检索结果-内蒙古大学图书馆

光谱学与光谱分析 2008年第3期28卷 612-616页

作者：刘忠渊徐涛郑树涛张兰廷张富春新疆大学生命科学与技术学院分子生物学实验室新疆生物资源基因工程重点实验室新疆乌鲁木齐830046

抗菌肽的抗菌机理研究主要集中在抗菌肽与细菌细胞膜作用方面,抗菌肽是否与细菌的染色体DNA作用尚不清楚。为了探讨新疆家蚕抗菌肽Cecropin-XJ抗细菌的作用机理,利用紫外光谱及以溴化乙锭(EthidiumBromide,EB)为荧光探针的荧光光谱方法... 详细信息

抗菌肽的抗菌机理研究主要集中在抗菌肽与细菌细胞膜作用方面,抗菌肽是否与细菌的染色体DNA作用尚不清楚。为了探讨新疆家蚕抗菌肽Cecropin-XJ抗细菌的作用机理,利用紫外光谱及以溴化乙锭(EthidiumBromide,EB)为荧光探针的荧光光谱方法研究抗菌肽Cecropin-XJ与金黄色葡萄球菌DNA在体外的相互作用,计算获得抗菌肽与DNA的结合常数和成键位点数。结果显示,抗菌肽使DNA发生了明显的增色效应,并使DNA的荧光强度增强,抗菌肽能与EB竞争性的结合DNA,表明抗菌肽可能与DNA双螺旋的沟槽结合;在抗菌肽存在下,DNA与EB作用的结合常数和成键位点数都发生变化,表明抗菌肽以嵌入和非嵌入两种方式与DNA相互作用。文章从分子水平上初步阐述了抗菌肽与细菌DNA的作用模式和结构特征,为深入研究抗菌肽的作用机理奠定了基础。

关键词：抗菌肽Cecropin-XJ 紫外光谱荧光光谱 DNA

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在胡杨NHX基因内发现细菌转座子IS10-L的存在

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生物工程学报 2003年第5期19卷 628-631页

作者：李金耀马纪蔡伦曾幼玲梅新娣张富春新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室

采用RT PCR扩增的方法 ,从新疆不同地区的野生植物胡杨中分别克隆获得 1kb和 2 3kb的cDNA片段 ,测序和序列分析表明这两个基因片段均包含NHX基因的部分读码框架 ,分别命名为PtNHX和PwNHX。PtNHX序列同源性分析结果显示胡杨NHX基因与滨... 详细信息

采用RT PCR扩增的方法 ,从新疆不同地区的野生植物胡杨中分别克隆获得 1kb和 2 3kb的cDNA片段 ,测序和序列分析表明这两个基因片段均包含NHX基因的部分读码框架 ,分别命名为PtNHX和PwNHX。PtNHX序列同源性分析结果显示胡杨NHX基因与滨藜NHX基因同源性高达 98% ,与碱蓬同源性达到 86 % ,与拟南芥同源性为 84 % ,与水稻同源性为 80 % ,表明它是植物中高度保守的一种基因 ,同时说明野生植物胡杨中也存在与拟南芥相似的植物耐盐相关基因。PwNHX序列分析表明 ,该基因内部含有一种转座酶的读码框 ,大小约 135 0bp ,与已发表的Shigellaflexneri.转座子Tn10基因序列 (AF16 2 2 2 3)同源性为 99%。NHX基因的蛋白产物在植物的耐盐性方面起着重要的作用。推测PwNHX由于插入转座酶读码框可能会导致该基因的功能丧失。胡杨生存于盐碱地 ,其体内可能存在另一些机制使胡杨具有抗盐碱的能力。对于这些机制的研究可能有助于进一步了解植物的抗盐机制。利用PwNHX基因内的转座子作基因标签 ,可进一步研究胡杨的其它基因 ,从而有可能揭示胡杨叶子发育的变态过程、耐盐碱等性状。

关键词：胡杨 NHX基因细菌转座子植物耐盐

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盐分和水分胁迫对两种盐生植物盐爪爪和盐穗木种子萌发的影响

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生态学杂志 2006年第9期25卷 1014-1018页

作者：曾幼玲蔡忠贞马纪张富春王波新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室乌鲁木齐830046

采用不同浓度NaCl和等渗PEG(分子量为6000)处理2种盐生植物种子(盐爪爪Kalidiumfoliatum、盐穗木Halostachys caspica)。结果表明,(1)NaCl和等渗PEG对种子的萌发均产生抑制作用,且PEG的抑制程度大于等渗NaCl,说明渗透胁迫是影响盐生植... 详细信息

