检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2022年第1期38卷 1-10页

作者：张暑军李青青乔春林勾璇王新敏章乐石河子大学医学院病理生理学教研室/新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科新疆石河子832008

目的:探究共培养体系下M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:分别以0、50、100和200μg/L的脂多糖(LPS)刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞24 h后,采用免疫荧光技术、Western blot及流式细胞术检测M1型巨噬细胞... 详细信息

目的:探究共培养体系下M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:分别以0、50、100和200μg/L的脂多糖(LPS)刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞24 h后,采用免疫荧光技术、Western blot及流式细胞术检测M1型巨噬细胞标志物CD86和诱导型一氧化氮合酶的表达情况。建立RAW264.7-MB49细胞共培养体系,分为MB49组、M0+MB49组和M1+MB49组,12 h后收集MB49细胞,CCK-8法检测各组MB49细胞活力,划痕实验和Transwell实验检测各组MB49细胞的迁移和侵袭能力,Hoechst 33258染色检测各组MB49细胞的凋亡情况,ELISA检测培养上清液中白细胞介素6(IL-6)浓度。结果:筛选出了诱导RAW264.7巨噬细胞向M1亚型极化的最佳LPS浓度和作用时间分别为100μg/L和24 h。与MB49组及M0+MB49组相比,M1+MB49组中MB49细胞的活力及迁移和侵袭能力均显著下降(P<0.05),凋亡细胞显著增多(P<0.05),培养上清液中IL-6浓度显著升高(P<0.05)。结论:在共培养体系中M1型巨噬细胞可抑制小鼠膀胱癌MB49细胞的活力、迁移和侵袭,并促进其凋亡。

关键词：肿瘤微环境 M1型巨噬细胞膀胱癌细胞迁移细胞侵袭

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钙敏感受体在高血压大鼠心肌重塑和视网膜血管病变中的作用研究

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中国全科医学 2023年第5期26卷 576-582页

作者：赵佳琪刘薇唐娜王腊梅屈媛媛席冬梅钟华何芳石河子大学医学院病理生理教研室新疆地方病与民族病教育部重点实验室国家卫生健康委中亚高发病防治重点实验室新疆维吾尔自治区石河子市832002 石河子大学医学院第一附属医院呼吸内科新疆维吾尔自治区石河子市832002

背景临床中对于高血压靶器官损害主要以全身降压辅以局部用药治疗为主,但因各组织对药物的反应不同甚至相斥,治疗效果不佳。现已关注到钙敏感受体(CaSR)与高血压的关系,然而其在高血压视网膜疾病中的作用和机制仍缺乏相关研究。目的探讨... 详细信息

背景临床中对于高血压靶器官损害主要以全身降压辅以局部用药治疗为主,但因各组织对药物的反应不同甚至相斥,治疗效果不佳。现已关注到钙敏感受体(CaSR)与高血压的关系,然而其在高血压视网膜疾病中的作用和机制仍缺乏相关研究。目的探讨CaSR在高血压视网膜中的表达水平以及其与高血压心肌重塑、视网膜血管改变的关系。方法2021年5—12月选取10只8周龄健康正常血压大鼠(WKY)作为WKY组,20只同周龄同源的自发性高血压大鼠(SHR)随机分为SHR组及抑制剂(SHR+NPS2143)组。SHR+NPS2143组腹腔注射CaSR抑制剂NPS2143,WKY组和SHR组注射等量的0.9%氯化钠溶液,共注射16周。干预0周、16周通过无创血压仪监测大鼠血压;干预0周、16周分别选取5只大鼠处死,通过马松(Masson)染色观察大鼠心肌胶原沉积,通过苏木素-伊红(HE)染色检测视网膜病理变化;通过免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)观察CaSR和血管内皮生长因子A(VEGFA)在视网膜的分布和表达。结果SHR组干预0周、16周收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)高于WKY组(P<0.05);SHR组干预16周SBP、DBP、MAP均低于SHR+NPS2143组(P<0.05);SHR组、SHR+NPS2143组干预16周SBP、DBP、MAP均高于干预0周(P<0.05)。SHR组干预16周心脏/体质量(HW/BW%)和左心室/体质量(LVW/BW%)、心肌组织胶原容积分数(CVF)高于WKY组,低于SHR+NPS2143组(P<0.05);SHR组、SHR+NPS2143组干预16周HW/BW%、LVW/BW%、CVF高于干预0周(P<0.05)。SHR组干预0周、16周视网膜总厚度、内丛状层厚度高于WKY组(P<0.05);SHR组干预16周视网膜总厚度、内丛状层厚度低于SHR+NPS2143组(P<0.05);SHR组干预16周视网膜内核层厚度高于WKY组、低于SHR+NPS2143组(P<0.05)。干预16周SHR组视网膜中CaSR低于WKY组、高于SHR+NPS2143组(P<0.05);SHR组视网膜中VEGFA高于WKY组、低于SHR+NPS2143组(P<0.05)。结论应用CaSR抑制剂,可减少CaSR活化,促进视网膜中VEGFA表达增加,加剧高血压引起的心肌重塑与视网膜血管病变的发展。

