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泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA表达水平的研究

中国免疫学杂志 2011年第5期27卷 395-399页

作者：庞楠楠丁剑冰赵慧王晶李博李玉娇姜涛马秀敏新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学附属中医医院乌鲁木齐830000

目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月... 详细信息

目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月,分别在感染2天、8天、1月、3月、6月和10月处死小鼠,收集肝脏组织。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肝脏组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA的表达水平。结果:T-bet mRNA的表达水平在感染早期开始增高,1月时达高峰后又开始缓缓下降至感染前水平;GATA-3 mRNA的表达水平在感染1月时明显升高,随后一直保持较高的表达水平;ROR-γt mRNA的表达水平在感染早期开始增高,感染1月时达到高峰,随后缓慢下降。IL-17 mRNA表达水平自感染早期开始持续性增高,到感染3月时达高峰,之后又逐渐降低至感染前水平。各组小鼠肝组织ROR-γt mRNA表达水平与T-bet mRNA表达水平呈正相关(r=0.67),IL-17 mRNA表达水平与ROR-γt mRNA表达水平有相关性(r=0.35),P值均<0.05。结论:泡球蚴感染宿主早期,主要以Th1型和Th17型细胞免疫为主,感染中后期出现Th1向Th2转化,机体呈现出以Th2细胞为主的优势应答。

关键词：泡球蚴 IL-17 T-bet GATA-3 ROR-γt mRNA

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辅助性T淋巴细胞17在肝囊型包虫病患者外周血中的变化

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中华传染病杂志 2010年第10期28卷 607-610页

作者：吐尔洪江·吐逊吐尔干·艾力单骄宇张雪阿尔孜古丽·吐逊刘弓伯林仁勇温浩新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫病外科乌鲁木齐830054 医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室

目的探讨肝囊型包虫病患者外周血中辅助性T淋巴细胞（Th）17的变化.方法将56例受试者分为：健康志愿者（HD）组20例,肝囊型包虫病（CE）组18例,肝囊型包虫病合并胆瘘（BF）组18例.流式细胞仪胞内染色分析法检测各组受试者外周血中Th1... 详细信息

目的探讨肝囊型包虫病患者外周血中辅助性T淋巴细胞（Th）17的变化.方法将56例受试者分为：健康志愿者（HD）组20例,肝囊型包虫病（CE）组18例,肝囊型包虫病合并胆瘘（BF）组18例.流式细胞仪胞内染色分析法检测各组受试者外周血中Th17细胞占CD4^＋T淋巴细胞比例,ELlSA检测血清Th17细胞相关细胞因子IL-17、IL-23水平.数据行t检验和Pearson相关分析.结果 CE组患者外周血Th17/CD4^＋T淋巴细胞比例为（0.23±0.11）%,明显低于BF组的（0.76±0.43）%和HD组的（0.52±0.50）%（t=2.225,t=4.077,均P＜0.05）,而BF组和HD组间差异无统计学意义（t=1.931,P＞0.05）.血清IL-17和IL-23在CE组分别为（12.1±3.7）ng/L和（84.4±46.0）ng/L,明显低于BF组的（15.5±4.1）ng/L和（138.6±37.9）ng/L（t=2.515,t=3.649,均P＜0.05）,也低于HD组的（14.8±4.4）ng/L和（138.1±48.7）ng/L（t=2.401,t=3.706,均P＜0.05）,而BF组和HD组间差异无统计学意义（t=0.534,P＞0.05）.各组血清IL-17水平与IL-23水平呈正相关（r=0.657,P＜0.05）.结论肝囊型包虫病患者外周血中Th17细胞比例明显减少,血清IL-17、IL-23水平显著降低.

