检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第1期43卷 76-83页

作者：邓冰清阿迪莱·多力坤李寅时阿比旦·艾尼瓦尔孙胜肖雯颖葛聪蕙唐娜姜涛王慧张传山李静新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学实验动物中心新疆乌鲁木齐830011 新疆地区高发疾病研究教育部重点实验室(新疆医科大学) 新疆乌鲁木齐830054 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心) 国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室(中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所)上海200025

目的了解多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔免疫细胞迁移及分化的变化,探讨其发挥免疫功能的机制。方法裂解增强绿色荧光蛋白(EGFP)小鼠脾组织,分离EGFP示踪免疫细胞。C57BL/6J小鼠腹腔注射2.5×10^(7)个示踪免疫细胞,5 d后经肝门静脉穿刺接... 详细信息

目的了解多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔免疫细胞迁移及分化的变化,探讨其发挥免疫功能的机制。方法裂解增强绿色荧光蛋白(EGFP)小鼠脾组织,分离EGFP示踪免疫细胞。C57BL/6J小鼠腹腔注射2.5×10^(7)个示踪免疫细胞,5 d后经肝门静脉穿刺接种3000个多房棘球蚴原头节。感染19周后,取感染小鼠肝、脾组织,冷冻切片后4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色,免疫荧光观察示踪免疫细胞的分布。分离感染小鼠外周血、肝、脾和腹膜腔免疫细胞,流式细胞术检测EGFP示踪免疫细胞在不同组织的迁移分布和细胞分型,以及细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)的分泌情况。结果免疫荧光结果显示,EGFP示踪细胞主要迁移至小鼠脾组织。肝组织中各型示踪淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(79.63±5.00)%、CD4^(+)T细胞(7.08±4.00)%、B细胞(2.01±1.00)%(F=396.20,P<0.01);脾组织中各型淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(73.97±3.56)%、CD4^(+)T细胞(11.92±5.02)%、B细胞(3.86±0.32)%(F=349.00,P<0.01);腹膜腔中各型淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(45.27±4.53)%、CD4^(+)T细胞(34.60±8.00)%、B细胞(15.03±6.38)%(F=16.90,P<0.05)。肝、脾、腹膜腔中的示踪CD4^(+)T细胞数量分别为2700±3120、14407±11958、3376±1481,示踪CD8^(+)T细胞数量分别为26407±22190、109179±92692、4245±798,示踪B细胞数量分别为698±719、5794±4971、1476±840,3种示踪淋巴细胞均主要分布在脾组织中(F=2.51、3.03、2.62,均P>0.05)。肝组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(3.94±1.33)%、单核细胞(3.79±1.80)%、巨噬细胞(3.13±1.85)%、嗜酸粒细胞(2.40±1.81)%、骨髓来源抑制性细胞(0.76±0.17)%、中性粒细胞(0.67±0.04)%(F=3.21,P<0.05);脾组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(1.86±0.89)%、单核细胞(0.41±0.09)%、巨噬细胞(0.23±0.03)%、中性粒细胞和骨髓来源抑制性细胞[均(0.13±0.14)%]、嗜酸粒细胞(0.04±0.04)%(F=42.70,P<0.01);外周血中组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(0.37±0.28)%、单核细胞(0.22±0.27)%、巨噬细胞(0.22±0.21)%、中性粒细胞和骨髓来源抑制性细胞[均(0.17±0.08)%]、嗜酸粒细胞(0.05±0.08)%(F=0.92,P>0.05)。肝组织的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(41.17±19.92)%、(30.70±3.35)%、(2.78±4.81)%(F=8.22,P<0.05);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(64.17±3.17)%、(24.85±15.66)%、(5.67±6.35)%(F=27.08,P<0.01)。脾组织的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(52.43±19.43)%、(27.67±18.99)%、(4.77±2.23)%(F=6.88,P<0.05);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌TNF-α、IFN-γ、IL-4的细胞分别占(40.53±17.79)%、(38.97±18.04)%、(3.23±3.09)%(F=6.15,P<0.05)。腹膜腔的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(64.33±6.82)%、(46.43±13.44)%、(4.03±3.51)%(F=36.04,P<0.01);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(53.57±19.17)%、(21.47±8.54)%、(6.13±8.63)%(F=10.24,P<0.05)。结论多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔内免疫细胞主要迁移至脾组织,细胞类型以CD8^(+)T细胞和树突状细胞为主。T细胞主要分泌IFN-γ,呈Th1型免疫应答。