关键词：原发性高血压受体,钙敏感血管内皮生长因子视网膜血管心肌重塑大鼠

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自发性高血压大鼠和Wistar大鼠脑动脉Cx45表达的差异

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山东大学学报（医学版） 2012年第11期50卷 39-42页

作者：李新芝司军强陈新燕庞丽娟李丽魏丽丽马克涛石河子大学医学院地方病与民族高发病教育部重点实验室石河子大学医学院病理生理学教研室石河子大学医学院生理学教研室石河子大学医学院.地方病与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 石河子大学医学院病理生理学教研室新疆石河子832002 石河子大学医学院生理学教研室新疆石河子832002

目的探讨脑动脉细胞间缝隙连接在高血压病中的变化。方法应用全细胞膜片钳、定量RT-PCR和Western blot技术,比较自发性高血压(SH)大鼠(n=30)和Wistar大鼠(n=30)脑动脉上缝隙连接耦联力,以及连接蛋白45(Cx45)在mRNA和蛋白水平的表达。结... 详细信息

目的探讨脑动脉细胞间缝隙连接在高血压病中的变化。方法应用全细胞膜片钳、定量RT-PCR和Western blot技术,比较自发性高血压(SH)大鼠(n=30)和Wistar大鼠(n=30)脑动脉上缝隙连接耦联力,以及连接蛋白45(Cx45)在mRNA和蛋白水平的表达。结果①应用全细胞膜片钳技术发现,SH大鼠脑动脉平滑肌细胞膜电容和膜电导都明显高于正常Wistar大鼠(P<0.05),提示SH大鼠脑动脉平滑肌细胞间的缝隙连接耦联力增强。②应用定量RT-PCR技术发现,SH大鼠脑动脉Cx45 mRNA的表达升高(P<0.05)。③应用Western blot发现,SH大鼠脑动脉Cx45的蛋白表达升高(P<0.01)。结论 SH大鼠可能通过上调平滑肌细胞上Cx45的表达,增强脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接通讯,保证血管的同步收缩。

关键词：自发性高血压大鼠脑动脉缝隙连接连接蛋白全细胞膜片钳技术

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Neuritin对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝作用的研究

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现代生物医学进展 2010年第12期10卷 2259-2262,2265页

作者：黎兴毅李东正高蕊李新丽张峤王倩罗星于娜黄瑾新疆地方与民族高发病重点实验室新疆石河子832002 新疆石河子大学医学院生化教研室新疆石河子832002

目的:探讨Neuritin对大鼠脊髓损伤后神经元突起再生的作用。方法:分为Neuritin组,His组和假手术组。使用改良Allen’s打击法打击Neuritin组和His组大鼠T10或T11节段脊髓。Neuritin组和His组经蛛网膜下腔置管局部连续给予Neuritin和His蛋... 详细信息

