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基础医学与临床 2012年第9期32卷 1095-1098页

作者：赵慧王亮马秀敏丁剑冰新疆医科大学第一附属医院省部共建国家重点实验室培育基地新疆重大疾病医学重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院检验科新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011

T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)基因是Tim家族成员,与其配体半乳凝素-9(Galectin-9)结合可显著抑制T细胞的活化和增殖,并调节细胞因子的表达和分泌。Tim-3/Galectin-9参与免疫反应的调节及抗病毒免疫反应,阻断此通路可促进CD8+T细胞应... 详细信息

T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)基因是Tim家族成员,与其配体半乳凝素-9(Galectin-9)结合可显著抑制T细胞的活化和增殖,并调节细胞因子的表达和分泌。Tim-3/Galectin-9参与免疫反应的调节及抗病毒免疫反应,阻断此通路可促进CD8+T细胞应答和对病毒的控制。因此,Tim-3/Galectin-9通路可能与病毒感染慢性化有关。本文对Tim-3及其配体的生物学特性、功能及在病毒感染中的研究近况进行综述。

关键词： Tim-3 Galectin-9 病毒感染

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siRNA特异性干扰EgRad9基因表达对细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤机制的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2018年第4期36卷 343-349页

作者：郑璇卢帅赵军吕国栋文丽梅李亚芬田春艳王建华新疆医科大学药学院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院药学部临床药学科乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室乌鲁木齐830054

目的研究小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)特异性干扰Eg Rad9基因表达后对细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤机制的影响。方法利用电穿孔法将Eg Rad9-si RNA干扰序列和阴性对照干扰序列转染细粒棘球蚴原头节,实验分为Eg Rad9-si RNA-... 详细信息

目的研究小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)特异性干扰Eg Rad9基因表达后对细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤机制的影响。方法利用电穿孔法将Eg Rad9-si RNA干扰序列和阴性对照干扰序列转染细粒棘球蚴原头节,实验分为Eg Rad9-si RNA-354、-614、-971干扰组,阴性对照组和空白对照组。电转染3 d后,加入自然状态下原头节最大耐受浓度的H_2O_2处理1 h,伊红染液染色后,倒置荧光显微镜下观察原头节活性并计算存活率。收集各组原头节的培养液,进行碱性磷酸酶活性的检测。电转染3 d后,加入自然状态下原头节耐受H_2O_2的最大耐受浓度处理1 h后,TRIzol法提取总RNA。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测Eg Rad9m RNA的表达。采用彗星实验检测干扰Eg Rad9基因表达后细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤情况,活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测干扰Eg Rad9基因表达后细粒棘球蚴原头节体内ROS的含量,采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析。结果自然状态下细粒棘球蚴原头节体外耐受H_2O_2的最大浓度为0.4 mmol/L,干预时间为1 h;电穿孔法可将绿色荧光干扰序列有效的导入原头节体内,实验组和阴性对照组的原头节体内均有明亮的绿色荧光斑点;而空白对照组原头节体内无绿色荧光斑点。Eg Rad9-si RNA-354、-614、-971干扰组原头节的存活率分别为(42.99±4.03)%、(29.86±5.87)%和(56.48±4.64)%,初步筛选最有效干扰序列为Eg Rad9-si RNA-614。si RNA-354、-614、-971干扰组碱性磷酸酶活性分别为0.024±0.001、0.004±0.001、0.039±0.002,其中Eg Rad9-si RNA-614组碱性磷酸酶活性与阴性对照组(0.095±0.001)和空白对照组(0.099±0.001)相比,差异均有统计学意义(t=10.227、10.934,均P<0.01),表明该组原头节Eg Rad9基因经干扰后对其活性影响最大,最有效干扰序列为Eg Rad9-si RNA-614。Eg Rad9-si RNA-354、614、971干扰组Eg Rad9 m RNA表达量分别为0.432±0.055、0.291±0.079、0.612±0.032,其中经Eg Rad9-si RNA-614序列干扰后,Eg Rad9 m RNA表达量与阴性对照组(1.001±0.020)和空白对照组(1.001±0.012)相比均显著下调(t=7.874、7.663,均P<0.01),可确定最有效干扰序列为Eg Rad9-si RNA-614。相同电泳条件下,Eg Rad9-si RNA-614干扰组原头节DNA碎片离开核向阳极迁移,形成拖尾;Eg Rad9-si RNA-614干扰组彗星尾距OTM值为13.901±2.263,与阴性对照组(0.074±0.020)和空白对照组(0.047±0.034)相比,差异有统计学意义(t=12.845、13.251,均P<0.01)。经Eg Rad9-si RNA-614序列干扰后,原头节体内ROS含量为13.024±0.154,与阴性对照组(2.728±0.083)和空白对照组(2.555±0.007)相比,差异有统计学意义(t=9.296、10.134,均P<0.01)。结论Eg Rad9基因在细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤过程中发挥重要作用,Eg Rad9-si RNA-614干扰片段可特异性干扰Eg Rad9基因的表达,并降低原头节修复DNA氧化损伤的能力。

