的表达纯化及诊断价值

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新疆医科大学学报 2025年第4期48卷 421-425,431页

作者：吴军范宇黎飞海李军张文宝郭宝平杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆地方病及分子生物学重点实验室乌鲁木齐830054

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化... 详细信息

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)在不同温度下诱导表达,利用镍亲和层析柱纯化重组Eg Inx蛋白(r Eg Inx),并通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)验证其特异性;制备多克隆抗体进行免疫组化;采用生物素-亲和素放大系统酶联免疫吸附实验(Biotin-avidin system-enzyme linked immunosorbent assay,BAS-ELISA)检测22份健康人血清及7份囊型棘球蚴病患者血清,初步评估其诊断价值。结果成功表达并纯化r Eg Inx,WB检测显示其可被组氨酸标签抗体特异性识别。免疫组化表明,在胆盐诱导后Eg Inx在原头蚴头节及体表皮层高表达,成虫则表达在生殖系统,主要位于孕节。BAS-ELISA检测敏感度为85.71%(6/7),特异度95.45%(21/22)。结论r Eg Inx具有高诊断特异性,其发育阶段差异性定位提示其参与虫体发育及繁殖调控,可作为囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis,CE)新型诊断标志物及犬用疫苗潜在靶点。

关键词：细粒棘球绦虫重组蛋白免疫诊断

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整合素β1在肝泡型包虫病患者肝脏中的表达及其与临床病理特征的相关性

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中国病原生物学杂志 2021年第5期16卷 552-556页

作者：刘辉杨宁毕晓娟柯颖孙立楚瑨孙涛吕国栋林仁勇新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室

目的检测肝泡型包虫病(AE)患者肝组织中整合素β1(Integrinβ1)的表达水平,并探讨其与患者临床病理特征的相关性。方法取73例AE患者肝脏组织样品及8例正常肝脏样品做石蜡组织切片,采用免疫组织化学染色法检测Integrinβ1的表达情况,分析... 详细信息

目的检测肝泡型包虫病(AE)患者肝组织中整合素β1(Integrinβ1)的表达水平,并探讨其与患者临床病理特征的相关性。方法取73例AE患者肝脏组织样品及8例正常肝脏样品做石蜡组织切片,采用免疫组织化学染色法检测Integrinβ1的表达情况,分析Integrinβ1的表达水平与Child-pugh分级、PNM分型、血管新生等临床病理特征的相关性。结果AE患者病灶近旁及远端肝组织integrinβ1表达显著高于正常肝组织(P<0.01)。相关性分析显示Integrinβ1表达与AE患者PNM分型及新生血管数(Integrinβ1高表达组23.7±10.78,低表达组16.09±7.35)呈正相关(P<0.05),且随着AE病灶范围(P分期)的加重,Integrinβ1呈高表达(P1,0%;P2,13.6%;P3,75.0%;P4,50%)(P<0.01),而与患者年龄、性别、Child-Pugh分级等无显著相关性(均P>0.05)。结论肝泡型包虫病患者的肝组织高表达Integrinβ1,提示Integrinβ1可能参与AE病灶浸润过程,为阐明AE的致病机制和寻找新的药物靶标奠定了基础。

关键词：肝泡型包虫病整合素β1(Integrinβ1) 相关性分析

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单核细胞源性巨噬细胞MAC387对肝泡型包虫病患者肝脏炎症与纤维化的作用

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新发传染病电子杂志 2023年第1期8卷 19-25页

作者：张靖仪田凤鸣姜涛齐新伟李佳峻闵宏悦麦迪乃姆·艾比布拉周璇刘玉梅马秀敏新疆医科大学附属肿瘤医院医学检验中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学动物实验中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院微生物教研室乌鲁木齐830011 北京儿童医院新疆医院检验科新疆乌鲁木齐830000

目的通过检测肝泡型包虫病(AE)患者肝组织中MAC387的表达水平,探讨其在肝脏炎症和纤维化中的作用。方法收集新疆医科大学第一附属医院2020年6月至2022年3月收治的32例AE患者肝脏组织标本,分为病灶近旁肝组织(CLT组)与远端对照肝组织(DLT... 详细信息

目的通过检测肝泡型包虫病(AE)患者肝组织中MAC387的表达水平,探讨其在肝脏炎症和纤维化中的作用。方法收集新疆医科大学第一附属医院2020年6月至2022年3月收治的32例AE患者肝脏组织标本,分为病灶近旁肝组织(CLT组)与远端对照肝组织(DLT组)。通过HE染色和天狼星红染色分别评估患者肝组织病理学炎症改变及胶原沉积,并对CLT组进行炎症分级评分和纤维化分期评分;用免疫组织化学实验分别检测CLT组和DLT组MAC387的阳性表达,并将AE患者分为MAC387高水平组和MAC387低水平组,分析临床主要肝功能生化指标的相关性及手术前后各指标的变化;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组肝组织MAC387mRNA的表达。结果与DLT组相比,CLT组肝脏中MAC387显著增加(P<0.001)。此外,与炎症分级评分和纤维化分期评分较低的患者相比,炎症分级评分和纤维化分期评分较高的患者肝脏中MAC387浸润更多(P<0.001),且MAC387高水平组与ALT、AST呈正相关(ALT:r=0.523,P=0.013;AST:r=0.503,P=0.017),与GGT、ALP、Alb无显著相关性(均P>0.05),MAC387低水平组与ALT、AST、GGT、ALP、Alb均无相关性(均P>0.05)。术后第9天,MAC387低水平组的GGT水平高于MAC387高水平组,且差异有统计学意义(P<0.05)。CLT组MAC387mRNA表达显著高于DLT组(P<0.05)。结论MAC387在肝泡型包虫病患者肝组织中高表达,并且在炎症分级评分和纤维化分期评分较高患者中浸润增加,提示可能在加重AE的肝脏炎症和纤维化中发挥作用。

关键词：肝泡型包虫病单核细胞源性巨噬细胞MAC387 肝脏炎症和纤维化

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