关键词：多房棘球蚴病腹膜腔免疫细胞迁移 CD8^(+)T细胞

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Eg Innexin-unc9重组蛋白的表达纯化及诊断价值

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新疆医科大学学报 2025年第04期 421-425+431页

作者：吴军范宇黎飞海李军张文宝郭宝平杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆地方病及分子生物学重点实验室

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(EgInnexin unc9,EgInx)重组蛋白，制备多抗评估其诊断潜力及组织定位，为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-EgInx原核表达质粒；将重组质粒转... 详细信息

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(EgInnexin unc9,EgInx)重组蛋白，制备多抗评估其诊断潜力及组织定位，为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-EgInx原核表达质粒；将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)在不同温度下诱导表达，利用镍亲和层析柱纯化重组EgInx蛋白(rEgInx),并通过蛋白质免疫印迹(Western blotting, WB)验证其特异性；制备多克隆抗体进行免疫组化；采用生物素-亲和素放大系统酶联免疫吸附实验(Biotin-avidin system-enzyme linked immunosorbent assay, BAS-ELISA)检测22份健康人血清及7份囊型棘球蚴病患者血清，初步评估其诊断价值。结果成功表达并纯化rEgInx, WB检测显示其可被组氨酸标签抗体特异性识别。免疫组化表明，在胆盐诱导后EgInx在原头蚴头节及体表皮层高表达，成虫则表达在生殖系统，主要位于孕节。BAS-ELISA检测敏感度为85.71%(6/7),特异度95.45%(21/22)。结论 rEgInx具有高诊断特异性，其发育阶段差异性定位提示其参与虫体发育及繁殖调控，可作为囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis, CE)新型诊断标志物及犬用疫苗潜在靶点。

关键词：细粒棘球绦虫重组蛋白免疫诊断

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多房棘球蚴感染对小鼠肝脾淋巴细胞及其亚群的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第1期38卷 30-35页

作者：章宁张传山李智德李亮王慧谭雅超尚琳琳温浩新疆医科大学第一附属医院中亚高发病病因预防治疗国家重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量多房棘球蚴原头节的混悬液,采用门静脉注射法建立多房棘球蚴感染小鼠模型,对照组注射等量生理盐水。感染后4周,每组各取4只小鼠,取肝脏组织,常规Masson染色,观察病理变化。剩余4只小鼠取肝脏和脾脏,制备肝、脾细胞悬液,流式细胞术检测肝、脾CD3^+T细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4^+CD69^+T细胞、CD8^+CD69^+T细胞绝对数以及初始型CD4^+T (CD4^+Tn)细胞、效应记忆性CD4^+T (CD4^+Tem)细胞、初始型CD8^+T (CD8^+Tn)细胞、效应记忆性CD8^+T(CD8^+Tem)细胞和中心记忆性CD8^+T(CD8^+Tcm)细胞比例的变化。检测数据采用Flow-Jo软件分析,并做流式图。采用Graphad Prism 7.0软件进行作图和统计学分析。结果感染后4周,对照组小鼠肝无明显变化,低、中数量组小鼠肝组织出现急性炎症反应减弱,部分病灶炎性反应逐渐转变为纤维化修复,形成小肉芽肿结节,呈点状或灶状坏死。高数量组小鼠肝内出现小囊泡,可见生发层结构,周围大量炎性细胞浸润。小鼠肝CD3^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(4.10±0.04)×10^5、(3.81±0.14)×10^5、(3.02±0.12)×10^5、(2.98±0.03)×10^5,高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠脾CD3^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(16.01±0.40)×10^5、(11.03±1.21)×10^5、(10.10±1.01)×10^5、(9.71±0.90)×10^5,高数量组高于其他3组(P<0.01)。小鼠肝CD4^+T、CD8^+T细胞和脾B细胞、CD8^+T绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4^+CD69^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(3.23±0.10)×10^4、(1.98±0.11)×10^4、(1.51±0.26)×10^4、(1.19±0.21)×10^4,高数量组高于其他组(P<0.05)。小鼠脾CD4^+CD69^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(10.10±0.41)×10^4、(8.91±0.80)×10^4、(8.20±0.41)×10^4、(6.81±0.50)×10^4,高数量组高于对照组(P<0.01)。肝、脾CD8^+CD69^+T细胞绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4^+Tn细胞比例高、中、低数量组和对照组分别为(15.52±1.51)%、(19.3±2.09)%、(20.66±1.28)%、(23.62±2.84)%,对照组高于其他组(P<0.05或0.01)。肝、脾CD8^+Tn细胞比例对照组高于其他组(P<0.05或0.01)。肝、脾CD8^+Tcm细胞比例高数量组高于对照组(P<0.05)。结论高数量多房棘球蚴感染C57BL/6小鼠,肝区域以CD4^+T细胞和CD8^+T细胞募集为主,而脾以B细胞和CD8^+T细胞募集为主。

