检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2021年第3期16卷 282-286页

作者：马文梅毕晓娟杨宁柯颖李亮刘辉吕国栋孙立林仁勇新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室

目的探讨泡球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)蛋白对小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose Tissue-Derived Stromal Cells, ADSCs)迁移能力、向血管内皮细胞分化能力和细胞增殖能力的影响。方法从小鼠腹股沟脂肪组织中提取和培养ADSCs,采... 详细信息

目的探讨泡球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)蛋白对小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose Tissue-Derived Stromal Cells, ADSCs)迁移能力、向血管内皮细胞分化能力和细胞增殖能力的影响。方法从小鼠腹股沟脂肪组织中提取和培养ADSCs,采用P3代ADSCs,培养基添加5μg/ml Em蛋白处理作为实验组,常规培养基处理ADSCs作为阴性对照组,培养基添加10 ng/ml PDGF-BB处理ADSCs作为阳性对照组。通过Transwell试验、CCK8试验、血管形成试验分别确定Em蛋白对ADSCs迁移能力、增殖能力、向血管内皮细胞分化能力的影响。结果分离获得的C57BL/6小鼠ADSCs细胞具有向脂肪细胞(油红O染色)、骨细胞(茜素红)分化的能力。5μg/ml Em蛋白可提高ADSCs的迁移能力,实验组和阴性对照组迁移细胞数(279.33±34.20)个和(134.27±21.98)个,差异有统计学意义(P均<0.01)。Em蛋白处理可增强ADSCs向血管内皮分化能力,分化后形成血管网的交叉点数(644.86±52.72)个,对照组为(528.60±80.75)个,差异有统计学意义(P<0.05);血管总长度(1225.14±146.42)μm,与对照组(1372.95±101.97)μm比较差异无统计学意义(P>0.05)。Em蛋白处理ADSCs 48h A450值为(0.87±0.16),对照组为(0.74±0.12),96 h A450值为(1.34±0.12),对照组为(1.33±0.19),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Em蛋白可显著提高ADSCs的迁移能力和向血管内皮细胞分化的能力,该研究为探索ADSCs移植修复泡球蚴感染所致的肝损伤提供了实验基础。

关键词：泡球蚴脂肪间充质干细胞迁移血管新生

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新疆和布克赛尔蒙古自治县人群和羊群肝包虫病现场筛查报告

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中华流行病学杂志 2013年第12期34卷 1176-1178页

作者：李海涛宋涛段新宇齐新伟冯晓辉王云海温浩新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫外科乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心超声科乌鲁木齐830011 新疆重大疾病医学重点实验室一省部共建闰家重点实验室培育基地及新疆包虫病基础医学重点实验室

目的了解新疆和布克赛尔县人群和羊群肝包虫病感染情况，以评价包虫病防控措施。方法在和布克赛尔县采用现患筛查的抽查方法，以肝包虫病超声声像图特征作为诊断标准，现场筛查人群和羊群肝包虫病，并比较分析不同筛查点患病情况。结果... 详细信息

目的了解新疆和布克赛尔县人群和羊群肝包虫病感染情况，以评价包虫病防控措施。方法在和布克赛尔县采用现患筛查的抽查方法，以肝包虫病超声声像图特征作为诊断标准，现场筛查人群和羊群肝包虫病，并比较分析不同筛查点患病情况。结果超声声像图显示，人群肝包虫病检出率为4．4％（23／521），囊性包虫病检出率为4．0％（21／521），泡性包虫病检出率为0．8％（4／521），羊群感染率为3．8％（7／180）。5个筛查点中查十库勒乡人群和羊群感染率最高，人群检出率与其他各筛查点相比差异无统计学意义，羊群检出率与巴音傲瓦乡相比差异有统计学意义（x2=4．8259，P=O．0280），作为包虫病中间宿主绵羊的感染率高于人群。结论和布克赛尔县人群和羊群肝包虫病仍呈高流行趋势。

关键词：棘球蚴病包虫病超声检查

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细粒棘球蚴SmadA基因的克隆及其功能的初步鉴定

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畜牧兽医学报 2011年第12期42卷 1756-1762页

作者：李静张传山吕国栋王俊华魏绪法林仁勇剡根强石河子大学动物科技学院石河子832003 新疆医科大学第一附属医院医学研究中心/新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

本研究旨在克隆细粒棘球蚴Smad蛋白家族基因EgSmadA,鉴定其结构及表达部位,并建立酵母双杂交体系。利用生物信息学方法,克隆及分析EgSmadA基因的DNA全长序列,采用免疫组化技术鉴定EgSmadA蛋白的表达及分布,并构建该基因酵母双杂交载体... 详细信息

