检索结果-内蒙古大学图书馆

新疆医科大学学报 2011年第3期34卷 246-250页

作者：古力帕丽.麦曼提依明马海梅陈洁陈璐吾拉木.马木提新疆医科大学基础医学院病原学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室新疆乌鲁木齐830011

目的构建pET32a-AgB8/1原核表达载体,并对其重组蛋白进行原核细胞表达。方法从细粒棘球绦虫原头蚴中提取总RNA,反转录生成cDNA,以此cDNA为模板用基因特异性引物扩增EgAgB8/1基因编码其分泌型多肽的片段,经测序后,以此基因片段为依据,人... 详细信息

目的构建pET32a-AgB8/1原核表达载体,并对其重组蛋白进行原核细胞表达。方法从细粒棘球绦虫原头蚴中提取总RNA,反转录生成cDNA,以此cDNA为模板用基因特异性引物扩增EgAgB8/1基因编码其分泌型多肽的片段,经测序后,以此基因片段为依据,人工合成合成EgAgB8/1抗原编码核酸序列,将其克隆至pUCm-T载体,测序鉴定其正确性。通过对pUCm-T/AgB8/1重组质粒进行双酶切,将获得的AgB8/1抗原编码核酸序列用定向克隆技术克隆至原核表达质粒pET32a上,测序鉴定插入片段正确性后,转化至*** BL21(DE3)Lys S,IPTG初步诱导表达pET32a-AgB8/1重组蛋白。用SDS-PAGE电泳分析鉴定重组蛋白的表达水平。结果测序表明,AgB8/1抗原编码核酸序列正方向插入至pET32a质粒。SDS-PAGE电泳分析显示,IPTG诱导后重组蛋白得到成功表达,在相对分子量约28 kDa处有表达条带。结论本研究成功构建了pET32a-AgB8/1原核表达质粒,并初步诱导表达出AgB8/1重组蛋白,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础。

关键词：细粒棘球绦虫 AgB8/1重组抗原原核表达质粒

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慢性肝囊型包虫病患者外周血单核细胞的表型及其功能状态研究

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中国病原生物学杂志 2011年第12期6卷 898-902页

作者：单骄宇李海涛吐尔洪江.吐逊张雪李亮林仁勇温浩新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫外科

目的探讨慢性肝囊型包虫持续感染患者外周血单核细胞的亚群组成及其功能状态。方法囊型包虫病患者(CE组)和健康者(NC组)各15例,采集外周血单核细胞(PBMC)后分成两部分,一部分应用流式细胞术分析其表面CD14、CD16的阳性表达率;另一部分... 详细信息

目的探讨慢性肝囊型包虫持续感染患者外周血单核细胞的亚群组成及其功能状态。方法囊型包虫病患者(CE组)和健康者(NC组)各15例,采集外周血单核细胞(PBMC)后分成两部分,一部分应用流式细胞术分析其表面CD14、CD16的阳性表达率;另一部分分为未干预组和重组抗原B(rAgB)干预组,干预后ELISA法检测上清中IFN-γ、IL-12p70、IL-10、IL-4的浓度。结果 PBMC占外周血白细胞的比例在CE组、NC组分别为(13.42±3.90)%和(6.23±1.39)%,差异有统计学意义(t=6.17,P<0.05);CD14阳性表达率分别为(19.90±6.96)%和(45.61±14.25)%,差异有统计学意义(t=6.28,P<0.05);CD16阳性表达率分别为(22.75±8.99)%和(22.83±6.77)%,差异无统计学意义(t=0.03,P>0.05)。除NC组rAgB干预后的IL-4与未干预对照相比差异无统计学意义外,来源于NC组、CE组rAgB干预后的4种细胞因子浓度与未干预对照相比差异均有统计学意义(P均<0.05)。CE组与NC组相比,rAgB干预下的IFN-γ、IL-12p70及IL-10的浓度差异均有统计学意义(t值分别为2.580,2.745,2.213,P值均<0.05),IL-4浓度差异无统计学意义(t=0.722,P>0.05)。结论慢性CE患者PBMC的CD14低表达致使单核细胞未能达到成熟状态,影响其分化能力,同时联合细粒棘球绦虫主要抗原成分的作用使机体倾向于Th2型反应,是囊型包虫病慢性感染引起机体免疫低下的重要因素。