关键词：多房棘球蚴 T淋巴细胞早期流式细胞术

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多房棘球蚴感染小鼠腹腔ST2^(+)T细胞亚群功能及其免疫检查点分子表达变化

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第6期40卷 708-716页

作者：侯昕伶李德伟施阳王茂林孜比姑·肉素阿比旦·艾尼瓦尔郑旭然康雪娇王慧李静张传山新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠腹腔ST2^(+)T细胞亚群功能及其免疫检查点分子表达的影响。方法11只BALB/c小鼠随机分为感染组(5只)、对照组(6只)。感染组每鼠经肝门静脉接种4000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量的生理盐水。感染24周... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠腹腔ST2^(+)T细胞亚群功能及其免疫检查点分子表达的影响。方法11只BALB/c小鼠随机分为感染组(5只)、对照组(6只)。感染组每鼠经肝门静脉接种4000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量的生理盐水。感染24周后小鼠腹腔内注入RPMI 1640,取腹腔内液体,离心后收集淋巴细胞,采用流式细胞术筛选小鼠腹腔不同T细胞亚群,检测生长刺激表达基因2蛋白(ST2)的表达变化,比较不同ST2^(+)T细胞亚群功能和表达免疫检查点分子杀伤细胞凝集素样受体G1(KLRG1)、淋巴细胞激活基因-3(LAG3)和程序性死亡受体-1(PD-1)的细胞比例与绝对数,及分泌细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-17A的细胞比例与绝对数。采用SPSS 25.0软件进行统计学分析,采用独立样本t检验。结果感染后24周,感染组小鼠腹腔内可见囊泡状或实体病灶,ST2^(+)CD4+T细胞绝对数为(5.06±3.06)×10^(4),记忆ST2^(+)CD4+T细胞绝对数为(4.66±3.18)×10^(4),均高于对照组的(3.31±2.77)×10^(3)和(3.27±2.77)×10^(3)(t=3.442、3.035,均P<0.05);且感染组小鼠腹腔记忆ST2^(+)CD4+T细胞比例为(22.78±6.05)%,绝对数为(4.66±3.18)×10^(4),均高于非记忆ST2^(+)CD4+T细胞比例[(6.68±1.25)%]和绝对数[(3.88±5.20)×10^(3)](t=5.830、2.962,P<0.01、0.05);感染组小鼠腹腔记忆ST2^(+)CD8+T细胞比例为(7.03±1.09)%,高于非记忆ST2^(+)CD8+T细胞的(4.10±1.57)%(t=3.417,P<0.01)。感染小鼠中表达KLRG1、LAG3和PD-1的记忆ST2^(+)CD4+T细胞绝对数分别为(2.77±1.41)×10^(3)、(5.52±3.95)×10^(3)、(6.59±3.75)×10^(3),均高于对照组的(3.66±6.42)×10^(2)、(1.67±0.72)×10^(2)、(1.69±1.49)×10^(3)(t=3.760、3.356、2.956,P<0.01、0.05、0.05)。感染组小鼠分泌IFN-γ的记忆ST2^(+)CD4+T、ST2^(+)CD8+T细胞比例为(5.48±1.33)%和(16.24±4.08)%,均低于对照组的(14.82±3.04)%和(44.70±5.31)%(t=-6.325、-9.786,均P<0.01);感染组小鼠分泌IL-4的记忆ST2^(+)CD8+T细胞比例为(13.10±3.60)%,高于对照组的(4.59±0.36)%(t=5.264,P<0.01)。结论多房棘球蚴感染小鼠腹腔T细胞和记忆T细胞表面ST2表达上调,且表达记忆ST2^(+)T细胞KLRG1、LAG3和PD-1分子的比例上调伴随IFN-γ分泌能力减弱,提示记忆ST2^(+)T细胞存在免疫功能耗竭。

