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草食家畜 2001年第S2期 203-205页

作者：杨梅黄俊成王立虎李辉郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000 中国农业大学动物科学技术学院北京100094 新疆石河子大学农学院新疆石河子832000

本试验以体外成熟培养 (IVM ) 2 2～ 2 4h的牛卵母细胞为对象 ,采用以下 3种激活方法 :①电激活 ( 2次直流脉冲 ,时间 30us,强度 1 .8KV/cm ,时间间隔 70us) +环己酰胺 +细胞松弛素B法 ;②电激活 (同上 ) +离子霉素 + 6 -DMAP(二甲基 -... 详细信息

本试验以体外成熟培养 (IVM ) 2 2～ 2 4h的牛卵母细胞为对象 ,采用以下 3种激活方法 :①电激活 ( 2次直流脉冲 ,时间 30us,强度 1 .8KV/cm ,时间间隔 70us) +环己酰胺 +细胞松弛素B法 ;②电激活 (同上 ) +离子霉素 + 6 -DMAP(二甲基 -氨基嘌呤 )法 ;③ 7%乙醇 +环己酰胺直接激活的方法对体外成熟牛卵母细胞进行孤雌激活实验 ,观察激活后 48h卵母细胞的早期分裂情况。结果表明 ,方法①的卵母细胞分裂率为 31 .32 % ( 2 6 /83) ;方法②的分裂率为 2 7.5% ( 32 /1 1 6 ) ;方法③的分裂率为44.1 1 % ( 45/1 0 2 ) ,与前两种方法相比差异显著 ( p <0 .0 5)。

关键词：牛卵母细胞孤雌激活

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不同成熟时间对牛卵母细胞发育及去核效率的影响

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草食家畜 2001年第2期 1-3页

作者：施巧婷黄俊成杨梅张家新王力虎李辉郭志勤新疆大学生物系乌鲁木齐830046 新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000 中国农业大学北京100094 新疆石河子大学动科系石河子832000

本文研究了不同成熟时间对牛卵母细胞的体外成熟、体外受精及后期的体外培养的影响和不同成熟时间的极体出现率。结果表明 ,牛卵母细胞在成熟 16h时极体出现率达 69.3%、分裂率为 54.7%、囊胚率仅为 6.2 5% ;而成熟 2 4h时极体出现率达 ... 详细信息

本文研究了不同成熟时间对牛卵母细胞的体外成熟、体外受精及后期的体外培养的影响和不同成熟时间的极体出现率。结果表明 ,牛卵母细胞在成熟 16h时极体出现率达 69.3%、分裂率为 54.7%、囊胚率仅为 6.2 5% ;而成熟 2 4h时极体出现率达 76.9%、分裂率为 70 .0 %、囊胚率为2 7.7% ,差异均显著 (P <0 .0 5)。成熟 16h的卵母细胞刚刚排出第一极体 ,细胞核与极体非常近 ,此时去核率较高 ;而成熟 2

关键词：牛卵母细胞体外成熟第一极体细胞发育去核效率成熟时间

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不同融合条件及激活方法对体细胞克隆绵羊胚胎发育的影响

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天津师范大学学报（自然科学版） 2001年第2期21卷 63-66页

作者：王立虎黄俊成杨梅张家新施巧婷李辉王红梅郭志勤中国农业大学动物科学技术学院北京100094 新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000 新疆大学生物系乌鲁木齐830046 石河子大学农学院新疆石河子832000

对成年绵羊耳部皮肤细胞进行培养传代 .将培养出的成纤维细胞经血清饥饿法处理后 ,作为核供体移植到MII期去核卵母细胞中进行核移植胚胎的生产 .用细胞松弛素B法与离子霉素 + 6 DMAP法对核移植胚胎 (重构胚 )在电融合后进行化学激活 ,... 详细信息

