检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肝胆外科杂志 2021年第6期27卷 461-466页

作者：阿卜杜萨拉木·艾尼冉博蒋铁民张瑞青郭强李肖红王健张传山林仁勇邵英梅温浩吐尔干艾力·阿吉新疆医科大学第一附属医院肝胆包虫病外科新疆维吾尔自治区包虫及肝胆疾病临床医学研究中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院核医学科乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院医学影像中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室乌鲁木齐830011

人泡型棘球蚴病是由多房棘球蚴感染所致的慢性感染性疾病,主要累及肝脏,呈"恶性肿瘤样"浸润性生长。病灶的不同分型、临床分期、生物学活性、脉管侵犯情况、病理特点、患者的免疫状态等因素共同决定治疗措施的选择及相应预后... 详细信息

人泡型棘球蚴病是由多房棘球蚴感染所致的慢性感染性疾病,主要累及肝脏,呈"恶性肿瘤样"浸润性生长。病灶的不同分型、临床分期、生物学活性、脉管侵犯情况、病理特点、患者的免疫状态等因素共同决定治疗措施的选择及相应预后或转归。然而,虽然目前存在多种分型方法,但仍缺乏公认的分型方案,在很大程度上影响了规范诊疗。本研究系统回顾近20年内的国内外文献,重点分析了超声、计算机断层成像、核磁共振成像、正电子发射计算机断层显像、血清学和病理学以及部分新技术的分型方法,详细分析了各分型方法的优缺点和联系。同时提出了未来新分型方案的参照因素或理论依据,为尽早提出更优化的分型方案建立了基础。

关键词：正电子发射计算机断层显像分型方案慢性感染性疾病浸润性生长计算机断层成像核磁共振成像分型方法系统回顾

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同期联合根治性手术治疗肝肾泡型棘球蚴病10例临床分析

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中华外科杂志 2021年第1期59卷 59-65页

作者：喀斯木·艾海提阿卜杜萨拉木·艾尼艾斯卡·艾尼娃冉博蒋铁民张瑞青邵英梅温浩吐尔干艾力·阿吉新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫病外科新疆维吾尔自治区包虫及肝胆疾病临床医学研究中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学中亚高发病成因与防治国家重点实验室乌鲁木齐830011

目的探讨同期联合根治性手术治疗肝肾泡型棘球蚴病(AE)的可行性、安全性和有效性。方法回顾性分析2013年4月至2019年9月在新疆医科大学第一附属医院接受手术治疗的连续10例肝肾AE患者的临床资料,男性8例,女性2例,年龄(42.5±10.3)岁... 详细信息

目的探讨同期联合根治性手术治疗肝肾泡型棘球蚴病(AE)的可行性、安全性和有效性。方法回顾性分析2013年4月至2019年9月在新疆医科大学第一附属医院接受手术治疗的连续10例肝肾AE患者的临床资料,男性8例,女性2例,年龄(42.5±10.3)岁(范围:27~52岁)。7例曾行姑息性治疗但服药依从性差。10例均存在肝右叶和右肾的联合病灶,2例分别合并肝左外叶和左肾小病灶。病灶体积为(726.4±576.1)cm^(3)(范围:117.0~1998.0 cm^(3))。病灶侵犯右侧膈肌7例、下腔静脉7例、右肾上腺6例、腹壁2例、右侧腰大肌1例、十二指肠1例和右肺下叶2例。采用同期联合根治性手术和血管重建等方法治疗肝肾及邻近器官的AE病灶。半肝及以上肝切除8例,离体肝切除自体肝移植2例,肝部分切除1例;右肾全切除7例,右肾部分切除3例,左肾部分切除1例;清除肝肾外受侵组织器官的病灶,并进行相应修补或重建。结果手术均顺利完成。术后无肝肾功能不全。3例患者出现胸腔积液,经保守治疗后改善;1例出现右肾周围尿漏,置入双“J”管并保守治疗后改善。随访6~81个月,中位随访时间21个月,无死亡病例,无发生肝肾功能不全、急慢性肾病者。1例术后7个月时发生腹壁切口疝,接受腹腔镜疝修补术。随访中无复发,10例患者均获得临床治愈。结论采用同期联合根治性手术治疗复发性或原发性肝肾AE安全可行,可同时有效清除其他邻近器官的病灶。