关键词：多房棘球蚴小鼠腹腔细胞生长刺激表达基因2蛋白 T细胞免疫检查点

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多房棘球蚴感染小鼠脾脏巨噬细胞亚群及其极化表型的变化

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第6期39卷 771-778页

作者：侯娇温浩王明坤李文定李亮李静张传山王慧新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054

目的研究不同数量多房棘球蚴原头节感染小鼠脾巨噬细胞亚群及其极化表型的变化。方法60只C57BL/6小鼠随机分为低、中、高感染组和对照组,每组15只。低、中、高感染组每只小鼠分别经肝门静脉穿刺接种50、500和2000个多房棘球蚴原头节,对... 详细信息

目的研究不同数量多房棘球蚴原头节感染小鼠脾巨噬细胞亚群及其极化表型的变化。方法60只C57BL/6小鼠随机分为低、中、高感染组和对照组,每组15只。低、中、高感染组每只小鼠分别经肝门静脉穿刺接种50、500和2000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量的生理盐水。感染后2、12和24周,各组随机选5只小鼠摘取脾脏,称量后计算脾脏系数;分离脾淋巴细胞,采用流式细胞术检测各组小鼠脾巨噬细胞不同亚群比例和数量;提取小鼠脾淋巴细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测巨噬细胞M1和M2极化相关基因的m RNA相对转录水平,其中M1型极化相关基因为白细胞介素-1β(IL-1β)、γ干扰素(IFN-γ)、趋化因子(C-X-C基序)配体11(CXCL11)、趋化因子(C-C基序)受体7(CCR7)和CD86,M2型极化相关基因为甘露糖受体C-1型(MRC1)、抵抗素样分子α(Retnla)和精氨酸酶1(ARG1),以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参。采用SPSS 26.0软件进行统计学分析,不同时间点多组间的比较采用单因素方差分析,同一感染时间点的两两比较采用LSD法检验。结果感染后2周,高感染组小鼠脾脏质量、脾脏系数、脾淋巴细胞数量、脾巨噬细胞比例、脾巨噬细胞数量和Ly-6C高表达(Ly-6C^(high))巨噬细胞的比例分别为(157.2±22.8)mg、(0.8±0.1)%、(10.3±2.9)×10^(7)、(9.2±6.4)%、(48.9±32.7)×10^(5)和(75.8±4.6)%,均高于对照组[(75.0±18.3)mg、(0.4±0.1)%、(3.1±1.3)×10^(7)、(4.3±0.7)%、(7.7±4.1)×10^(5)、(52.1±8.4)%]、低感染组[(89.2±7.4)mg、(0.4±0.0)%、(5.4±2.3)×10^(7)、(3.0±0.9)%、(9.3±6.9)×10^(5)、(50.1±8.8)%]和中感染组[(102.6±15.2)mg、(0.5±0.1)%、(7.0±2.1)×10^(7)、(3.5±0.3)%、(13.7±3.9)×10^(5)、(60.3±8.7)%](F=22.744、23.542、9.318、3.935、6.617、11.197,P<0.05或P<0.01);Ly-6C低表达(Ly-6Clow)巨噬细胞比例(20.3±4.2)%低于对照组(39.0±7.1)%、低感染组(41.2±8.6)%和中感染组(34.2±7.1)%(F=9.157,P<0.01)。