检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2010年第7期28卷 402-407页

作者：吕国栋纪静王俊华李亮王红丽卢晓梅王星温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的从新疆株细粒棘球蚴中克隆细胞外信号调节激酶（EgERK1）基因，进行序列测定、生物信息学分析，蛋白表达及功能初步鉴定。方法设计特异性引物，从新疆株细粒棘球蚴中提取总RNA，RT—PCR法扩增EgERKl基因，构建pET28a—EgERK1原核表... 详细信息

目的从新疆株细粒棘球蚴中克隆细胞外信号调节激酶（EgERK1）基因，进行序列测定、生物信息学分析，蛋白表达及功能初步鉴定。方法设计特异性引物，从新疆株细粒棘球蚴中提取总RNA，RT—PCR法扩增EgERKl基因，构建pET28a—EgERK1原核表达质粒，测序确定序列并进行生物信息学分析。构建正确的pET28a-EgERK1原核表达质粒，经诱导、表达EgERK1重组蛋白，聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹检测其生物学功能。结果RT-PCR扩增出的条带经测序，结果显示其长度为1125bp，编码374个氨基酸，等电点为6．34，BLAST比对结果提示为一新基因，命名为EgERKl（EU701008）。同源性比较表明，EgERK1与多房棘球绦虫ERK基因（EmMPK1）同源性为95．45％，与线虫、酵母、果蝇和人类等ERK基因的同源性为43．04％～61．88％。进化树分析发现EgERKl和EmMPKl相聚集。功能分析预测EgERKl具有ERK类激酶T—X—Y结构保守区和酶激活功能域。Western印迹显示，原核诱导表达的EgERKl重组蛋白能与抗人ERK1／2抗体发生特异性免疫反应。结论成功克隆细粒棘球蚴EgERKl新基因，发现EgERK1重组蛋白具有与ERK1／2抗体结合的功能，为进一步研究该基因在寄生虫与宿主相互作用中的功能奠定基础。

关键词：细粒棘球绦虫细胞外信号调节MAP激酶类基因克隆分子序列分析质粒

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不同棘球蚴抗原诱导树突状细胞表达吲哚胺2,3-双加氧酶的实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第3期31卷 188-192页

作者：单骄宇李海涛李春燕肖晋李亮张雪林仁勇温浩新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地及新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院肝胆包虫病外科乌鲁木齐830054

目的检测不同的棘球蚴抗原体外诱导树突状细胞(DCs)表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的情况。方法从C57BL/6小鼠股骨中分离出骨髓细胞,用小鼠重组巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)诱导后,获得小鼠骨髓源树突状细胞(BMDCs)。分别用重组抗原B(r... 详细信息

目的检测不同的棘球蚴抗原体外诱导树突状细胞(DCs)表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的情况。方法从C57BL/6小鼠股骨中分离出骨髓细胞,用小鼠重组巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)诱导后,获得小鼠骨髓源树突状细胞(BMDCs)。分别用重组抗原B(rAgB,15μg/ml)、小鼠细粒棘球蚴囊液(MHF,5 mg/ml)、γ干扰素(IFN-γ,1 000 U/ml,为阳性对照)和RPMI 1640完全培养液(阴性对照)刺激DCs,于18、24和48 h后收集细胞和细胞上清。采用流式细胞术检测各组DCs的表面标志物CD40、CD80、CD86和I-A/I-E的阳性表达情况,并利用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)检测各组的IDO mRNA相对转录水平。利用高效液相色谱法(HPLC)检测各组细胞上清中的色氨酸(Try)浓度。结果流式细胞术检测结果显示,DCs受rAgB和MHF刺激后,其表面标志物CD40、CD80、CD86和I-A/I-E的阳性表达率均降低。刺激24 h后,rAgB组的CD40、CD86和I-A/I-E阳性表达率分别为(22.60±2.69)%、(35.50±4.38)%和(57.30±4.38)%,与MHF组[(38.00±3.54)%、(53.00±3.39)%和(77.10±1.70)%]和阴性对照[(37.95±3.61)%、(19.55±1.06)%和(85.45±1.63)%]的差异均有统计学意义(P<0.05)。FQ-RT-PCR结果显示,刺激18、24和48 h后,rAgB组的IDO mRNA水平[(9.20±0.01)、(29.44±0.02)和(16.48±0.04)]和MHF组的[(9.67±0.02)、(17.52±0.01)和(16.81±0.01)]均高于阴性对照组[(2.46±0.01)、(7.77±0.01)和(10.56±0.01)](P<0.01),rAgB组和MHF组IDO mRNA水平的差异均有统计学意义(P<0.05)。HPLC结果显示,刺激18、24和48 h后,rAgB组DCs上清中的色氨酸浓度[(23.65±0.64)、(13.95±1.06)和(19.05±0.64)μmol/L]均较其他3组低,刺激24 h后的色氨酸浓度与阴性对照组(22.90±0.14)和MHF组(20.65±0.35)的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在体外实验条件下,rAgB、MHF均可上调DCs表面IDO的表达,作用24 h后,rAgB上调IDO的能力强于MHF。