本研究旨在克隆细粒棘球蚴Smad蛋白家族基因EgSmadA,鉴定其结构及表达部位,并建立酵母双杂交体系。利用生物信息学方法,克隆及分析EgSmadA基因的DNA全长序列,采用免疫组化技术鉴定EgSmadA蛋白的表达及分布,并构建该基因酵母双杂交载体。结果表明,成功扩增出EgSmadA基因组序列全长4 069bp,包含4个外显子和3个内含子,开放阅读框为957bp,编码318个氨基酸,该蛋白C端含有Smad蛋白家族进化高度保守的典型结构域MH2(Mad homology),并成功构建该基因及其MH2结构域的酵母双杂交载体。免疫组化定位该蛋白主要表达于原头蚴被膜及囊泡生发层。研究结果为进一步研究EgSmadA在细粒棘球蚴生长发育中的作用奠定了基础。

关键词：细粒棘球蚴 SmadA 基因克隆酵母双杂交

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骨形态发生蛋白Ⅰ型受体抑制剂LDN-212854对多房棘球蚴原头节的体外作用研究

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中国病原生物学杂志 2021年第11期16卷 1280-1284页

作者：李静李德伟李亮施阳侯昕伶王慧张传山新疆医科大学基础医学院生理教研室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室新疆医科大学基础医学院生物学教研室

目的探讨骨形态发生蛋白Ⅰ型受体(bone morphogenetic protein typeⅠreceptor,BMPRⅠ)新型抑制剂LDN-212854对多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)原头节的体外作用。方法建立体外培养多房棘球蚴体系,随机设置空白对照组(RPMI 1640)、DMSO溶剂对照组(RPMI 1640+DMSO)及药物干预组(RPMI+DMSO+LDN-212854),其中药物干预组又设1、50及100μmol/L LDN-212854三个浓度梯度,分别与原头节共培养3、6、9、12 d。伊红染色与扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察各干预组虫体存活率,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察虫体病理形态变化。结果各时间段空白对照组与DMSO对照组原头节存活率比较差异无统计学意义(P>0.05);50μmol/L与100μmol/L LDN-212854组干预6 d原头节无存活,与DMSO组比较差异有统计学意义(P<0.01);1μmol/L LDN-212854组干预3 d和6 d原头节存活率分别为(84.85±2.77)%、(82.92±0.59)%,显著低于以往实验中1μmol/L LDN-193189组的(99.75±0.35)%和(99.11±0.22)%(P<0.01);1、50、100μmol/L LDN-212854组干预12 d原头节存活率分别为(38.05±1.29)%、0和0,与DMSO组存活率(98.31±0.14)%比较差异有统计学意义(P<0.01)。随LDN-212854浓度的增加,药物干预组原头节较空白对照及DMSO组HE染色变深、体积变小;SEM显示虫体体表结构改变,主要表现为顶突变形、头部固缩、内部结构暴露以及微绒毛成簇聚集。结论BMPR I新型抑制剂LDN-212854体外抗多房棘球蚴效应较LDN-193189强,低浓度下即有杀伤作用,为新型药物研发奠定了理论基础。

关键词：多房棘球蚴 BMP信号通路抑制剂LDN-212854 体外培养

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泡球蚴组织蛋白处理对人肝星状细胞α-SMA和COL1A1表达及TGF-β/Smad信号通路的影响

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中国病原生物学杂志 2017年第10期12卷 956-960页

作者：毕晓娟张传山李亮马洋洋吕国栋吐尔干·艾力邵英梅林仁勇新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝胆包虫外科

目的探讨泡球蚴组织蛋白在肝星状细胞活化中的作用。方法用不同浓度泡球蚴组织蛋白体外刺激人肝星状细胞,以PBS处理作为阴性对照,TGF-β1处理肝星状细胞作为阳性对照,分别采用qRT-PCR和Western blot检测肝星状细胞中COL1A1、α-SMA和TGF... 详细信息