感染后12周,高感染组小鼠脾脏质量、脾脏系数、脾巨噬细胞比例、巨噬细胞数量以及Ly-6C^(high)巨噬细胞比例均高于对照组、低感染组和中感染组(F=12.730、14.173、20.380、7.943和25.838,P<0.01);Ly-6Clow巨噬细胞比例低于对照组、低感染组和中感染组(F=27.668,P<0.01)。感染后24周,高感染组小鼠脾脏质量、脾脏系数、脾淋巴细胞数量、脾巨噬细胞比例和数量均高于对照组、低感染组和中感染组(F=8.664、7.318、13.047、3.315、6.007,P<0.05或P<0.01);Ly-6C^(high)和Ly-6Clow巨噬细胞比例与对照组、低感染组和中感染组差异无统计学意义(F=3.177、2.709,P>0.05),且随着感染时间的延长,Ly-6C^(high)巨噬细胞比例逐渐降低(F=30.649,P<0.01),Ly-6Clow巨噬细胞比例逐渐升高(F=32.407,P<0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示,感染后24周,高感染组M1型极化基因CXCL11的mRNA相对转录水平(28.2±36.3)高于对照组(1.9±2.7)(t=2.243,P<0.05),CD86(0.2±0.1)低于对照组(0.5±0.3)(t=-2.255,P<0.05);M2型极化基因MRC1、Retnla和ARG1的mRNA相对转录水平(5.2±2.9、201.8±176.4、51.2±69.6)均高于对照组(1.8±1.5、0.8±0.8、1.2±0.8)(t=2.313、3.470、2.185,P<0.05)。结论感染后2周,多房棘球蚴原头节高感染组小鼠脾脏募集大量Ly-6C阳性单核来源的巨噬细胞,感染进程中Ly-6C^(high)巨噬细胞逐渐向Ly-6Clow转变,且在感染后12周和24周脾巨噬细胞以M2型为主,诱导小鼠免疫耐受,利于多房棘球蚴的慢性寄生。

关键词：多房棘球蚴病多房棘球蚴脾脏巨噬细胞极化

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寄生虫感染对类风湿性关节炎保护作用的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第1期34卷 75-79页

作者：沙地克.阿帕尔吐尔洪江.吐逊温浩新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝(移植).腹腔镜外科新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

类风湿性关节炎是影响人类健康的全球性卫生问题,其发病率不断增长。自从1870年"卫生假说"的提出,有大量实验和流行病学研究结果提示寄生虫感染可能减轻或改善类风湿性关节炎机体的病情,但其具体机制尚未明确。因此,研究寄生... 详细信息

类风湿性关节炎是影响人类健康的全球性卫生问题,其发病率不断增长。自从1870年"卫生假说"的提出,有大量实验和流行病学研究结果提示寄生虫感染可能减轻或改善类风湿性关节炎机体的病情,但其具体机制尚未明确。因此,研究寄生虫感染与类风湿性关节炎的关系具有重要意义。本文将初步探讨寄生虫感染对类风湿性关节炎的保护作用及其可能的细胞及细胞因子变化等免疫机制。

关键词：类风湿性关节炎寄生虫免疫应答

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多房棘球蚴感染对小鼠脾脏自然杀伤细胞Tim3表达的影响

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中国血吸虫病防治杂志 2023年第4期35卷 366-373页