对成年绵羊耳部皮肤细胞进行培养传代 .将培养出的成纤维细胞经血清饥饿法处理后 ,作为核供体移植到MII期去核卵母细胞中进行核移植胚胎的生产 .用细胞松弛素B法与离子霉素 + 6 DMAP法对核移植胚胎 (重构胚 )在电融合后进行化学激活 ,然后在 38.6℃、5%CO2 、最大相对湿度条件下 ,进行体外培养 (IVC) .重构胚卵裂率分别为 37.8%与 43.8% ( 51 /1 35与 81 /1 85) ,囊 /桑葚胚率分别为 9.8%和 1 2 .3% ( 5/51和 1 0 /81 ) .在融合电压 1 .5kV/cm、持续时间 30μs、脉冲次数为 2次的条件下 ,孤雌激活胚胎的卵裂率和囊 /桑葚胚率分别为 81 .0 %和1 2 .9% .

关键词：绵羊体细胞核移植克隆激活融合条件胚胎发育

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绵羊体细胞核移植实验研究

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草食家畜 2001年第2期 17-19页

作者：王立虎黄俊成杨梅张家新施巧婷李辉王红梅郭志勤中国农业大学动物科技学院北京100094 新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000 新疆大学生物系乌鲁木齐830046 石河子大学农学院动科系石河子832000

用成年绵羊耳部皮肤细胞进行培养传代。将培养出的成纤维细胞经血清饥饿法处理后 ,作为核供体移植到MⅡ期去核卵母细胞中 ,重构胚经电融合与化学激活后 ,在 38.6℃、5%CO2 、最大相对湿度条件下进行体外培养 (IVC)。用细胞松驰素B法与... 详细信息

用成年绵羊耳部皮肤细胞进行培养传代。将培养出的成纤维细胞经血清饥饿法处理后 ,作为核供体移植到MⅡ期去核卵母细胞中 ,重构胚经电融合与化学激活后 ,在 38.6℃、5%CO2 、最大相对湿度条件下进行体外培养 (IVC)。用细胞松驰素B法与离子霉素 +6-DMAP法在电融合后进行化学激活。重构胚卵裂率分别为 37.8%与 4 3.8% ( 51/135与 81/185) ,囊 /桑堪胚率分别为9.8%和 12 .3% ( 5/51和 10 /81)。在融合电压 1.5Kv/cm、持续时间 30us、脉冲次数为 2次的条件下 ,孤雌激活胚胎的卵裂率和囊 /桑堪胚率分别为 81.0 %和 12 .9%。

关键词：绵羊体细胞核移植克隆电融合化学激活方法

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人胰岛素原基因在转基因小鼠乳汁中的表达

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西北农业大学学报 2000年第4期28卷 65-68页

作者：黄俊成史洪才李文蓉武坚杨冬梅郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000

将构建的绵羊 β-乳球蛋白基因 ( BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因小鼠。共移植 888枚注射 BLG-胰岛素原基因的小鼠卵 ,移植受体 31只 ,怀孕 1 4只 ,产仔 53只。PCR检测 51只 ,有 5只为阳性 ,并均为雌性 ,其中 ... 详细信息

将构建的绵羊 β-乳球蛋白基因 ( BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因小鼠。共移植 888枚注射 BLG-胰岛素原基因的小鼠卵 ,移植受体 31只 ,怀孕 1 4只 ,产仔 53只。PCR检测 51只 ,有 5只为阳性 ,并均为雌性 ,其中 2只小鼠泌乳 ,经放免检测小鼠乳汁中人胰岛素原的质量浓度分别为 37.44mg/L和 39.99mg/L。另外 3只异常消瘦而不孕 ,其中

关键词：人胰岛素原基因转基因小鼠基因表达乳汁糖尿

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鸡沙门氏菌外膜蛋白的免疫效果观察

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中国预防兽医学报 2000年第1期22卷 21-24页

作者：成进李文蓉谷文喜沙依然古丽依米提新疆畜牧科学院兽医研究所乌鲁木齐830000 新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000