关键词：棘球蚴病,肝 T淋巴细胞,辅助诱导白细胞介素17 白细胞介素23 染色与标记

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多房棘球蚴感染小鼠腹腔ST2^(+)T细胞亚群功能及其免疫检查点分子表达变化

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第6期40卷 708-716页

作者：侯昕伶李德伟施阳王茂林孜比姑·肉素阿比旦·艾尼瓦尔郑旭然康雪娇王慧李静张传山新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠腹腔ST2^(+)T细胞亚群功能及其免疫检查点分子表达的影响。方法11只BALB/c小鼠随机分为感染组(5只)、对照组(6只)。感染组每鼠经肝门静脉接种4000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量的生理盐水。感染24周... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠腹腔ST2^(+)T细胞亚群功能及其免疫检查点分子表达的影响。方法11只BALB/c小鼠随机分为感染组(5只)、对照组(6只)。感染组每鼠经肝门静脉接种4000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量的生理盐水。感染24周后小鼠腹腔内注入RPMI 1640,取腹腔内液体,离心后收集淋巴细胞,采用流式细胞术筛选小鼠腹腔不同T细胞亚群,检测生长刺激表达基因2蛋白(ST2)的表达变化,比较不同ST2^(+)T细胞亚群功能和表达免疫检查点分子杀伤细胞凝集素样受体G1(KLRG1)、淋巴细胞激活基因-3(LAG3)和程序性死亡受体-1(PD-1)的细胞比例与绝对数,及分泌细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-17A的细胞比例与绝对数。采用SPSS 25.0软件进行统计学分析,采用独立样本t检验。结果感染后24周,感染组小鼠腹腔内可见囊泡状或实体病灶,ST2^(+)CD4+T细胞绝对数为(5.06±3.06)×10^(4),记忆ST2^(+)CD4+T细胞绝对数为(4.66±3.18)×10^(4),均高于对照组的(3.31±2.77)×10^(3)和(3.27±2.77)×10^(3)(t=3.442、3.035,均P<0.05);且感染组小鼠腹腔记忆ST2^(+)CD4+T细胞比例为(22.78±6.05)%,绝对数为(4.66±3.18)×10^(4),均高于非记忆ST2^(+)CD4+T细胞比例[(6.68±1.25)%]和绝对数[(3.88±5.20)×10^(3)](t=5.830、2.962,P<0.01、0.05);感染组小鼠腹腔记忆ST2^(+)CD8+T细胞比例为(7.03±1.09)%,高于非记忆ST2^(+)CD8+T细胞的(4.10±1.57)%(t=3.417,P<0.01)。感染小鼠中表达KLRG1、LAG3和PD-1的记忆ST2^(+)CD4+T细胞绝对数分别为(2.77±1.41)×10^(3)、(5.52±3.95)×10^(3)、(6.59±3.75)×10^(3),均高于对照组的(3.66±6.42)×10^(2)、(1.67±0.72)×10^(2)、(1.69±1.49)×10^(3)(t=3.760、3.356、2.956,P<0.01、0.05、0.05)。感染组小鼠分泌IFN-γ的记忆ST2^(+)CD4+T、ST2^(+)CD8+T细胞比例为(5.48±1.33)%和(16.24±4.08)%,均低于对照组的(14.82±3.04)%和(44.70±5.31)%(t=-6.325、-9.786,均P<0.01);感染组小鼠分泌IL-4的记忆ST2^(+)CD8+T细胞比例为(13.10±3.60)%,高于对照组的(4.59±0.36)%(t=5.264,P<0.01)。结论多房棘球蚴感染小鼠腹腔T细胞和记忆T细胞表面ST2表达上调,且表达记忆ST2^(+)T细胞KLRG1、LAG3和PD-1分子的比例上调伴随IFN-γ分泌能力减弱,提示记忆ST2^(+)T细胞存在免疫功能耗竭。

关键词：多房棘球蚴小鼠腹腔细胞生长刺激表达基因2蛋白 T细胞免疫检查点

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多房棘球蚴感染小鼠脾脏巨噬细胞亚群及其极化表型的变化

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第6期39卷 771-778页

作者：侯娇温浩王明坤李文定李亮李静张传山王慧新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054

目的研究不同数量多房棘球蚴原头节感染小鼠脾巨噬细胞亚群及其极化表型的变化。方法60只C57BL/6小鼠随机分为低、中、高感染组和对照组,每组15只。低、中、高感染组每只小鼠分别经肝门静脉穿刺接种50、500和2000个多房棘球蚴原头节,对... 详细信息

