检索结果-内蒙古大学图书馆

第六次人畜共患病学术交流会

作者：陈君彦李海燕陈化兰杨焕良李泽君于康震毕英佐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 全国畜牧兽医总站(北京) 华南农业大学动物科学学院(广州)

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的神经氨酸酶(NA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NA基因核甘酸全长为1458bp,共编码477个氨基酸.15株H1N1亚型SIV的NA... 详细信息

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的神经氨酸酶(NA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NA基因核甘酸全长为1458bp,共编码477个氨基酸.15株H1N1亚型SIV的NA蛋白在58、63、68、88、146位都存在糖基化位点;但是,SW/GD/714/01和SW/GD/771/01在50位存在一糖基化位点,为"-NQS-",其余13株H1N1亚型SIV在50位无糖基化位点,却在44位存在"-NHS-"的糖基化位点;而且,SW/GD/714/01、SW/GD/771/01和其余13株H1N1亚型SIV的NA蛋白头部抗原位点,在328、332、334、339、340位的氨基酸不同;但是,15株H1N1亚型SIV在366位的氨基酸均为N,与所有参考毒株在此位的S不同.经同源性比较结果和进化树分析可见,SW/GD/714/01和SW/GD/771/01的NA基因明显属于类禽型H1N1猪谱系,其余13株H1N1亚型SIV的NA基因皆属于古典型H1N1猪谱系.

关键词：猪流感病毒神经氨酸酶序列分析分子演化正粘病毒科

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H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究

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第六次人畜共患病学术交流会

作者：陈君彦李海燕申之义陈化兰于康震毕英佐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 全国畜牧兽医总站(北京) 华南农业大学动物科学学院(广州)

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的血凝素(HA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1 SIV的HA基因核甘酸全长为1778bp,共编码566个氨基酸;而且,15株H1N1亚型SIV的HA1蛋... 详细信息

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的血凝素(HA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1 SIV的HA基因核甘酸全长为1778bp,共编码566个氨基酸;而且,15株H1N1亚型SIV的HA1蛋白在10、11、23、87、287位都存在高度保守的糖基化位点,此外,在276位多了一个"-NTT-"糖基化位点,与参考毒株SW/IW/930/01一致,这可能是近期H1N1亚型SIV的一个分子特征.本研究进一步发现,15株H1N1亚型SIV的HA基因切割位点氨基酸组成为IPSIQSR↓G,具有非高致病力毒株分子特征;而其受体结合位点在HA蛋白上第226位是Q,第228位为G,可能具有感染禽的潜力.经同源性比较,15株H1N1亚型SIV的HA基因与古典型H1N1猪谱系中的WIS/4754/94的同源性相对最高,核苷酸和氨基酸序列同源性分别达到95.7~96.1﹪和96.5~97.2﹪.由同源性比较结果和进化树分析可见,15株H1N1亚型SIV的HA基因皆属于古典型的H1N1猪谱系.

关键词：猪流感病毒血凝素序列分析分子演化正粘病毒科流感病毒

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移植方法和培养液对显微注射生产转基因小鼠的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2003年第2期31卷 6-8页

作者：史洪才玛依拉黄俊成刘明军李建华郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000 甘肃农业大学动物科技学院甘肃兰州730000

研究了移植方法和培养液对显微注射法生产转基因小鼠的影响。结果表明 ,小鼠受精卵显微注射外源基因后 ,进行单、双侧输卵管移植 ,受体的妊娠率分别为 34.4 %和 37.5 % (P>0 .0 5 ) ,差异不显著 ;但仔鼠成活率分别为 83.6 %和 97.2 %... 详细信息

研究了移植方法和培养液对显微注射法生产转基因小鼠的影响。结果表明 ,小鼠受精卵显微注射外源基因后 ,进行单、双侧输卵管移植 ,受体的妊娠率分别为 34.4 %和 37.5 % (P>0 .0 5 ) ,差异不显著 ;但仔鼠成活率分别为 83.6 %和 97.2 % (P<0 .0 5 ) ,差异显著。用 M2和改良的 M2培养液作为显微注射及移植工作液 ,体外培养的囊胚率分别为 17%和 35 % (P<0 .0 1) ,差异极显著 ,体内发育的情况也与这一结果相似 ,妊娠率分别为 35 .9%和 6 2 .5 % (P<0 .0 5 )。表明改良的 M2培养液的成分结构更适合小鼠胚胎发育的要求。