关键词：囊型包虫病外周血单核细胞(PBMCs) 细胞表型免疫低下

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新疆细粒棘球蚴免疫诊断抗原B亚单位3基因的克隆及序列分析

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新疆医科大学学报 2011年第3期34卷 236-239页

作者：马海梅陈洁古力帕丽.麦曼提依明陈璐丁剑冰吾拉木.马木提新疆医科大学基础医学院病原学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院寄生虫教研室新疆乌鲁木齐830011

目的确定细粒棘球蚴抗原B亚单位3(EgAgB8/3)的特性并为研究其免疫功能奠定基础。方法根据已报道的编码EgAgB8/3的基因序列(AF362442)设计引物,进行基因扩增,利用DNAstarProtean软件对该抗原进行分析。结果成功克隆到EgAgB8/3基因,扩增... 详细信息

目的确定细粒棘球蚴抗原B亚单位3(EgAgB8/3)的特性并为研究其免疫功能奠定基础。方法根据已报道的编码EgAgB8/3的基因序列(AF362442)设计引物,进行基因扩增,利用DNAstarProtean软件对该抗原进行分析。结果成功克隆到EgAgB8/3基因,扩增片段为207 bp;序列比对结果显示,新疆细粒棘球蚴EgAgB8/3基因与GenBank登录号为AF362442序列完全一致,同源性为100%。对该抗原分析认为具有潜在的抗原表位位点。结论细粒棘球蚴EgAgB8/3在对包虫病的免疫诊断上是较好的候选抗原,并为研究该蛋白的免疫功能及建立以EgAgB8/3抗原为主的包虫病终末宿主免疫诊断方法奠定了基础。

关键词：细粒棘球蚴抗原B8/3 聚合酶链反应(PCR)

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犬细粒棘球绦虫感染LAMP检出日期的确定

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中国病原生物学杂志 2011年第11期6卷 813-815,809页

作者：陈璐吾拉木.马木提陈洁古力帕丽.麦曼提依明新疆医科大学基础医学院自治区病原生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室

目的确定犬细粒棘球绦虫感染环介导等温扩增技术(LAMP)最早检出日期。方法家犬8只,口服喂饲细粒棘球绦虫原头节,建立细粒棘球绦虫感染动物模型。感染后40d收集犬粪,用LAMP检测粪便中细粒棘球绦虫目的基因并与传统的PCR比较。结果 8只犬... 详细信息

目的确定犬细粒棘球绦虫感染环介导等温扩增技术(LAMP)最早检出日期。方法家犬8只,口服喂饲细粒棘球绦虫原头节,建立细粒棘球绦虫感染动物模型。感染后40d收集犬粪,用LAMP检测粪便中细粒棘球绦虫目的基因并与传统的PCR比较。结果 8只犬均获得细粒棘球绦虫感染,感染后第18dLAMP法检查犬粪中细粒棘球绦虫目的基因均阳性,较普通PCR法提早2d。结论 LAMP法简便、快捷、灵敏,有望成为早期诊断犬细粒棘球绦虫感染的重要手段。

关键词：细粒棘球绦虫环介导等温扩增 cox1基因检测

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多房棘球绦虫原头蚴对体外培养宿主肝细胞MAPK信号通路影响的初步研究

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中国病原生物学杂志 2011年第8期6卷 574-577,608页

作者：张传山李朝旺范金亮李静吕国栋王俊华卢晓梅温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院省部共建新疆重大疾病医学国家重点实验室培育基地新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球绦虫原头蚴对体外培养宿主肝细胞丝裂素活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法采用宿主大鼠肝细胞BRL3A和人源肝癌细胞系HepG2,分别与多房棘球绦虫原头蚴体外无血清共培养。实验组... 详细信息