目的研究不同数量多房棘球蚴原头节感染小鼠脾巨噬细胞亚群及其极化表型的变化。方法60只C57BL/6小鼠随机分为低、中、高感染组和对照组,每组15只。低、中、高感染组每只小鼠分别经肝门静脉穿刺接种50、500和2000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量的生理盐水。感染后2、12和24周,各组随机选5只小鼠摘取脾脏,称量后计算脾脏系数;分离脾淋巴细胞,采用流式细胞术检测各组小鼠脾巨噬细胞不同亚群比例和数量;提取小鼠脾淋巴细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测巨噬细胞M1和M2极化相关基因的m RNA相对转录水平,其中M1型极化相关基因为白细胞介素-1β(IL-1β)、γ干扰素(IFN-γ)、趋化因子(C-X-C基序)配体11(CXCL11)、趋化因子(C-C基序)受体7(CCR7)和CD86,M2型极化相关基因为甘露糖受体C-1型(MRC1)、抵抗素样分子α(Retnla)和精氨酸酶1(ARG1),以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参。采用SPSS 26.0软件进行统计学分析,不同时间点多组间的比较采用单因素方差分析,同一感染时间点的两两比较采用LSD法检验。结果感染后2周,高感染组小鼠脾脏质量、脾脏系数、脾淋巴细胞数量、脾巨噬细胞比例、脾巨噬细胞数量和Ly-6C高表达(Ly-6C^(high))巨噬细胞的比例分别为(157.2±22.8)mg、(0.8±0.1)%、(10.3±2.9)×10^(7)、(9.2±6.4)%、(48.9±32.7)×10^(5)和(75.8±4.6)%,均高于对照组[(75.0±18.3)mg、(0.4±0.1)%、(3.1±1.3)×10^(7)、(4.3±0.7)%、(7.7±4.1)×10^(5)、(52.1±8.4)%]、低感染组[(89.2±7.4)mg、(0.4±0.0)%、(5.4±2.3)×10^(7)、(3.0±0.9)%、(9.3±6.9)×10^(5)、(50.1±8.8)%]和中感染组[(102.6±15.2)mg、(0.5±0.1)%、(7.0±2.1)×10^(7)、(3.5±0.3)%、(13.7±3.9)×10^(5)、(60.3±8.7)%](F=22.744、23.542、9.318、3.935、6.617、11.197,P<0.05或P<0.01);Ly-6C低表达(Ly-6Clow)巨噬细胞比例(20.3±4.2)%低于对照组(39.0±7.1)%、低感染组(41.2±8.6)%和中感染组(34.2±7.1)%(F=9.157,P<0.01)。感染后12周,高感染组小鼠脾脏质量、脾脏系数、脾巨噬细胞比例、巨噬细胞数量以及Ly-6C^(high)巨噬细胞比例均高于对照组、低感染组和中感染组(F=12.730、14.173、20.380、7.943和25.838,P<0.01);Ly-6Clow巨噬细胞比例低于对照组、低感染组和中感染组(F=27.668,P<0.01)。感染后24周,高感染组小鼠脾脏质量、脾脏系数、脾淋巴细胞数量、脾巨噬细胞比例和数量均高于对照组、低感染组和中感染组(F=8.664、7.318、13.047、3.315、6.007,P<0.05或P<0.01);Ly-6C^(high)和Ly-6Clow巨噬细胞比例与对照组、低感染组和中感染组差异无统计学意义(F=3.177、2.709,P>0.05),且随着感染时间的延长,Ly-6C^(high)巨噬细胞比例逐渐降低(F=30.649,P<0.01),Ly-6Clow巨噬细胞比例逐渐升高(F=32.407,P<0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示,感染后24周,高感染组M1型极化基因CXCL11的mRNA相对转录水平(28.2±36.3)高于对照组(1.9±2.7)(t=2.243,P<0.05),CD86(0.2±0.1)低于对照组(0.5±0.3)(t=-2.255,P<0.05);M2型极化基因MRC1、Retnla和ARG1的mRNA相对转录水平(5.2±2.9、201.8±176.4、51.2±69.6)均高于对照组(1.8±1.5、0.8±0.8、1.2±0.8)(t=2.313、3.470、2.185,P<0.05)。结论感染后2周,多房棘球蚴原头节高感染组小鼠脾脏募集大量Ly-6C阳性单核来源的巨噬细胞,感染进程中Ly-6C^(high)巨噬细胞逐渐向Ly-6Clow转变,且在感染后12周和24周脾巨噬细胞以M2型为主,诱导小鼠免疫耐受,利于多房棘球蚴的慢性寄生。