关键词：转基因小鼠显微注射移植方法培养液动物模型

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细胞因子对绵羊体外受精胚胎发育的影响

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畜牧兽医学报 2002年第4期33卷 344-348页

作者：雷蕾张富春张家新钟喆张大铭郭志勤新疆大学生物系新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000

绵羊卵巢采自乌鲁木齐市屠宰场 ,卵母细胞体外成熟 2 4～ 2 5h后 ,由体外获能的附睾精子授精 ,5 0h后 ,将卵裂至 2 - 8细胞的绵羊胚胎移入添加了不同浓度细胞因子的培养液中继续培养 ,结果表明 ,加入 5、10、15 μg/ml胰岛素 (Insulin)... 详细信息

绵羊卵巢采自乌鲁木齐市屠宰场 ,卵母细胞体外成熟 2 4～ 2 5h后 ,由体外获能的附睾精子授精 ,5 0h后 ,将卵裂至 2 - 8细胞的绵羊胚胎移入添加了不同浓度细胞因子的培养液中继续培养 ,结果表明 ,加入 5、10、15 μg/ml胰岛素 (Insulin)分别得到 17 46 %、2 3 81%、2 2 95 %的囊胚率 ,与对照组 9 5 2 %相比差异显著 (P <0 0 5 )。高浓度(5 0 0 μg/ml)的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (Granulocyte -macrophagecolonystimulatingfactor,GM -CSF)可获得2 1 82 %的囊胚率 ,与对照组 7 2 7%相比差异显著 (P <0 0 5 )。胚胎培养液中分别加入 10、10 0、5 0 0ng/ml的白细胞介素 - 3(Interleukin - 3,IL - 3)、白细胞介素 - 8(IL - 8)和神经生长因子 (Nucleargrowthfactor,NGF)与对照组相比 ,囊胚率差异不显著。本研究表明 ,胰岛素、GM -CSF对绵羊体外受精胚胎早期发育有促进作用 ,IL - 3、IL -8、NGF对绵羊胚胎的早期发育无明显作用。

关键词：细胞因子绵羊体外受精胚胎发育

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显微注射生产转人胰岛素原基因奶山羊

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中国兽医学报 2001年第3期21卷 242-254页

作者：黄俊成张健李文蓉刘明军武坚郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

将构建的绵羊β-乳球蛋白基因 ( BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因奶山羊。同期化超排处理供体奶山羊 1 5只 ,排卵 2 62枚 ,回收卵 2 2 1枚 ,移植 2 0 6枚注射卵 ,移植受体 68只 ,怀孕2 1只 (妊娠率 3 3 % ,其... 详细信息

将构建的绵羊β-乳球蛋白基因 ( BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因奶山羊。同期化超排处理供体奶山羊 1 5只 ,排卵 2 62枚 ,回收卵 2 2 1枚 ,移植 2 0 6枚注射卵 ,移植受体 68只 ,怀孕2 1只 (妊娠率 3 3 % ,其中成年母羊妊娠率为 58.62 % ,周岁母羊为 9.4 % ) ,产羔 3 3只 ,其中母羔 8只 ,公羔 2 5只。经 PCR检测及酶切分析 ,证明有 5只为阳性 ,阳性整合率为 1 5.1 5% ,但

关键词：显微注射人胰岛素原基因转基因奶山羊乳腺生物反应器

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制苗用鸡大肠杆菌培养基及培养方法

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中国兽医学报 2001年第1期21卷 47-48页

作者：成进谷文喜沙依然古丽依米提李文蓉新疆畜牧科学院兽医研究所新疆乌鲁木齐830000 新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

采用通气搅拌培养方法对鸡大肠杆菌用 MM培养基和改良 MM培养基进行了对比试验 ,并用改良MM培养基对鸡大肠杆菌进行了静止培养、通气搅拌培养和连续通气搅拌培养的对比试验。结果显示 ,改良MM培养基培养的鸡大肠杆菌菌数和光密度 ( D)... 详细信息