关键词：棘球蚴病外科手术同期联合手术棘球蚴病,肝棘球蚴病,肾

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LAG3分子对泡球蚴感染小鼠肝脏B淋巴细胞亚群及其功能的影响

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中国人兽共患病学报 2024年第6期40卷 529-536页

作者：郑旭然邓冰清康雪娇李寅时阿比旦·艾尼瓦尔余倩孜比姑·肉素阿迪莱·多力坤王茂林王慧张传山李静新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院、省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室、新疆维吾尔自治区包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆地区高发疾病研究教育部重点实验室(新疆医科大学) 乌鲁木齐830054 新疆维吾尔自治区地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探究淋巴细胞活化基因-3(Lymphocyte activation gene-3,LAG3)分子对泡球蚴感染小鼠肝脏B淋巴细胞亚群及其功能的影响。方法将野生型(C57-wild-type, WT)和LAG3基因敲除(LAG3-knockout, LAG3-KO)小鼠经肝门静脉注射泡球蚴原头节,... 详细信息

目的探究淋巴细胞活化基因-3(Lymphocyte activation gene-3,LAG3)分子对泡球蚴感染小鼠肝脏B淋巴细胞亚群及其功能的影响。方法将野生型(C57-wild-type, WT)和LAG3基因敲除(LAG3-knockout, LAG3-KO)小鼠经肝门静脉注射泡球蚴原头节,感染12周免疫组织化学染色观察小鼠肝脏CD19和α-SMA表达及定位,流式细胞术检测小鼠肝脏B细胞及其各亚群和表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ分子的表达情况。结果泡球蚴感染12周小鼠肝脏LAG3-KO组CD19阳性区及面积占比略高于WT组,但差异均无统计学意义。α-SMA在LAG3-KO组阳性区及面积占比显著高于WT组(t=-3.224、-3.227,P均<0.05)。LAG3-KO组肝脏B细胞表达CD80和MHC-Ⅱ分子的比例显著上调,差异具有统计学意义(t=-2.379、-3.321,P均<0.05)。LAG3-KO组B2细胞占比显著高于WT组,差异有统计学意义(t=-2.695,P<0.05)。LAG3-KO组B1b细胞表达CD80比例亦显著上调,差异具有统计学意义(t=-5.315,P<0.001),而B2细胞表达CD80比例显著低于WT组,且差异具统计学意义(t=2.806,P<0.05)。LAG3-KO组B2细胞表达MHC-Ⅱ分子显著上调,且具统计学差异(t=-4.227,P<0.01)。结论泡球蚴感染中期12周,LAG3分子影响小鼠肝脏B细胞亚群及功能,并以B2型淋巴细胞尤为显著,LAG3对B细胞的活化以及MHC-Ⅱ类分子表达产生抑制作用,提示其可能参与泡球蚴感染下的B细胞耗竭。

关键词：泡球蚴淋巴细胞活化基因-3 B细胞 B细胞亚群

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泡球蚴感染C57BL/6小鼠不同阶段Ⅲ型胶原的表达及意义

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中国病原生物学杂志 2018年第4期13卷 382-386页

作者：马洋洋毕晓娟李亮张传山吕国栋杨宁林仁勇曾幼玲新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室新疆乌鲁木齐830046 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室

目的探讨Ⅲ型胶原(Col3a1)在泡球蚴感染C57BL/6小鼠早期(1月,Em-1m)和中期(3月,Em-3m)的表达变化及意义。方法采用门静脉注射法建立泡球蚴感染小鼠模型,分别于感染后1个月和3个月将小鼠处死,取肝脏,HE染色和天狼星红染色观察纤维化程度... 详细信息