关键词：多房棘球蚴病多房棘球蚴脾脏巨噬细胞极化

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寄生虫感染对类风湿性关节炎保护作用的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第1期34卷 75-79页

作者：沙地克.阿帕尔吐尔洪江.吐逊温浩新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝(移植).腹腔镜外科新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

类风湿性关节炎是影响人类健康的全球性卫生问题,其发病率不断增长。自从1870年"卫生假说"的提出,有大量实验和流行病学研究结果提示寄生虫感染可能减轻或改善类风湿性关节炎机体的病情,但其具体机制尚未明确。因此,研究寄生... 详细信息

类风湿性关节炎是影响人类健康的全球性卫生问题,其发病率不断增长。自从1870年"卫生假说"的提出,有大量实验和流行病学研究结果提示寄生虫感染可能减轻或改善类风湿性关节炎机体的病情,但其具体机制尚未明确。因此,研究寄生虫感染与类风湿性关节炎的关系具有重要意义。本文将初步探讨寄生虫感染对类风湿性关节炎的保护作用及其可能的细胞及细胞因子变化等免疫机制。

关键词：类风湿性关节炎寄生虫免疫应答

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多房棘球蚴感染晚期小鼠肝脏中NK1.1的表达对T细胞功能的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第5期42卷 594-600,607页

作者：赵涵玥李锦田薛俊隆卡力比夏提·艾木拉江林仁勇吐尔干艾力·阿吉新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫外科新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病因与防治国家重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的观察多房棘球蚴感染晚期小鼠肝T细胞的NK1.1表达变化,分析NK1.1表达对T细胞功能的影响。方法 C57BL/6N小鼠随机分为对照组和感染组。感染组小鼠经肝门静脉注射2 000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等体积生理盐水。感染后36周取肝组... 详细信息

目的观察多房棘球蚴感染晚期小鼠肝T细胞的NK1.1表达变化,分析NK1.1表达对T细胞功能的影响。方法 C57BL/6N小鼠随机分为对照组和感染组。感染组小鼠经肝门静脉注射2 000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等体积生理盐水。感染后36周取肝组织,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,天狼星红和Masson染色观察肝组织纤维化情况。收集肝淋巴细胞,流式细胞术检测小鼠肝CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞占比,并检测不同T细胞的NK1.1、颗粒酶B (GrB)、穿孔素、γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-17 (IL-17)表达变化。采用SPSS 25.0软件进行统计学分析,两组间比较采用独立样本t检验。结果感染多房棘球蚴36周后,HE染色显示感染组小鼠肝组织内可见具有生发层结构的病灶,周围出现大量炎性细胞浸润;Masson染色和天狼星红染色显示感染组小鼠肝组织纤维化明显。流式结果显示,感染组小鼠肝脏的CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞的占比分别为(32.0±6.0)%、(42.0±13.9)%,与对照组的(36.6±9.0)%、(50.2±5.2)%差异均无统计学意义(t=1.068、1.446,均P> 0.05)。感染组NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞占CD4^(+)T细胞的(30.0±14.5)%,低于对照组NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞的(69.0±10.7)%(t=5.573,P <0.01)和感染组NK1.1-CD4^(+)T细胞的(51.6±10.8)%(t=2.920,P <0.05)。感染组NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞占CD8^(+)T细胞的(22.0±12.9)%,低于对照组NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞的(43.6±5.9)%(t=3.999,P <0.01)和感染组NK1.1-CD8^(+)T细胞的(64.0±13.6)%(t=5.496,P <0.01)。感染组小鼠分泌GrB、IFN-γ和IL-17的NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞占比分别为(4.8±2.8)%、(6.8±6.0)%和(6.9±5.2)%,均低于对照组的(12.6±4.8)%、(23.6±7.3)%和(22.1±7.1)%(t=3.462、4.171、4.124,均P <0.01);分泌GrB、IFN-γ和IL-17的NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞占比分别为(1.5±0.9)%、(5.3±2.7)%和(3.7±2.3)%,均低于对照组的(6.0±2.7)%、(18.1±9.5)%和(16.9±9.3)%(t=3.861、3.196、3.361,P <0.01、0.05、0.01)。感染组分泌穿孔素的NK1.1^(+)CD4^(+)T和NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞占比分别为(3.0±1.3)%和(2.7±1.2)%,与对照组的(2.3±1.2)%和(2.1±1.6)%差异均无统计学意义(t=1.027、0.717,均P> 0.05)。感染组分泌GrB的NK1.1-CD4^(+)T细胞占比为(6.7±2.1)%,高于NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞(t=2.629,P <0.05);分泌IFN-γ的NK1.1-CD8^(+)T细胞占比为(13.7±9.2)%,高于NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞(t=2.609,P <0.05);分泌IL-17的NK1.1-CD8^(+)T细胞占比为(1.0±0.4)%,低于NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞(t=2.740,P <0.05)。结论多房棘球蚴感染晚期小鼠肝组织中NK1.1^(+)CD4^(+)T细胞、NK1.1^(+)CD8^(+)T细胞数量均减少,分泌的GrB、IFN-γ、IL-17降低,导致NK1.1^(+)T细胞呈现免疫耗竭状态。