采用通气搅拌培养方法对鸡大肠杆菌用 MM培养基和改良 MM培养基进行了对比试验 ,并用改良MM培养基对鸡大肠杆菌进行了静止培养、通气搅拌培养和连续通气搅拌培养的对比试验。结果显示 ,改良MM培养基培养的鸡大肠杆菌菌数和光密度 ( D)值明显高于 MM培养基 ;连续通气搅拌培养和通气搅拌培养的方法明显优于静止培养方法。

关键词：鸡大肠杆菌灭活疫苗培养方法培养基

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乳汁蛋白质基因的遗传工程研究进展

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草食家畜 2001年第S2期 51-56页

作者：刘明军新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

利用动物转基因技术可以改变家畜乳汁蛋白质的组成。目前这方面的研究主要集中在通过乳汁表达生产异原蛋白质及多肽类药物。如果胚胎干细胞技术或基因打靶技术能够成功用于家畜的遗传修饰和改造 ,今后不仅可以通过产乳家畜乳腺生产高价... 详细信息

利用动物转基因技术可以改变家畜乳汁蛋白质的组成。目前这方面的研究主要集中在通过乳汁表达生产异原蛋白质及多肽类药物。如果胚胎干细胞技术或基因打靶技术能够成功用于家畜的遗传修饰和改造 ,今后不仅可以通过产乳家畜乳腺生产高价值的医用蛋白质 ,而且可以通过遗传工程手段对内源性的乳汁蛋白质进行加工、改造 ,进一步加强和提高乳汁的营养价值和生物学功能。

关键词：乳汁遗传修饰转基因乳腺生物反应器家畜

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通过显微注射生产转基因小鼠的研究

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草食家畜 2001年第S2期 168-173页

作者：黄俊成杨梅史洪才新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

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人胰岛素原乳腺表达基因构建及其在转基因小鼠乳汁中的表达

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草食家畜 2001年第S2期 179-185页

作者：刘明军武坚李文蓉黄俊成杨冬梅玛依拉郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ... 详细信息

从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ,以及 1 .2kb人胰岛素原基因组DNA。将绿色荧光蛋白基因与BLG 5’和 3’调控区融合后转化乳腺细胞系 (TD47) ,通过荧光显微镜观察和紫外吸收检测 ,证明GFP在TD47乳腺细胞系中获得了表达。用BLG -hINS基因分别注射小鼠 ,通过PCR和限制性内切酶检测分析 ,共获得 5只转基因小鼠。经放免 (RIA)检测 ,两只转基因母鼠乳汁中人胰岛素原的表达量分别为 37.44和 39.99mg/L。该结果表明 ,本文所构建的 pBLG乳腺表达结构。

关键词：人胰岛素原羊乳球蛋白转基因乳腺表达

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精子载体介导法生产转基因绵羊的研究

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草食家畜 2001年第S2期 186-190,202页

作者：武坚刘明军李文蓉黄俊成史洪才郭志勤新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室新疆乌鲁木齐830000

采用精子载体介导法先后对 1 952只绵羊进行转基因试验 ,经PCR和South ern检测 1 592只后代中 ,转基因羊 1 0 3只 ,最高转基因效率达 9.86 % ;其中 2只转基因母羊乳汁中人胰岛素原基因表达量分别达 1 99.97mg/L和 1 83.6 2mg/L。荧光原... 详细信息

采用精子载体介导法先后对 1 952只绵羊进行转基因试验 ,经PCR和South ern检测 1 592只后代中 ,转基因羊 1 0 3只 ,最高转基因效率达 9.86 % ;其中 2只转基因母羊乳汁中人胰岛素原基因表达量分别达 1 99.97mg/L和 1 83.6 2mg/L。荧光原位PCR结果证实牛、山羊和绵羊的精子经处理能携带外源基因 ,精子携带外源DNA的比率分别为 :绵羊 2 7.1 2 %、山羊 30 .57%、牛 31 .1 6 % ;同时外源基因进入到精子细胞并定位于核及其外周区域。研究还提示使用精子载体介导法时必须充分洗涤精液以除去精清。

关键词：精子载体介导转基因乳腺表达药用蛋白质

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