目的探讨Ⅲ型胶原(Col3a1)在泡球蚴感染C57BL/6小鼠早期(1月,Em-1m)和中期(3月,Em-3m)的表达变化及意义。方法采用门静脉注射法建立泡球蚴感染小鼠模型,分别于感染后1个月和3个月将小鼠处死,取肝脏,HE染色和天狼星红染色观察纤维化程度,免疫组化检测Col3a1的表达。用60μg/ml泡球蚴蛋白体外刺激人肝星状细胞(LX-2)12h、24h、48h和72h后,qRT-PCR检测LX-2细胞中Col3a1mRNA表达水平。结果 HE染色显示泡球蚴感染组小鼠发生肝脏纤维化。天狼星红染色显示泡球蚴感染Em-1m组和Em-3m组胶原纤维阳性面积与假手术组(Sham组)比较有统计学意义(Em-1mvs Sham-1m:8.14±0.84vs 1.00±0.37;Em-3mvs Sham-3m:34.40±5.07vs1.00±0.08,P<0.01);Col3a1免疫组化检测阳性面积比值泡球蚴感染Em-1m和Em-3m组与假手术组比较有统计学意义(Em-1mvs Sham-1m:32.05±5.24vs 1.00±0.37;Em-3mvs Sham-3m:37.58±10.84vs 1.00±0.08,P<0.01)。qRT-PCR结果显示60μg/ml泡球蚴组织蛋白刺激LX-2 72h后Col3a1mRNA相对表达量为1.29±0.49,与刺激12h时的Col3a1mRNA相对表达量0.35±0.08相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论随着泡球蚴感染时间的增加,小鼠肝脏Col3a1表达逐渐增加且纤维化程度加重。

关键词：泡球蚴肝纤维化肝星状细胞 Ⅲ型胶原

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泡球蚴囊液对大鼠肝细胞TGF-βⅡ型受体及Smads信号蛋白表达的影响

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中国病原生物学杂志 2011年第5期6卷 340-343页

作者：王俊华张雪李静魏绪法周晓涛张传山吕国栋卢晓梅温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的观察泡球蚴(Em)囊液对Wistar大鼠肝细胞TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)及信号蛋白Smad2/3、Smad4及Smad7表达的影响。方法以Wistar大鼠作肝细胞供者,采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离,1×106接种于Ⅰ型胶原铺底35 mm培养皿,无血清培养... 详细信息

目的观察泡球蚴(Em)囊液对Wistar大鼠肝细胞TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)及信号蛋白Smad2/3、Smad4及Smad7表达的影响。方法以Wistar大鼠作肝细胞供者,采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离,1×106接种于Ⅰ型胶原铺底35 mm培养皿,无血清培养20 h后,以泡球蚴囊液置换培养液培养2 h,提取蛋白,Western blot检测TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)、p-Smad2/3、Smad4及Smad7在肝细胞的表达。结果 Western blot显示,泡球蚴囊液处理2 h后,大鼠肝细胞内TβRⅡ、p-Smad2/3、Smad4及Smad7分别为4.71±0.73、2.37±0.34、2.08±0.23和0.19±0.05,对照组分别为1.55±0.21、0.42±0.09、0.37±0.07和0.59±0.12,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论泡球蚴囊液对大鼠肝细胞TβRⅡ、p-Smad2/3、Smad4蛋白表达均有上调作用,而对Smad7蛋白表达具有下调作用,提示泡球蚴侵染宿主过程中通过影响TGF-/βSmads信号通路而造成宿主肝损伤。

关键词：泡球蚴囊液肝细胞 TGF-βⅡ型受体 Smads

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泡球蚴感染中期小鼠肝脏中miR-100/125b/126/122的表达变化

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中国病原生物学杂志 2013年第5期8卷 417-422页

作者：叶建蔚苗娜刘辉吕国栋刘莲王云海新疆医科大学临床医学研究院新疆重大疾病省部共建国家重点实验室培育基地新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 乌鲁木齐市第一人民医院心胸外科新疆乌鲁木齐830011