目的探讨泡球蚴组织蛋白在肝星状细胞活化中的作用。方法用不同浓度泡球蚴组织蛋白体外刺激人肝星状细胞,以PBS处理作为阴性对照,TGF-β1处理肝星状细胞作为阳性对照,分别采用qRT-PCR和Western blot检测肝星状细胞中COL1A1、α-SMA和TGF-β/Smad信号通路基因及蛋白表达水平。结果 60和600μg/ml泡球蚴蛋白处理肝星状细胞后α-SMA mRNA相对表达量分别为2.16±0.33和2.72±0.49,COL1A1mRNA相对表达量分别为1.73±0.12和5.39±0.14;TGF-β1处理肝星状细胞后α-SMA mRNA相对表达量为13.43±0.27,COL1A1mRNA相对表达量为18.89±2.59;PBS阴性对照组α-SMA基因相对表达量1.07±0.42,COL1A1基因相对表达量1.00±0.02。不同浓度泡球蚴蛋白组和TGF-β1处理组与PBS阴性对照组相比α-SMA及COL1A1mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);肝星状细胞泡球蚴组织蛋白处理组与TGF-β1处理组α-SMA和COL1A1的蛋白水平较阴性对照组显著升高(P<0.05)。TGFβ-RII基因相对表达量在600μg/ml泡球蚴组织蛋白处理组为1.71±0.08,与PBS阴性对照组1.09±0.43相比差异具有统计学意义(P<0.05);Smad2基因相对表达量在TGF-β1处理组为1.68±0.29,与PBS阴性对照组1.07±0.42相比差异有统计学意义(P<0.05);Smad3基因相对表达量在600μg/ml泡球蚴组织蛋白处理组为2.41±0.84,TGF-β1处理组为1.61±0.15,与PBS阴性对照组1.00±0.09相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论泡球蚴组织蛋白中有类似TGF-β作用的能够诱发宿主肝星状细胞活化的细胞因子,该细胞因子可能参与泡球蚴感染所致宿主肝纤维化损伤。

关键词：泡球蚴肝星状细胞纤维化 COL1A1 α-平滑肌肌动蛋白

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细粒棘球蚴SmadC蛋白及其MH2结构域酵母双杂交载体的构建及自激活鉴定

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中国兽医学报 2012年第1期32卷 58-62页

作者：李静张传山吕国栋王俊华魏绪法李朝旺范金亮林仁勇剡根强石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

从重组克隆载体pMD18-T-egsmadC中扩增细粒棘球蚴egsmadC基因及其MH2编码序列,将其克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中,经PCR、限制性酶切鉴定及序列测定正确后,PEG/LiAc法转化酵母菌株,测定融合蛋白对酵母菌生长的影响和自激活活性... 详细信息

从重组克隆载体pMD18-T-egsmadC中扩增细粒棘球蚴egsmadC基因及其MH2编码序列,将其克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中,经PCR、限制性酶切鉴定及序列测定正确后,PEG/LiAc法转化酵母菌株,测定融合蛋白对酵母菌生长的影响和自激活活性。结果表明,egsmadC基因及其MH2编码序列表达的蛋白对酵母菌Y2HGold无毒性和自激活作用,可为进一步运用酵母双杂交技术筛选与之相互作用的蛋白奠定基础。

关键词： smadC基因 MH2结构域酵母双杂交自激活

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泡球蚴感染小鼠所致肝损伤基因表达谱的变化

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中华实验外科杂志 2010年第2期27卷 189-191页

作者：谢文娟吕国栋李瑶张传山温浩林仁勇新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046 新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室

目的观察泡球蚴感染小鼠肝脏基因表达谱的变化.方法采用开腹直视下肝左叶注射泡球蚴混悬液构建小鼠肝泡型包虫病动物模型.运用包含25000个小鼠基因的36 K小鼠全基因组寡核苷酸芯片,检测感染8周后小鼠肝脏的基因表达.荧光定量逆转录.... 详细信息

目的观察泡球蚴感染小鼠肝脏基因表达谱的变化.方法采用开腹直视下肝左叶注射泡球蚴混悬液构建小鼠肝泡型包虫病动物模型.运用包含25000个小鼠基因的36 K小鼠全基因组寡核苷酸芯片,检测感染8周后小鼠肝脏的基因表达.荧光定量逆转录.聚合酶链反应（RT-PCR）法验证芯片结果 .结果小鼠肝脏受泡球蚴侵染8周后,共有108条基因表达发生改变,功能聚类分为新陈代谢、信号转导、细胞生长、转录调节、细胞骨架、凋亡、免疫应答及运输等11类.荧光定量RT-PCR验证正确.结论泡球蚴感染可以导致小鼠肝脏基因表达谱发生的改变,涉及多个基因表达调控途径.

关键词：肝脏泡球蚴基因芯片

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T-bet和GATA-3基因在肝泡型包虫病患者肝脏组织中的表达及作用

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中国病原生物学杂志 2014年第10期9卷 898-901页

作者：张恒吐尔洪江·吐逊马海长沙地克·阿帕尔林仁勇温浩新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院消化血管外科中心肝脏腹腔镜外科新疆乌鲁木齐830054

目的探讨T-bet和GATA-3基因在肝泡型包虫病患者肝脏组织中的表达及作用。方法选取14例在新疆医科大学第一附属医院接受手术治疗的肝泡型包虫病患者病灶组织（L组）、病灶旁组织（P组）及正常肝组织（N组）,采用实时荧光定量PCR（qRT-PC... 详细信息