采用不同浓度NaCl和等渗PEG(分子量为6000)处理2种盐生植物种子(盐爪爪Kalidiumfoliatum、盐穗木Halostachys caspica)。结果表明,(1)NaCl和等渗PEG对种子的萌发均产生抑制作用,且PEG的抑制程度大于等渗NaCl,说明渗透胁迫是影响盐生植物种子萌发的主要因素;(2)盐胁迫和水分胁迫对盐生植物种子的萌发具有明显的抑制作用,降低了种子的萌发率,推迟了种子的初始萌发时间、延长了种子的萌发时间;(3)根据2种盐生植物种子萌发耐盐性比较,两种盐生植物均具有较强的耐盐性,在0~300 mmol.L-1NaCl盐溶液范围内,盐穗木种子相对萌发率达到95%以上,盐爪爪达到80%以上,说明盐穗木比盐爪爪具有更强的耐盐性。盐穗木种子耐盐适宜值为332.5 mmol.L-1,临界值为540 ***-1,极限值为749 ***-1;盐爪爪种子耐盐适宜值为246.5 mmol.L-1,临界值为391.8 ***-1,极限值为537 mmol.L-1;(4)低浓度的NaCl溶液对种子萌发的幼苗生长起着促进作用。在100 ***-1NaCl处理时,两种盐生植物幼苗的胚...

关键词：盐爪爪盐穗木盐胁迫水分胁迫萌发率

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单引物方法克隆盐角草orf25基因

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生物工程学报 2003年第1期19卷 120-123页

作者：李金耀张富春马纪单文娟王宾新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室

采用单引物RT PCR扩增的方法 ,从新疆野生植物盐角草 (Salicorniaeuropaea)中克隆获得了 1.7kb的cDNA片段 ,经过测序和序列分析 ,发现基因片段包含了orf2 5基因完整的读码框架。采用序列同源性分析方法 ,结果显示新疆盐角草orf2 5基因... 详细信息

采用单引物RT PCR扩增的方法 ,从新疆野生植物盐角草 (Salicorniaeuropaea)中克隆获得了 1.7kb的cDNA片段 ,经过测序和序列分析 ,发现基因片段包含了orf2 5基因完整的读码框架。采用序列同源性分析方法 ,结果显示新疆盐角草orf2 5基因与甜菜线粒体同源性高达 98% ,与烟草线粒体同源性达到 95 % ,与小麦同源性为 92 % ,与玉米同源性为 88% ,表明orf2 5基因在植物中是高度保守的一种基因 ,同时说明野生植物盐角草中也存在与农作物相似的雄性不育相关基因 ,orf2 5基因编码的功能性蛋白可能在影响植物雄性不育改良作物品种方面具有重要的意义。

关键词：单引物方法盐角草orf25基因植物雄性不育基因克隆

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抗冻蛋白研究进展(英文)

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第6期21卷 717-722页

作者：李金耀马纪张富春新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室

很多越冬的生物会产生抗冻蛋白,这些抗冻蛋白能够吸附到冰晶的表面改变冰晶形态并抑制冰晶的生长.抗冻蛋白在很多生物体内都被发现,不同的抗冻蛋白结构差异非常大.目前的一些研究揭示了几种抗冻蛋白的结构,并提出了抗冻蛋白与冰晶的结... 详细信息

很多越冬的生物会产生抗冻蛋白,这些抗冻蛋白能够吸附到冰晶的表面改变冰晶形态并抑制冰晶的生长.抗冻蛋白在很多生物体内都被发现,不同的抗冻蛋白结构差异非常大.目前的一些研究揭示了几种抗冻蛋白的结构,并提出了抗冻蛋白与冰晶的结合模型,但是还没有一种机制能解释所有抗冻蛋白的作用机理.抗冻蛋白能被广泛的应用到农业、水产业和低温储藏器官、组织和细胞,利用转基因技术提高植物的抗冻性具有重要应用价值.而抗冻蛋白基因的表达调控则有待进一步阐明.