关键词：细粒棘球蚴抗原树突状细胞吲哚胺2 ,3-双加氧酶免疫逃避

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多房棘球蚴感染对小鼠肝脾淋巴细胞及其亚群的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第1期38卷 30-35页

作者：章宁张传山李智德李亮王慧谭雅超尚琳琳温浩新疆医科大学第一附属医院中亚高发病病因预防治疗国家重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量多房棘球蚴原头节的混悬液,采用门静脉注射法建立多房棘球蚴感染小鼠模型,对照组注射等量生理盐水。感染后4周,每组各取4只小鼠,取肝脏组织,常规Masson染色,观察病理变化。剩余4只小鼠取肝脏和脾脏,制备肝、脾细胞悬液,流式细胞术检测肝、脾CD3^+T细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4^+CD69^+T细胞、CD8^+CD69^+T细胞绝对数以及初始型CD4^+T (CD4^+Tn)细胞、效应记忆性CD4^+T (CD4^+Tem)细胞、初始型CD8^+T (CD8^+Tn)细胞、效应记忆性CD8^+T(CD8^+Tem)细胞和中心记忆性CD8^+T(CD8^+Tcm)细胞比例的变化。检测数据采用Flow-Jo软件分析,并做流式图。采用Graphad Prism 7.0软件进行作图和统计学分析。结果感染后4周,对照组小鼠肝无明显变化,低、中数量组小鼠肝组织出现急性炎症反应减弱,部分病灶炎性反应逐渐转变为纤维化修复,形成小肉芽肿结节,呈点状或灶状坏死。高数量组小鼠肝内出现小囊泡,可见生发层结构,周围大量炎性细胞浸润。小鼠肝CD3^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(4.10±0.04)×10^5、(3.81±0.14)×10^5、(3.02±0.12)×10^5、(2.98±0.03)×10^5,高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠脾CD3^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(16.01±0.40)×10^5、(11.03±1.21)×10^5、(10.10±1.01)×10^5、(9.71±0.90)×10^5,高数量组高于其他3组(P<0.01)。小鼠肝CD4^+T、CD8^+T细胞和脾B细胞、CD8^+T绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4^+CD69^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(3.23±0.10)×10^4、(1.98±0.11)×10^4、(1.51±0.26)×10^4、(1.19±0.21)×10^4,高数量组高于其他组(P<0.05)。小鼠脾CD4^+CD69^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(10.10±0.41)×10^4、(8.91±0.80)×10^4、(8.20±0.41)×10^4、(6.81±0.50)×10^4,高数量组高于对照组(P<0.01)。肝、脾CD8^+CD69^+T细胞绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4^+Tn细胞比例高、中、低数量组和对照组分别为(15.52±1.51)%、(19.3±2.09)%、(20.66±1.28)%、(23.62±2.84)%,对照组高于其他组(P<0.05或0.01)。肝、脾CD8^+Tn细胞比例对照组高于其他组(P<0.05或0.01)。肝、脾CD8^+Tcm细胞比例高数量组高于对照组(P<0.05)。结论高数量多房棘球蚴感染C57BL/6小鼠,肝区域以CD4^+T细胞和CD8^+T细胞募集为主,而脾以B细胞和CD8^+T细胞募集为主。

关键词：多房棘球蚴 T淋巴细胞早期流式细胞术

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细粒棘球蚴感染对哮喘大鼠血清白介素-17水平及Th1/Th2平衡的影响

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免疫学杂志 2011年第2期27卷 110-113页

作者：马秀敏徐琦侯敏马海梅魏晓丽李玉娇庞楠楠赵慧丁剑冰新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病重点实验室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院

目的建立细粒棘球蚴感染并发过敏性哮喘实验动物模型及探讨细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的作用。方法 24只健康Wistar大鼠,随机分为3组,A组为正常对照组,B组为单纯哮喘组,C组为细粒棘球蚴感染并发哮喘组。C组大鼠经腹腔注射感染细粒棘球... 详细信息

目的建立细粒棘球蚴感染并发过敏性哮喘实验动物模型及探讨细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的作用。方法 24只健康Wistar大鼠,随机分为3组,A组为正常对照组,B组为单纯哮喘组,C组为细粒棘球蚴感染并发哮喘组。C组大鼠经腹腔注射感染细粒棘球蚴,70 d后,以卵白蛋白(OVA)分别对B组、C组大鼠进行致敏及激发,建立过敏性哮喘模型。取大鼠肺组织作病理切片,观察大鼠肺组织的炎症变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清白介素-17(IL-17)、白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的水平。结果与B组比较,C组大鼠血清IL-17和IL-4的水平明显下降(P<0.05),而血清IFN-γ的水平明显上升(P<0.05)。各组大鼠血清IL-4与IFN-γ水平呈密切负相关(r=-0.915),IL-4和IFN-γ水平与IL-17呈负相关关系(r=-0.406,-0.603),P<0.05。结论细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的发生有抑制作用。