关键词：多房棘球蚴病 NK1.1 CD4^(+)T细胞 CD8^(+)T细胞

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多房棘球蚴感染对小鼠脾脏自然杀伤细胞Tim3表达的影响

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中国血吸虫病防治杂志 2023年第4期35卷 366-373页

作者：施阳阿比旦·艾尼瓦尔李德伟孜比姑·肉素王茂林郑旭然康雪娇王慧李静张传山新疆医科大学基础医学院(新疆乌鲁木齐 830054) 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院、省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室、新疆维吾尔自治区包虫病基础医学重点实验室(新疆乌鲁木齐 830054) 新疆维吾尔自治区地方病分子生物学重点实验室新疆医科大学基础医学院(新疆乌鲁木齐 830054) 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院、省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室、新疆维吾尔自治区包虫病基础医学重点实验室(新疆乌鲁木齐 830054)

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠脾脏自然杀伤(natural killer,NK)细胞Tim3及其与免疫检查点分子2B4和LAG3共表达的影响.方法取体质量为(20±2)g的C57BL/6小鼠,随机分为高剂量感染组(15只)、低剂量感染组(13只)和对照组(11只),高、... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对小鼠脾脏自然杀伤(natural killer,NK)细胞Tim3及其与免疫检查点分子2B4和LAG3共表达的影响.方法取体质量为(20±2)g的C57BL/6小鼠,随机分为高剂量感染组(15只)、低剂量感染组(13只)和对照组(11只),高、低剂量感染组分别经肝门静脉接种2000、50个多房棘球蚴原头节,对照组经肝门静脉注射等量生理盐水.分别于感染后12、24周收集小鼠脾脏细胞,采用流式细胞术检测小鼠脾脏NK细胞Tim3表达及其与2B4和LAG3共表达水平.结果多房棘球蚴感染后12周,各组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例及其与2B4共表达比例差异有统计学意义(F = 13.559、12.465,P均<0.01);低剂量感染组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例[(23.84±2.28)%]高于高剂量感染组[(15.72±3.67)%]和对照组[(16.14±3.83)%](P均<0.01);低剂量感染组小鼠脾脏NK细胞Tim3和2B4共表达比例[(22.20±2.13)%]高于高剂量感染组[(14.17±3.81)%]和对照组[(15.20±3.77)%](P均<0.01).多房棘球蚴感染后24周,各组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例及其与2B4共表达比例差异有统计学意义(F = 5.243、4.659,P均<0.05);高剂量感染组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例[(20.55±7.04)%]、Tim3和2B4共表达比例[(20.98±7.12)%]均低于对照组[(31.38±3.19)%、(31.25±3.06)%](P均<0.05),低剂量感染组小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例[(26.80±6.47)%]、Tim3和2B4共表达比例[(26.48±6.48)%]与对照组差异均无统计学意义(P均＞0.05).感染后12、24周,各组小鼠脾脏NK细胞Tim3和LAG3共表达比例差异均无统计学意义(F = 2.283、0.375,P均＞0.05).低剂量感染组中,多房棘球蚴感染后12、24周小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例、Tim3和2B4共表达比例差异均无统计学意义(t =-1.137、-1.658,P>0.05);感染后24周,小鼠脾脏NK细胞Tim3和LAG3共表达比例较感染后12周上调(t =-5.261,P<0.01).高剂量感染组中,多房棘球蚴感染后12、24周小鼠脾脏NK细胞Tim3表达比例差异无统计学意义(t =-1.546,P>0.05);但感染后24周,小鼠脾脏NK细胞Tim3和2B4共表达比例、Tim3和LAG3共表达比例均较感染后12周小鼠上调(t =-2.425、-4.745,P均<0.05).结论 NK细胞表面Tim3表达及其与LAG和2B4共表达均受多房棘球蚴不同感染剂量及不同病程阶段影响,并在多房棘球蚴病病程中呈现出不同表型.NK细胞在多房棘球蚴感染后随病程进展形成免疫抑制表型趋势,利于多房棘球蚴免疫逃逸及慢性寄生.