关键词：抗冻蛋白冰晶冰结合模型应用

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准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5毕赤酵母表达产物的理化性质

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昆虫知识 2006年第6期43卷 821-826页

作者：吕国栋孙洁马纪张富春新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室

研究准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica Kasz抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物的功能及理化性质。首先用硫酸铵浓度梯度沉淀初步纯化酵母真核表达产物,然后通过细菌低温保护实验检测抗冻蛋白MPAFP5低温保护功能,同时探讨抗... 详细信息

研究准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica Kasz抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物的功能及理化性质。首先用硫酸铵浓度梯度沉淀初步纯化酵母真核表达产物,然后通过细菌低温保护实验检测抗冻蛋白MPAFP5低温保护功能,同时探讨抗冻蛋白MPAFP5在酸碱环境和100℃时的稳定性,并通过等电聚焦凝胶电泳检测其等电点。研究表明MPAFP5真核表达产物在低温下能够提高细菌的存活率,能够耐受高温和一定程度的强酸强碱,其等电点约为5.8左右。准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物与赤翅甲抗冻蛋白(DAFP)的比较表明拟步甲类昆虫抗冻蛋白具有相似的理化性质。

关键词：准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白理化性质等电点

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植物分子水平的耐盐机制

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植物生理学通讯 2003年第6期39卷 715-719页

作者：李金耀张富春马纪王宾新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室

从盐过敏感调控途径、离子分室效应、胁迫反应转录因子及胁迫对基因表达的调控等方面综述了植物的抗盐机制。

关键词：盐分胁迫 SOS 区隔效应转录因子基因表达

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采用RT-PCR扩增方法从犁苞滨藜中扩增NHX基因

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植物生理学通讯 2003年第6期39卷 585-588页

作者：李金耀张富春马纪蔡伦鲍勇刚王宾新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室

采用RT PCR扩增的方法 ,从新疆野生植物犁苞滨藜中克隆获得 1.7kb的cDNA片段 ,测序和序列分析表明该基因片段包含NHX基因完整的读码框架。序列同源性分析结果显示犁苞滨藜NHX基因与滨藜NHX基因同源性高达 95 % ,与碱蓬同源性达到 86 % ... 详细信息

采用RT PCR扩增的方法 ,从新疆野生植物犁苞滨藜中克隆获得 1.7kb的cDNA片段 ,测序和序列分析表明该基因片段包含NHX基因完整的读码框架。序列同源性分析结果显示犁苞滨藜NHX基因与滨藜NHX基因同源性高达 95 % ,与碱蓬同源性达到 86 % ,与柑桔同源性为 88% ,与拟南芥同源性为 84 % ,表明它是植物中高度保守的一种基因。

关键词：犁苞滨藜 NHX基因 RT-PCR 植物耐盐

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赤翅甲抗冻蛋白基因的原核表达及蛋白生物活性检测

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昆虫学报 2005年第2期48卷 179-183页

作者：刘忠渊张富春王芸吕国栋新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室

根据GenBank中序列人工合成赤翅甲 Dendroides canadensis 的抗冻蛋白基因 (afp), 将其克隆到载体 pGEX_4T_1上, 构建融合表达的重组质粒, 转化大肠杆菌 BL21并进行原核表达。通过优化表达的诱导条件和SDS_PAGE检测, 证明人工合成的赤... 详细信息

根据GenBank中序列人工合成赤翅甲 Dendroides canadensis 的抗冻蛋白基因 (afp), 将其克隆到载体 pGEX_4T_1上, 构建融合表达的重组质粒, 转化大肠杆菌 BL21并进行原核表达。通过优化表达的诱导条件和SDS_PAGE检测, 证明人工合成的赤翅甲抗冻蛋白基因能够特异性地表达, 并以可溶性融合蛋白形式存在, 相对分子质量约为40 kD。抗冻蛋白的生物活性检测表明, 赤翅甲的抗冻融合蛋白能够提高细菌的耐寒能力。

关键词：赤翅甲抗冻蛋白原核表达抗冻活性

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Tenebrio molitor抗冻蛋白基因家族cDNA片段的克隆、序列分析及原核表达

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遗传 2006年第12期28卷 1532-1540页

作者：刘忠渊王芸吕国栋王贤磊张富春马纪新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046

利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cDNA片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cDNA片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGE... 详细信息

利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cDNA片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cDNA片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGEX-4T-1-tmafp-XJ430,转化***21进行原核表达,SDS-PAGE分析结果表明,抗冻蛋白基因以可溶性融合蛋白表达,相对分子量为38kDa。构建真核表达载体pCDNA3-tmafp-XJ430,免疫小鼠,获得的抗血清滴度为1:2000。Westernblotting结果为单一的条带,证明该抗血清具有针对抗冻蛋白TmAFP-XJ430抗原的专一性。

关键词：黄粉甲虫抗冻蛋白 cDNA片段序列分析原核表达

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