检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2001年第1期21卷 47-48页

作者：成进谷文喜沙依然古丽依米提李文蓉新疆畜牧科学院兽医研究所新疆乌鲁木齐830000 新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

采用通气搅拌培养方法对鸡大肠杆菌用 MM培养基和改良 MM培养基进行了对比试验 ,并用改良MM培养基对鸡大肠杆菌进行了静止培养、通气搅拌培养和连续通气搅拌培养的对比试验。结果显示 ,改良MM培养基培养的鸡大肠杆菌菌数和光密度 ( D)... 详细信息

采用通气搅拌培养方法对鸡大肠杆菌用 MM培养基和改良 MM培养基进行了对比试验 ,并用改良MM培养基对鸡大肠杆菌进行了静止培养、通气搅拌培养和连续通气搅拌培养的对比试验。结果显示 ,改良MM培养基培养的鸡大肠杆菌菌数和光密度 ( D)值明显高于 MM培养基 ;连续通气搅拌培养和通气搅拌培养的方法明显优于静止培养方法。

关键词：鸡大肠杆菌灭活疫苗培养方法培养基

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通过显微注射生产转基因小鼠的研究

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草食家畜 2001年第S2期 168-173页

作者：黄俊成杨梅史洪才新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

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乳汁蛋白质基因的遗传工程研究进展

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草食家畜 2001年第S2期 51-56页

作者：刘明军新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

利用动物转基因技术可以改变家畜乳汁蛋白质的组成。目前这方面的研究主要集中在通过乳汁表达生产异原蛋白质及多肽类药物。如果胚胎干细胞技术或基因打靶技术能够成功用于家畜的遗传修饰和改造 ,今后不仅可以通过产乳家畜乳腺生产高价... 详细信息

利用动物转基因技术可以改变家畜乳汁蛋白质的组成。目前这方面的研究主要集中在通过乳汁表达生产异原蛋白质及多肽类药物。如果胚胎干细胞技术或基因打靶技术能够成功用于家畜的遗传修饰和改造 ,今后不仅可以通过产乳家畜乳腺生产高价值的医用蛋白质 ,而且可以通过遗传工程手段对内源性的乳汁蛋白质进行加工、改造 ,进一步加强和提高乳汁的营养价值和生物学功能。

关键词：乳汁遗传修饰转基因乳腺生物反应器家畜

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人胰岛素原乳腺表达基因构建及其在转基因小鼠乳汁中的表达

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草食家畜 2001年第S2期 179-185页

作者：刘明军武坚李文蓉黄俊成杨冬梅玛依拉郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ... 详细信息

从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ,以及 1 .2kb人胰岛素原基因组DNA。将绿色荧光蛋白基因与BLG 5’和 3’调控区融合后转化乳腺细胞系 (TD47) ,通过荧光显微镜观察和紫外吸收检测 ,证明GFP在TD47乳腺细胞系中获得了表达。用BLG -hINS基因分别注射小鼠 ,通过PCR和限制性内切酶检测分析 ,共获得 5只转基因小鼠。经放免 (RIA)检测 ,两只转基因母鼠乳汁中人胰岛素原的表达量分别为 37.44和 39.99mg/L。该结果表明 ,本文所构建的 pBLG乳腺表达结构。

关键词：人胰岛素原羊乳球蛋白转基因乳腺表达

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精子载体介导法生产转基因绵羊的研究

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草食家畜 2001年第S2期 186-190,202页

作者：武坚刘明军李文蓉黄俊成史洪才郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

采用精子载体介导法先后对 1 952只绵羊进行转基因试验 ,经PCR和South ern检测 1 592只后代中 ,转基因羊 1 0 3只 ,最高转基因效率达 9.86 % ;其中 2只转基因母羊乳汁中人胰岛素原基因表达量分别达 1 99.97mg/L和 1 83.6 2mg/L。荧光原... 详细信息

采用精子载体介导法先后对 1 952只绵羊进行转基因试验 ,经PCR和South ern检测 1 592只后代中 ,转基因羊 1 0 3只 ,最高转基因效率达 9.86 % ;其中 2只转基因母羊乳汁中人胰岛素原基因表达量分别达 1 99.97mg/L和 1 83.6 2mg/L。荧光原位PCR结果证实牛、山羊和绵羊的精子经处理能携带外源基因 ,精子携带外源DNA的比率分别为 :绵羊 2 7.1 2 %、山羊 30 .57%、牛 31 .1 6 % ;同时外源基因进入到精子细胞并定位于核及其外周区域。研究还提示使用精子载体介导法时必须充分洗涤精液以除去精清。

关键词：精子载体介导转基因乳腺表达药用蛋白质

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建立高效的转基因动物鉴定技术体系

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草食家畜 2001年第S2期 45-50页

作者：李文蓉武坚刘明军黄俊成杨冬梅郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

转基因动物的鉴定是转基因动物研究领域的重要内容。本文简要回顾了相关鉴定技术的研究进展 ,建立和完善了特异性PCR扩增及其产物酶切的转基因动物鉴定体系 ,在引物设计、PCR参数优化、设立内源性标记等方面作了进一步的改进 ,提高了PC... 详细信息

转基因动物的鉴定是转基因动物研究领域的重要内容。本文简要回顾了相关鉴定技术的研究进展 ,建立和完善了特异性PCR扩增及其产物酶切的转基因动物鉴定体系 ,在引物设计、PCR参数优化、设立内源性标记等方面作了进一步的改进 ,提高了PCR的特异性和可靠性。实验表明 ,PCR扩增及其产物酶切是一种准确、灵敏、简便。