目的观察小鼠泡球蚴感染中期(3月)肝内miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的表达并探讨其意义。方法肉眼直视下穿刺小鼠肝脏,注射0.1ml泡球蚴组织匀浆液,建立泡球蚴感染小鼠模型。3个月后处死小鼠,采集肝脏标本,提取肝脏总RNA,采用RT-... 详细信息

目的观察小鼠泡球蚴感染中期(3月)肝内miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的表达并探讨其意义。方法肉眼直视下穿刺小鼠肝脏,注射0.1ml泡球蚴组织匀浆液,建立泡球蚴感染小鼠模型。3个月后处死小鼠,采集肝脏标本,提取肝脏总RNA,采用RT-qPCR法检测miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的相对表达量,预测并初步分析差异表达miRNA的靶基因。结果实验组小鼠在感染3月肝内miR-122相对表达量为6.335±1.815,是对照组的2.41倍(P<0.05);miR-100、miR-125b和miR-126相对表达量实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。预测hfe是miR-122的直接靶基因,参与肝脏铁离子代谢的调节。结论小鼠泡球蚴感染中期肝脏miR-122表达上调,推测其通过下调hfe等基因的表达影响肝脏铁离子和脂类代谢,造成肝损伤。

关键词： microRNA 泡球蚴肝损伤 RT-qPCR

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包虫病影像诊断技术和手术治疗进展

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国际医学寄生虫病杂志 2009年第5期36卷 299-306页

作者：温浩刘文亚邵英梅赵晋明宋涛吐尔干艾力·阿吉冉博新疆包虫病临床研究所、新疆包虫病基础医学研究重点实验室、新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830054

包虫病是严重危害中国西部人群的人兽共患寄生虫病，手术仍为包虫病临床最主要的治疗手段。该文通过对囊型包虫病和泡型包虫病等两型肝包虫病的影像学诊断和各种术式回顾性分析总结后，综述如下：1）超声检查主要用在两型包虫病的诊断... 详细信息

包虫病是严重危害中国西部人群的人兽共患寄生虫病，手术仍为包虫病临床最主要的治疗手段。该文通过对囊型包虫病和泡型包虫病等两型肝包虫病的影像学诊断和各种术式回顾性分析总结后，综述如下：1）超声检查主要用在两型包虫病的诊断与鉴别诊断，尤其是在农牧区进行流行病学调查和普查时，超声以其便携低耗易行的特点成为首选。近来用超声对肝两型包虫病病灶在二维超声、彩色多普勒血流成像的基础上进行灰阶超声造影检查，超声造影可以更好地显示其病灶的确切范围，周边增值带微循环血供状态，为肝包虫病外科手术提供更多的诊断治疗信息。2）囊型包虫病CT／MRI均表现为境界清楚的囊肿，病程发展中出现子囊、囊膜剥离、囊壁及内容物钙化等特征；泡型包虫病CT／MRI均表现为非均质实性肿块，内部有小圈状和颗粒状钙化，中心常出现液化坏死，形成“地图状”外观。其类似肿瘤的浸润生长可压迫和侵蚀肝血管和胆管并伴远处血行转移。MRI水成像技术对不典型包虫病有独特的诊断效果；CT／MRI血管成像和胆系成像有利于诊断包虫并发症；CT／MRI灌注技术、MRI扩散成像和波谱成像有望实现活体无创的分子影像诊断。3）肝囊型包虫病：（1）肝包虫外囊完整剥除术是理想的治疗方法，值得推广的首选术式；（2）外囊次全切除术可有效消减残腔，避免胆瘘等，能减少手术时间及外囊完整剥除术所致手术风险；（3）肝内囊摘除术仍是主要方法，术中应经胆道或胆囊管美蓝造影以确认是否胆漏。4）肝泡型包虫病：（1）根治性肝切除是治疗首选方法；（2）姑息性病灶切除手术，因继发难治性肝切面胆瘘而宜慎重采用；（3）肝移植是治疗两型包虫病终末期最后手段，术后仍存在复发的可能，需酌情服用抗包虫药，如阿苯达唑片剂或其他剂型（乳剂、脂质体口服液等）。