关键词：多房棘球蚴脾脏细胞 Tim3 自然杀伤细胞免疫检查点

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Smad蛋白抑制剂SIS3对细粒棘球蚴原头节的作用研究

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中国病原生物学杂志 2017年第5期12卷 389-393页

作者：张静曾静李亮齐海成王超林仁勇李静新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室

目的研究Smad蛋白抑制剂SIS3对体外细粒棘球蚴原头节的影响。方法建立体外细粒棘球蚴培养体系,以不同浓度(12.5、25、50和100μmol/L)、不同作用时间(24、48、72和96h)对原头节进行药物(Smad蛋白抑制剂SIS3)干预试验,伊红染色和扫描及... 详细信息

目的研究Smad蛋白抑制剂SIS3对体外细粒棘球蚴原头节的影响。方法建立体外细粒棘球蚴培养体系,以不同浓度(12.5、25、50和100μmol/L)、不同作用时间(24、48、72和96h)对原头节进行药物(Smad蛋白抑制剂SIS3)干预试验,伊红染色和扫描及透射电镜观察不同浓度药物干预过程中原头节活力及虫体超微结构的变化。结果SIS3干预48h,50和100μmol/L SIS3组与空白对照组原头节活力显著下降;作用96h,50和100μmol/L SIS3组原头节活力分别下降(10.06±2.79)%和(19.49±2.63)%。随着药物浓度的增加,扫描电镜观察原头节体表绒毛排列紊乱,吸盘结构变形,顶突小钩脱落;透射电镜观察药物组原头节表层微毛减少或消失,合胞体带变薄,胞浆空泡化,虫体内部出现脂滴等。结论 Smad信号通路抑制剂SIS3对体外细粒棘球蚴有抑制作用,为治疗细粒棘球蚴病提供了理论基础。

关键词：细粒棘球蚴 Smad信号通路抑制剂SIS3 体外培养

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细粒棘球蚴SmadA基因的克隆及其功能的初步鉴定

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畜牧兽医学报 2011年第12期42卷 1756-1762页

作者：李静张传山吕国栋王俊华魏绪法林仁勇剡根强石河子大学动物科技学院石河子832003 新疆医科大学第一附属医院医学研究中心/新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

本研究旨在克隆细粒棘球蚴Smad蛋白家族基因EgSmadA,鉴定其结构及表达部位,并建立酵母双杂交体系。利用生物信息学方法,克隆及分析EgSmadA基因的DNA全长序列,采用免疫组化技术鉴定EgSmadA蛋白的表达及分布,并构建该基因酵母双杂交载体... 详细信息