用含EDTA的提取剂制备了鸡沙门氏菌外膜蛋白(OMP) ,经琼脂扩散试验检测,与同源株抗血清出现特异性沉淀线,与不同源株出现完全同源和部分同源的沉淀线,经SDS_PAGE分析,OMP抗原所含的蛋白质分子量介于14 ～67kD 之间,并用电洗脱方法分别... 详细信息

用含EDTA的提取剂制备了鸡沙门氏菌外膜蛋白(OMP) ,经琼脂扩散试验检测,与同源株抗血清出现特异性沉淀线,与不同源株出现完全同源和部分同源的沉淀线,经SDS_PAGE分析,OMP抗原所含的蛋白质分子量介于14 ～67kD 之间,并用电洗脱方法分别制备了分子量为20 ～30kD、30～43kD和43～67kD的OMP抗原组分,并将其用于免疫攻毒试验,结果表明,OMP铝剂苗对鸡的死亡保护率为89.4 % ,油剂苗组为97.5% 。

关键词：鸡沙门氏菌外膜蛋白免疫效果

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加速胚胎移植技术产业化促进我国养牛业发展

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中国工程科学 2000年第3期2卷 12-17页

作者：郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000

从我国养牛业的现状和存在的主要问题 ,指出养牛业需要大力发展 ,当前必须大量引种和繁殖种牛。而胚胎移植是引种的一种最好手段 ,具有方法简便、成本低、缩短改良时间、减少疾病传播等优点。同时 ,进一步分析了我国胚胎移植技术的研究... 详细信息

从我国养牛业的现状和存在的主要问题 ,指出养牛业需要大力发展 ,当前必须大量引种和繁殖种牛。而胚胎移植是引种的一种最好手段 ,具有方法简便、成本低、缩短改良时间、减少疾病传播等优点。同时 ,进一步分析了我国胚胎移植技术的研究概况 ,阐明了胚胎移植的主要技术关键及产业化的必要性和可能性。并根据我国养牛业的现状 ,提出奶牛。

关键词：胚胎移植产业化养牛业牛繁育中国

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氨基酸对绵羊体外受精胚胎发育的影响

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草食家畜 2000年第3期 27-30页

作者：张家新侯健史洪才玛依拉陈玉琦郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000

本文研究了Eagle氏氨基酸对绵羊胚胎发育的影响：①比较了不同浓度Eagle氏非必需氨基酸(NEAA)(0、025×、05×、1×)对绵羊胚胎的影响，结果表明，NEAA可明显提高绵羊胚胎的囊胚发育率，其中1×NEAA组的囊胚率为42％。

关键词：绵羊体外受精氨基酸培养液胚胎发育

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动物乳腺商业化生产重组蛋白质

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草食家畜 2000年第2期 1-3页

作者：武坚译新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000

:8 0年代 ,全球几家生物技术公司开展多种转基因动物乳腺生产人蛋白质类治疗药物的先驱性研制工作 ,其中采用这种途径生产的人抗凝血因子Ⅲ和α 1-抗胰蛋白酶已于 1990年底通过临床实验 ,成为全球首批转基因生产的蛋白质类药物 ,该生产... 详细信息

:8 0年代 ,全球几家生物技术公司开展多种转基因动物乳腺生产人蛋白质类治疗药物的先驱性研制工作 ,其中采用这种途径生产的人抗凝血因子Ⅲ和α 1-抗胰蛋白酶已于 1990年底通过临床实验 ,成为全球首批转基因生产的蛋白质类药物 ,该生产计划已被医药权威机构认可并将在2 0 0 0年左右投放市场。尽管在生物制药上取得了重大进展 ,但胚胎基础研究和应用推广人员仍面临其它一些转基因问题的巨大挑战。同时生物制药业认为还需通过另外一些新技术 (如克隆、精子性别鉴定和反转录病毒介导的基因转移等 )来克服自然生物学上的屏障。

关键词：转基因家畜生物制药乳腺表达重组药用蛋白

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精子介导外源基因转移的研究进展

引用

草食家畜 2000年第1期 1-4页

作者：武坚郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000

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