目的:探究微小核糖核酸-21(mi R-21)对心肌缺血大鼠心肌细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法:取40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和建模组(30只),建模组大鼠通过左冠状动脉前降支(LAD)结扎术建立心肌缺血大鼠模型,假手术组大鼠仅开胸后不做其他处理即缝合。将建模成功大鼠随机分为对照组(转染mi R-NC慢病毒)、沉默组(转染mi R-21 antagomir慢病毒)、过表达组(转染mi R-21 mimics慢病毒),假手术组注射等量生理盐水。苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织损伤情况;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(WB)检测TLR-4、NF-κB、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)信使核糖核酸(m RNA)和蛋白表达及磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)水平。结果:对照组大鼠心肌纤维排列紊乱,大量心肌细胞肿胀坏死并伴随炎症细胞浸润,沉默组大鼠心肌组织损伤情况进一步加重,而过表达组大鼠心肌组织损伤现象得到明显改善。与假手术组比,对照组、沉默组、过表达组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平升高,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达降低(P<0.05);与对照组比,沉默组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA表达与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平升高,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达降低(P<0.05),过表达组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平降低,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达升高(P<0.05)。结论:下调mi R-21表达可促进TLR-4/NF-κB通路表达,加重心肌缺血大鼠心肌损伤。
目的通过对不明原因复发性流产(URSA)孕妇绒毛组织的lncRNA比对参考基因组进行注释,探究URSA中潜在的lncRNA生物学靶点。方法收集4例URSA(实验组)和4例选择性终止妊娠(ETP)孕妇(对照组)的绒毛组织样本,使用StringTie处理并预测各转录本,DESeq2获得差异表达lncRNA,Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析对lncRNA反式调控及lncRNA顺式调控潜在通路进行探索。结果使用4种编码潜能分析方法对候选lncRNA进行进一步的筛选,共有474个共表达转录本,接着DESeq2获得差异表达lncRNA,有705个显著上调lncRNA数目和107个显著下调表达lncRNA数目,对差异表达的lncRNA和所有差异表达的基因进行共表达分析,其中lncRNA反式调控分子功能主要作用在蛋白结合,生物过程发生在细胞外基质组织,存在于细胞表面。KEGG结果显示其主要是作用于lncRNA HLA-DQA2进而富集在金黄色葡萄球菌感染通路。lncRNA顺式调控分子功能主要作用在蛋白结合,生物过程发生在RNA聚合酶对转录的调节,存在于核染色质。KEGG富集结果显示其主要是作用于lncRNA HLA-DQA2以及BIRCT进而富集在弓形体病感染通路。结论lncRNA HLA-DQA2可能通过调控炎症感染信号通路导致不明原因复发性流产,其可能成为潜在的治疗靶点。
暂无评论