关键词：肝囊型包虫病肝泡型包虫病外囊完整剥除术内囊摘除术肝切除超声检查 CT检查 CT血管成像 MRI检查

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miR-1、miR-133b与肝泡型棘球蚴病患者肝纤维化的关系

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中华地方病学杂志 2023年第9期42卷 689-696页

作者：阿依努尔·艾尔肯阿卜杜艾尼·啊卜力孜塔来提·吐尔干蒋铁民古丽米拉·亚森江艾赛提·吐尔干伊力扎提·艾买提江沙衣提江·努尔买买提李锦田罗黎吐尔干艾力·阿吉省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室、新疆医科大学第一附属医院肝胆包虫病外科乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学公共卫生学院乌鲁木齐830054 新疆维吾尔自治区包虫及肝胆疾病临床医学研究中心乌鲁木齐830054

目的探讨肝泡型棘球蚴病患者肝纤维化与微小核糖核酸(microRNA,miR)-1、miR-133b的相关性。方法选择2020年10月至2021年4月在新疆医科大学第一附属医院明确诊断为肝泡型棘球蚴病(9例)、肝硬化(9例)、肝细胞癌(5例)患者作为研究对象,并... 详细信息

目的探讨肝泡型棘球蚴病患者肝纤维化与微小核糖核酸(microRNA,miR)-1、miR-133b的相关性。方法选择2020年10月至2021年4月在新疆医科大学第一附属医院明确诊断为肝泡型棘球蚴病(9例)、肝硬化(9例)、肝细胞癌(5例)患者作为研究对象,并以同期健康志愿者为对照(10例),采集所有对象外周血样本制备血浆,经实时荧光定量PCR法检测外周血miR-1、miR-133b表达量;同时,自5例肝泡型棘球蚴病患者采集肝脏病灶周围组织(近端)、距病灶约5 cm处相应组织(远端),并采用免疫组织化学染色法检测肝泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近、远端的细胞活化相关指标[细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)],纤维化指标[Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅠ、CollagenⅢ)],转化生长因子β1(TGF-β1)信号通路相关基因[TGF-β1,Ⅰ、Ⅱ型转化生长因子β1受体(TGF-β1RⅠ、TGF-β1RⅡ)]及其下游相关蛋白(SMAD2、SMAD3)表达情况。结果实时荧光定量PCR结果显示,肝泡型棘球蚴病、肝硬化、肝细胞癌和对照组人群外周血miR-1、miR-133b表达水平比较,差异均有统计学意义(H=16.54、28.40,均P<0.001);其中,肝泡型棘球蚴病组miR-1、miR-133b表达水平均高于对照组、肝硬化组(均P<0.05)。肝泡型棘球蚴病患者病灶近端和远端CDK1(0.46±0.02、0.42±0.01),α-SMA(0.54±0.09、0.51±0.07),TGF-β1(0.55±0.15、0.51±0.13),TGF-β1RⅠ(0.58±0.09、0.57±0.08),TGF-β1RⅡ表达水平(0.40±0.05、0.39±0.05)比较,差异均有统计学意义(t=5.56、3.17、3.18、4.27、5.65,P=0.005、0.034、0.034、0.024、0.011);CyclinD1、CollagenⅠ、CollagenⅢ、SMAD2、SMAD3表达水平比较,差异均无统计学意义(t=3.06、3.06、2.86、1.43、1.50,P=0.055、0.055、0.064、0.247、0.230)。Pearson相关分析结果显示,肝泡型棘球蚴病患者外周血miR-1与肝脏病灶近端TGF-β1RⅠ表达水平呈正相关(P=0.001);miR-1、miR-133b与CDK1、α-SMA、TGF-β1、TGF-β1RⅡ表达水平均无相关性(均P>0.05)。结论肝泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端TGF-β1信号通路相关因子表达上调;外周血miR-1和miR-133b表达上调,且miR-1与肝脏病灶近端TGF-β1RⅠ表达水平呈正相关,提示miR-1可能促进肝泡型棘球蚴病肝纤维化发生。