本研究旨在克隆细粒棘球蚴Smad蛋白家族基因EgSmadA,鉴定其结构及表达部位,并建立酵母双杂交体系。利用生物信息学方法,克隆及分析EgSmadA基因的DNA全长序列,采用免疫组化技术鉴定EgSmadA蛋白的表达及分布,并构建该基因酵母双杂交载体。结果表明,成功扩增出EgSmadA基因组序列全长4 069bp,包含4个外显子和3个内含子,开放阅读框为957bp,编码318个氨基酸,该蛋白C端含有Smad蛋白家族进化高度保守的典型结构域MH2(Mad homology),并成功构建该基因及其MH2结构域的酵母双杂交载体。免疫组化定位该蛋白主要表达于原头蚴被膜及囊泡生发层。研究结果为进一步研究EgSmadA在细粒棘球蚴生长发育中的作用奠定了基础。

关键词：细粒棘球蚴 SmadA 基因克隆酵母双杂交

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泡球蚴感染对小鼠脾脏CD8^+T细胞免疫功能耗竭的影响

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中国血吸虫病防治杂志 2020年第6期32卷 591-597,604页

作者：侯昕伶李亮李玲慧李静王慧蒋铁民张瑞青邵英梅张传山新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院、省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室、新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院新疆农业大学动物医学学院新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫科

目的观察不同时间、不同剂量泡球蚴感染对小鼠脾脏CD8^+T细胞免疫功能耗竭的影响。方法采集泡球蚴原头蚴虫体,经肝门静脉建立低(50个原头蚴)、中(500个原头蚴)和高剂量(2000个原头蚴)泡球蚴感染小鼠模型,并设生理盐水对照组。于感染后... 详细信息

目的观察不同时间、不同剂量泡球蚴感染对小鼠脾脏CD8^+T细胞免疫功能耗竭的影响。方法采集泡球蚴原头蚴虫体,经肝门静脉建立低(50个原头蚴)、中(500个原头蚴)和高剂量(2000个原头蚴)泡球蚴感染小鼠模型,并设生理盐水对照组。于感染后早(2周)、中(12周)、晚期(24周)分别取小鼠脾脏,研磨分离淋巴细胞。流式细胞术检测不同实验组小鼠脾脏中记忆性CD8^+T细胞表型、免疫抑制性分子2B4表达水平,及其分泌γ⁃干扰素(IFN⁃γ)、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素⁃17A(IL⁃17A)和IL⁃10的能力。结果在感染早期,高剂量泡球蚴感染诱导小鼠脾脏CD8^+T细胞以中心记忆性表型为主,其比例为(35.50±2.00)%,显著高于对照组(25.90%±2.46%)(P<0.01);在感染晚期,中、高剂量泡球蚴感染均诱导小鼠脾脏CD8^+T细胞以效应记忆性表型为主,其比例分别为(25.70±4.12)%和(28.40±4.12)%,均显著高于对照组(10.50%±6.45%)(P均<0.05)。高剂量泡球蚴感染中期和晚期,中心记忆性CD8^+T细胞比例显著低于感染早期(P均<0.01);高剂量泡球蚴感染晚期,效应记忆性CD8^+T细胞比例显著高于感染早期和中期(P均<0.05)。低、中剂量泡球蚴感染早期,脾脏CD8^+T细胞分泌IFN⁃γ和IL⁃17A能力显著增强,而高剂量泡球蚴感染虽然促进小鼠脾脏CD8^+T细胞分泌IFN⁃γ和TNF⁃α能力,但感染晚期其分泌IFN⁃γ和TNF⁃α能力显著低于早期和中期(P均<0.05)。此外,中、高剂量泡球蚴感染晚期小鼠脾脏CD8^+T细胞表面免疫抑制性分子2B4呈高表达,其比例分别为(4.73±1.56)%和(4.94±1.90)%,均显著高于低剂量组(2.49%±0.58%)和对照组(2.92%±0.60%)(P均<0.05)。结论在低、中剂量泡球蚴感染中期和晚期,机体利用自身免疫应答能力对虫体起到杀伤和清除;而高剂量泡球蚴感染晚期可诱导小鼠脾脏CD8^+T细胞上调2B4分子表达,导致免疫耗竭,造成慢性寄生。

关键词：多房棘球蚴病泡球蚴脾脏 CD8^+T细胞免疫耗竭 2B4 小鼠

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