作者：施阳阿比旦·艾尼瓦尔李德伟孜比姑·肉素王茂林郑旭然康雪娇王慧李静张传山新疆医科大学基础医学院(新疆乌鲁木齐 830054) 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院、省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室、新疆维吾尔自治区包虫病基础医学重点实验室(新疆乌鲁木齐 830054) 新疆维吾尔自治区地方病分子生物学重点实验室新疆医科大学基础医学院(新疆乌鲁木齐 830054) 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院、省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室、新疆维吾尔自治区包虫病基础医学重点实验室(新疆乌鲁木齐 830054)

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠脾脏自然杀伤(natural killer,NK)细胞Tim3及其与免疫检查点分子2B4和LAG3共表达的影响.方法取体质量为(20±2)g的C57BL/6小鼠,随机分为高剂量感染组(15只)、低剂量感染组(13只)和对照组(11只),高、... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠脾脏自然杀伤(natural killer,NK)细胞Tim3及其与免疫检查点分子2B4和LAG3共表达的影响.方法取体质量为(20±2)g的C57BL/6小鼠,随机分为高剂量感染组(15只)、低剂量感染组(13只)和对照组(11只),高、低剂量感染组分别经肝门静脉接种2000、50个多房棘球蚴原头节,对照组经肝门静脉注射等量生理盐水.分别于感染后12、24周收集小鼠脾脏细胞,采用流式细胞术检测小鼠脾脏NK细胞Tim3表达及其与2B4和LAG3共表达水平.结果多房棘球蚴感染后12周,各组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例及其与2B4共表达比例差异有统计学意义(F = 13.559、12.465,P均<0.01);低剂量感染组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例[(23.84±2.28)%]高于高剂量感染组[(15.72±3.67)%]和对照组[(16.14±3.83)%](P均<0.01);低剂量感染组小鼠脾脏NK细胞Tim3和2B4共表达比例[(22.20±2.13)%]高于高剂量感染组[(14.17±3.81)%]和对照组[(15.20±3.77)%](P均<0.01).多房棘球蚴感染后24周,各组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例及其与2B4共表达比例差异有统计学意义(F = 5.243、4.659,P均<0.05);高剂量感染组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例[(20.55±7.04)%]、Tim3和2B4共表达比例[(20.98±7.12)%]均低于对照组[(31.38±3.19)%、(31.25±3.06)%](P均<0.05),低剂量感染组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例[(26.80±6.47)%]、Tim3和2B4共表达比例[(26.48±6.48)%]与对照组差异均无统计学意义(P均＞0.05).感染后12、24周,各组小鼠脾脏NK细胞Tim3和LAG3共表达比例差异均无统计学意义(F = 2.283、0.375,P均＞0.05).低剂量感染组中,多房棘球蚴感染后12、24周小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例、Tim3和2B4共表达比例差异均无统计学意义(t =-1.137、-1.658,P>0.05);感染后24周,小鼠脾脏NK细胞Tim3和LAG3共表达比例较感染后12周上调(t =-5.261,P<0.01).高剂量感染组中,多房棘球蚴感染后12、24周小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例差异无统计学意义(t =-1.546,P>0.05);但感染后24周,小鼠脾脏NK细胞Tim3和2B4共表达比例、Tim3和LAG3共表达比例均较感染后12周小鼠上调(t =-2.425、-4.745,P均<0.05).结论 NK细胞表面Tim3表达及其与LAG和2B4共表达均受多房棘球蚴不同感染剂量及不同病程阶段影响,并在多房棘球蚴病病程中呈现出不同表型.NK细胞在多房棘球蚴感染后随病程进展形成免疫抑制表型趋势,利于多房棘球蚴免疫逃逸及慢性寄生.