关键词：细粒棘球蚴哮喘白介素17 Th1/Th2

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新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段95抗原基因克隆及序列分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2003年第3期21卷 170-172页

作者：林仁勇丁剑冰温浩张文宝李君卢晓梅新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学免疫学教研室乌鲁木齐830054 昆士兰医学研究所

目的研究细粒棘球绦虫95抗原(Eg95)基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达及其基因序列差异。方法根据Eg95基因序列设计引物,用PCR方法分别从新疆株细粒棘球绦虫3个不同发育阶段(原头蚴、六钩蚴和成虫)所构建的cDNA文库中克隆获... 详细信息

目的研究细粒棘球绦虫95抗原(Eg95)基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达及其基因序列差异。方法根据Eg95基因序列设计引物,用PCR方法分别从新疆株细粒棘球绦虫3个不同发育阶段(原头蚴、六钩蚴和成虫)所构建的cDNA文库中克隆获得Eg95目的基因,将其克隆至pUCm-T载体、测序并进行序列分析。结果从3个不同发育阶段的新疆株细粒棘球绦虫cDNA文库中均克隆出Eg95基因,其基因片段长度为402bp,同源性比对分析(BLAST)结果表明,所克隆的新疆株Eg95基因与GenBank中的Eg95基因序列一致。结论 Eg95基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段均有表达,其基因序列无差异。

关键词：细粒棘球绦虫 95抗原基因克隆序列分析棘球蚴病

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阿苯达唑片和阿苯达唑脂质体治疗囊性包虫病的相关不良反应

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中华传染病杂志 2013年第10期31卷 620-622页

作者：李海涛邵英梅宋涛阿依浦汗·阿汉温浩新疆医科大学第一附属医院肝胆包虫外科新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

阿苯达唑是目前国际公认的有效治疗包虫病的药物之一，临床广泛应用。阿苯达唑脂质体初期临床应用疗效良好，不良反应较少。本研究在治疗囊性包虫病的临床观察中，对比评价这两种药物的相关不良反应，为制订包虫病药物治疗的合理方案提... 详细信息

阿苯达唑是目前国际公认的有效治疗包虫病的药物之一，临床广泛应用。阿苯达唑脂质体初期临床应用疗效良好，不良反应较少。本研究在治疗囊性包虫病的临床观察中，对比评价这两种药物的相关不良反应，为制订包虫病药物治疗的合理方案提供一定的临床依据。

关键词：阿苯达唑脂质体囊性包虫病不良反应有效治疗阿苯达唑片临床观察药物治疗应用疗效

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细粒棘球绦虫Eg95基因疫苗和重组抗原诱导小鼠免疫应答的比较研究

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中国人兽共患病学报 2006年第4期22卷 347-351页

作者：丁剑冰马秀敏魏晓丽林仁勇王俨张静萍温浩新疆医科大学基础医学院免疫学教研室乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室

目的观察比较细粒棘球绦虫Eg95重组抗原和基因疫苗诱导小鼠的免疫应答状况。方法实验组和对照组小鼠分别注射Eg95重组抗原(rEg95)、费氏佐剂(FCA)、pcDNA3-Eg95基因疫苗、pcDNA3质粒和生理盐水,收集各组血清用酶联免疫吸附(ELISA法)检... 详细信息

目的观察比较细粒棘球绦虫Eg95重组抗原和基因疫苗诱导小鼠的免疫应答状况。方法实验组和对照组小鼠分别注射Eg95重组抗原(rEg95)、费氏佐剂(FCA)、pcDNA3-Eg95基因疫苗、pcDNA3质粒和生理盐水,收集各组血清用酶联免疫吸附(ELISA法)检测抗体IgG和IgG2a亚类水平;采集脾细胞用四甲基偶氮唑盐试验(MTT法)检测免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖反应。结果rEg95免疫组小鼠在第二次免疫后开始检测到抗Eg95抗原的IgG,并随着免疫次数的增多,血清抗体效价升高,在第1次免疫后第10周时,免疫抗体滴度可达到1∶25,600。Eg95基因疫苗免疫的小鼠产生抗体滴度随免疫次数的增加而升高,最高可达1∶3,200,但是低于Eg95重组蛋白免疫小鼠产生的抗体滴度水平。pcDNA3-Eg95免疫组产生IgG2a亚类抗体水平明显高于对照组和rEg95组。在第四次免疫后,进行淋巴细胞转化试验,MTT法检测证实rEg95和pcD-NA3-Eg95免疫的小鼠,其脾细胞均可在体外被特异性刺激增生。结论细粒棘球绦虫Eg95重组抗原和基因疫苗均可诱发小鼠产生特异性免疫应答。