目的探讨多房棘球绦虫原头蚴对体外培养宿主肝细胞丝裂素活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法采用宿主大鼠肝细胞BRL3A和人源肝癌细胞系HepG2,分别与多房棘球绦虫原头蚴体外无血清共培养。实验组(与多房棘球绦虫原头蚴共培养)每瓶细胞接种约3×103个原头蚴;处理组(U0126)每瓶细胞先用20μmol/L U0126处理3 h,再接种约3×103个原头蚴,继续共培养,分别在12、24、48、72、96和120 h收集细胞,同时收集对照组(无血清培养基)细胞。利用免疫印迹技术(Western blot)检测p-ERK1/2、p-p38和p-JNK的变化。结果在48 h,肝细胞BRL3A共培养组p-ERK1/2表达活性与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),在12、24和48 h,p-JNK和p-p38表达活性分别有微弱升高;在72和96 h肝细胞HepG2共培养组p-ERK1/2表达活性与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),p-JNK和p-p38表达活性无明显变化;U0126处理组p-ERK1/2活性受抑制。结论多房棘球绦虫原头蚴可能自身分泌细胞因子EmIns、EmBMP1/2、EmAct或egfd,通过与宿主表面受体结合激活宿主肝细胞MAPK信号通路。

关键词：多房棘球绦虫原头蚴肝细胞 MAPK

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细粒棘球绦虫抗原B8kDa亚单位在虫体发育过程中的阶段性表达研究

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新疆医科大学学报 2011年第3期34卷 231-235页

作者：张海涛陈璐马海梅马秀敏吾拉木.马木提新疆医科大学基础医学院病原学教研室新疆乌鲁木齐830011 梅州市嘉应医学院附属医院广东梅州514031 新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室新疆乌鲁木齐830011

目的研究细粒棘球绦虫抗原B(EgAgB)8 kDa亚单位基因家族成员(EgAgB8/1、EgAgB8/2、EgAgB8/3、EgAgB8/4、EgAgB8/5)在虫体发育各阶段(虫卵、棘球蚴生发层、原头蚴及成虫)基因表达的差异,为包虫感染中间宿主和终末宿主的免疫学诊断筛选期... 详细信息

目的研究细粒棘球绦虫抗原B(EgAgB)8 kDa亚单位基因家族成员(EgAgB8/1、EgAgB8/2、EgAgB8/3、EgAgB8/4、EgAgB8/5)在虫体发育各阶段(虫卵、棘球蚴生发层、原头蚴及成虫)基因表达的差异,为包虫感染中间宿主和终末宿主的免疫学诊断筛选期特异性优势表达抗原。方法分别从细粒棘球绦虫成虫、虫卵、原头蚴和棘球蚴生发层提取总RNA,用Avian Myeloblastosis Virus Reverse Transcriptase XL(TaKaRa,Japan)反转录成cDNA,根据EgAgB 5个亚单位(EgAgB8/1、EgAgB8/2、EgAgB8/3、EgAgB8/4、EgAgB8/5)序列设计跨越内含子的基因特异性引物。基因表达差异应用SYBR Green I荧光实时定量PCR(Real-ti me PCR)技术进行定量分析,并用内参对照基因actin II来标准化定量结果。结果荧光实时定量PCR结果分析,EgAgB8/1和EgAgB8/2在棘球蚴生发层大量表达(表达量为68.874和16.258),EgAgB8/3和EgAgB8/5在成虫阶段有大量表达(表达量分别为1 905.512和180.315),EgAgB8/4在成虫、虫卵和原头蚴中的表达量分别为0.001、0.088和0.102,均较棘球蚴生发层表达量(3.576)低。结论 EgAgB 5个亚单位的基因表达在虫体发育各个阶段显现出明显差异。EgAgB8/1和EgAgB8/2可作为包虫感染中间宿主免疫学诊断最佳候选目的抗原,而EgAgB8/3可作为包虫感染终末宿主免疫学诊断的靶抗原。EgAgB 5个亚单位的阶段差异表达可能与其虫体发育不同阶段特有的生物学功能有关,有待进一步研究。