关键词：多房棘球蚴脾脏细胞 Tim3 自然杀伤细胞免疫检查点

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泡型包虫病患者肝脏组织TGF-β1和Gadd45γ基因的表达及其在肝损伤中的作用研究

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中国病原生物学杂志 2016年第10期11卷 908-912页

作者：张传山杨舒婷毕晓娟李亮吕国栋林仁勇新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的研究泡型包虫病患者肝脏组织TGF-β1和Gadd45γ基因的表达及其在肝损伤中的作用,探讨其临床意义。方法采集23例AE患者肝脏手术标本,Trizol法提取RNA,反转录cDNA后采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达。... 详细信息

目的研究泡型包虫病患者肝脏组织TGF-β1和Gadd45γ基因的表达及其在肝损伤中的作用,探讨其临床意义。方法采集23例AE患者肝脏手术标本,Trizol法提取RNA,反转录cDNA后采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达。体外培养肝细胞HL-7702,用重组TGF-β1(1ng/ml)细胞因子或匀浆虫体蛋白(1mg/ml)刺激30min、1h、24h和48h,分别收集细胞,采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达。结果 AE患者病灶旁肝脏组织TGF-β1、p53和p21mRNA的相对表达量分别为1.93±1.34、1.29±0.62和1.50±1.10,与远端肝组织1.00±0.00比较差异有统计学意义(P<0.05);Gadd45γmRNA为1.24±0.96,与远端组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson法分析TGF-β1表达分别与Gadd45γ、p53和p21呈正相关(r值分别为0.5257、0.5287、0.4605,P<0.05)。用重组细胞因子TGF-β1(1ng/ml)或匀浆虫体蛋白(1mg/ml)刺激30min、1h、24h和48h,均能促进肝细胞HL-7702中TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达上调。结论在肝泡球蚴病晚期,炎症性细胞因子TGF-β1可能通过激活非经典型MAPK(Mitogen Activated Protein Kinase,JNK和p38)信号转导途径和细胞周期关键调控因子(Gadd45γ,p53,p21)调控肝脏细胞的生长抑制或凋亡,造成宿主肝脏的病理性损伤。

关键词：泡型包虫病转化生长因子β1 生长抑制和DNA损伤基因45γ 肝损伤生长抑制或凋亡

来源：评论

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Smad蛋白抑制剂SIS3对细粒棘球蚴原头节的作用研究

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中国病原生物学杂志 2017年第5期12卷 389-393页

作者：张静曾静李亮齐海成王超林仁勇李静新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室

目的研究Smad蛋白抑制剂SIS3对体外细粒棘球蚴原头节的影响。方法建立体外细粒棘球蚴培养体系,以不同浓度(12.5、25、50和100μmol/L)、不同作用时间(24、48、72和96h)对原头节进行药物(Smad蛋白抑制剂SIS3)干预试验,伊红染色和扫描及... 详细信息

目的研究Smad蛋白抑制剂SIS3对体外细粒棘球蚴原头节的影响。方法建立体外细粒棘球蚴培养体系,以不同浓度(12.5、25、50和100μmol/L)、不同作用时间(24、48、72和96h)对原头节进行药物(Smad蛋白抑制剂SIS3)干预试验,伊红染色和扫描及透射电镜观察不同浓度药物干预过程中原头节活力及虫体超微结构的变化。结果SIS3干预48h,50和100μmol/L SIS3组与空白对照组原头节活力显著下降;作用96h,50和100μmol/L SIS3组原头节活力分别下降(10.06±2.79)%和(19.49±2.63)%。随着药物浓度的增加,扫描电镜观察原头节体表绒毛排列紊乱,吸盘结构变形,顶突小钩脱落;透射电镜观察药物组原头节表层微毛减少或消失,合胞体带变薄,胞浆空泡化,虫体内部出现脂滴等。结论 Smad信号通路抑制剂SIS3对体外细粒棘球蚴有抑制作用,为治疗细粒棘球蚴病提供了理论基础。

关键词：细粒棘球蚴 Smad信号通路抑制剂SIS3 体外培养

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多房棘球蚴感染晚期小鼠肝脏中NK1.1的表达对T细胞功能的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第5期42卷 594-600,607页