关键词：细粒棘球绦虫 Eg95重组抗原基因疫苗免疫应答小鼠

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白细胞介素-17和白细胞介素-6在泡球蚴感染小鼠中的变化特点及作用

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中华实验外科杂志 2011年第12期28卷 2131-2133页

作者：庞楠楠丁剑冰赵慧李玉娇李亮马海梅马秀敏新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院

目的观察泡球蚴（Em）感染小鼠肝脏过程中白细胞介素（IL）-17和IL-6的动态变化特点。方法实验组小鼠腹腔接种泡球蚴原头蚴，持续观察10个月，取肝脏组织和收集各组血清，通过苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏病理改变，免疫组织化学和酶... 详细信息

目的观察泡球蚴（Em）感染小鼠肝脏过程中白细胞介素（IL）-17和IL-6的动态变化特点。方法实验组小鼠腹腔接种泡球蚴原头蚴，持续观察10个月，取肝脏组织和收集各组血清，通过苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏病理改变，免疫组织化学和酶联免疫吸附试验（ELISA）法观察IL-17在Em感染不同阶段的动态变化特点。结果与对照组小鼠比较，Em感染小鼠的肝组织汇管区周围出现炎细胞浸润、肝细胞坏死等多种病理改变；肝组织IL-17和IL-6在感染1个月出现阳性表达，3个月达到高峰，其中IL-17在感染3个月以后与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；IL-6在感染1～6月与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；Em感染小鼠血清IL-17的含量明显升高，在感染2、3、8个月时与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-17和IL-6的表达随着泡球蚴感染加重而增高，并随着感染时间延长一直保持较高的水平，可能与泡球蚴感染小鼠时造成免疫紊乱及宿主免疫病理损伤有关。

关键词：泡球蚴感染白细胞介素-17 白细胞介素-6

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Fas及Caspase家族在泡球蚴感染宿主肝脏中的表达及其意义

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中华实验外科杂志 2011年第10期28卷 1677-1679,I0002页

作者：王俊华张传山张雪卢晓梅温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨细胞凋亡信号分子Fas及Caspase家族在肝泡球蚴病宿主中的表达及意义。方法16例配对泡型包虫患者（AE）肝脏标本，16只雌性BALB／C小鼠。分析肝脏标本中肝细胞病理变化、凋亡及Fas、Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9的表达。结... 详细信息

目的探讨细胞凋亡信号分子Fas及Caspase家族在肝泡球蚴病宿主中的表达及意义。方法16例配对泡型包虫患者（AE）肝脏标本，16只雌性BALB／C小鼠。分析肝脏标本中肝细胞病理变化、凋亡及Fas、Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9的表达。结果AE患者病灶周围肝细胞水肿，汇管区周围纤维化，肝细胞造型坏死；病灶周围肝细胞发生显著凋亡[（74．0±15．0）％比（4．2±3．3）％]，Fas[（71．3±19．0）％比（5．2±1．6）％]、Caspase-3[（39．4±18．3）％比（3．3±2．9）％]、Caspase-8[（37．6±3．5）％比（4．0±1．8）％]和Caspase-9[（24．7±13．8）％比（2．0±1．4）％]高表达（P〈0．05）。泡球蚴感染小鼠病灶处可见囊泡，肝组织纤维化严重；肝细胞发生显著凋亡[（37．5±5．2）％比（13．9±2．7）％]，Fas[（48．3±6．2）％比（4．6±1．2）％]、Caspase-3[（29．7±6．3）％比（5．2±1．9）％]、Caspase-8[（23．1±2．9）％比（3．5±1．4）％]和Caspase-9[（16．7±3．2）％比（2．3±1．1）％]高表达（P〈0．05）。结论泡球蚴感染引起宿主肝细胞凋亡，提示Fas及Caspase家族介导的细胞凋亡信号通路可能参与了泡球蚴所致肝损伤进程。

关键词：肝泡球蚴病 Fas Caspases

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CD4^+CD25^+调节性T细胞在寄生虫感染中的作用研究

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中国人兽共患病学报 2010年第7期26卷 680-682,687页

作者：毛人杰朱玥洁马秀敏丁剑冰新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病重点实验室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011

近年来调节性T细胞(Treg)的发现和成功分离,使人们对免疫应答的机制有了进一步的认识。调节性T细胞具有免疫负向调控作用,参与维持机体的免疫稳定,根据其表面标记、细胞因子分泌和发挥作用的方式,[第一段]

关键词： CD4^+CD25^+调节性T细胞寄生虫感染免疫应答细胞因子分泌调控作用表面标记

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