关键词：细粒棘球绦虫抗原B 荧光定量PCR 基因表达

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肝包虫病诊断和手术治疗新进展

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中华消化外科杂志 2011年第4期10卷 290-292页

作者：温浩新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫外科新疆包虫病临床研究所、新疆包虫病基础医学研究重点实验室乌鲁木齐830054

包虫病又名棘球蚴病，是一种古老的人畜共患性寄生虫病，世界性分布，中国西部属高发地区。人体包虫病主要分为两型，即囊型包虫病和泡型包虫病。近代诊断学和外科学发展迅猛，包虫病的诊断和治疗取得了巨大的进步。本文通过总结1956年... 详细信息

包虫病又名棘球蚴病，是一种古老的人畜共患性寄生虫病，世界性分布，中国西部属高发地区。人体包虫病主要分为两型，即囊型包虫病和泡型包虫病。近代诊断学和外科学发展迅猛，包虫病的诊断和治疗取得了巨大的进步。本文通过总结1956年至2010年我院收治的8070例包虫病患者临床诊断和治疗经验以及分析多次大规模包虫病普查结果，旨在介绍肝包虫病的诊断和治疗新进展。

关键词：肝囊型包虫病肝泡型包虫病诊断外科治疗

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根治性及准根治性手术治疗终末期肝泡型包虫病

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中华消化外科杂志 2011年第4期10卷 296-298页

作者：邵英梅蒋铁民吐尔干艾力·阿吉冉博温浩新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫外科乌鲁木齐830054 新疆包虫病临床研究所、新疆包虫病基础医学研究重点实验室

目的比较根治性及准根治性手术治疗侵犯肝周重要血管及脏器的终末期肝泡型包虫病的临床疗效。方法回顾性分析2002年1月至2010年1月新疆医科大学第一附属医院收治的41例肝泡型包虫病患者的临床资料。根据是否对重要血管行重建修补，将患... 详细信息

目的比较根治性及准根治性手术治疗侵犯肝周重要血管及脏器的终末期肝泡型包虫病的临床疗效。方法回顾性分析2002年1月至2010年1月新疆医科大学第一附属医院收治的41例肝泡型包虫病患者的临床资料。根据是否对重要血管行重建修补，将患者分为根治性手术组（13例）和准根治性手术组（28例），比较两组患者手术时间、出血量、住院时间、病灶复发及转移、胸腔及腹腔积液、胆道并发症及死亡情况。计量资料采用t检验，计数资料采用X^2检验。结果根治性手术组和准根治性手术组患者的出血量、住院时间、病灶复发及转移、梗阻性黄疸和远期死亡例数分别为（326±115）ml、（22±18）d、0、0、0例和（24±20）rnl、（15±12）d、10、10、10例，两组比较，差异有统计学意义（t=13．41，1.47，X^2=4．36，4．36，4．36，P〈0．05）。根治性手术组和准根治性手术组患者手术时间、胸腔及腹腔积液、术后胆汁漏、胆管炎及围手术期死亡例数分别为（407±146）min、4、0、1、1例和（263±93）min、2、2、2、1例，两组比较，差异无统计学意义（t=3．81，X^2=2．30，0．04，0．34，0．04，P〉0．05）。结论根治性手术是重要血管受侵犯但经修整后可达到重建条件的肝泡型包虫病患者的首选治疗方法。准根治性手术有避免伤及大血管，手术风险相对较小的优点。

关键词：肝泡型包虫病肝切除术手术治疗

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细粒棘球蚴14-3-3与MKK2酵母双杂交载体的构建及自激活鉴定

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中国病原生物学杂志 2011年第12期6卷 894-897,F0002页