作者：赵涵玥李锦田薛俊隆卡力比夏提·艾木拉江林仁勇吐尔干艾力·阿吉新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫外科新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病因与防治国家重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的观察多房棘球蚴感染晚期小鼠肝T细胞的NK1.1表达变化,分析NK1.1表达对T细胞功能的影响。方法 C57BL/6N小鼠随机分为对照组和感染组。感染组小鼠经肝门静脉注射2 000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等体积生理盐水。感染后36周取肝组... 详细信息

目的观察多房棘球蚴感染晚期小鼠肝T细胞的NK1.1表达变化,分析NK1.1表达对T细胞功能的影响。方法 C57BL/6N小鼠随机分为对照组和感染组。感染组小鼠经肝门静脉注射2 000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等体积生理盐水。感染后36周取肝组织,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,天狼星红和Masson染色观察肝组织纤维化情况。收集肝淋巴细胞,流式细胞术检测小鼠肝CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞占比,并检测不同T细胞的NK1.1、颗粒酶B (GrB)、穿孔素、γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-17 (IL-17)表达变化。采用SPSS 25.0软件进行统计学分析,两组间比较采用独立样本t检验。结果感染多房棘球蚴36周后,HE染色显示感染组小鼠肝组织内可见具有生发层结构的病灶,周围出现大量炎性细胞浸润;Masson染色和天狼星红染色显示感染组小鼠肝组织纤维化明显。流式结果显示,感染组小鼠肝脏的CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞的占比分别为(32.0±6.0)%、(42.0±13.9)%,与对照组的(36.6±9.0)%、(50.2±5.2)%差异均无统计学意义(t=1.068、1.446,均P> 0.05)。感染组NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞占CD4^(+)T细胞的(30.0±14.5)%,低于对照组NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞的(69.0±10.7)%(t=5.573,P <0.01)和感染组NK1.1-CD4^(+)T细胞的(51.6±10.8)%(t=2.920,P <0.05)。感染组NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞占CD8^(+)T细胞的(22.0±12.9)%,低于对照组NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞的(43.6±5.9)%(t=3.999,P <0.01)和感染组NK1.1-CD8^(+)T细胞的(64.0±13.6)%(t=5.496,P <0.01)。感染组小鼠分泌GrB、IFN-γ和IL-17的NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞占比分别为(4.8±2.8)%、(6.8±6.0)%和(6.9±5.2)%,均低于对照组的(12.6±4.8)%、(23.6±7.3)%和(22.1±7.1)%(t=3.462、4.171、4.124,均P <0.01);分泌GrB、IFN-γ和IL-17的NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞占比分别为(1.5±0.9)%、(5.3±2.7)%和(3.7±2.3)%,均低于对照组的(6.0±2.7)%、(18.1±9.5)%和(16.9±9.3)%(t=3.861、3.196、3.361,P <0.01、0.05、0.01)。感染组分泌穿孔素的NK1.1^(+)CD4^(+)T和NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞占比分别为(3.0±1.3)%和(2.7±1.2)%,与对照组的(2.3±1.2)%和(2.1±1.6)%差异均无统计学意义(t=1.027、0.717,均P> 0.05)。感染组分泌GrB的NK1.1-CD4^(+)T细胞占比为(6.7±2.1)%,高于NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞(t=2.629,P <0.05);分泌IFN-γ的NK1.1-CD8^(+)T细胞占比为(13.7±9.2)%,高于NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞(t=2.609,P <0.05);分泌IL-17的NK1.1-CD8^(+)T细胞占比为(1.0±0.4)%,低于NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞(t=2.740,P <0.05)。结论多房棘球蚴感染晚期小鼠肝组织中NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞、NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞数量均减少,分泌的GrB、IFN-γ、IL-17降低,导致NK1.1^(+)T细胞呈现免疫耗竭状态。

关键词：多房棘球蚴病 NK1.1 CD4^(+)T细胞 CD8^(+)T细胞

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