关键词：棘球蚴病,肝肝纤维化微小核糖核酸

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泡球蚴感染BALB/c小鼠肝脏TGF-β1表达的动态变化

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中国病原生物学杂志 2009年第12期4卷 901-903,F0004页

作者：牵瑶刘辉卢晓梅吕国栋谢文娟王俊华王红丽温浩丁剑冰林仁勇新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830054

目的观察泡球蚴感染BALB/c小鼠肝脏转化生长因子β1(TGF-β1)的动态变化。方法将60只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,肉眼直视下肝脏穿刺感染泡球蚴。分别于感染后2 d8、d、4周、12周、24周、36周采取小鼠肝脏组织,通过HE和Masson染... 详细信息

目的观察泡球蚴感染BALB/c小鼠肝脏转化生长因子β1(TGF-β1)的动态变化。方法将60只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,肉眼直视下肝脏穿刺感染泡球蚴。分别于感染后2 d8、d、4周、12周、24周、36周采取小鼠肝脏组织,通过HE和Masson染色观察小鼠肝脏病理改变,免疫组织化学法观察泡球蚴感染不同阶段的TGF-β1动态变化。结果泡球蚴感染小鼠肝脏汇管周围出现炎细胞浸润、脂肪变性、坏死、钙化和肝泡球蚴纤维囊壁形成等多种病理改变;TGF-β1表达水平呈先升高再下降趋势,感染4周、12周、24周、36周时的阳性率分别为(1.44±3.22)%、(18.83±4.03)%(、9.44±4.71)%和(8.13±3.65)%,其中感染12周和36周与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论泡球蚴感染BALB/c小鼠TGF-β1表达上调,可能与感染小鼠肝纤维化的发展有关。

关键词：泡球蚴 BALB/c小鼠肝脏 TGF-β1 动态变化

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转化生长因子β1刺激改良培养小鼠原代肝星状细胞的活化

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中国组织工程研究 2015年第51期19卷 8234-8240页

作者：毕晓娟张传山李亮吕国栋林仁勇新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地新疆包虫病基础医学重点实验室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011

背景:肝星状细胞是肝内分泌细胞外基质的关键细胞类型,因此在肝纤维化研究中很重要。目的:实验改良了肝星状细胞原代培养方法,获得充足的细胞量,用转化生长因子β1刺激活化,研究致纤维化的相关因子表达情况。方法:氯胺酮麻醉小鼠后采用... 详细信息

背景:肝星状细胞是肝内分泌细胞外基质的关键细胞类型,因此在肝纤维化研究中很重要。目的:实验改良了肝星状细胞原代培养方法,获得充足的细胞量,用转化生长因子β1刺激活化,研究致纤维化的相关因子表达情况。方法:氯胺酮麻醉小鼠后采用门静脉穿刺原位灌注肝脏的方法分离肝脏,采用密度梯度离心获得肝星状细胞,利用形态学、免疫荧光染色等方法对原代肝星状细胞进行鉴定;将培养24 h肝星状细胞用质量浓度10μg/L转化生长因子β1刺激48 h,同时设PBS组进行对比。结果与结论:通过原位灌注肝脏并且酶消化的方法可以成功获得小鼠原代肝星状细胞,并且锥虫蓝染色活率为(97.2±0.8)%,免疫荧光染色纯度为(90.4±1.2)%,细胞计数总量约2.5×106/只。实时荧光定量聚合酶链式反应检测显示,与PBS组比较,转化生长因子β1刺激组的肝星状细胞平滑肌肌动蛋白α、Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2 mR NA表达水平明显升高(P<0.05)。结果证实,实验采用的改良的培养方法可更高效高质量的获得原代肝星状细胞,转化生长因子β1刺激可导致肝星状细胞活化,分泌致纤维化因子。

关键词：组织工程肝细胞转化生长因子β1 组织构建肝星状细胞肝纤维化原代培养分离鉴定胶原蛋白平滑肌肌动蛋白α 国家自然科学基金

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