关键词：转基因动物鉴定 PCR 酶切

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人胰岛素原基因的PCR扩增、克隆和鉴定

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草食家畜 2001年第S2期 174-178页

作者：李文蓉刘明军武坚杨冬梅郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

根据已知的人胰岛素原基因序列设计引物 ,用PCR直接从人基因组DNA中获得天然的人胰岛素原基因 ,并将其克隆到 pUC1 8载体中 ,通过内切酶图谱及序列分析 ,证实所获得的人胰岛素原基因与已报道的序列完全一致。对于已知序列的基因克隆 ,PC... 详细信息

根据已知的人胰岛素原基因序列设计引物 ,用PCR直接从人基因组DNA中获得天然的人胰岛素原基因 ,并将其克隆到 pUC1 8载体中 ,通过内切酶图谱及序列分析 ,证实所获得的人胰岛素原基因与已报道的序列完全一致。对于已知序列的基因克隆 ,PCR扩增法操作简捷。

关键词：人胰岛素原基因 PCR克隆序列分析

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生物活性因子对牛卵母细胞体外成熟及胚胎体外发育的影响

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草食家畜 2001年第S2期 131-135页

作者：施巧婷黄俊成杨梅王立虎李辉玛依拉郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

免疫活性肽 (ICP)和表皮生长因子 (EGF)是两种生物活性因子 ,ICP对牛卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养的影响还未见报道。本实验将ICP ( 1 0、1 0 0、50 0ng/ml)和EGF ( 2 .5、2 5、50ng/ml)加入成熟液和培养液中 ,对照组中不含生物活性... 详细信息

免疫活性肽 (ICP)和表皮生长因子 (EGF)是两种生物活性因子 ,ICP对牛卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养的影响还未见报道。本实验将ICP ( 1 0、1 0 0、50 0ng/ml)和EGF ( 2 .5、2 5、50ng/ml)加入成熟液和培养液中 ,对照组中不含生物活性因子。结果表明ICP在浓度为 50 0ng/ml时对卵母细胞成熟有抑制作用 ,对胚胎发育无明显作用 ;EGF( 50ng/ml)

关键词：牛卵母细胞胚胎免疫活性肽表皮生长因子

来源：评论

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山羊的超排处理及影响因素的研究

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草食家畜 2001年第S2期 107-109页

作者：黄俊成史洪才杨梅武坚杨冬梅郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

本试验比较了FSH的剂量、供体羊的年龄与经产情况、不同季节及环境条件对奶山羊超数排卵效果的影响。从统计分析可以看出 ,不同批号的FSH超数排卵用的剂量不完全相同 ,并且同一批号的FSH剂量在其一定的剂量范围内变化时 ,对本地山羊和... 详细信息

本试验比较了FSH的剂量、供体羊的年龄与经产情况、不同季节及环境条件对奶山羊超数排卵效果的影响。从统计分析可以看出 ,不同批号的FSH超数排卵用的剂量不完全相同 ,并且同一批号的FSH剂量在其一定的剂量范围内变化时 ,对本地山羊和奶山羊的超数排卵效果影响不显著 (P >0 .0 5) ;经产羊做供体的超排效果明显好于青年羊 (P <0 .0 5) ;在供体羊体况良好的情况下 ,经合适的同期化及超排处理 ,春季山羊的超排效果并不比秋季差 ;塔城本地山羊与奶山羊在呼图壁的超数排卵效果无明显差异 (P >0 .0 5) ,而与奶山羊在塔城的超数排卵效果有显著差异 (P <0 .0 5) ,并且 ,同一批奶山羊在塔城地区种羊场和在呼图壁种牛场分别进行超数排卵处理 ,结果排卵效果有极显著的差异 (P <0 .0 1 ) ,这主要是由于塔城地区 1 0月份气温比呼图壁的气温偏低。

关键词：山羊超数排卵 FSH 年龄季节环境气候

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利用动物耳皮肤组织培养成纤维细胞的研究

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草食家畜 2001年第S2期 210-214页

作者：王红梅黄俊成刘明军王立虎计巧灵郭志勤新疆大学生物系新疆乌鲁木齐830046 新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000 中国农业大学动物科技学院北京100094

对采集的动物耳部皮肤样品采用将组织块剪碎后直接贴附于细胞培养瓶底部培养的方法与酶消化法对动物体细胞进行原代培养 ,前者使得对不同品种绵羊、山羊、牛、北山羊的原代体细胞出现率及可传代率均达到 1 0 0 %。两种培养方法在成纤维... 详细信息

对采集的动物耳部皮肤样品采用将组织块剪碎后直接贴附于细胞培养瓶底部培养的方法与酶消化法对动物体细胞进行原代培养 ,前者使得对不同品种绵羊、山羊、牛、北山羊的原代体细胞出现率及可传代率均达到 1 0 0 %。两种培养方法在成纤维细胞出现及可进行传代时间上有所差别。对于在体细胞传代培养中出现的上皮样细胞与成纤维样细胞混合生长的问题根据两者贴壁紧实程度的不同 ,用 0 .0 5%的胰酶—EDTA对其进行不同时间的消化 ,将两种不同类型的细胞进行分离和纯化。纯化的体细胞经数次传代培养后进行冷冻—解冻后仍具有正常的传代能力。对不同代次绵羊和牛的体细胞进行的核型分析表明 ,在体外培养至 2 0～ 30代 (绵羊胎儿细胞培养至 45代 )

关键词：皮肤细胞系体外培养

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