作者：范金亮邵英梅李静李朝旺张传山吕国栋李亮王俊华温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的构建细粒棘球幼(Eg)14-3-3与MKK2酵母双杂交系统,并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。方法从Eg cDNA中扩增Eg14-3-3基因和EgMKK2编码序列,将其克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中,经PCR、限制性酶切鉴定及序列测定正确后,PEG... 详细信息

目的构建细粒棘球幼(Eg)14-3-3与MKK2酵母双杂交系统,并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。方法从Eg cDNA中扩增Eg14-3-3基因和EgMKK2编码序列,将其克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中,经PCR、限制性酶切鉴定及序列测定正确后,PEG/LiAc法转化酵母菌株,检测融合蛋白对酵母菌生长的影响和自激活活性。结果扩增Eg14-3-3和EgMKK2基因编码区全长分别为749bp和1 572bp。构建的pGBKT7-Eg14-3-3及pGADT7-EgMKK2重组质粒转化到酵母细胞Y2HGold中,检测表达蛋白对Y2HGold无毒性及自激活作用。结论 Eg14-3-3基因和EgMKK2编码序列表达的蛋白对酵母菌Y2HGold无毒性和自激活作用,为进一步运用酵母双杂交技术筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础。

关键词： Eg14-3-3基因 EgMKK2基因酵母双杂交自激活

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109例肝囊型包虫病破入腹腔的诊断与治疗

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中华消化外科杂志 2011年第4期10卷 293-295页

作者：吐尔干艾力·阿吉邵英梅蒋铁民戴季彭冉博温浩新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫外科乌鲁木齐830054 新疆包虫病临床研究所、新疆包虫病基础医学研究重点实验室

目的探讨肝囊型包虫病破入腹腔的诊断和治疗方法。方法回顾性分析1994年1月至2009年12月新疆医科大学第一附属医院收治的109例肝囊型包虫病破入腹腔患者的临床资料。根据流行病学史、典型临床表现、典型影像学特征和血清免疫学检查结果... 详细信息

目的探讨肝囊型包虫病破入腹腔的诊断和治疗方法。方法回顾性分析1994年1月至2009年12月新疆医科大学第一附属医院收治的109例肝囊型包虫病破入腹腔患者的临床资料。根据流行病学史、典型临床表现、典型影像学特征和血清免疫学检查结果进行诊断。根据不同手术方式将108例行手术治疗的患者分为传统组（传统内囊摘除，67例）和改良组（改良内囊摘除，41例），比较两组患者手术时间、术中出血量、术后平均住院时间、术后带管引流时间、术后残腔并发症、胸腔积液、包虫原位复发、腹腔播散种植、死亡等情况。计量资料采用t检验，组间率的比较采用X^2检验。结果超声、CT、MRI检查确诊率分别为93％（101／109）、99％（70／71）、7／7；血清免疫学检查阳性率为100％（61／61）。109例肝囊型包虫病破入腹腔患者中，1例因过敏性休克经抢救无效死亡，其余生存。传统组和改良组患者手术时间、术中出血量分别为（3．2±0．3）h、（104．0±11．5）ml和（3．3±0．4）h、（110．0±23．8）ml，两组比较，差异无统计学意义（t=-1．474，-1．758，P〉0．05）；术后平均住院时间、术后带管引流时间分别为（15．3±4．3）d、（28．0±4．6）d和（9．3±1．2）d、（7．6±0．8）d，两组比较，差异有统计学意义（t=8．628，28．088，P〈0．05）。传统组患者术后残腔积液、残腔感染、胆汁漏、包虫原位复发、腹腔播散种植发生率均显著高于改良组（X^2=4．335，3．888，5．691，4．581，10．153，P〈0．05）。确诊包虫原位复发或严重并发症再次手术患者2l例。结论流行病学史、典型临床表现、典型影像学特征和血清免疫学检查对于肝囊型包虫病破人腹腔的诊断具有重要作用；改良内囊摘除术＋高渗盐水反复冲洗腹腔＋术后正规服用抗包虫药物是目前肝囊型包虫病破入腹腔较理想的治疗方式。

关键词：肝囊型包虫病破入腹腔诊断治疗

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