关键词： EgRad9基因小干扰RNA 细粒棘球蚴原头节 DNA氧化损伤

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IL-10在细粒棘球蚴感染小鼠的免疫调控作用研究

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中国病原生物学杂志 2016年第1期11卷 41-44,49页

作者：彭珊珊王亮古丽扎尔·阿不都纳斯尔兰希刘学磊王倩刘玉梅姜涛温浩丁剑冰马秀敏新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011

目的通过检测细粒棘球蚴感染小鼠IL-10表达水平的变化,探讨IL-10的免疫调控作用。方法收集感染细粒棘球蚴病羊肝脏囊泡中的原头蚴,处理后接种实验组小鼠肝脏,建立实验动物模型。于感染后2、8、30、90和270d各取8只小鼠处死,收集血液,分... 详细信息

目的通过检测细粒棘球蚴感染小鼠IL-10表达水平的变化,探讨IL-10的免疫调控作用。方法收集感染细粒棘球蚴病羊肝脏囊泡中的原头蚴,处理后接种实验组小鼠肝脏,建立实验动物模型。于感染后2、8、30、90和270d各取8只小鼠处死,收集血液,分离血清,采用ELISA检测IL-10含量;同时剥取小鼠脾脏,采用RT-PCR检测IL-10mRNA。实验设0.9%NaCl对照组。结果与对照组比较,实验组小鼠在感染后60和90d血清IL-10表达水平显著升高,在感染后180d达到峰值,随后略有下降,但持续高水平表达(t180d=-27.087,t270d=-19.382,均P<0.01)。与对照组相比,实验组小鼠脾脏IL-10mRNA水平在感染后90d达到峰值(t=-3.959,P<0.01),之后表达量仍然处于较高水平状态(t180d=-2.571,t270d=-3.284,均P<0.01)。结论细粒棘球蚴感染后期小鼠IL-10持续高表达,这可能是导致细粒棘球蚴发生免疫逃逸的机制之一。

关键词： IL-10 细粒棘球蚴包虫病免疫逃逸

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细粒棘球绦虫AgB1抗原表位的生物信息学预测

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科技导报 2013年第27期31卷 27-30页

作者：马秀敏胡晓安阿尔孜古丽·吐尔逊李艳华刘学磊朱明丁剑冰新疆医科大学第一附属医院省部共建国家重点实验室培育基地--新疆重大疾病医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011

以细粒棘球绦虫AgB1基因序列为基础，采用Predict Protein软件预测其编码蛋白的二级结构；应用在线预测软件Bcepred、Abcpred、IEDB及SYFPEITHI等对细粒棘球绦虫AgB1的B细胞表位和T细胞表位进行预测。结果提示，AgB1抗原蛋白存在可以构... 详细信息

以细粒棘球绦虫AgB1基因序列为基础，采用Predict Protein软件预测其编码蛋白的二级结构；应用在线预测软件Bcepred、Abcpred、IEDB及SYFPEITHI等对细粒棘球绦虫AgB1的B细胞表位和T细胞表位进行预测。结果提示，AgB1抗原蛋白存在可以构成抗原表位的区域。经软件分析，分值高的B细胞表位区域：2～9、15～20、22～35和41～52氨基酸序列；T细胞表位区域：3-12、26～33、34～44和52-61氨基酸序列。研究运用生物信息学确定AgB1抗原的4个B细胞优势表位和4个T细胞优势表位。对进一步研究AqB1的抗原性和研发更有价值的免疫诊断方法具有重要意义。

关键词： AgB1 B细胞表位 T细胞表位生物信息学

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环介导等温扩增与实时荧光定量PCR检测布鲁氏菌的比较

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中国病原生物学杂志 2016年第12期11卷 1070-1073页

作者：刘玉梅古丽扎尔·阿不都纳斯尔丁剑冰马秀敏新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院

目的为快速、特异、灵敏的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究依据环介导等温扩增技术与实时荧光定量PCR技术原理设计引物,建立两种检测布鲁氏菌的方法并进行评价。方法根据布鲁氏菌OMP31基因序列设计6条LAMP引物和2条Real-time PCR引物,对新... 详细信息