目的:探讨Neuritin对大鼠脊髓损伤后神经元突起再生的作用。方法:分为Neuritin组,His组和假手术组。使用改良Allen’s打击法打击Neuritin组和His组大鼠T10或T11节段脊髓。Neuritin组和His组经蛛网膜下腔置管局部连续给予Neuritin和His蛋白(6ug/d)一周。假手术组仅咬除椎板不损伤脊髓,经蛛网膜下腔置空管而部损伤脊髓。术后6h、3d、7d、14d、28d、56d分别观察:①运动功能评分(BBB评分)观察大鼠后肢运动功能恢复情况;②HE染色观察脊髓组织形态学变化;③免疫组织化学染色和Westernblotting检测损伤段脊髓神经中丝蛋白(NF200)的修复与再生。结果:①BBB评分,Neuritin组和His组在一周内没有明显差别,但Neuritin组和His组的评分均低于假手术组,从术后第14d,实验组评分明显高于对照组(P<0.05);②HE染色可见损伤段脊髓出血、坏死及炎性细胞浸润;③免疫组化检测,Neuritin组的NF200平均光密度值(IOD/AREA)较His组明显增高(P<0.05);Western blotting检测的NF200灰度值(GMD)较His组明显增高(P<0.05)。结论:持续外源性Neuritin能促进大鼠脊髓损伤后伤区神经元突起的再生,并能促进大鼠后肢运动功能的康复。

关键词： Neuritin 脊髓损伤神经元突起再生神经中丝

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神经突起因子酵母双杂交诱饵质粒构建和转化

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中国公共卫生 2006年第4期22卷 444-445页

作者：罗星张峪涵于娜孔雪徐坚顾少华杨磊黄瑾新疆石河子大学医学院生物化学教研室/新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室石河子832002 复旦大学生命科学院遗传学研究所

目的构建和转化神经突起因子(Neuritin)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究Neuritin的功能及作用机制奠定基础。方法用PCR扩增neuritin全长cDNA中编码开放读框的基因片段;将该基因片段与pLex-A载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组... 详细信息

目的构建和转化神经突起因子(Neuritin)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究Neuritin的功能及作用机制奠定基础。方法用PCR扩增neuritin全长cDNA中编码开放读框的基因片段;将该基因片段与pLex-A载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;将核苷酸序列正确的重组质粒转化入EGY48[p8op-LacZ]酵母菌株。结果成功构建pLexA-neuritin重组质粒。转化有重组质粒和pLexA空载体的2种EGY48[p8op-LacZ]酵母都能在SD/Gal/Raf/-His/-Ura培养基中长成白色菌落,同时,转化pLexA-pos阳性对照质粒的酵母菌在相同条件下长成蓝色菌落,但都不能在SD/-His/-Leu/-Ura培养基中生长,在SD/-His/-Ura液中培养16 h后,A600均值均为0.9。表明重组质粒表达的融合蛋白没有激活LEU2和lacZ酵母报告基因表达的活性,也没有酵母毒性作用。结论构建的诱饵重组质粒可以用于下一阶段的人胎脑cDNA文库筛选。

关键词：神经突起因子酵母双杂交诱饵质粒

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小凹蛋白-1下调人脐静脉内皮细胞外钙敏感受体介导的钙内流的作用机制

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中国病理生理杂志 2013年第4期29卷 577-583页

作者：钟华龚艳吴玲玲赵慧王静孙志萍邓峰美何芳石河子大学医学院新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 石河子大学医学院病理生理教研室新疆石河子832002 石河子大学医学院医学机能实验中心新疆石河子832002

目的:研究小凹蛋白-1(Cav-1)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞外钙敏感受体(CaR)介导钙内流的作用机制。方法:取2～3代HUVECs,采用细胞膜穴样凹陷(caveolae)结构破坏剂非律平(filipin)和甲基-β-环糊精(MβCD)及Cav-1基因沉默,配合CaR激... 详细信息