目的探讨T-bet和GATA-3基因在肝泡型包虫病患者肝脏组织中的表达及作用。方法选取14例在新疆医科大学第一附属医院接受手术治疗的肝泡型包虫病患者病灶组织（L组）、病灶旁组织（P组）及正常肝组织（N组）,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测各肝脏组织中T-bet和GATA-3 mRNA的表达,采用两两比较的t检验和Pearson相关性检验分析结果。结果 T-bet mRNA在L组、P组和N组的表达量分别为3.98、0.89和0.27,其中L组与P组比较差异无统计学意义（t=0.307,P〉0.05）,L组与N组比较差异有统计学意义（t=3.695,P〈0.01）,P组与N组比较差异有统计学意义（t=3.492,P〉0.05）。GATA-3mRNA在L组、P组和N组的表达量分别为119.23、6.30和0.53,其中L组与N组比较差异有统计学意义（t=5.190,P〈0.01）,P组与N组比较差异有统计学意义（t=4.649,P〈0.01）,L组与P组差异无统计学意义（t=1.711,P〉0.05）。肝脏不同组织中,T-bet和GATA-3mRNA的表达量呈正相关（相关系数为0.730-0.932）。结论 Th1细胞转录因子T-bet基因和Th2细胞转录因子GATA-3基因在肝脏病灶组织中的表达升高,这些变化或与泡型包虫病发病过程中寄生虫肉芽肿的形成有关。

关键词：棘球蚴病,肝寄生虫感染 T-bet GATA-3

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细粒棘球蚴转化生长因子βⅡ型受体胞外域基因的克隆、表达及抗血清制备

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中国病原生物学杂志 2016年第8期11卷 719-722,741页

作者：李亮李静张传山吕国栋毕晓娟林仁勇新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院生理学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学教研室

目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)转化生长因子βⅡ型受体胞外域(Extracellular Domain of Transforming Growth Factor beta type Ⅱ receptor of Eg,EgTβRⅡ-E)原核表达载体,诱导表达融合蛋白并制备其特异性抗体。方法采集羊源Eg原头蚴,Trizol法提取总RNA,RT-PCR扩增EgTβRⅡ-E基因,构建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表达载体,PCR、限制性内切酶双酶切和测序鉴定正确的阳性质粒转入***感受态细胞,IPTG诱导EgTβRⅡ-E融合蛋白表达并免疫小鼠,制备抗血清。结果成功构建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表达载体,经0.6mmol/L IPTG诱导表达18ku的EgTβRⅡ-E融合蛋白。用融合蛋白免疫小鼠,获得高效价(1∶256 000抗血清)。结论制备的EgTβRⅡ-E融合蛋白具有抗原性,免疫小鼠获得高效价的抗血清,为研究EgTβRⅡ的生物学功能奠定了基础。

关键词：细粒棘球蚴转化生长因子βⅡ型受体基因克隆抗血清

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MEK1/2抑制剂曲美替尼对体外多房棘球蚴原头节的作用研究

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中国人兽共患病学报 2022年第8期38卷 673-677页

作者：李德伟施阳李亮侯昕伶王慧张传山李静新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的研究MEK1/2抑制剂曲美替尼对体外多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis,Em)活性的影响,探讨MEK1/2作为治疗泡型棘球蚴病靶点的可能性。方法建立Em空白对照组、DMSO及1μmol/L、50μmol/L、100μmol/L曲美替尼组,利用活力染色... 详细信息

目的研究MEK1/2抑制剂曲美替尼对体外多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis,Em)活性的影响,探讨MEK1/2作为治疗泡型棘球蚴病靶点的可能性。方法建立Em空白对照组、DMSO及1μmol/L、50μmol/L、100μmol/L曲美替尼组,利用活力染色与扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)分别观察虫体活性及体表结构变化;以Swiss Model同源建模合理构建Em MEK1/2分子的三级结构进行分析。结果1μmol/L曲美替尼干预3 d、6 d、9 d的原头节活性分别为(84.72±0.27)%、(87.32±2.01)%、(85.12±3.64)%,低于相同时间DMSO组,且差异有统计学意义(t>2.78,P<0.05);当1μmol/L曲美替尼干预时间延长至12 d,原头节活性降至(37.82±2.12)%,与DMSO组比较差异具有统计学意义(t=32.90,P<0.01)。SEM和活力染色显示曲美替尼组虫体活性与干预浓度成正比,同源建模结果显示Em与人MEK1/2分子具有较高的同源性。结论综合分析活力染色、SEM与同源建模结果,证实体外1μmol/L的MEK1/2抑制剂曲美替尼对虫体活性具有较好的抑制作用,为临床治疗提供了理论依据。

关键词：多房棘球蚴 MEK信号通路曲美替尼体外培养原头节

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