目的为快速、特异、灵敏的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究依据环介导等温扩增技术与实时荧光定量PCR技术原理设计引物,建立两种检测布鲁氏菌的方法并进行评价。方法根据布鲁氏菌OMP31基因序列设计6条LAMP引物和2条Real-time PCR引物,对新疆医科大学第一附属医院院确诊的10例布鲁氏菌病患者全血标本进行DNA检测。LAMP反应前加入羟基萘芬蓝（HNB）作为扩增指示剂,根据指示剂的颜色变化判定结果,并比较两种方法的特异性及灵敏度差异。结果 LAMP反应只需30-60min完成,在检测特异性和灵敏度方面两者结果相同,均能检出100个拷贝数的质粒DNA,且均无假阳性。结论 LAMP方法快速、简便,经济,无需专用仪器设备,更适用于基层医院对布鲁氏菌的快速检测。

关键词：布鲁氏菌环介导等温扩增 Real-time PCR OMP31基因

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细粒棘球蚴表位质粒的构建和噬菌体展示

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中国病原生物学杂志 2015年第12期10卷 1108-1111页

作者：兰希胡晓安刘玉梅张春桃刘学磊冯宁王倩温浩丁剑冰马秀敏新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院

目的合成Eg95T-B联合表位肽段,通过噬菌体展示技术获得含不同联合表位的肽段,为细粒棘球蚴病的多抗原表位疫苗的研制奠定基础。方法采用DNAman软件设计3对相应引物,分别扩增各段联合表位的核苷酸序列,连接PMD18-T载体,PCR扩增测序正确... 详细信息

目的合成Eg95T-B联合表位肽段,通过噬菌体展示技术获得含不同联合表位的肽段,为细粒棘球蚴病的多抗原表位疫苗的研制奠定基础。方法采用DNAman软件设计3对相应引物,分别扩增各段联合表位的核苷酸序列,连接PMD18-T载体,PCR扩增测序正确的序列,然后用T4连接酶将各段外源基因重组到M13KE噬菌体载体上,构建M13KE/Eg95-1、M13KE/Eg95-2和M13KE/Eg95-3质粒,转入大肠埃希菌ER2738感受态细胞中,运用PCR方法对插入序列进行初步鉴定,测序确定序列正确且无基因突变。使各段基因所对应的外源肽融合表达于M13KE噬菌体PⅢ蛋白上,通过PEG/NaCl沉淀法提纯重组噬菌体。结果成功构建了M13KE/Eg95-1 M13KE/Eg95-2与M13KE/Eg95-3噬菌体展示系统,PCR扩增Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3片段分别为192、168和222bp,与预期大小一致。结论成功构建了T细胞和B细胞联合表位的噬菌体展示系统,为抗原表位的筛选奠定了基础。

关键词： Eg95 表位质粒噬菌体展示系统

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Th17细胞与自身免疫性疾病关系的研究进展

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现代免疫学 2015年第6期35卷 524-526,506页

作者：王倩胡金伟马秀敏罗莉新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011

Th17细胞是一种新发现不同于Th1、Th2、Tregs的CD4^+T细胞的独立亚型,以高分泌细胞因子IL-17为特征,在宿主防御方面发挥很重要的作用,介导炎症反应、感染、自身免疫性疾病等。Th17细胞的发现对疾病的发病机制及治疗提出了新的挑战,本文... 详细信息

Th17细胞是一种新发现不同于Th1、Th2、Tregs的CD4^+T细胞的独立亚型,以高分泌细胞因子IL-17为特征,在宿主防御方面发挥很重要的作用,介导炎症反应、感染、自身免疫性疾病等。Th17细胞的发现对疾病的发病机制及治疗提出了新的挑战,本文就其生物学特点与自身免疫性疾病的关系作一综述。

关键词： Th17细胞 IL-17 自身免疫性疾病

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棘球绦虫的主要生理学特点与包虫病控制方法的确立

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中华预防医学杂志 2018年第2期52卷 210-214页

作者：李军郭刚张壮志张文宝新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地830054 新疆畜牧科学院兽医研究所

由细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫引起的棘球蚴病在全世界范围内流行，严重危害了人群的身体健康和社会发展。棘球绦虫生理学特点和生理指标是设计控制方案，解决诊断、治疗和预防等方面问题的基础。棘球绦虫有其复杂的生活史，需要寄生于... 详细信息