目的:研究小凹蛋白-1(Cav-1)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞外钙敏感受体(CaR)介导钙内流的作用机制。方法:取2～3代HUVECs,采用细胞膜穴样凹陷(caveolae)结构破坏剂非律平(filipin)和甲基-β-环糊精(MβCD)及Cav-1基因沉默,配合CaR激动剂精胺(spermine)和负性变构调节剂Calhex 231。Fura-2/AM负载检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)。Western blotting检测HUVECs中Cav-1以及CaR蛋白表达,免疫共沉淀技术检测Cav-1和CaR相互作用。用蔗糖密度梯度离心的方法提取并鉴定caveolae,Western blotting检测caveolae的标志蛋白Cav-1和浮舰蛋白1(flotillin-1)及CaR表达。同时检测胞膜、胞浆和高尔基体标志蛋白:转铁蛋白受体(TfR)、β-肌动蛋白(β-actin)和β-外被体蛋白(β-COP)。检测富含Cav-1膜(CEM)区、非caveolae I区(NCF I)和II区(NCF II)的Cav-1和CaR表达。结果:(1)细胞外液为含钙液时,Calhex 231完全阻断精胺刺激引起的[Ca2+]i升高(P<0.05),MβCD可加强精胺升高[Ca2+]i的作用(P<0.05)。不同浓度MβCD处理后各组Cav-1和CaR相互作用的差异无统计学意义(P>0.05);(2)免疫共沉淀结果显示,各组Cav-1和CaR蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05);(3)与control组比较,spermine+Ca2+组、filipin+spermine+Ca2+组和MβCD+spermine+Ca2+组CEM区的Cav-1和CaR蛋白表达均降低(P<0.05),NCF I区的Cav-1和CaR蛋白表达增加(P<0.05),NCF II区Cav-1蛋白表达增加(P<0.05),而CaR蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在HUVECs中,Cav-1和CaR共定位于同一caveolae区,同时Cav-1对CaR介导的Ca2+内流有下调作用,其机制可能与Cav-1抑制CaR膜定位、促使其向非caveolae区转位及减弱其对激动剂的反应性有关。

关键词：小凹蛋白-1 人脐静脉内皮细胞受体,钙敏感钙信号

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人类14-3-3β真核表达系统的构建

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农垦医学 2007年第3期29卷 179-181页

作者：曾妍杨丽罗星赵娟杨磊石河子大学新疆地方与民族高发病重点实验室石河子大学医学院生化教研室新疆石河子832002

目的:构建人类14-3-3β基因真核表达载体并观察其转染的ECV-304细胞中14-3-3β的表达。方法:用基因重组技术将人类14-3-3βcDNA的开放阅读框克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,经酶切鉴定及测序分析并以脂质体介导转染ECV-304细胞,Western-b... 详细信息

目的:构建人类14-3-3β基因真核表达载体并观察其转染的ECV-304细胞中14-3-3β的表达。方法:用基因重组技术将人类14-3-3βcDNA的开放阅读框克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,经酶切鉴定及测序分析并以脂质体介导转染ECV-304细胞,Western-blot检测其在细胞内的表达。结果:酶切鉴定及测序分析表明重组pcDNA3.1-14-3-3β表达质粒克隆成功,经Westem-blot检测14-3-3β蛋白在ECV-304细胞中获得表达。结论:以脂质体介导pcDNA3.1-14-3-3β质粒转染真核细胞为进一步研究14-3-3β基因的功能奠定了实验基础。

关键词：重组pcDNA3.1-14-3-3β ECV-304细胞转染

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医学“生物化学”实验教学模式创新的改革

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科教导刊 2015年第9X期 86-87页

作者：刘伟李冬妹张君石河子大学医学院基础医学系生化教研室/新疆地方与民族高发病重点实验室新疆石河子832003

生物化学实验课在医学课程中是培养学生职业能力的关键课程,强化实验教学对提高学生的综合素质具有重要的意义。结合医学院实际从创新实验教学模式的需求出发,从互动教学理念、实验教学内容重组、新开放实验室平台建设、实验考核革新等... 详细信息

生物化学实验课在医学课程中是培养学生职业能力的关键课程,强化实验教学对提高学生的综合素质具有重要的意义。结合医学院实际从创新实验教学模式的需求出发,从互动教学理念、实验教学内容重组、新开放实验室平台建设、实验考核革新等方面构建新的生物化学实验教学模式,为培养创新型医学人才提供思路和建议。