由细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫引起的棘球蚴病在全世界范围内流行，严重危害了人群的身体健康和社会发展。棘球绦虫生理学特点和生理指标是设计控制方案，解决诊断、治疗和预防等方面问题的基础。棘球绦虫有其复杂的生活史，需要寄生于两个哺乳类动物，经历不同发育的阶段（成虫、虫卵、包囊和原头蚴），每个阶段都有各自不同的生理学特点。本文系统总结和归纳了棘球绦虫主要生理学特点并强调了与控制方案有关的生理学参数。从生活史可以看出，棘球绦虫有两个感染阶段，一是虫卵,它是引起人和中间宿主原发性感染的唯一阶段；二是原头蚴，唯一感染犬等终末宿主的发育阶段。虫卵产生于寄生在终末宿主小肠里的成虫，虫卵在成虫体内的成熟时限是确定对犬驱虫间隔期的生理参数。细粒棘球绦虫在犬体内发育45 d产生发育成熟的虫卵。该期限是国外每年8次驱虫的基础。多房棘球绦虫在犬和狐狸体内感染28～30 d产生成熟的虫卵，控制泡球蚴的流行和传播，驱虫间隔期应该少于30 d。鉴于泡型包虫病和囊型包虫病在我国西部共流行，目前对犬每年12次驱虫，即成虫期前驱虫措施已经列入包虫病控制规划，广泛应用西部流行区。绵羊肝肺脏器内的包囊发育至成熟原头蚴需要12～15个月，采取羔羊上市的牧业生产方式因其羊体内的包囊不能产生原头蚴而成为囊型包虫病控制的有效方法。另外，棘球绦虫有其独特的生物学特点，比如有性繁殖和无性繁殖，包囊的单细胞层结构，胆盐调控原头蚴双向发育，包虫蚴在中间宿主体内长期感染的无症状反应等等，使其成为研究生物学和医学生物学问题的工具。囊蚴分泌的包囊液是研究诊断试剂的抗原来源，特异的六钩蚴表达基因是研制疫苗的重要发育阶段。随着高通量组学，包括基因组学、转录组学以及蛋白质组学的发展和应用，我们可以利用棘球绦虫的生理学特性寻找诊断试剂，研发预防疫苗和确定新型药靶。

关键词：棘球绦虫棘球蚴病生理学控制

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泡球蚴感染BALB/c小鼠肝脏中ICOS表达的动态变化

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中国病原生物学杂志 2012年第12期7卷 885-888,892页

作者：张丽娜朱玥洁赵慧刘辉刘晓霞李艳华周晓涛丁剑冰新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆重大疾病医学重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地新疆医科大学第一附属医院新疆乌鲁木齐830054

目的观察泡球蚴感染BALB/c小鼠肝脏中诱导性协同刺激分子(ICOS)的动态变化。方法将60只BALB/c小鼠随机分成实验组和对照组,实验组经腹腔注射感染泡球蚴,对照组以相同的方法注射生理盐水。分别于感染后2、8、30、90、180和300d各处死5只... 详细信息

目的观察泡球蚴感染BALB/c小鼠肝脏中诱导性协同刺激分子(ICOS)的动态变化。方法将60只BALB/c小鼠随机分成实验组和对照组,实验组经腹腔注射感染泡球蚴,对照组以相同的方法注射生理盐水。分别于感染后2、8、30、90、180和300d各处死5只小鼠,取肝脏组织,通过HE染色观察病理变化,通过免疫组化观察泡球蚴感染后ICOS的动态改变。结果与对照组比较,泡球蚴感染小鼠肝脏ICOS表达升高,表达部位主要在肝细胞浆和肝细胞膜。结论泡球蚴感染鼠肝组织ICOS表达增高。ICOS可能参与泡球蚴感染致肝纤维化及肝损伤过程。

关键词：泡球蚴肝脏 ICOS 动态变化

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滤泡辅助性T细胞与寄生虫感染的关系

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中国病原生物学杂志 2013年第7期8卷 664-665,671页

作者：张丽娜杨晶张峰波丁剑冰新疆重大疾病医学重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地新疆医科大学第一附属医院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011

滤泡辅助性T细胞(Tfh)是最近发现的辅助B细胞新的CD4+阳性T细胞亚群。Tfh细胞与其他CD4+T细胞亚群如Th1、Th2和Th17细胞不同,其关键是辅助B细胞参与体液免疫应答。Tfh细胞参与利什曼原虫等寄生虫感染的发生、发展。本文对Tfh细胞在寄生... 详细信息

滤泡辅助性T细胞(Tfh)是最近发现的辅助B细胞新的CD4+阳性T细胞亚群。Tfh细胞与其他CD4+T细胞亚群如Th1、Th2和Th17细胞不同,其关键是辅助B细胞参与体液免疫应答。Tfh细胞参与利什曼原虫等寄生虫感染的发生、发展。本文对Tfh细胞在寄生虫感染过程中的免疫作用进行了综述。

关键词：滤泡辅助性T细胞(Tfh) 分化表型寄生虫综述

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