关键词：生物化学实验教学教学模式教学改革

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Orai2参与了HUVEC外钙敏感受体介导的Ca^(2+)内流和NO生成

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基础医学与临床 2014年第5期34卷 595-601页

作者：王腊梅钟华赵慧王静庞丽娟孙志萍何芳新疆石河子大学医学院新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 新疆石河子大学医学院病理生理教研室新疆石河子832002 新疆石河子大学医学院病理教研室新疆石河子832002 新疆石河子大学医学院医学机能实验中心新疆石河子832002

目的研究钙释放激活的钙调素2(Orai2)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞外钙敏感受体(CaR)介导Ca2+内流和一氧化氮(NO)生成中的作用。方法 1)用转染技术将构建的Orai2干扰质粒(Orai2shRNA)转染入HUVEC,用实时定量RT-PCR和Western blot检测O... 详细信息

目的研究钙释放激活的钙调素2(Orai2)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞外钙敏感受体(CaR)介导Ca2+内流和一氧化氮(NO)生成中的作用。方法 1)用转染技术将构建的Orai2干扰质粒(Orai2shRNA)转染入HUVEC,用实时定量RT-PCR和Western blot检测Orai2 mRNA和蛋白的表达。2)取2~5代HUVEC,分别以精胺激活CaR(钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)均激活)、ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醋酸酯-13(TPA)+CaR负性变构调节剂Calhex231(激活ROC及阻断SOC)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro31-8220、经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967(阻断ROC及激活SOC)为细胞模型。实验分为3组:特异性质粒转染组(Orai2shRNA组),未转染组(空白对照组),空质粒组(vehicle组),用荧光探针Fura-2/AM、DAF-FM负载方法同步检测[Ca2+]i和NO的生成。结果 1)与control组相比,shOrai2-71干扰后,Orai2 mRNA和蛋白的表达均明显降低,抑制率分别为75.75%和70.58%(P<0.05)。2)与对照组和空质粒组相比,在4种不同处理因素作用下,Orai2shRNA转染组[Ca2+]i△ratio值和NO净荧光强度值均明显降低(P<0.05)。结论 Orai2参与了HUVEC中CaR经SOC和ROC激活介导的Ca2+内流和NO生成。

关键词： Orai2 一氧化氮钙离子人脐静脉内皮细胞

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同型半胱氨酸抑制人脐静脉内皮细胞eNOS活性

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基础医学与临床 2011年第8期31卷 864-868页

作者：钟华胡清华张会敏赵丹孙志萍李增春何芳新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室石河子大学医学院病理生理教研室华中科技大学同济医学院病理生理学系卫生部呼吸系疾病重点实验室湖北武汉430030 新乡医学院河南新乡453003 郧阳医学院生理学教研室湖北十堰442000 医学机能实验中心新疆石河子832002

目的研究不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)作用不同的时间对人脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响机制。方法取2～3代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与不同浓度Hcy孵育以及孵育不同时间。用Western blot和实时荧光定量RT-PCR法检... 详细信息

目的研究不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)作用不同的时间对人脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响机制。方法取2～3代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与不同浓度Hcy孵育以及孵育不同时间。用Western blot和实时荧光定量RT-PCR法检测热休克蛋白90(HSP90)、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达,小凹蛋白(Caveolin-1)、eNOS、P-eNOS蛋白及mRNA的表达,二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)mRNA表达。结果与静息和激活状态下的对照组相比,在Hcy作用下,Caveolin-1蛋白的表达上调(P<0.05),而Akt蛋白的表达下调(P<0.05),且均呈浓度、时间依赖性。eNOS蛋白的表达无明显改变。Hcy对其他检测指标无影响。结论 Hcy引起的eNOS活性降低与增强Caveolin-1蛋白表达使其与eNOS藕联增加,减少HSP90、Akt和eNOS复合物的形成,进而抑制了eNOS的活性有关。

关键词：同型半胱氨酸 eNOS 人脐静脉内皮细胞 A23187

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